DU-145-celler - en omfattende guide for forskere

DU-145 er en human prostatakarsinomcellelinje som er mye brukt i biomedisinsk forskning. Disse cellene fungerer som en uvurderlig modell for å studere prostatakreftbiologi, legemiddeltesting og -utvikling. Forskere bruker også DU-145-celler til å undersøke molekylære mekanismer som ligger til grunn for utvikling, vekst og progresjon av prostatakreft.

Denne artikkelen vil gi deg verdifull innsikt i DU-145-prostatakreftcellene. Spesielt vil den dekke:

Generell informasjon og opprinnelse til DU-145-cellelinjen
Dyrking av DU-145-celler
DU-145-cellelinjen: Fordeler og begrensninger
Forskningsmessige anvendelser av DU-145-celler
Forskningspublikasjoner med DU-145-celler
Ressurser for DU-145 cellelinje: Protokoller, videoer og mer

1. Generell informasjon om DU-145-cellelinjen og dens opprinnelse

Det er viktig å forstå en cellelinjes grunnleggende egenskaper og opprinnelse før man begynner å arbeide med den. Denne delen vil gi en omfattende forståelse av DU-145-cellelinjens egenskaper og opprinnelse. Du vil få vite mer: Hva er DU145 kreftceller? Hva er morfologien til DU145-celler? Hva er forskjellen mellom PC-3 og DU145?

DU-145, en menneskelig prostatakreftcellelinje, ble avledet fra hjernen til en kaukasisk mann (69 år gammel) med metastatisk prostatakarsinom. Disse cellene ble først deponert av K.R. Stone og kolleger i 1978.
I likhet med PC-3-prostatakreftceller uttrykker også DU-145 androgenreseptorer. Når disse cellene utsettes for androgenligandbehandling, viser de imidlertid ingen aktivitet av androgenreseptorresponsive gener, og de regnes derfor som androgenuavhengige celler.
DU-145-celler har en epitelial morfologi.
DU-145-celler er hypotriploide og har et modalt kromosomnummer på 64. De har flere markørkromosomer, som del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) og del (9) (p11).

PC-3 mot DU145

Begge prostatakreftcellelinjene er androgenreseptoruavhengige. De skiller seg fra hverandre når det gjelder tumor- og metastatisk potensial. Når PC-3-cellelinjen injiseres i en immunkompromittert mus, danner den høymetastatisk adenokarsinom av grad IV. I motsetning til dette utvikler DU-145-cellelinjen prostatakreft med moderat metastatisk potensial [1].

Forstyrrelse av mikrofilamenter i humane prostatakreftceller PC-3.

2.dyrking av DU-145-celler

DU-145-cellelinjen er mye brukt i forskningslaboratorier for prostatakreft. Du bør lære deg følgende viktige punkter for å gjøre det enklere og mer effektivt å dyrke den. Denne delen inneholder informasjon om DU-145-mediet, fordoblingstid, betingelser for celledyrking og protokoller.

