BEAS-2B-celler – BEAS-2B-celler i forskning på luftveissykdommer: En omfattende guide
BEAS-2B er en immortalisert og ikke-tumorogen human lungeepitelcellelinje. Den er en mye brukt in vitro-modell for å studere lungecellers respons på ulike kreftfremkallende stoffer og giftstoffer. I tillegg er den et verdifullt forskningsverktøy for å studere ulike luftveisinfeksjoner og sykdommer, som COVID-19 og lungekreft.
- Vekstmedium
- BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) med 10 % føtal bovint serum brukes til dyrking av BEAS-2B-lungecellelinjen. Mediet bør skiftes ut hver 2. til 3. dag.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for BEAS-2B-populasjonen er omtrent 26 timer.
- Veksttype
- BEAS-2B er en epitelignende, vedheftende cellelinje.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-1
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill BEAS-2B
I denne artikkelen vil vi diskutere nesten alle aspekter ved BEAS-2B-lungecellelinjen, inkludert dens opprinnelse, informasjon om cellekultur, fordeler, ulemper og anvendelser i forskning. Spesielt vil vi gå gjennom:
- Opprinnelse og generelle egenskaper ved BEAS-2B-cellene
- BEAS-2B-cellelinje: Informasjon om dyrking
- Fordeler og ulemper ved BEAS-2B-celler
- Anvendelser av BEAS-2B-cellelinjen i forskning
- BEAS-2B-celler: Forskningspublikasjoner
- Protokoller for cellekultivering
1. Opprinnelse og generelle egenskaper ved BEAS-2B-cellene
Det første man ser etter i en cellelinje er dens opprinnelse og generelle egenskaper. Her vil du lære om de viktigste egenskapene og opprinnelsen til BEAS-2B humane bronkiale epitelceller. Du vil studere: Hva er BEAS-2B-lungecellelinjen? Hvilken type celler er BEAS-2B? Hva er opprinnelsen til BEAS-2B-celler?
- BEAS-2B, bronkialepitelcellelinjen, ble utviklet fra ikke-kreftbefengt humant lungevev i 1988 av Curtis C. Harris' gruppe [1].
- BEAS-2B-celler har en epitel-lignende morfologi.
HBEpC vs. BEAS-2B
HBEpC er humane primære bronkiale epitelceller. I likhet med BEAS-2B er de normale humane bronkiale epitelceller. De har imidlertid en begrenset levetid sammenlignet med de udødeliggjorte BEAS-2B-cellene. Begge cellelinjene kan brukes til å studere lungebiologi, toksikologi og sykdomsmodellering.
BEAS-2B-cellelinje: Informasjon om dyrking
Informasjon om dyrking av en cellelinje kan gjøre arbeidet ditt med den enklere. I denne delen av artikkelen vil du lære alt det grunnleggende om dyrking av BEAS-2B-lungecellelinjen. Spesielt vil vi finne ut: Hva er doblingstiden for BEAS-2B? Hva er BEAS-2B-medium? Er BEAS-2B-cellelinjen vedheftende? Hvordan dyrker man BEAS-2B-celler?
Viktige punkter for dyrking av BEAS-2B-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for BEAS-2B-populasjonen er omtrent 26 timer.
Adherent eller i suspensjon:
BEAS-2B er en epitel-lignende vedheftende cellelinje.
Celle tetthet:
Den anbefalte celletettheten for BEAS-2B-cellelinjen er 1 til 2 × 104 celler/cm2. Adhærente BEAS-2B-celler skylles med fosfatbuffersaltvann og inkuberes med Accutase ved romtemperatur i noen minutter. Etter at cellene har løsnet, tilsettes ferskt medium, og cellene samles opp ved sentrifugering. De høstede cellene resuspenderes forsiktig og helles over i en ny kolbe for vekst.
Vekstmedium:
BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) medier som inneholder 10 % føtalt bovint serum brukes til dyrking av BEAS-2B-lungecellelinjen. Mediet bør skiftes ut hver 2. til 3. dag.
Vekstbetingelser:
BEAS-2B-kulturen holdes ved 37 °C i en fuktet inkubator med kontinuerlig tilførsel av 5 % CO2.
Oppbevaring:
Frosne BEAS-2B-celleampuller kan oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller i en elektrisk fryser ved en temperatur under -150 °C.
Fryseprosess og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier brukes til å fryse BEAS-2B-lungecellelinjen. Cellene fryses ved å tillate kun en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt for å beskytte cellenes levedyktighet. Denne typen metode kalles langsom frysing.
Tineprosess:
Frosne eller kryokonserverte BEAS-2B-kulturer tines i et 37 °C varmt vannbad som inneholder et antimikrobielt middel i 40 til 60 sekunder. Deretter tilsettes cellene medier og kan dyrkes direkte i nye kolber eller sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Deretter resuspenderes de oppsamlede cellene og dyrkes. I det første tilfellet fjernes frysemediet etter 24 timer.
Biosikkerhetsnivå:
Laboratorier med biosikkerhetsnivå 1 er påkrevd for håndtering av BEAS-2B-kulturer.
Fordeler og ulemper ved BEAS-2B-celler
I likhet med andre cellelinjer har også BEAS-2B-celler noen fordeler og ulemper. Noen av disse blir omtalt nedenfor.
Fordeler
Fordelene med BEAS-2B-cellelinjen inkluderer:
Immortaliserte cellelinjer
Den humane bronkiale epitelcellelinjen BEAS-2B er blitt immortalisert. Derfor fortsetter den å vokse uten å gå inn i senesens. Denne egenskapen ved BEAS-2B-celler eliminerer behovet for gjentatt ekstraksjon av primære humane lungeepitelceller med kortere levetid.
