DLD-1-celler: Bruksområder og innsikt i DLD-1-celler i kolorektal kreftforskning

DLD-1 er en human kolorektal karsinomcellelinje som ofte brukes i kreftforskning. Den er et verdifullt verktøy for å undersøke ulike aspekter ved tykktarmskreft, inkludert tumorutvikling, progresjon, underliggende molekylære mekanismer og respons på terapeutiske midler. DLD-1 er derfor enestående når det gjelder å forstå sykdommen og utvikle potensielle behandlingsstrategier.

Denne artikkelen gir deg viktig informasjon om DLD-1-cellelinjen som du bør kjenne til før du arbeider med den. Den vil dekke følgende:

Generelle egenskaper og opprinnelse til DLD-1-celler
Informasjon om dyrking av DLD-1-cellelinjen
DLD-1-cellelinjen: Fordeler og begrensninger
Forskningsanvendelser av DLD-1-cellelinjen
Forskningspublikasjoner om DLD-1-celler
Ressurser for DLD-1 cellelinje: Protokoller, videoer og mer

1. Generelle egenskaper og opprinnelse til DLD-1-celler

Før en forsker begynner å arbeide med en cellelinje, må han eller hun først ta hensyn til dens opprinnelse og generelle egenskaper. Denne artikkelen er en detaljert introduksjon til DLD-1-cellelinjen. Den vil dekke følgende ofte stilte spørsmål: Hva er DLD-1-celler? Hva er en DLD-1-kreftcellelinje? Hva er mutasjonene i DLD-1-cellelinjen? Hva er størrelsen på en DLD-1-celle? Hva er morfologien til DLD-1-celler?

DLD-1, en tykktarmskreftcellelinje, stammer fra tykktarmen til en 67 år gammel mannlig pasient med kolorektalt adenokarsinom. Den ble isolert av D.L. Dexter og kolleger i 1977-1979. Denne cellelinjen har samme opprinnelse som HCT-8-, HCT-15- og HRT-18-cellelinjene.
I likhet med kolorektal kreft har DLD-1-celler en mikrosatellittinstabil fenotype [1].
DLD-1-mutasjoner omfatter KRAS, P53, BRAF, BRCA1 og BRCA2. På grunn av DLD-1 P53-status, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 og DLD-1 KRAS-mutasjon anses disse cellene som ideelle for kreftstudier.
Disse cellene har en epitel-lignende morfologi.
Størrelsen på DLD-1-cellelinjen er ca. 15 µm.
Den humane kolorektale kreftcellelinjen DLD-1 har en pseudodiploid karyotype. Rundt 86 % av cellene har et modalt kromosomnummer på 46. Polyploidi kan imidlertid også forekomme i 17,1 % av cellepopulasjonen.

3D-gjengivelse av en CT-kolonografi eller CT-skanning av tykktarmen som vises på skjermen for diagnostisering av tykktarmskreft, tykktarmskreft og kolorektal kreft.

2.informasjon om dyrking av DLD-1-cellelinjen

Før du dyrker en cellelinje, må du kjenne til de grunnleggende kravene til celledyrking. I dette avsnittet vil vi trekke frem de viktigste punktene du må lære deg før du begynner å arbeide med DLD-1-cellelinjen. Dette inkluderer: Hva er DLD-1-doblingstiden? Hva er DLD-1-kulturmediet? Hva er såingstettheten for DLD-1-celler? Hvordan dyrker man DLD-1-celler?