Viktige punkter for dyrking av DU-145-celler

Populasjonens fordoblingstid:	DU-145-cellenes fordoblingstid varierer mellom 30 og 40 timer.
Adherent eller i suspensjon:	DU-145 er en adherent cellelinje.
Såingstetthet:	DU-145-celler utsås med en anbefalt celletetthet på 2 x¹⁰⁴^celler/cm2. Ved denne tettheten danner cellene et konfluerende monolag i løpet av nesten 4 dager. Ved såing vaskes cellene med 1 x fosfatbuffer saltvann og inkuberes med passasjeløsning, Accutase. Etter 8 til 10 minutters inkubering i romtemperatur tilsettes cellene nytt dyrkingsmedium, og de sentrifugeres. Den oppsamlede cellepelleten resuspenderes forsiktig, og cellene helles over i nye dyrkingsflasker for vekst.
Vekstmedium:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) med medietilskudd, dvs. 10 % føtalt bovint serum (FBS), 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS. Mediet fornyes 2 til 3 ganger per uke.
Vekstbetingelser:	DU-145-kulturer oppbevares i en 37 °C fuktig inkubator med en 5 % CO2-kilde.
Oppbevaring:	DU-145-celler oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk fryser for å opprettholde cellenes levedyktighet over lengre tid.
Fryseprosess og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedium anbefales for DU-145 prostatakreftceller. For å fryse celler velges en langsom nedfrysingsmetode som lar temperaturen synke gradvis med 1 °C. Dette forhindrer at cellene utsettes for sjokk og bidrar til å opprettholde levedyktigheten.
Tineprosessen:	Frosne DU-145-celleglass tines raskt i et vannbad på 37 °C i 40 til 60 sekunder. Deretter tilsettes cellene med dyrkingsmedium og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. De høstede cellene resuspenderes i et vekstmedium og helles over i kolben for vekst. Gjenfrysing tar nesten 24 timer.
Biosikkerhetsnivå:	Det kreves innstillinger på biosikkerhetsnivå 1 for å dyrke den androgenreseptoruavhengige cellelinjen DU145.

DU-145 prostatakreftceller i 10 x og 20 x forstørrelse.

3. dU-145 cellelinje: Fordeler og begrensninger

I likhet med andre cellelinjer er prostatakreftcellelinjen DU-145 forbundet med noen fordeler og ulemper. Disse egenskapene kan hjelpe deg med å avgjøre om den skal brukes i forskningen din. De viktigste fordelene og ulempene med DU-145-celler er nevnt nedenfor.

Fordeler og ulemper

Fordelene med DU-145-celler er

Tumorigenisitet	DU-145 er en aggressiv tumorigenisk prostatakreftcellelinje med moderat metastatisk potensial. Brukes til å utvikle DU145 xenograftmodellen i immunkompromitterte mus for å studere prostatakreftbiologi, utvikling og vekst in vitro og in vivo.
Uavhengig av androgenreseptorer	DU-145 prostatakreftceller er androgenreseptoruavhengige. De er ikke avhengige av androgener for å vokse, og viser ingen respons på celle- og molekylnivå når de behandles med androgener. Ideell for forskning på hormonuavhengige prostatakreftmekanismer.

Begrensninger

Begrensningene med DU-145-cellelinjen er følgende:

In vitro-modell

DU-145 er en in vitro-cellemodell av metastatisk prostatakarsinom, så det er ikke sikkert at den fullt ut representerer kompleksiteten i primære prostatasvulster. Dessuten er det ikke sikkert at den representerer alle typer og undertyper av prostatakreft på grunn av spesifikke egenskaper som for eksempel androgenreseptoruavhengighet.

4. forskningsmessige anvendelser av DU-145-celler

Prostatakreftcellelinjen DU-145 har et bredt spekter av bruksområder innen forskning. Noen få lovende bruksområder er listet opp her.

Prostatakreftbiologi: DU-145 er en relevant modell for å studere prostatakreftbiologi. Forskere bruker disse cellene til å undersøke molekylære mekanismer som driver kreftutvikling, progresjon og metastasering. I tillegg utforskes genetiske endringer som ofte er forbundet med prostatakreft. I 2021 ble DU-145-celler undersøkt for å identifisere potensielle biomarkører som kan gi effektive diagnostiske og terapeutiske implikasjoner. Studien foreslo aktin gamma 1 (ACTG1) som en potensiell biomarkør for prostatakreft, ettersom den fremmer spredning av kreftceller og regulerer metastase via aktivering av MAPK/ERK-stien [2].
Screening og utvikling av legemidler: DU-145-prostatakreftceller brukes ofte til å teste cytotoksisiteten og effekten av potensielle legemidler mot kreft. Dette hjelper forskere med å identifisere nye legemidler, forstå legemiddelresistens og underliggende molekylære mekanismer. I en studie utført i 2022 ble den cytotoksiske effekten av en harpiksblanding, propolis eller bielim, undersøkt i prostatakreftcellelinjene PC-3 og DU-145. Studien viste veksthemmende effekter av dette naturlige stoffet i begge cellelinjene og antydet dets potensial mot kreft [3]. I 2019 ble det gjennomført en annen studie som undersøkte de antiproliferative effektene av et naturlig stoff, betain, i DU-145 prostatakreftceller. Forskningen viste at betain utøver antiproliferative aktiviteter ved å øke oksidativt stressmediert celledød og betennelse i DU-145-celler [4].