Enkel å dyrke
BEAS-2B-kulturer er enkle å vedlikeholde. Cellene vokser og formerer seg uten problemer under standard dyrkningsforhold. Det er ingen krevende eller kompliserte krav til cellekultivering.
Humant opphav
BEAS-2B-cellelinjen har menneskelig opprinnelse og relevans. Den er dermed en ideell in vitro-modell for å studere responser, atferd og prosesser hos humane luftveiepitelceller.
Ulemper
Ulempene ved BEAS-2B-lungecellelinjen er:
Transformerte humane lungeepitelceller
BEAS-2B-celler er transformert med Ad12-SV40 2B-virus, noe som kan endre deres atferd og responser sammenlignet med originale bronkiale epitelceller avledet fra humant lungevev.
Anvendelser av BEAS-2B-cellelinjen i forskning
BEAS-2B-cellelinjen har flere anvendelser innen biomedisinsk forskning. Noen vanlige anvendelser av BEAS-2B-celler er:
- Toksikologi: BEAS-2B-celler brukes ofte til å undersøke genotoksisiteten og cytotoksisiteten til ulike giftstoffer, miljøforurensninger og kjemikalier. Forskere bruker denne bronkiale epitelcellelinjen til å evaluere de skadelige effektene av disse stoffene på lungehelsen. I tillegg studerer de også de underliggende molekylære mekanismene. For eksempel vurderte en studie utført i 2021 toksisiteten til kadmiummetall i BEAS-2B-cellelinjen. Forskningsresultatene avslørte at kadmium induserte celledød og mitokondriell skade i BEAS-2B-lungecellelinjen gjennom modulering av MAPK-signalveien [2]. En annen studie brukte BEAS-2B-cellelinjen til å evaluere toksisiteten til sinkoksid-nanopartikler under oksidativt stress [3].
- Modellering av luftveissykdommer: BEAS-2B-cellelinjen er et utmerket forskningsverktøy og en in vitro-modell for å studere luftveissykdommer som kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS), astma, lungekreft og virusinfeksjoner som SARS-CoV-2. Forskere har en tendens til å indusere sykdomsrelaterte tilstander i BEAS-2B-cellelinjen og studere underliggende cellulære og molekylære mekanismer. Dette bidrar til å identifisere potensielle legemiddelmål og utvikle personaliserte terapier. Forskning utført i 2022 brukte BEAS-2B-cellelinjen og studerte rollen til østrogen og dets reseptorer i SARS-CoV-2-infeksjon. Funnene avslørte at høyere uttrykk av østrogenreseptoren GPER1 reduserer BEAS-2B SARS-CoV-2-virusbelastningen. Derfor kan den være involvert i SARS-CoV-2-virusinfeksjon eller -replikasjon [4].
5. BEAS-2B-celler: Forskningspublikasjoner
Følgende er noen interessante og mest siterte forskningsstudier som omhandler BEAS-2B-celler.
Toksisitet av grafen i normale humane lungeceller (BEAS-2B)
Denne studien ble publisert i 2011 i Journal of Biomedical Nanotechnology. Forskningen antydet at grafittoksid induserer apoptose og cytotoksisitet i den normale bronkiale epitelcellelinjen (BEAS-2B).
Denne forskningsartikkelen ble publisert i Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Denne studien undersøkte det terapeutiske potensialet til naringenin, et flavonoid, i BEAS-2B-cellelinjen. Funnene tyder på at naringenin beskytter BEAS-2B-lungeceller mot paraquat-indusert toksisitet eller oksidativ skade.
Denne studien ble publisert i Inhalation Toxicology (2011). Her vurderte forskerne toksisitetseffekten av magnetiske nanopartikler med amorfe silisiumdioksidbelegg i BEAS-2B-cellelinjen in vitro.
Denne artikkelen i Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) foreslo at ursodeoksycholsyre kan hindre unormal migrasjon av luftveiepitelceller og forhindre skade forårsaket av interaksjonen mellom SARS-CoV-2-spike-proteinet og ACE-2. Dermed kan det bidra til å gjenopprette epitelets basallag.
Effekter av radon på miR-34a-indusert apoptose i humane bronkiale epitelceller av typen BEAS-2B
Denne studien ble publisert i 2019 i Journal of Toxicology and Environmental Health. Forskningsresultatene viser at kronisk eksponering for radon kan fremme kreftdannelse i humane bronkiale epitelceller (BEAS-2B) ved å aktivere mikroRNA-34a.
Protokoller for cellekultur
Cellekulturprotokollen for BEAS-2B-celler er beskrevet her.
- BEAS-2B-subkultivering: Dette dokumentet vil hjelpe deg med å lære om BEAS-2B-medier og subkultiveringsprosedyrer.
- BEAS-2B-cellelinje: Dette nettstedet inneholder all grunnleggende informasjon du trenger for å begynne å arbeide med BEAS-2B-cellelinjen, inkludert medier og protokoller for håndtering av prolifererende og kryokonserverte kulturer.
Referanser
- Han, X., et al., Humane lungeepitelceller av typen BEAS-2B viser egenskaper som mesenkymale stamceller. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmium induserte apoptose og mitokondriell skade i BEAS-2B-celler via MAPK-signalveien. Chemosphere, 2021. 263: s. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toksisiteten til sinkoksid (ZnO)-nanopartikler på humane bronkiale epitelceller (BEAS-2B) forsterkes av oksidativt stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): s. 1762–1766.
- Costa, A.J., et al., Overekspresjon av østrogenreseptoren GPER1 og G1-behandling reduserer SARS-CoV-2-infeksjon i BEAS-2B-bronkialceller. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: s. 111775.