HT-29-cellelinje

HT-29 er en cellelinje for kolorektal kreft hos mennesker med et bredt spekter av bruksområder innen kreft- og toksikologiforskning. Disse cellene er for eksempel følsomme for standard kjemoterapeutiske behandlinger mot kolorektal kreft. I tillegg er HT-29-cellelinjen en velkarakterisert in vitro-modell for å undersøke tarmepitelets respons på bakteriell infeksjon. HT-29-cellene etterligner egenskapene til modne tarmceller, dvs. enterocytter, og egner seg derfor godt til feste- og mekanistiske studier.

Denne artikkelen tar for seg alle aspekter ved HT-29-cellelinjen som du trenger å kjenne til før du arbeider med den. Hovedsakelig vil den omfatte

HT-29-celler: Opprinnelse og generell informasjon
Informasjon om celledyrking av HT-29-cellelinjen
HT-29-celler: Fordeler og begrensninger
HT-29 celler: Bruksområder
Forskningspublikasjoner om HT-29-celler
Ressurser om HT-29-celler: Protokoller, videoer og mer

1. HT-29-celler: Opprinnelse og generell informasjon

Før du bruker en cellelinje, bør du kjenne til cellelinjens generelle egenskaper og opprinnelse. Denne delen vil hjelpe deg med å lære: Hva er HT-29-celler? Er HT-29 en cellelinje for kolorektal kreft? Hva er morfologien til HT-29-celler?

Hva er HT-29-cellelinjen? HT-29 er en kolorektal adenokarsinomcellelinje som ble etablert i 1964 av Trempe og Fogh. Cellene ble opprinnelig avledet fra primærsvulsten til en kaukasisk kvinne (44 år gammel) med kolorektalt adenokarsinom [1]. Siden etableringen har denne cellelinjen blitt brukt til å studere kreftsykdommenes biologi.

Morfologien til HT-29-celler: HT-29-cellelinjen har generelt en epitel-lignende morfologi. Differensierte celler vokser i monolag, danner tette celle-celle-forbindelser og har en apikal børstegrense. Hvis disse cellene dyrkes i glukosefattig medium eller gis induktorer som butyrat eller syre, viser de enterocyttlignende trekk.

Cellestørrelse: Diameteren til HT-29-cellelinjen for kolorektal kreft er 11 μm.

Genom og ploiditet: Det normale antallet kromosomer for HT-29-cellelinjen er 71. Det kan variere fra 68-72. Det strømlinjeformede kromosomantallet for HT-29-celler er dessuten hypertriploid, med en 2S-komponent på 2,4 %.

Hva er HT29 MTX? HT29 MTX er en metotreksatresistent cellelinje som er isolert fra den opprinnelige HT-29-cellelinjen for tykktarmskreft ved tilpasning til 10 µM metotreksat. Disse cellene har egenskaper som slimutskillende modne begerceller.

Deling og bevegelse av kolorektale kreftceller under mikroskopet.

2. Informasjon om celledyrking av HT-29-cellelinjen

Å vite om de grunnleggende dyrkingskravene til en cellelinje kan gjøre arbeidet ditt enkelt med den. Du bør vite: Hva er fordoblingstiden for HT-29-cellelinjen? Hva er såingstettheten til HT-29-celler? Hvilke medier brukes til HT-29-celler?

Doblingstid	Den gjennomsnittlige doblingstiden for HT-29-cellelinjen er 24 timer.
Adherent/suspensjon	HT-29 er en adherent cellelinje.
Såingstetthet	Den anbefalte såingstettheten for HT-29-celler er 3 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. De dyrkede cellene vaskes med 1 X PBS og løsnes etter inkubering med Accutase i 8-10 minutter. Fersk medium tilsettes, og cellene sentrifugeres. Cellepelleten resuspenderes, og cellene fordeles i nye kolber med anbefalt celletetthet.
Vekstmedium	Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) supplert med 2,5 mM L-glutamin og 10 % FBS brukes for optimal dyrking av HT-29-celler. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger i uken.
Vekstbetingelser	HT-29-celler krever en humifisert inkubator med en temperatur på 37 °C og 5 %_{CO2-tilførsel} for vekst.
Oppbevaring	Disse cellene oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen ved temperaturer under -195 °C.
Frysemedium og prosess	Frysemediet som brukes til HT-29-cellelinjen, er CM-1 eller CM-ACF. Cellene fryses ved hjelp av en langsom fryseprosess som gir et temperaturfall på 1 °C og effektivt beskytter cellenes levedyktighet.
Tineprosessen	Frosne HT-29-celler tines i et vannbad med en temperatur på 37 °C. Disse cellene kan resuspenderes og doseres direkte i den ferske vekstmediumkolben. I motsetning til dette kan de tinte cellene sentrifugeres for å fjerne elementer fra frysemediet, resuspenderes i ferskt medium og dyrkes i kolber.
Biosikkerhetsnivå	Biosikkerhetsnivå 1 brukes til å håndtere og vedlikeholde HT-29-cellelinjen.

