B16-celler - Grunnleggende veiledning til B16-melanomceller i onkologisk forskning

B16 er en hudkreftcellelinje (melanom) av murin opprinnelse. Denne cellelinjen er en effektiv in vitro-modell for studier av hudkreft hos mennesker. Den brukes ofte til å undersøke dannelse av solide svulster og metastasering av kreftceller.

Denne artikkelen vil hjelpe deg med å forstå det grunnleggende om B16-melanomcellelinjen. Spesifikt vil den gå gjennom følgende:

1.generelle egenskaper og opprinnelse til B16-cellelinjen

Denne delen av artikkelen vil dekke de karakteristiske trekkene ved B16-melanomcellelinjen. Du vil lære svarene på følgende ofte stilte spørsmål. For eksempel Hva er B16-kreftcellelinjen? Hvor stammer B16-celler fra? Hva er størrelsen på B16-celler?

B16-cellelinjen ble etablert i 1954. Disse cellene ble avledet fra C57BL/6J-mus som spontant fikk en svulst i huden ved Jackson Laboratories i Maine.
Dette er melaninproduserende epitelceller som har evnen til å metastasere i milt, lever og lunger.
Melanom B16-cellene vokser som monolag og har en epitel-lignende og spindelformet cellemorfologi.
Størrelsen på B16-cellelinjen er ca. 15,4 μm.
Det finnes forskjellige subkloner av B16-celler, inkludert B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 og B16F10. Disse subklonene er forskjellige fra de opprinnelige B16-cellene og har noen spesifikke egenskaper. De har for eksempel ulik morfologi, cellestørrelse og andre egenskaper. B16F10 har høy lungemetastatisk evne, og B164A5 er den mest aggressive hudkreftcellelinjen sammenlignet med B16F10, B16-GMCSF og B16FLT3 [1].

3D-animasjon av et nærbilde av en voksende hudkreftsvulst, for eksempel malignt melanom, som inflammerer det omkringliggende vevet.

2.informasjon om dyrking av B16-cellelinjen

Før du vedlikeholder eller dyrker en cellelinje, kan du se etter nøkkelinformasjon om fordoblingstid, celletype, vekstmedier, dyrkingsforhold osv. Denne delen inneholder all nødvendig informasjon for dyrking av B16-celler.

Nøkkelpunkter for dyrking av B16-celler

Populasjonsdoblingstid:	Den gjennomsnittlige populasjonsdoblingstiden for B16-celler er estimert til 24 timer.
Adherent eller i suspensjon:	B16-celler er adherente og vokser i monolag.
Utsåingstetthet:	B16-celler anbefales å sås ved en celletetthet på 1 til 2 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. B16-celler som har festet seg, skylles med 1 x PBS og dissosieres fra overflaten ved hjelp av Accutase-løsning. Cellene sentrifugeres, og cellepelleten resuspenderes i vekstmediet. Senere overføres disse cellene til en ny kolbe for vekst.
Vekstmedium:	B16-celler dyrkes i EMEM-medium (Eagle's Minimum Essential Medium) som inneholder 10 % føtalt bovint serum (FBS). Vekstmediet bør fornyes 2-3 ganger i uken.
Vekstbetingelser:	B16-cellelinjen dyrkes i en fuktet inkubator med 5 %_{CO2-tilførsel} og en temperatur på 37 °C.
Oppbevaring:	Cellene oppbevares ved temperaturer under -150 °C eller i dampfasen av flytende nitrogen for å beskytte cellenes levedyktighet.
Fryseprosess og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedium brukes til å fryse B16-celler ved hjelp av en langsom fryseprosess.
Tineprosess:	Frosne B16-celler tines ved 37 °C i et vannbad som inneholder et antimikrobielt middel. De tinte cellene kan dyrkes direkte ved å dosere dem i kolber som inneholder vekstmedium. Dessuten kan disse cellene sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet, og deretter dyrkes i nye medier.
Biosikkerhetsnivå:	B16-cellelinjen bør håndteres eller vedlikeholdes i et laboratorium på biosikkerhetsnivå én.

Semi-flytende lag av B16-melanomceller under 10x og 20x forstørrelse.

3. b16-cellelinje: Fordeler og ulemper

I likhet med andre cellelinjer har B16 en unik blanding av fordeler og ulemper. Noen viktige fordeler og ulemper med denne melanomcellelinjen er listet opp i denne delen.

Fordeler og ulemper

B16 er det første effektive murine verktøyet som er mye brukt i metastaseforskning på grunn av fordelene den tilbyr. Noen av fordelene med denne hudkreftcellelinjen er

Lett å dyrke	B16-cellelinjen er enkel å dyrke i forskningslaboratorier. Den er mye brukt til å studere kreftcellers biologi, signalveier og mye mer.
Vokser raskt	B16-melanomcellelinjen har en høy proliferasjonsrate, noe som gjør den egnet til å studere celledeling og vekstprosesser.
Tumorigenisitet	B16 er en tumorigen cellelinje med tumorlignende egenskaper som invasjon, migrasjon og proliferasjon. Den er verdifull for studier av tumordannelse, progresjon og metastasering.

Ulemper

Ulempene forbundet med B16-cellelinjen er

Manglende relevans for mennesker	Fordi B16 er en musemelanomcellelinje, er det ikke sikkert at den representerer human hudkreftbiologi på en nøyaktig måte, noe som begrenser overførbarheten av forskningsresultater.
Heterogenitet	B16-celler er heterogene og har ulike genetiske og fenotypiske egenskaper innenfor samme kultur. Dette kan påvirke resultatenes pålitelighet og reproduserbarhet.

