Hep3B-celler: Forskning og oppdagelse av hepatocellulært karsinom

HEP3B er en udødeliggjort, humant avledet hepatocyttkarsinomcellelinje. Den er mye brukt i forskning på hepatotoksisitet og legemiddelmetabolisme. HEP3B har en høy transfeksjonseffektivitet, og disse cellene brukes derfor ofte til å studere utvikling og progresjon av leverkreft og terapeutiske intervensjoner. Denne artikkelen dekker all nødvendig informasjon om HEP3B-cellelinjen for å hjelpe deg i arbeidet med den. Hovedsakelig vil den inkludere:

Generelle egenskaper og opprinnelse til HEP3B-celler
Informasjon om dyrking av HEP3B-cellelinjen
HEP3B-cellelinjen: Fordeler og begrensninger
Anvendelser av HEP3B-celler i forskning
Publikasjoner om HEP3B-cellelinjen
Ressurser for HEP3B-cellelinje: Protokoller, videoer og mer

1.generelle egenskaper og opprinnelse for HEP3B-celler

Den viktigste informasjonen du trenger om en cellelinje, er dens opprinnelse og generelle egenskaper. Det kan hjelpe deg med å avgjøre hvordan den skal brukes i forskningen din og hjelpe deg med å håndtere den. Denne delen av artikkelen dekker all viktig informasjon om HEP3Bs opprinnelse og egenskaper. Her vil du lære mer: Hva er Hep 3B-cellelinjer? Hva er opprinnelsen til Hep3B-celler? Hva er morfologien til HEP3B-celler?

HEP3B, en kontinuerlig human hepatomcellelinje, stammer fra levervev fra en 8 år gammel afrikansk gutt med hepatocellulært karsinom (HCC). Den ble etablert av Aden og kolleger i 1979 ved Barbara B. Knowles' laboratorium, Wistar Institute, Philadelphia, USA [1].
HEP3B-celler har en integrasjon av hepatitt B-virusets (HBV) genom i sitt kromosom.
Disse hepatocyttkarsinomcellene har en epitelial morfologi.
HEP3B-cellene har et modalt kromosomnummer på 60. I motsetning til HepG2 har de ikke et rearrangert kromosom 1.

Hva er forskjellen mellom HepG2 og Hep3B?

HepG2 og HEP3B skiller seg fra hverandre når det gjelder antall kromosomer per celle. HEP3B inneholder 60 kromosomer, mens HepG2-celler i gjennomsnitt har 55 kromosomer. HepG2 er dessuten ikke-tumorigen og hepatitt B-negativ, mens HEP3B er tumorigen og HBV-positiv.

Leverkarsinom i høy forstørrelse under mikroskop.

2.informasjon om dyrking av HEP3B-cellelinjen

Kunnskap om dyrkingsinformasjonen for en cellelinje kan gjøre det enklere for deg å bruke den. Denne delen dekker alle viktige punkter for dyrking av HEP3B HBV-cellelinjen, inkludert: Hva er fordoblingstiden for Hep3B-celler? Hva er HEP3B-dyrkingsforholdene? Hvordan dyrker man HEP3B HCC-celler?

Nøkkelpunkter for dyrking av HEP3B-celler

Fordoblingstid:	Doblingstiden for HEP3B-celler er ca. 36 timer.
Adherent eller i suspensjon:	Denne hepatomcellelinjen er adherent.
Delingsforhold:	HEP3B-celler subkultiveres i forholdet 1:2 til 1:4. Adherente HEP3B-celler skylles med 1 x PBS og inkuberes deretter med Accutase-dissosiasjonsløsningen. Etter 8 til 10 minutter tilsettes nytt medium, og cellene sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes deretter forsiktig og helles over i kolber som inneholder dyrkingsmedium i et anbefalt delingsforhold.
Vekstmedium:	EMEM-medium som inneholder 10 % FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-glutamin og Earle's Balanced Salt Solution (EBSS), brukes til dyrking av HEP3B-celler.
Vekstbetingelser:	HEP3B-celler dyrkes i en 37 °C fuktig inkubator med kontinuerlig tilførsel av 5 % CO2.
Oppbevaring:	Frosne HEP3B-celler oppbevares ved temperaturer under -150 °C i en elektrisk fryser eller i dampfasen av flytende nitrogen.
Fryseprosess og medium:	Det anbefalte frysemediet for HEP3B-celler er CM-1 eller CM-ACF. Cellene fryses ved hjelp av en langsom fryseprosess som bare tillater en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt for å beskytte cellenes levedyktighet.
Tineprosess:	De frosne cellene tines i et vannbad som er forhåndsinnstilt på 37 °C i 40 til 60 sekunder. Senere tilsettes disse cellene til det ferske vekstmediet og sentrifugeres for å fjerne elementer fra frysemediet. De oppsamlede cellene resuspenderes og fordeles i nye kolber for vekst.
Biosikkerhetsnivå:	Et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1 er nødvendig for dyrking av HEP3B-celler.