HT-29-celler under 10 ganger og 20 ganger forstørrelse.

3. HT-29-celler: Fordeler og begrensninger

Hver cellelinje har unike fordeler og ulemper som skiller den fra andre cellelinjer. I denne delen vil vi gå gjennom de viktigste fordelene og begrensningene knyttet til HT-29-celler.

Fordeler og ulemper

De viktigste fordelene med HT-29-celler er

Lett å dyrke
HT-29-cellelinjen er enkel å håndtere og vedlikeholde, uten komplekse krav til dyrking. Den dyrkes mye i forskningslaboratorier.
In vitro-modell av tarmceller
HT-29-celler kan differensieres til modne tarmceller (enterocytter og slimproduserende celler) under spesifikke dyrkingsforhold. De brukes som en cellulær modell for å studere matfordøyelse og biotilgjengelighet.
Høy transfeksjonseffektivitet
HT-29 tykktarmskreftceller har høy transfeksjonseffektivitet, noe som gjør dem egnet for studier av genuttrykk og -regulering. Både transiente og stabile transfeksjonseksperimenter kan utføres ved hjelp av ulike metoder.
Sensitivitet for legemidler
HT-29-celler er følsomme for kjemoterapeutiske legemidler som fluorouracil og oksaliplatin, som ofte brukes i behandling av tykktarmskreft. De brukes til å studere medikamentresistens og screene potensielle legemidler for behandling av kolorektal karsinom.

Begrensninger

Heterogenitet
HT-29-celler, i likhet med andre kreftcellelinjer, er heterogene og danner kanskje ikke en ensartet cellepopulasjon. Dette kan påvirke reproduserbarheten av resultatene i visse analyser og føre til mindre variasjoner i forsøksresultatene.
Begrenset differensiering
HT-29-celler har begrenset differensieringspotensial. De differensierer ikke fullt ut til tarm- eller tykktarmsceller, men viser bare noen få karakteristiske trekk. Denne begrensningen kan begrense bruken av dem i studier av mer komplekse biologiske prosesser.

4. hT-29-celler: Bruksområder

HT-29-cellelinjen dyrkes i stor utstrekning i forskningslaboratorier på grunn av sitt brede bruksområde. I dette avsnittet vil vi bare ta for oss noen få viktige bruksområder for HT-29-celler.

Kreftforskning: HT-29 er en cellelinje for kolorektalt adenokarsinom, og den brukes derfor til å studere kreftprogresjon, utvikling og underliggende molekylære mekanismer. I en studie fra 2018 ble HT-29-cellelinjen brukt til å undersøke hvilke cellemolekyler som er ansvarlige for metastase. I denne studien ble det observert at vimentin- og CXCR4-gener regulerer cellemetastase. Transfeksjon av mikroRNA-193a-5p mimic kan redusere mRNA-nivåene av disse genene og redusere metastase av kreftceller [2].

Toksikologisk forskning: HT-29-cellelinjen er mye brukt i toksikologisk forskning. Disse kolorektale karsinomcellene brukes til å vurdere toksisiteten til ulike legemiddelkandidater ved hjelp av forskjellige analyser. I en studie ble for eksempel toksisitetspotensialet til et etanolisk ekstrakt av planten Syzygium cumini undersøkt på HT-29-cellelinjen. Resultatene viste signifikant undertrykkelse av HT-29-cellevekst, noe som indikerer ekstraktets lovende egenskaper mot kreft [3].

Mikrobiologi: HT-29 kan brukes som et vertscellesystem for å undersøke patogenesen til potensielle mikrober, dvs. bakterier og virus. Forskere kan infisere HT-29-celler med mikrober for å undersøke deres virulens og vertsrespons. I en slik studie ble HT-29-celler brukt til å utforske melkesyrebakteriers probiotiske egenskaper [4]. I en annen studie ble HT-29-celler brukt til å evaluere effekten og sikkerheten ved bakteriofagbehandlinger [5].

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300215

5. Forskningspublikasjoner om HT-29-celler

Denne delen vil belyse noen bemerkelsesverdige publikasjoner om HT-29-celler som vil hjelpe deg med å utforme forskningsstudien din.

