MX-1-cellelinje

MX-1 er en human brystkreftcellelinje som stammer fra en xenograftmodell for brystkreft i athymiske mus. De humane brystkreftcellene ble etablert fra brystsvulsten til en 29 år gammel kaukasisk kvinne. MX1-celler er trippel-negativ brystkreft (TNBC) som i stor grad brukes til forskning på legemiddelresistens, cellesignalering, legemiddelresponsmekanismer osv.

Opprinnelse og generell informasjon om MX-1-celler

Før du begynner å jobbe med denne cellelinjen, bør du sette deg inn i hvordan den fungerer. Vi vil gjennomgå nesten all generell informasjon om MX-1-cellelinjen.

Den udødelige MX-1-cellelinjen er en tumorigen cellelinje som er etablert fra et xenograft av en tumor. MX-1-celler regnes som en type trippel-negativ brystkreft (TNBC) [1]. Disse cellene er dessuten østrogenreseptor- og p53-negative, ettersom de ikke uttrykker disse genene.

MX-1-celler - et modellsystem for trippelnegativ brystkreft

MX-1-cellelinjen krever ingen spesielle dyrkingsforhold. Disse cellene kan enkelt formeres og brukes i ulike forskningslaboratorier til transfeksjonsstudier. Den transiente transfeksjonsmetoden brukes ofte til å studere de underliggende cellulære mekanismene og genuttrykksmønstrene i denne cellelinjen [2, 3].

Denne cellelinjen er et godt modellsystem for brystkarsinomer. Den kan brukes til å forstå de molekylære mekanismene bak sykdomsprogresjon og til å screene og utvikle legemidler for å bekjempe sykdommen. Mer spesifikt kan den humane MX-1-cellelinjen for brystadenokarsinom være et alternativ til TNBC-celler, siden den er østrogenreseptornegativ [4].

MX-1 cellelinje: Informasjon om dyrking

• Doblingstid: Populasjonsdoblingstiden for INS-1-celler er ca. 44 timer.
• Adherent eller i suspensjon: INS-1-celler vokser både i suspensjon og adherent form.
• Forhold mellom subkultivering: INS-1-celler subkultiveres i et delingsforhold på 1:3. Kort fortalt samles suspenderte celler opp. Adherente celler skylles med PBS og inkuberes med Accutase-løsningen. Etter at cellene er løsnet, tilsettes de nye mediene. Deretter sentrifugeres og samles både suspenderte og adherente celler. Cellene resuspenderes forsiktig og fordeles i de nye kolbene for vekst.
• Vekstmedium: RPMI 1640 brukes til dyrking av INS-1 rotteinsulinomcellelinjen. Mediet er supplert med 10 % varmeinaktivert føtalt bovint serum, 2,1 mM stabil glutamin, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 og 1 mM natriumpyruvat.
• Vekstbetingelser: INS-1-celler oppbevares i en befuktet inkubator med en temperatur på 37 °C og kontinuerlig tilførsel av 5 % CO2.
• Oppbevaring: INS-1 beta-celler kan langtidslagres i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk fryser.
• Fryseprosess og medium: CM-1- eller CM-ACF-medier brukes til å fryse INS-1-celler gjennom en langsom fryseprosess. Den tillater bare et temperaturfall på 1 °C per minutt for å beskytte cellenes levedyktighet.
• Tineprosess: Frosne INS-1-celler tines i et vannbad som er forhåndsinnstilt på 37 grader Celsius i 40 til 60 sekunder. Etter tining tilsettes cellene ferske medier og helles direkte over i en ny kolbe for vekst. Etter 24 timer skiftes mediet ut for å eliminere komponenter fra frysemediet.
• Biosikkerhetsnivå: Det kreves et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1 for å dyrke INS-1 rotteinsulinomceller.

MX-1-celler: Anvendelser i forskning

MX-1-cellelinjen fra humant brystadenokarsinom brukes ofte i brystkreftstudier i stedet for celler som MDA-MB-231 eller MCF-7. Her er noen spesielle bruksområder for denne cellelinjen i kreftforskning.

Mekanismer for legemiddelresistens

MX-1-celler brukes til å studere de molekylære faktorene som medierer utviklingen av resistens mot brystkreftmedisiner. Studier har i stor grad brukt MX-1-celler til å etablere resistensmodeller. En studie publisert i 2021 rapporterte om bruk av MX-1-celler til å generere en doxorubicin-resistent brystkreftcellelinje. Den utviklede cellemodellen validerte ABC-transportøren ABCB1 og epitelial-mesenkymal overgang (EMT) som en del av kjemoresistensen [5].

Genuttrykk/cellesignalveier

MX-1-cellelinjen kan transfekteres transient for å belyse genuttrykksmønstre og cellesignalveier. Studier har brukt MX-1-celler til shRNA (kort hårnåls-RNA) og ikke-kodende RNA-transfeksjon for å undersøke deres effekt på spredning og vekst av brystkreftceller. I tillegg er assosierte gensignalveier belyst [2, 6].

Screening av potensielle inhibitorer

MX-1-celler kan brukes til screening av potensielle legemidler mot brystkreft, ettersom de etterligner kreftcellenes mikromiljø. En forskningsstudie har vist terapeutisk aktivitet av Vinorelbine, et mikrotubulatoksin, som utløste celledød og polyploidi i MX-1-celler [4].

Bestill din MX-1-cellelinje i dag

MX-1 cellelinjeressurser: Protokoller, videoer og mer

Det er begrenset med ressurser tilgjengelig om dyrking og transfeksjonsmetoder, men vi har samlet så mye informasjon som mulig for deg.

Protokoller for celledyrking

MX-1-celler brukes i mange transiente transfeksjonsanalysestudier. Her har vi listet opp noen ressurser som kan hjelpe deg med transfeksjonsprotokollene.

• Transfeksjon av MX-1-celler: Denne publikasjonen beskriver protokollen for transfeksjon med siRNA i MX-1-celler for utvikling av en gen knock-out-modell.
• Transfeksjon av pattedyrceller: Denne artikkelen inneholder all viktig informasjon om transfeksjonsmetoder som brukes i pattedyrcellelinjer.

Vi håper at denne artikkelen har gitt deg verdifull kunnskap om MX-1-cellelinjen, og at du har fått en bedre forståelse av hvordan du kan dyrke, vedlikeholde og bruke disse cellene i forskningen din. Hvis du er interessert i å jobbe med MX-1-cellelinjen, ikke nøl med å bestille fra oss for å kickstarte forskningsreisen din!

Ofte stilte spørsmål om MX-1 brystkarsinomcellelinjen

Referanser

1. Stefanski, C.D. og J.R. Prosperi, Combating CHK1 resistance in triple negative breast cancer: EGFR-hemming som potensiell kombinasjonsbehandling. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., Analogen av cGAMP, c-di-AMP, aktiverer STING-mediert celledødsvei i østrogenreseptornegative brystkreftceller. Apoptose, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteomisk analyse av hemmer avapoptoseproteinlignende protein-2på brystkreftcelleproliferasjon. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa og J. Magae, Vinorelbine, et mikrotubulatoksin, induserer apoptose og polyploidi i MX-1, en human trippel-negativ brystkreftcellelinje. Gan to Kagaku ryoho. Kreft og kjemoterapi, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Ikke-genotoksisk ABCB1-aktivator tetrafenylfosfonium kan bidra til doxorubicinresistens i MX-1 brystkreftcellelinje. Vitenskapelige rapporter, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al, Mixomics-analyse av brystkreft: Langt ikke-kodende RNA linc01561 fungerer som ceRNA involvert i progresjonen av brystkreft. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.