Adherent semi-flytende lag av Hep3B-celler i 10 × og 20 × forstørrelse.

3.hEP3B-cellelinje: Fordeler og begrensninger

HEP3B er en mye brukt cellelinje for hepatocellulært karsinom. Denne delen fokuserer på noen av de viktigste fordelene og begrensningene ved disse hepatomcellene.

Fordeler og begrensninger

De viktigste fordelene med HEP3B-celler er

De er enkle å dyrke	HEP3B-celler har ingen spesielle krav til cellekultur, noe som gjør dem enkle å håndtere og vedlikeholde i et forskningslaboratorium. Dette forenkler de eksperimentelle prosedyrene.
Høy transfeksjonseffektivitet	HEP3B-celler har en bemerkelsesverdig transfeksjonseffektivitet, noe som gjør dem mye brukt i genmanipulering og genuttrykksrelaterte studier.
Tumorigenisitet	HEP3B er en tumorogen hepatocellulær karsinomcellelinje som er i stand til å danne svulster når den injiseres i en immunkompromittert mus. Dette gjør det enklere å studere kreftprogresjon og -utvikling ved hjelp av HEP3B xenograftmodeller.
HEP3Bs P53-status	HEP3B-celler har en P53-genmutasjon som ligner på hepatocellulært karsinom (HCC) og andre kreftformer, noe som gjør dem relevante for å studere effekten av P53-mutasjon på kreftvekst, -utvikling og -progresjon.

Begrensninger

Begrensningen knyttet til HEP3B-cellelinjen er

In vitro-cellemodell

HEP3B-cellelinjen fungerer som en in vitro-modell av hepatocellulære karsinomceller (HCC). Det er imidlertid ikke sikkert at den fullt ut representerer kompleksiteten til HCC slik den finnes i levende organismer. Derfor kan resultatene av in vitro-forsøkene avvike fra de som observeres in vivo.

4.bruksområder for HEP3B-celler i forskning

HEP3B-cellelinjen har flere bruksområder innen biomedisinsk forskning. Noen av de viktigste bruksområdene for HEP3B-celler er blant annet

Kreftbiologi: HEP3B er en cellelinje for humant hepatocellulært karsinom. Det er en uvurderlig cellemodell for å undersøke celle- og molekylære mekanismer som ligger til grunn for utvikling og progresjon av HCC. Forskere bruker disse cellene til å studere genetiske mutasjoner, cellulære prosesser og cellesignalveier som er forbundet med leverkreft. I en studie ble HEP3B-celler benyttet, og det ble funnet at mikroRNA-223-3p regulerer NLRP3-inflammasomkomponenter, hemmer proliferasjon og øker apoptosen i HEP3B-hepatokarsinomceller [2].
Screening og utvikling av legemidler: HEP3B-cellelinjen brukes også til å teste, screene og utvikle nye legemidler mot leverkarsinom. I tillegg brukes den til å evaluere toksisiteten og effekten av ulike kreftmedisiner og -behandlinger. Forskerne brukte også disse hepatomcellene til å studere legemiddelmetabolismen. Forskere brukte HEP3B-celler og vurderte det cytotoksiske potensialet til Cotinus coggygria-planteekstrakt på HEP3B-hepatocyttkarsinomceller [3].
Virusinfeksjoner: HEP3B er en hepatitt B-viruspositiv cellelinje, og den brukes derfor til å studere virusinfeksjoner som kan føre til utvikling av leverkreft, dvs. HBV og HCV. Dette kan bidra til bedre forståelse av virusinfeksjoner og utvikling av potensielle antivirale behandlinger. I en studie ble det for eksempel brukt HEP3B-hepatocyttkreftceller for å undersøke betydningen av ubiquitinering for spredning av hepatitt c-virus. Funnene tydet på at ubiquitinspesifikk protease 15 (USP15) er involvert i spredningen av HCV via regulering av hepatocyttspesifikke funksjoner, inkludert dannelse av lipiddråper og HCV RNA-translasjon [4].

