Hep3B-celler: Forskning og ny kunnskap om leverkreft

HEP3B er en immortalisert hepatocellulær karsinomcellelinje av menneskelig opprinnelse. Den er mye brukt i forskning på hepatotoksisitet og legemiddelmetabolisme. Transfeksjonseffektiviteten til HEP3B er betydelig; derfor brukes disse cellene ofte til å studere utvikling, progresjon og terapeutiske tiltak ved leverkreft. Denne artikkelen dekker all nødvendig informasjon om HEP3B-cellelinjen for å hjelpe deg i arbeidet med den. Den vil hovedsakelig omfatte:

1. Generelle egenskaper og opprinnelse til HEP3B-celler
2. Informasjon om dyrking av HEP3B-cellelinjen
3. HEP3B-cellelinje: Fordeler og begrensninger
4. Anvendelser av HEP3B-celler i forskning
5. Publikasjoner om HEP3B-cellelinjen
6. Ressurser for HEP3B-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer

Generelle egenskaper og opprinnelse til HEP3B-celler

Den viktigste informasjonen du trenger om en cellelinje, er dens opprinnelse og generelle egenskaper. Dette kan hjelpe deg med å bestemme hvordan den skal brukes i forskningen din og hvordan du skal håndtere den. Denne delen av artikkelen dekker all viktig informasjon om HEP3Bs opprinnelse og egenskaper. Her vil du lære: Hva er Hep 3B-cellelinjer? Hva er opprinnelsen til Hep3B-celler? Hva er morfologien til HEP3B-celler?

• HEP3B, en kontinuerlig human hepatomcellelinje, stammer fra levervevet til en 8 år gammel afrikansk gutt med hepatocellulært karsinom (HCC). Den ble etablert av Aden og kolleger i 1979 ved Barbara B. Knowles' laboratorium, Wistar Institute, Philadelphia, USA [1]. 
• HEP3B-celler har en integrasjon av hepatitt B-virus (HBV)-genomet i kromosomet.
• Disse hepatocyttkarsinomcellene har en epitelial morfologi.
• HEP3B-cellene har et modalt kromosomtall på 60. I motsetning til HepG2 har de ikke et omorganisert kromosom 1.

Hva er forskjellen mellom HepG2 og Hep3B?

HepG2 og HEP3B skiller seg fra hverandre i antall kromosomer per celle. HEP3B inneholder 60 kromosomer, mens HepG2-celler har et gjennomsnitt på 55 kromosomer. Videre er HepG2 ikke-tumorigenisk og hepatitt B-negativ, mens HEP3B er tumorigenisk og HBV-positiv.

HEP3B-cellelinje: Fordeler og begrensninger

HEP3B er en mye brukt cellelinje for hepatocellulært karsinom. Dette avsnittet vil fokusere på noen viktige fordeler og begrensninger ved disse hepatomcellene.

Fordeler

De viktigste fordelene med HEP3B-celler er:

Enkel å dyrke

HEP3B-celler har ingen krevende krav til cellekultur, noe som gjør dem enkle å håndtere og vedlikeholde i et forskningslaboratorium. Dette forenkler eksperimentelle prosedyrer.

Høy transfeksjonseffektivitet

HEP3B-celler har en bemerkelsesverdig transfeksjonseffektivitet, noe som gjør dem mye brukt i genetisk manipulering og studier relatert til genuttrykk.

Tumorigenisitet

HEP3B er en tumorigen hepatocellulær karsinomcellelinje som kan danne svulster når den injiseres i en immunsvekket mus. Dette bidrar til å studere kreftprogresjon og utvikling ved hjelp av HEP3B-xenotransplantatmodeller.

HEP3B P53-status

HEP3B-celler har en P53-genmutasjon som ligner på hepatocellulært karsinom (HCC) og andre kreftformer, noe som gjør dem relevante for å studere effekten av P53-mutasjon på kreftvekst, utvikling og progresjon.

Begrensninger

Begrensningen knyttet til HEP3B-cellelinjen er:

In vitro-cellemodell

HEP3B-cellelinjen fungerer som en in vitro-modell for hepatocellulære karsinomceller (HCC). Den representerer imidlertid ikke nødvendigvis fullt ut kompleksiteten til HCC slik den forekommer i levende organismer. Følgelig kan eksperimentelle resultater in vitro avvike fra de som observeres in vivo.

Anvendelser av HEP3B-celler i forskning

HEP3B-cellelinjen har flere anvendelser innen biomedisinsk forskning. Noen av de viktigste forskningsanvendelsene av HEP3B-cellene inkluderer:

• Kreftbiologi: HEP3B er en human hepatocellulær karsinomcellelinje. Den er en uvurderlig cellemodell for å undersøke celle- og molekylære mekanismer som ligger til grunn for utvikling og progresjon av HCC. Forskere bruker disse cellene til å studere genetiske mutasjoner, cellulære prosesser og cellesignalveier assosiert med leverkreft. For eksempel ble HEP3B-celler brukt i en studie som fant at mikroRNA-223-3p regulerer NLRP3-inflammasomkomponenter, hemmer proliferasjon og forsterker apoptosen av HEP3B-hepatokarsinomceller [2].
• Legemiddelscreening og -utvikling: HEP3B-cellelinjen brukes også til å teste, screene og utvikle nye behandlingsformer mot leverkarsinom. Videre brukes den til å evaluere toksisiteten og effekten av ulike kreftmedisiner og behandlinger. Forskere brukte også disse hepatomcellene til å studere legemiddelmetabolisme. Forskere brukte HEP3B-celler og vurderte det cytotoksiske potensialet til planteekstrakt fra Cotinus coggygria på HEP3B-hepatocyttkarsinomceller [3].
• Virusinfeksjoner: HEP3B er en hepatitt B-viruspositiv cellelinje; derfor brukes den til å studere virusinfeksjoner som kan føre til utvikling av leverkreft, dvs. HBV og HCV. Dette kan bidra til å bedre forstå virusinfeksjoner og utvikle potensielle antivirale behandlinger. For eksempel brukte en studie HEP3B-hepatocyttkreftceller og undersøkte betydningen av ubiquitinering for spredning av hepatitt C-virus. Funnene tydet på at ubiquitin-spesifikk protease 15 (USP15) er involvert i spredningen av HCV via regulering av hepatocyttspesifikke funksjoner, inkludert dannelse av lipiddråper og HCV-RNA-translasjon [4].

5. Publikasjoner om HEP3B-cellelinjen

Denne delen av artikkelen vil omhandle noen interessante forskningspublikasjoner om HEP3B-celler.

Regulering av apoptose og autofagi ved hjelp av luteolin i Hep3B-celler fra humant leverkreft

Denne publikasjonen i Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) foreslo at luteolinforbindelsesindusert endoplasmatisk retikulumstress kan utøve antitumoreffekter i P53-null HEP3B-celler på en P53-uavhengig måte.

Potensiell målretting av Hep3B-leverkreftceller ved hjelp av lupeol isolert fra Avicennia marina

Denne studien i Archiv der Pharmazie (2021) foreslo et pentacyklisk triterpenoid, lupeol, som et potensielt kreftmiddel mot HEP3B-celler.

Etanolekstrakt fra Cnidium monnieri (L.) Cusson induserer cellecyklusstans og apoptose via regulering av den p53-uavhengige signalveien i HepG2- og Hep3B-hepatocellulære karsinomceller

Denne artikkelen er publisert i Molecular Medicine Reports (2017). Studienes funn viser at etanolekstrakt fra Cnidium monnieri (L.) Cusson induserer celledød (apoptose) og cellecyklusstans i hepatokarsinomcellene HepG2 og HEP3B gjennom regulering av p53- og Akt/GSK-3β-signalveien.

Auranofin forsterker sulforafan-mediert apoptose i hepatocellulære karsinomceller av typen Hep3B gjennom inaktivering av PI3K/Akt-signalveien

Denne forskningen, publisert i Biomolecules and Therapeutics (2020), foreslo at auranofin utviser synergistisk aktivitet og fremmer sulforafan-mediert apoptose av HEP3B-celler via aktivering av PI3K/AKT-banen.

Sirkulært RNA-0072309 har antitumorvirkning i Hep3B-cellelinjen ved å målrette mot mikroRNA-665

Denne forskningsartikkelen i BioFactors (2023) foreslo at sirkulært RNA-0072309 utøver antitumoreffekter i hepatocellulære karsinomceller HEP3B ved å målrette miRNA-665.

Ressurser for HEP3B-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer

Følgende er noen ressurser som er tilgjengelige for HEP3B-celler:

• HEP3B-transfeksjon: Denne videoen forklarer transfeksjonsprotokollen for HEP3B-celler.
• HEP3B-transfeksjonseffektivitet: Denne lenken hjelper deg med å lære om sammensetningen av HEP3B DMEM-medium, cellepassering og transfeksjonsprotokoll for HEP3B-celler. I tillegg gir den informasjon om hvordan du kan optimalisere HEP3B-lipofectamin 3000-reagenset i transfeksjonsprotokollen din.

Følgende lenke inneholder protokollen for HEP3B-cellekultur:

• HEP3B-dyrkingsbetingelser: Denne lenken vil hjelpe deg med å lære protokollen for håndtering og vedlikehold av Huh7- og HEP3B-kulturer.
• HEP3B-celler: Denne nettsiden har mye informasjon om HEP3B-celler, inkludert HEP3B-medier, protokollen for celledeling, tining og håndtering av proliferative og kryokonserverte kulturer.

Referanser

1. Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Opprinnelse og egenskaper til hepatocellulære karsinomcellelinjer. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): s. 1040.
2. Wan, L., et al., miRNA-223-3p regulerer NLRP3 for å fremme apoptose og hemme proliferasjon av Hep3B-celler. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): s. 2429-2435.
3. Danjolli-Hashani, D. og S. Selen-Isbilir, Cytotoksisk effekt av Cotinus coggygria-ekstrakt på Hep3B-kreftcellelinjen. Natural Product Research, 2022: s. 1-4.
4. Kusakabe, S., et al., USP15 deltar i spredning av hepatitt C-virus gjennom regulering av viral RNA-translasjon og dannelse av lipiddråper. Journal of Virology, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.