B16-F10-celler - Utforskning av B16-F10-melanomcellelinjen i metastaseforskning
B16-F10-celler er en melanomcellelinje som stammer fra C57BL/6J-mus. De er mye brukt i hudkreftforskning. Forskere bruker disse cellene til å studere tumorutvikling og -progresjon og terapeutiske intervensjoner. Denne artikkelen tar for seg de grunnleggende aspektene ved B16-F10-melanomceller. Den vil særlig omfatte
- Opprinnelse og generelle egenskaper ved B16-F10-cellelinjen
- Informasjon om dyrking av B16-F10-celler
- B16-F10-celler: Fordeler og ulemper
- Forskningsanvendelser av B16-F10-celler
- Publikasjoner med B16-F10 cellelinje
- Ressurser for B16-F10 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
1. Opprinnelse og generelle egenskaper ved B16-F10-cellelinjen
Denne delen gir deg innsikt i opprinnelsen til og de særegne egenskapene til B16F10-melanomsvulstceller. Det vil hjelpe deg å bruke cellelinjen effektivt i forskningsarbeidet ditt. Hovedsakelig vil du lære: Hva er B16-F10-celler? Hva er B16F10 avledet fra? Hva er morfologien til B16F12-cellelinjen? Hva er størrelsen på B16F10-cellen?
- B16-F10 er en subklon av B16-svulstcellelinjen avledet fra hudvev fra C57BL/6J-mus. B16F10-melanomceller ble utviklet etter intravenøs injeksjon av B16-linjen i immunkompromitterte eller syngene mus. Disse cellene ble selektert for sitt potensial til å danne metastaserende lungekolonier in vivo og deretter etablert etter ti sykluser med dannelse av lungekolonier in vitro [1]. Den ble utviklet av Fidler og kolleger i 1976.
- B16-F10-cellelinjene har et epitellignende og spindelformet utseende.
- Den omtrentlige størrelsen på B16-F10-celler er 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1- og B16-F10-celler
B16-F1- og B16-F10-celler ble avledet fra B16-stamcellelinjen. Begge har samme opprinnelse og har nesten like egenskaper. Hovedforskjellen er imidlertid deres metastatiske evne. B16-F10-celler har høyt, mens B16-F1 har lavt metastatisk potensial [3].
2.informasjon om dyrking av B16-F10-celler
Før du håndterer og dyrker en cellelinje, må du kjenne til dens fordoblingstid, vekstmedier, betingelser og celledyrkningsprotokoller. Denne delen vil diskutere dette: Hva er fordoblingstiden for b16-f10-celler? Hvordan dyrker man B16F10-celler? Hva er B16-F10-cellemediet? Hvilke dyrkingsbetingelser anbefales for B16-F10-celler?
Nøkkelpunkter for dyrking av B16-F10-celler
|
Fordoblingstid: |
Doblingstiden for B16-F10-celler er omtrent 20,1 timer. Den kan variere fra 17 til 21 timer, avhengig av dyrkingsforholdene. |
|
Adherent eller i suspensjon: |
B16-F10 er en adherent cellelinje. Cellene vokser raskt og danner monolag. |
|
Delingsforhold: |
B16-F10-celler subkultiveres i et delingsforhold på 1:2 til 1:4. Cellene vaskes med fosfatbuffer saltvann (1x) og inkuberes deretter med Accutase-passasjeløsning i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Cellene tilsettes nytt medium og sentrifugeres. Den høstede cellepelleten resuspenderes igjen, og cellene fordeles i den nye kolben som inneholder nytt dyrkingsmedium i henhold til delingsforholdet. |
|
Vekstmedium: |
B16-F10-celler dyrkes i DMEM-medium. Mediet er supplert med 10 % FBS, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L glukose og 1,0 mM natriumpyruvat for ideell cellevekst. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke. |
|
Vekstbetingelser: |
B16-F10-celler dyrkes i en befuktet inkubator ved 37 °C med 5 % CO2-tilførsel. |
|
Oppbevaring: |
Frosne celler oppbevares under -150 °C i en elektrisk fryser med ultralave temperaturer eller i dampfasen av flytende nitrogen for å opprettholde cellenes levedyktighet. |
|
Fryseprosess og medium: |
B16-F10-celler fryses i CM-1- eller CM-ACF-medier for lagring. Her anbefales en langsom fryseprosess som kun tillater en temperaturreduksjon på 1 °C per minutt, for å unngå at cellene får sjokk. |
|
Tineprosess: |
Frosne B16-F10-celler tines i et forhåndsinnstilt vannbad på 37 °C i 40 til 60 sekunder. Deretter tilsettes cellene til nytt medium og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. De oppsamlede cellene resuspenderes i et vekstmedium og helles over i kolber for dyrking. |
|
Biosikkerhetsnivå: |
Det kreves et laboratorium på biosikkerhetsnivå 1 for å håndtere og vedlikeholde B16-F10-cellelinjen. |
3.b16-F10-celler: Fordeler og ulemper
I likhet med andre cellelinjer har B16-F10 også noen fordeler og ulemper. Noen viktige fordeler og ulemper ved denne hudmelanomcellelinjen blir diskutert i denne delen.