4. bruksområder for B16-celler

B16-cellelinjen er mye brukt i forskningsstudier. Noen lovende bruksområder for denne cellelinjen er

Tumorbiologi: Denne murine hudkreftcellelinjen er tumorigenisk og mye brukt for å forstå tumorbiologi. Flere studier har blitt gjennomført for å utforske de cellulære mekanismene bak vekst, spredning og metastasering av tumorceller ved hjelp av B16-celler. I en forskningsstudie fra 2020 ble B16-celler brukt til å undersøke hvilken rolle et langt ikke-kodende RNA, LncRNA MEG3, spiller i dannelse, vekst og metastase av melanom. Denne forskningen fant at det ikke-kodende RNA-et modulerer miRNA-21/E-Cadherin-aksen for å stimulere disse cellulære hendelsene [2]. I likhet med dette ble det utført forskning for å undersøke den potensielle rollen til Notch1-signalering i tumorindusert immunsuppresjon ved bruk av B16-celler [3].
Oppdagelse av legemidler: B16-celler brukes til å validere og teste de potensielle terapeutiske effektene av legemiddelkandidater. En studie evaluerte antitumoreffekten av neogamboginsyre, en naturlig forbindelse, ved hjelp av en B16-cellelinje. Resultatene av studien viste at denne forbindelsen modulerer PI3K/Akt/mTOR-signalveien for å forårsake kreftcelledød [4]. En annen studie undersøkte anti-melanomeffekten av Ginsenoside Rg3, et saponin, ved hjelp av B16-cellelinjen. Forskningen viste at denne naturlige forbindelsen forårsaket antitumoraktivitet ved å nedregulere ERK- og Akt-signalveiene [5].

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305154

5.forskningspublikasjoner med B16-celler

Her er noen viktige forskningspublikasjoner som omhandler B16-melanomcellelinjen.

LncRNA MEG3 fremmer vekst, metastase og dannelse av melanom gjennom modulering av miR-21/E-cadherin-aksen

I denne publikasjonen i tidsskriftet Cancer Cell International (2020) foreslås det at det lange ikke-kodende RNA-et MEG3 fremmer dannelse, vekst og metastase av B16-melanomceller ved å modulere miRNA-21/E-Cadherin-aksen.

Et nytt psoralenderivat - MPFC - øker melanogenesen via aktivering av p38 MAPK- og PKA-signalveier i B16-celler

Denne artikkelen ble publisert i International Journal of Molecular Medicine i 2018. Denne studien undersøkte den melanogene effekten og mekanismene til et psoralenderivat - 4-metyl-6-fenyl-2H-furo[3,2-g] chromen-2-on (MPFC) i B16-celler. Studien foreslår at dette derivatet fremmer melanogenese ved å stimulere PKA- og p38 MAPK-cellesignalering.

Notch1-signalering i melanomceller fremmer tumorindusert immunsuppresjon via oppregulering av TGF-β1

Denne forskningen ble publisert i 2018 i Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Funnene i studien tyder på at aktivering av Notch1-signalering i B16-celler kan forhindre antitumorimmunitet ved å øke uttrykket av TGF-β1-genet.

Neogamboginsyre induserer apoptose av melanom B16-celler via PI3K/Akt/mTOR-signalveien

Denne studien ble utført av Chunlan Wu og hans kolleger i 2020 og publisert i tidsskriftet Acta Biochimica Polonica. Forskningen viser at neogamboginsyre, en naturlig forbindelse, kan forårsake B16-melanomcelledød ved å modulere PI3K/Akt/mTOR-signaleringskaskaden.

Et iridium (III)-kompleks som potent kreftmiddel induserer apoptose og autofagi i B16-celler gjennom hemming av AKT/mTOR-signalveien

Denne forskningsartikkelen ble publisert i European Journal of Medicinal Chemistry i 2018. I denne studien undersøkte forskerne anti-kreftaktiviteten til en forbindelse, et iridium (III)-kompleks, ved hjelp av B16-melanomceller.

Ailanthone induserer cellesyklusarrest og apoptose i melanom B16- og A375-celler

Denne studien viser at det bioaktive stoffet ailanthone har et kreftbekjempende potensial, ettersom det kan indusere apoptose og cellesyklusarrest i B16- og A375-melanomceller. Denne artikkelen ble publisert i Biomolecules i 2019.

6. ressurser for B16-cellelinje: Protokoller, videoer og mer

Det finnes begrensede ressurser om B16-cellelinjen som forklarer dyrkings- og transfeksjonsprotokoller.

Dyrking av melanomceller: Denne videoen gir verdifulle tips for dyrking av melanomcellelinjer.
Subkultivering av en cellelinje: Denne videoen forklarer en generell subkultureringsprotokoll for en cellelinje.
Transfeksjon av B16F10-cellelinjen: Denne videoen forklarer transfeksjonsprotokollen for en sublinje av B16-melanomceller. Den kan hjelpe deg med å optimalisere transfeksjonsprotokollen for B16-celler.

Følgende er noen celledyrkingsprotokoller for B16-celler.

Dyrking av B16-celler: Dette nettstedet inneholder all nødvendig informasjon om dyrking av B16-celler, inkludert vekstmedier, subkulturer, tining og frysing av celler.

Referanser

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J skin. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 fremmer melanomvekst, metastase og dannelse gjennom modulering av miR-21/E-cadherin-aksen. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1-signalering i melanomceller fremmet tumorindusert immunsuppresjon via oppregulering av TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogamboginsyre induserer apoptose av melanom B16-celler via PI3K / Akt / MTOR-signalveien. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Antitumoraktivitet av ginsenosid Rg3 i melanom gjennom nedregulering av ERK- og Akt-veiene. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.