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300168

5.forskningspublikasjoner med DU-145-celler

Her følger noen forskningspublikasjoner om DU-145-cellelinjen.

Konsentrasjonsavhengige effekter av sinksulfat på DU-145 menneskelig prostatakreftcellelinje: oksidative, apoptotiske, inflammatoriske og morfologiske analyser

Denne studien i Biological Trace Element Research, 2020, foreslo at sinksulfat (_ZnSo4) utøver antiproliferative effekter i DU-145-celler ved å indusere apoptose, morfologiske endringer, oksidativ skade og betennelse.

Selektiv cytotoksisk og anti-metastatisk aktivitet i DU-145 prostatakreftceller indusert av Annona muricata L. barkekstrakt og det fytokjemiske stoffet annonacin

Denne forskningsartikkelen ble publisert i BMC Complementary Medicine and Therapies i 2020. Denne studien undersøkte det cytotoksiske og anti-metastatiske potensialet til en plante, Annona muricata L. barkekstrakt, og dens bioaktive annonacin i DU-145-cellelinjen.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-relatertvei regulerer doxorubicinresistensen til DU-145-celler i prostatakreft

Denne publikasjonen i IUBMB Life (2019) foreslo at lang ikke-kodende RNA LOXL1-AS1 interaksjon med miR-let-7a-5p og EGFR-veien regulerer doksorubicinresistens i DU-145 prostatakreftceller.

Nedregulering av DDR1 induserer apoptose og hemmer EMT gjennom fosforylering av Pyk2/MKK7 i DU-145- og Lncap-FGC-prostatakreftcellelinjer

I denne artikkelen i Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) står det at nedregulering av Discoidin Domain Receptor1 (DDR1)-genet fører til at DU-145-celler dør og hemmer epitelial til mesenkymal overgang (EMT) via aktivering av Pyk2/MKK7-veien.

Casticin hemmer migrasjon og invasjon av DU-145-celler fra prostatakreft hos mennesker via Ras/Akt/NF-κB-signalveier

Denne studien i Journal of Food Biochemistry (2019) foreslår at Casticin, et polymetoksyflavon, hemmer migrasjon og invasjon av DU-145-celler ved å regulere Ras/Akt/NF-κB-signalering.

6. ressurser for DU-145 cellelinje: Protokoller, videoer og mer

Det finnes mange nettressurser om DU-145-cellelinjen for prostatakreft. I denne delen vil vi nevne noen få ressurser som forklarer håndtering, vedlikehold og transfeksjonsprotokoll for disse cellene:

DU-145-transfeksjon: Denne videoveiledningen er en trinnvis veiledning for å lære protokollen for transfeksjon av DU-145-celler.

DU-145-cellekulturprotokollen er nevnt her.

DU-145 subkulturering: Denne lenken vil hjelpe deg å lære protokollen for subkulturering eller subkultivering av DU-145-celler.
DU-145-celler: Dette nettstedet inneholder mye nyttig informasjon om DU-145-cellelinjen, inkludert DU145-medium, protokoll for subkultivering og håndtering av proliferative og kryopreserverte kulturer.

Referanser

Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Vitenskapelige rapporter, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1-uttrykk induserer prostatakreft epitelial mesenkymal overgang gjennom MAPK / ERK signalvei. DNA og cellebiologi, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancereffekter av propolisekstrakter oppnådd med kaldseparasjonsmetoden på PC-3 og DU-145 prostatakreftcellelinjer. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betain undertrykker celleproliferasjon ved å øke oksidativt stressmediert apoptose og betennelse i DU-145 menneskelig prostatakreftcellelinje. Cellestress og chaperoner, 2019. 24: p. 871-881.