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305141

5.publikasjoner om HEP3B-cellelinjen

Denne delen av artikkelen vil dekke noen interessante forskningspublikasjoner om HEP3B-celler.

Regulering av apoptose og autofagi ved hjelp av luteolin i humane hepatocellulære kreftceller Hep3B-celler

I denne publikasjonen i Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) ble det foreslått at luteolinindusert endoplasmatisk retikulumstress kan ha anti-tumoreffekter i P53-null HEP3B-celler på en P53-uavhengig måte.

Potensiell målretting av Hep3B leverkreftceller med lupeol isolert fra Avicennia marina

Denne studien i Archiv der Pharmazie (2021) foreslår et pentacyklisk triterpenoid, lupeol, som et potensielt antikreftmiddel mot HEP3B-celler.

Etanolekstrakt fra Cnidium monnieri (L.) Cusson induserer cellesyklusstopp og apoptose via regulering av den p53-uavhengige veien i HepG2- og Hep3B hepatocellulære karsinomceller

Denne artikkelen er publisert i Molecular Medicine Reports (2017). Studiefunnene sier at Cnidium monnieri (L.) Cusson etanolekstrakt induserer celledød (apoptose) og cellesyklusstopp i hepatokarsinomceller HepG2 og HEP3B gjennom regulering av p53 og Akt / GSK-3β signalvei.

Auranofin forsterker sulforafan-mediert apoptose i hepatocellulære karsinom Hep3B-celler gjennom inaktivering av PI3K/Akt-signalveien

Denne forskningen publisert i Biomolecules and Therapeutics (2020) foreslo at auranofin utviser synergistisk aktivitet og fremmer sulforafan-mediert apoptose av HEP3B-celler via aktivering av PI3K/AKT-signalveien.

Sirkulært RNA-0072309 har antitumorpåvirkning i Hep3B-cellelinjen ved å målrette mot mikroRNA-665

Denne forskningsartikkelen i BioFactors (2023) foreslo at sirkulært RNA-0072309 utøver antitumoreffekter i hepatocellulære karsinomceller HEP3B via målretting mot miRNA-665.

6.ressurser for HEP3B-cellelinje: Protokoller, videoer og mer

Nedenfor finner du noen få tilgjengelige ressurser om HEP3B-celler:

HEP3B-transfeksjon: Denne videoen forklarer transfeksjonsprotokollen for HEP3B-celler.
HEP3B-transfeksjonseffektivitet: Denne lenken hjelper deg med å lære om sammensetningen av HEP3B DMEM-medium, cellepassering og transfeksjonsprotokoll for HEP3B-celler. I tillegg gir den informasjon om hvordan du optimaliserer HEP3B lipofectamine 3000-reagenset i transfeksjonsprotokollen din.

Følgende lenke inneholder HEP3B-cellekulturprotokollen:

HEP3B-kulturbetingelser: Denne lenken hjelper deg med å lære protokollen for håndtering og vedlikehold av Huh7- og HEP3B-kulturer.
HEP3B-celler: Dette nettstedet inneholder mye informasjon om HEP3B-celler, inkludert HEP3B-medier, protokollen for celledeling, tining og håndtering av proliferative og kryopreserverte kulturer.

Referanser

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al. , miRNA-223-3p regulerer NLRP3 for å fremme apoptose og hemme proliferasjon av hep3B-celler. Eksperimentell og terapeutisk medisin, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. og S. Selen-Isbilir , Cytotoksisk effekt av Cotinus coggygria-ekstrakt på Hep3B kreftcellelinje. Natural Product Research, 2022: s. 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15 deltar i forplantning av hepatitt C-virus gjennom regulering av viral RNA-translasjon og dannelse av lipiddråper. Journal of Virology, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.