BEAS-2B-celler - BEAS-2B-celler i forskning på luftveissykdommer: En omfattende guide
BEAS-2B er en udødeliggjort og ikke-tumorigen human lungeepitelcellelinje. Det er en mye brukt in vitro-modell for å studere lungecellers respons på ulike kreftfremkallende og giftige stoffer. I tillegg er den et verdifullt forskningsverktøy for å studere ulike luftveisinfeksjoner og sykdommer, som covid-19 og lungekarsinom.
I denne artikkelen vil vi diskutere nesten alle aspekter ved lungecellelinjen BEAS-2B, inkludert dens opprinnelse, informasjon om cellekultur, fordeler, ulemper og bruksområder innen forskning. Spesielt vil vi gå gjennom:
- Opprinnelse og generelle egenskaper ved BEAS-2B-cellene
- BEAS-2B cellelinje: Informasjon om dyrking
- Fordeler og ulemper med BEAS-2B-celler
- Anvendelser av BEAS-2B cellelinje i forskning
- BEAS-2B-celler: Forskningspublikasjoner
- Protokoller for celledyrking
1. BEAS-2B-cellenes opprinnelse og generelle egenskaper
Det første du ser etter i en cellelinje, er dens opprinnelse og generelle egenskaper. Her vil du lære om de viktigste egenskapene og opprinnelsen til BEAS-2B humane bronkiale epitelceller. Du kommer til å studere: Hva er BEAS-2B lungecellelinjen? Hvilken type celler er Beas 2B? Hva er opprinnelsen til BEAS-2B-cellene?
- BEAS-2B, bronkialepitelcellelinjen, ble utviklet fra humant lungevev som ikke var kreft i 1988 av Curtis C. Harris' gruppe [1].
- BEAS-2B-celler har en epitellignende morfologi.
HBEpC mot BEAS-2B
HBEpC er primære bronkialepitelceller fra mennesker. I likhet med BEAS-2B er de normale humane bronkiale epitelceller. De har imidlertid begrenset levetid sammenlignet med udødeliggjorte BEAS-2B. Begge cellelinjene kan brukes til å studere lungebiologi, toksikologi og sykdomsmodellering.
2.bEAS-2B cellelinje: Informasjon om dyrking
Dyrking av informasjon fra en cellelinje kan gjøre arbeidet ditt med den enklere. I denne delen av artikkelen vil du lære alt det grunnleggende om dyrking av BEAS-2B lungecellelinjen. Spesielt vil vi vite: Hva er BEAS-2B doblingstid? Hva er BEAS-2B-medier? Er BEAS-2B-cellelinjen adherent? Hvordan dyrker man BEAS-2B-celler?
Nøkkelpunkter for dyrking av BEAS-2B-celler
|
Fordoblingstid: |
BEAS-2B-populasjonens fordoblingstid er ca. 26 timer. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
BEAS-2B er en epitel-lignende adherente cellelinje. |
|
Celletetthet: |
Den anbefalte celletettheten for BEAS-2B-cellelinjen er 1 til 2 ×104 celler/cm2. Adherente BEAS-2B-celler skylles med fosfatbuffersaltvann og inkuberes med Accutase ved omgivelsestemperatur i noen minutter. Etter at cellene har dissosiert, tilsettes nytt medium, og cellene samles opp gjennom sentrifugering. De høstede cellene resuspenderes forsiktig og helles over i den nye kolben for vekst. |
|
Vekstmedium: |
BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium), som inneholder 10 % føtalt bovint serum, brukes til dyrking av lungecellelinjen BEAS-2B. Mediet bør skiftes ut hver 2. til 3. dag. |
|
Vekstbetingelser: |
BEAS-2B-kulturen holdes ved 37 °C i en fuktig inkubator med kontinuerlig tilførsel av 5 % CO2. |
|
Oppbevaring: |
Frosne BEAS-2B-celleglass kan oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller i en elektrisk fryser ved temperaturer under -150 °C. |
|
Fryseprosess og medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysemedier brukes til frysing av BEAS-2B lungecellelinjen. Cellene fryses ved å la temperaturen synke med bare 1 °C per minutt for å beskytte cellenes levedyktighet. Denne typen metode kalles langsom frysing. |
|
Tineprosess: |
Frosne eller kryopreserverte BEAS-2B-kulturer tines i et 37 °C varmt vannbad som inneholder et antimikrobielt middel i 40 til 60 sekunder. Etterpå tilsettes cellene med medier og kan dyrkes direkte i nye kolber eller sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediene. Deretter resuspenderes de oppsamlede cellene og dyrkes. I det førstnevnte tilfellet fjernes frysemediet etter 24 timer. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
Det kreves laboratorier på biosikkerhetsnivå 1 for håndtering av BEAS-2B-kulturer. |
3.fordeler og ulemper med BEAS-2B-celler
I likhet med andre cellelinjer er BEAS-2B-celler også forbundet med noen fordeler og ulemper. Noen av disse er omtalt nedenfor.