Fordeler og ulemper
B16-F10-cellelinjen er mye brukt i kreftforskning. Fordelene med B16-F10-celler er
|
Metastatisk potensial |
B16F10-celler fra hudmelanom har et høyt metastatisk potensial, noe som gjør dem verdifulle for studier av kreftmetastaser og underliggende mekanismer. |
|
In vitro-tumormodell |
B16-F10-celler fungerer som en in vitro-modell for å studere kreftutvikling og -vekst, og hjelper forskere med å forstå de cellulære og molekylære mekanismene som driver kreft. |
Ulemper
Ulempene forbundet med B16-F10-cellelinjen er
|
Cellelinje avledet fra mus |
B16-F10 er en cellelinje som stammer fra mus, noe som begrenser dens anvendelighet i menneskespesifikke studier. Forskningsresultater fra disse cellene kan ikke alltid overføres til human biologi. |
4.anvendelser av B16-F10-celler i forskning
B16-F10-cellelinjen er mye brukt i kreftforskning. Noen lovende bruksområder for denne cellelinjen omtales her.
- Kreftforskning: B16-F10-cellelinjen er en verdifull modell for å studere kreftcelleprosesser, inkludert proliferasjon, invasjon, migrasjon og celledød eller apoptose. Dessuten hjelper den forskere med å få innsikt i molekylære mekanismer og veier som driver disse cellulære prosessene. En studie fra 2018 undersøkte hvilken rolle CCR5 (C-C-kjemokinreseptor type fem) spiller i melanomcellers overgang fra epiteliale til mesenkymale celler og metastase. Funnene viste at mangel på CCR5 begrenser tumorvekst og metastasering, mens høyt uttrykk fører til økt vekst og metastasering av B16-F10-celler. Ytterligere forskning rapporterte at CCR5 regulerer TGFβ1-ekspresjon, som regulerer PI3K/AKT/GSK3β-signalering for å fremme epitelial til mesenkymal overgang og cellemigrasjon [4].
- Utprøving og utvikling av legemidler: B16F10-melanomtumorceller er svært aggressive og egner seg derfor godt til utprøving av potensielle antitumorlegemidler og -behandlinger. Forskere bruker disse cellene til å vurdere effekten av ulike stoffer på cellevekst, spredning og metastasering, noe som bidrar til utvikling av legemidler. I en studie fra 2018 undersøkte Valentina Nanni og kolleger de terapeutiske effektene av et hydroalkoholholdig blomsterekstrakt av Spartium junceum . Studien viste at blomsterekstraktet var effektivt til å indusere senescens i B16-F10-celler, noe som fører til undertrykkelse av cellevekst og melanogenese, og dermed kan det utøve potensielle anti-kreftaktiviteter [5].
5.publikasjoner med B16-F10 cellelinje
Her er noen viktige forskningspublikasjoner som omhandler B16-F10 melanomcellelinjen:
Denne studien ble publisert i Nutrients (2020). Den foreslo at Sorghum bicolor etanolisk ekstrakt har en anti-melanogen effekt i hudmelanom B16F10-celler.
Calcitriol hemmer spredning og induserer potensielt apoptose i B16-F10-celler
Forskningen publisert i Medical Science Monitor Basic Research (2022) foreslo at kalsitriolmedisin utøver antitumoreffekter i B16-F10 melanomceller ved å hemme spredning og indusere apoptose.
Denne artikkelen er publisert i Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Funnene avslørte at kardoler, resorcinoliske lipider, utøver intens cytotoksisitet på B16-F10-cellelinjen.
Studien som ble publisert i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), undersøkte det antimetastatiske potensialet til Ginkgo biloba-ekstrakt ved hjelp av B16-F10-celler.
Denne forskningen i World Neurosurgery (2018) foreslo at tymokinon kan være en effektiv behandling mot intracerebrale metastatiske lesjoner ettersom det undertrykker B16-F10-cellevekst og induserer apoptose.
6.ressurser for B16-F10 cellelinje: Protokoller, videoer og mer
B16F10 endotelceller er mye brukt i hudkreftforskning. Her er noen nettressurser som forklarer dyrkings- og transfeksjonsprotokoller:
- Transfeksjon av B16F10 melanomceller: Denne videoveiledningen kan hjelpe deg med å lære transfeksjonsprotokollen for B16-F10-celler.
- B16-F10-transfeksjon: Dette dokumentet forklarer in vitro DNA-transfeksjonsprotokollen for hudmelanom B16F10-celler.
Følgende lenke inneholder celledyrkningsprotokollen for B16-F10-celler:
- B16-F10 subkulturering: Dette nettstedet inneholder nyttig informasjon om B16F10-melanomsvulstceller. Her finner du informasjon om vekstmedier, fordoblingstid, dyrkingsforhold og protokoll for subkulturering av celler, samt håndtering av kryopreserverte og proliferative kulturer.
Referanser
- Poste, G., et al., Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono og S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Mikromaskiner, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., Behaviour of four different B16 murine melanoma cell sublines: C57BL/6J skin. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Hydroalkoholisk ekstrakt av Spartium junceum L. blomster hemmer vekst og melanogenese i B16-F10-celler ved å indusere senescens. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.