Nøkkelpunkter for dyrking av DLD-1-celler

Doblingstid:	DLD-1-cellenes fordoblingstid er ca. 15 timer.
Adherent eller i suspensjon:	DLD-1 er en adhærent cellelinje for tykktarmskreft fra mennesker. Cellene vokser i monolag.
Såtetthet:	DLD-1-celler utsås med en tetthet på 1 til 2 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. De adherente cellene vaskes med 1x fosfatbuffersaltløsning (PBS) og inkuberes med passageløsning (Accutase) ved omgivelsestemperatur. Etter 8 til 10 minutters inkubering tilsettes de løsrevne cellene til dyrkingsmediet og sentrifugeres. Cellepelleten resuspenderes deretter forsiktig, og cellene helles over i nye dyrkningsbeholdere som inneholder vekstmedium.
Vekstmedium:	RPMI 1640 med tilskudd av 10 % føtalt bovint serum (FBS), 2,1 mM stabil glutamin og 2,0 g/L NaHCO3 brukes til dyrking av DLD-1-celler. Mediet bør skiftes ut 2-3 ganger per uke.
Vekstbetingelser:	DLD-1-kulturer holdes i en 37 °C fuktig inkubator med 5 % CO2-tilførsel.
Oppbevaring:	DLD-1-celler oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller i en elektrisk fryser med ultralave temperaturer (under -150 °C).
Fryseprosess og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedium kan brukes til å fryse DLD-1-celler. Det anbefales alltid en langsom fryseprosess, slik at temperaturen gradvis synker med 1 °C, noe som forhindrer at cellene får sjokk og beskytter levedyktigheten deres.
Tineprosess:	Frosne celler tines i et vannbad som er forhåndsinnstilt på 37 °C i 40 til 60 sekunder til det er igjen en liten isklump. Deretter tilsettes cellene til et nytt medium og sentrifugeres. Dette trinnet er nødvendig for å fjerne komponenter fra frysemediet fra cellene. De oppsamlede cellene resuspenderes i et vekstmedium og doseres i kolben for vekst.
Biosikkerhetsnivå:	DLD-1-cellelinjen vedlikeholdes i laboratorier på biosikkerhetsnivå 1.

DLD-1-celler observert i 10- og 20 ganger forstørrelse, noe som avslører deres karakteristiske epitelmorfologi.

3.dLD-1 cellelinje: Fordeler og begrensninger

I denne delen av artikkelen går vi gjennom fordelene og begrensningene ved DLD-1-cellelinjen for tykktarmskreft.

Fordeler og begrensninger

De viktigste fordelene med DLD-1-cellelinjen er

Modell for kolorektal kreft	DLD-1-celler har mutasjoner som ofte finnes hos pasienter med kolorektal kreft, som DLD-1 KRAS-mutasjon, DLD-1 BRCA og DLD-1 BRCA2. Denne relevansen gjør dem til en klinisk egnet cellemodell for studier av denne sykdommen.
Tumorogen cellelinje	DLD-1-celler er tumorogene. De kan forårsake svulster når de injiseres i nakne mus. Forskere bruker derfor disse cellene til å utvikle xenotransplantasjonsmodeller for å undersøke tumordannelse, -utvikling og -progresjon in vivo.

Begrensninger

Begrensningene knyttet til DLD-1-cellene er

Heterogenitet

DLD-1-cellepopulasjoner med tykktarmskreft viser genetisk og fenotypisk heterogenitet. Dette kan påvirke generaliserbarheten av forskningsresultatene.

4.anvendelser av DLD-1-cellelinjen i forskning

DLD-1-cellelinjen har en rekke bruksområder innen kreftforskning. Noen av de viktigste bruksområdene omtales i dette avsnittet.

Kreftstudier: DLD-1-celler er en verdifull in vitro-modell for å forstå de molekylære mekanismene som ligger til grunn for vekst, utvikling og progresjon av kolorektal kreft. De brukes dessuten til å studere genuttrykk, signalveier og hvordan spesifikke genetiske mutasjoner påvirker kreftcellenes atferd. Forskning utført i 2022 viste at PI3K/Akt/YAP-signalkaskaden regulerer migrasjon og invasjon av DLD-1-cellelinjen for kolorektal kreft [2].
Utvikling av legemidler: Forskere bruker DLD-1-cellelinjen til å teste effekten av legemidler mot kreft og evaluere deres potensial for behandling av tykktarmskreft. Dette bidrar til utvikling av legemidler og effektiv sykdomsbekjempelse. I en studie utført i 2022 ble DLD-1-cellelinjen brukt til å undersøke anti-kreftaktiviteten til silisiumftalocyaniner, kjemisk syntetiserte forbindelser. Resultatene av studien antydet at disse forbindelsene er potente midler mot kreft [3]. Interessant nok viste en annen undersøkelse at et probiotisk avledet P8-protein hadde potensial mot kreft ved bruk av DLD-1-celler [4].