Fordeler og ulemper
Fordelene med BEAS-2B-cellelinjen er blant annet
|
Udødeliggjort cellelinje |
BEAS-2B-cellelinjen av humane bronkialepitelceller er udødeliggjort. Derfor fortsetter den å vokse uten å gå inn i senescens. BEAS-2B-cellelinjens egenskaper eliminerer behovet for gjentatt ekstraksjon av primære humane lungeepitelceller med kortere levetid. |
|
Lett å dyrke |
BEAS-2B-kulturer er enkle å vedlikeholde. Cellene vokser og formerer seg uten problemer under standard dyrkingsforhold. Det er ingen krav til kinkig eller komplisert celledyrking. |
|
Menneskelig opprinnelse |
BEAS-2B-cellelinjen har menneskelig opprinnelse og relevans. Den er derfor en ideell in vitro-modell for å studere menneskelige luftveisepitelcellers responser, atferd og prosesser. |
Ulemper
Ulempene forbundet med BEAS-2B-lungecellelinjen er
|
Transformerte humane lungeepitelceller |
BEAS-2B-celler er transformert med Ad12-SV40 2B-virus, noe som kan endre deres atferd og responser sammenlignet med de opprinnelige bronkiale epitelcellene som stammer fra humant lungevev. |
4.bruksområder for BEAS-2B-cellelinjen i forskning
BEAS-2B-cellelinjen har flere bruksområder innen biomedisinsk forskning. Noen vanlige bruksområder for BEAS-2B-celler er
- Toksikologi: BEAS-2B-celler brukes ofte til å undersøke genotoksisiteten og cytotoksisiteten til ulike giftstoffer, miljøgifter og kjemikalier. Forskere bruker denne bronkiale epitelcellelinjen til å evaluere de skadelige effektene av disse stoffene på lungehelsen. Dessuten studerer de også de underliggende molekylære mekanismene. I en studie fra 2021 ble for eksempel toksisiteten til kadmiummetall vurdert i BEAS-2B-cellelinjen. Forskningsresultatene viste at kadmium induserte celledød og mitokondriell skade i BEAS-2B-lungecellelinjen gjennom modulering av MAPK-signalveien [2]. I en annen studie ble BEAS-2B-cellelinjen brukt til å evaluere toksisiteten til sinkoksidnanopartikler under oksidativt stress [3].
- Modellering av luftveissykdommer: BEAS-2B-cellelinjen er et godt forskningsverktøy og en in vitro-modell for å studere luftveissykdommer som kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS), astma, lungekreft og virusinfeksjoner som SARS-CoV-2. Forskere pleier å indusere sykdomsrelaterte tilstander i BEAS-2B-cellelinjen og studere underliggende cellulære og molekylære mekanismer. Dette bidrar til å identifisere potensielle mål for legemidler og utvikle persontilpassede behandlingsformer. I 2022 ble BEAS-2B-cellelinjen brukt til å studere østrogen og østrogenreseptorers rolle i SARS-CoV-2-infeksjon. Funnene viste at høyere uttrykk av østrogenreseptoren GPER1 reduserer virusbelastningen i BEAS-2B SARS-CoV-2. Derfor kan den være involvert i SARS-CoV-2 virusinfeksjon eller replikasjon [4].
5.bEAS-2B-celler: Forskningspublikasjoner
Her følger noen interessante og mest siterte forskningsstudier med BEAS-2B-celler.
Toksisitet av grafen i normale humane lungeceller (BEAS-2B)
Denne studien ble publisert i 2011 i Journal of Biomedical Nanotechnology. Forskningen viste at grafittoksid induserer apoptose og cytotoksisitet i den normale bronkiale epitelcellelinjen (BEAS-2B).
Denne forskningsartikkelen ble publisert i Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Denne studien undersøkte det terapeutiske potensialet til flavonoidet naringenin i BEAS-2B-cellelinjen. Funnene tyder på at naringenin beskytter BEAS-2B-lungeceller mot paraquat-indusert toksisitet eller oksidativ skade.
Denne studien ble publisert i Inhalation Toxicology (2011). Her vurderte forskerne toksisitetseffekten av magnetiske nanopartikler med amorf silikabelegg i BEAS-2B-cellelinjen in vitro.
Denne artikkelen i Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) foreslo at ursodeoxycholic acid kan hindre unormal migrasjon av luftveisepitelceller og forhindre skade forårsaket av SARS-CoV-2 spike protein og ACE-2 interaksjon. Dermed kan det bidra til å gjenopprette det epiteliale basallaget.
Effekter av radon på miR-34a-indusert apoptose i humane bronkialepitelceller av typen BEAS-2B
Denne studien ble publisert i 2019 i Journal of Toxicology and Environmental Health. Forskningsresultatene viser at kronisk eksponering for radon kan fremme karsinogenese i humane bronkiale epitelceller (BEAS-2B) ved å aktivere mikroRNA-34a.
6.protokoller for celledyrking
Celledyrkningsprotokollen for BEAS-2B-celler er nevnt her.
- BEAS-2B subkulturering: Dette dokumentet hjelper deg med å lære om BEAS-2B-medier og subkultureringsprosedyrer.
- BEAS-2B cellelinje: Dette nettstedet inneholder all grunnleggende informasjon du trenger for å begynne å arbeide med BEAS-2B-cellelinjen, inkludert medier og protokoller for håndtering av prolifererende og kryopreserverte kulturer.
Referanser
- Han, X., et al., Humane lungeepitelceller fra BEAS-2B viser egenskaper som mesenkymale stamceller. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmium induserte BEAS-2B-celler apoptose og mitokondrieskade via MAPK-signalvei. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toxicity of zinc oxide (ZnO) nanoparticles on human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) is accentuated by oxidative stress. Mat og kjemisk toksikologi, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Overuttrykk av østrogenreseptor GPER1 og G1-behandling reduserer SARS-CoV-2-infeksjon i BEAS-2B-bronkialceller. Molekylær og cellulær endokrinologi, 2022. 558: p. 111775.