Evaluering av den krefthemmende effekten av Syzygium cumini-etanolisk ekstrakt på HT-29 kolorektal cellelinje

Denne studien foreslo Syzygium cumini-etanolisk ekstrakt som et potensielt antikreftmiddel mot kolorektal kreftcellelinje HT-29. Ekstraktet undertrykte veksten av kreftceller betydelig.

Tetrandrin hemmer veksten av tykktarmskreft HT-29-celler via Bcl-2/Caspase 3/PARP-veien og G1/S-fasen

Denne publikasjonen i Bioscience Reports testet anti-kreftaktiviteten til en forbindelse, Tetradrine, på HT-29-celler. Resultatene viste at tetrandrin hemmer spredning og vekst av kreftceller via regulering av cellenes signalveier.

microRNA-193a-5p hemmer migrasjon av humane HT-29 tykktarmskreftceller via undertrykkelse av metastaseveien

Denne studien foreslår at miRNA-193a-5p potensielt kan regulere metastase i HT-29-celler ved å regulere metastaserelaterte gener.

Bakteriofager er mer virulente mot bakterier med humane celler enn de er i bakteriekultur; innsikt fra HT-29-celler

Denne artikkelen er publisert i Nature Scientific Reports i 2018. I denne studien ble HT-29 tumorigen cellelinje brukt som en tarmmodell for å evaluere effekten av den foreslåtte bakteriofagbehandlingen.

Probiotiske egenskaper hos laktobaciller og deres evne til å hemme adhesjonen av enteropatogene bakterier til Caco-2- og HT-29-celler

I denne studien brukte forskerne HT-29-celler for å undersøke melkesyrebakterienes probiotiske aktiviteter. Interessant nok viste studien at laktobaciller forhindrer adhesjon av patogene bakterier til tykktarmsceller.

6. HT-29-celler Ressurser: Protokoller, videoer og mer

Denne delen vil dekke noen tilgjengelige nettressurser om HT-29-celler som kan hjelpe deg med å lære om vedlikehold, dyrking og transfeksjonsprotokoller.

Protokoller for celledyrking

Følgende ressurser gir deg veiledning om subkulturering av HT-29-celler.

Dyrking av HT-29-celler: Denne lenken gir deg grunnleggende kunnskap om vekstmedium, tining og subkultur av HT-29-celler.
Vedlikehold av HT-29-kulturer: Denne artikkelen inneholder all nyttig informasjon om dyrking og vedlikehold av HT-29-celler.

Protokoller for transfeksjon

HT-29-cellelinjen har høy transfeksjonseffektivitet, og den brukes ofte i genekspresjonsstudier. Følgende ressurser beskriver mulige transfeksjonsprotokoller for disse cellene.

Transfeksjon av HT-29: Denne nettstedslenken inneholder en detaljert protokoll for transfeksjon av HT-29-celler.
Transfeksjon av HT-29-cellelinjen: Dette dokumentet beskriver transfeksjonsprotokollen for HT-29-cellelinjen med plasmid-DNA.

Videoer relatert til HT-29-cellelinjen

Her er noen videoer om dyrking og vedlikehold av denne tumorigeniske cellelinjen.

Passering av celler: Denne videoen viser protokollen for cellepassering for adherente cellelinjer.
Transfeksjon av HT-29-celler: Denne videoen gir deg veiledning om transfeksjonsmetoden som brukes for HT-29-celler.

Vi forventer at informasjonen i denne artikkelen er verdifull og tilstrekkelig til at du kan håndtere håndtering og vedlikehold av HT-29-cellelinjer. Hvis du planlegger å bruke HT-29-celler i studien din, kan du bestille fra oss.

Referanser

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles og I. Recio, HT29-cellelinje. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: s. 113-124.
Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p hemmer migrasjon av humane HT-29 tykktarmskreftceller via undertrykkelse av metastaseveien. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean og R. Safaralizadeh, Evaluering av antikrefteffekten av Syzygium cumini etanolisk ekstrakt på HT-29 kolorektal cellelinje. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al., Probiotiske egenskaper til laktobaciller og deres evne til å hemme adhesjonen av enteropatogene bakterier til Caco-2 og HT-29 celler. Probiotika og antimikrobielle proteiner, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al., Bakteriofager er mer virulente mot bakterier med humane celler enn de er i bakteriekultur; innsikt fra HT-29-celler. Vitenskapelige rapporter, 2018. 8(1): p. 5091.