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300220

5.forskningspublikasjoner om DLD-1-celler

I dette avsnittet vil vi trekke frem noen interessante og hyppig siterte publikasjoner som omhandler DLD-1-cellelinjen for tykktarmskreft.

Flavonoidglykosidet diosmin induserer apoptose og cellesyklusarrest i DLD-1-cellelinjen for tykktarmskreft hos mennesker

Denne publikasjonen er publisert i Journal of Biologically Active Products fra Nature (2022). Studien fant at diosmin, et flavonoid, induserte celledød i DLD-1-celler og også forårsaket cellesyklusarrest; dermed kan det være et potensielt middel mot kreft.

Bromelain undertrykker effektivt Kras-mutant kolorektal kreft ved å stimulere ferroptose

Denne studien i Animal Cells and Systems (2018) foreslo at bromelain, et enzym, undertrykker DLD-1 KRAS-mutasjon og utøver potente cytotoksiske effekter.

Bergapten induserer G1-arrest og pro-apoptotisk kaskade i kolorektale kreftceller i forbindelse med p53/p21/PTEN-aksen

Denne forskningsartikkelen ble publisert i 2019 i tidsskriftet "Environmental Toxicology". Studien undersøkte antitumoreffektene av en naturlig forbindelse, Bergapten, ved hjelp av en DLD-1-cellelinje fra tykktarmskreft.

Miljøvennlig fremstilling av nanokurcumin/nanojernoksid-kompositt: Forbedret in vitro-antikreftaktivitet mot DLD-1-cellelinjer

Denne studien i Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) fant at curcumin/jernoksid-nanokompositter er svært effektive mot DLD-1 kolorektale kreftceller.

Epibrassinolid aktiverer AKT for å utløse autofagi med polyaminmetabolisme i SW480- og DLD-1 tykktarmskreftcellelinjer

Denne forskningsartikkelen ble publisert i 2020 i Turkish Journal of Biology. Studien foreslo at et naturlig produkt, epibrassinolid-mediert aktivering av AKT i DLD-1-celler, stimulerer autofagi relatert til polyaminer.

6.ressurser for DLD-1 cellelinje: Protokoller, videoer og mer

Her følger noen få ressurser om DLD-1-celler:

DLD-1-transfeksjon: Denne videoopplæringen er en omfattende veiledning om DLD-1 in vitro transfeksjonsprotokoll.
DLD-1-celler: Denne forskningsartikkelen beskriver kort DLD-1-cellekulturkrav, inkludert medier og kulturforhold. Dessuten kan den hjelpe deg med å lære transfeksjonsprotokollen som brukes for DLD-1-celler.

Følgende lenker inneholder protokollen for dyrking av DLD-1, humane avledede tykktarmskreftceller.

DLD-1 cellelinje: Dette nettstedet gir grunnleggende informasjon om DLD-1-cellelinjen. Den vil hjelpe deg med å lære ulike DLD-1-celledyrkingsprotokoller, inkludert subkulturer og håndtering av kryopreserverte og prolifererende kulturer.

Referanser

Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotiske gener som nye mål for enkelt- og kombinasjonsbehandlinger med resveratrol og curcumin i kolorektal kreft. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP-signalering fremmer migrasjon og invasjon avDLD-1kolorektale kreftceller. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al, Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al., Anti-kreftroller av probiotisk-avledet P8-protein i kolorektal kreftcellelinje DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.