A375-cellelinjen - en guide til melanomforskning

A375 er en human melanomcellelinje som er mye brukt i toksikologisk og immunonkologisk forskning. Forskere bruker denne cellelinjen til å studere kreftbiologi og signalveier, teste eller screene potensielle kreftmidler og utvikle nye og effektive behandlingsmetoder.

A375-cellenes opprinnelse og generelle egenskaper

Kunnskap om en cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper kan hjelpe deg med å planlegge bruken av den i forskning. Denne delen av artikkelen tar for seg A375-cellelinjens opprinnelse og egenskaper. Hva er for eksempel A375-cellelinjen? Hva kjennetegner A375-cellelinjen? Hvor kommer A375-cellene fra? Hva er morfologien til A375-melanomceller? Hva er størrelsen på A375-cellene?

Hudkreftcellelinjen A375 stammer fra en eksplorasjonskultur av en solid tumor fra en 54 år gammel kvinne med malignt melanom [1].
A375-cellene har en epitel-lignende morfologi.
A375-cellene er relativt små sammenlignet med andre cellelinjer. De har en diameter på omtrent 12 µm.
A375-melanomcellene er hypotriploide. Det modale kromosomnummeret for denne cellelinjen er 62. Vanligvis har hver celle ni markørkromosomer og én kopi av de normale N2-, N6- og N22-kromosomene.

En lege undersøker svulstene på huden til en voksen person for hudkreft.

A375-celler: Informasjon om cellekulturer

A375-cellekulturer er enkle å vedlikeholde. De har ingen spesielle krav til celledyrking. Denne delen vil hjelpe deg med å finne nødvendig informasjon om celledyrking. For eksempel hva som er A375-doblingstiden. Hva er mediet for A375-cellelinjen? Hva er såingstettheten for A375? Er A375 melanomceller adherente?

Nøkkelpunkter for dyrking av A375-celler

Populasjonens fordoblingstid:	A375 doblingstid er 20 timer.
Adherent eller i suspensjon:	A375 er en adherent human melanomcellelinje.
Utsåingstetthet:	1 x¹⁰⁴ celler/cm2^celletettheter ideell for A375-cellekulturer. Adherente celler skylles med 1 x fosfatbuffersaltvann (PBS) og inkuberes med passasjeløsning (Accutase). Deretter ble cellene tilsatt dyrkingsmedium og sentrifugert. De høstede cellene ble resuspendert i et dyrkningsmedium og fordelt i nye kolber for vekst.
Vekstmedium:	DMEM anbefales som ideelt A375-medium når det er supplert med 10 % føtalt bovint serum (FBS), 4,5 g/l glukose, 1,5 g/l NaHCO3, 4 mM L-glutamin og 1,0 mM natriumpyruvat. A375-mediet bør fornyes 2-3 dager per uke.
Vekstbetingelser:	A375 melanomceller dyrkes i en befuktet inkubator (37 °C) med 5 % CO2-tilførsel.
Oppbevaring:	Frosne A375-celler skal oppbevares under -150 °C i dampfasen av flytende nitrogen eller i en elektrisk fryser.
Fryseprosess og medium:	CM-1- eller CM-ACF-medier brukes til å fryse A375-cellelinjen. En langsom fryseprosess som tillater en gradvis reduksjon av temperaturen på 1 °C, er valgt for å beskytte cellenes levedyktighet.
Tineprosess:	Det frosne hetteglasset med A375-melanomceller omrøres raskt i vannbadet i 40 til 60 sekunder til det bare er en liten isklump igjen. Cellene tilsettes ferske medier og sentrifugeres for å fjerne elementer av frysemedier. Cellepelleten som ble oppnådd, ble resuspendert på nytt og hellet over i nye kolber.
Biosikkerhetsnivå:	A375-kulturer håndteres og vedlikeholdes i laboratorier på biosikkerhetsnivå 1.

Konfluerende lag av adherente A375-celler i 20x forstørrelse.

Fordeler og begrensninger ved A375-cellelinjen

I likhet med andre cellelinjer er A375-cellelinjen forbundet med en unik kombinasjon av fordeler og begrensninger, noe som gjør den til et verdifullt verktøy for forskning på melanomkreft. I dette avsnittet har vi kun listet opp noen få viktige fordeler og ulemper ved A375-cellelinjen.

Fordeler

De viktigste fordelene med A375-celler er nevnt nedenfor:

Modell for melanomsvulster: A375-cellelinjen er avledet fra en ondartet melanomsvulst, og fungerer dermed som en uvurderlig tumormodell for å undersøke melanomets biologi og terapeutiske intervensjoner. Disse cellene har melanomlignende egenskaper, som høy proliferasjonshastighet og invasivitet.
Tumorigenisitet: A375-celler er svært tumorogene, noe som betyr at de kan danne svulster. Det er rapportert at A375-celler produserer aggressive amelanotiske melanomer i NIH Swiss-mus som behandles med anti-thymocyttserum (et immunsuppressivt middel).
Godt karakterisert: A375 er en genetisk velkarakterisert cellelinje. Den har spesifikke genetiske mutasjoner som melanom. A375-mutasjonene inkluderer A375 BRAF-genforandring, noe som gjør den følsom for BRAF-spesifikke hemmere. Denne genetiske profilen gjør A375-celler til et godt verktøy for kreftforskning, der man kan studere underliggende molekylære veier og målrettede terapier.

Begrensninger

Begrensningene knyttet til A375-celler er

In vitro-begrensninger: A375 er en in vitro-tumormodell. Selv om den etterligner egenskapene til melanom, kan den ikke fullt ut representere kompleksiteten i melanomsvulster. Derfor må man være forsiktig med å generalisere in vitro-funn til kliniske studier.

Kjøp dine A375-celler nå

430,00 €*

Innhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300110

Bruksområder for A375-cellelinjen i forskning

A375-cellelinjen har omfattende bruksområder innen kreftforskning. Her er noen av de vanligste områdene der A375-celler brukes.

Kreftforskning: A375-celler har utbredt anvendelse innen melanomforskning. Forskere har brukt disse cellene til å undersøke hudkreftbiologi, prosesser og underliggende cellesignalmekanismer, inkludert celleproliferasjon, migrasjon og invasjon. Dette kan også hjelpe forskerne med å identifisere nye molekylære behandlingsmål. En studie utført av Lin Zhu og kolleger i 2019 brukte svært aggressive melanomceller A375 og fant ut hvilken rolle mikroRNA-3662 spiller for vekst og invasjon av A375-melanomceller. Funnene i studien viser at mikroRNA-3662 er rettet mot ZEB1-genet og regulerer melanomcellenes vekst in vitro og in vivo i A375-svulstmodellen [2]. Tilsvarende forskning utført i 2018 viste at PI3K/AKT- og MAPK/ERK-veiene er involvert i spredning og metastase i A375-cellelinjen [3].
Oppdagelse og testing av legemidler: A375-cellelinjen er en nyttig in vitro-svulstmodell for å teste og screene potensielle kreftmidler. Forskere evaluerer toksisiteten og effekten av nye kjemoterapeutiske legemidler, forbindelser og andre behandlingsformer ved hjelp av disse A375-melanomcellene. I en studie undersøkte man for eksempel de krefthemmende egenskapene til mikro- og nanovesikler fra grapefrukt på A375-melanomkreftceller fra mennesker. Resultatene viste at mikro- og nanovesikler induserer cellesyklusarrest og apoptose og hemmer genuttrykk i celleproliferasjon, migrasjon og invasjon [4].

A375-celler: Publikasjoner

Her nevnes noen viktige forskningspublikasjoner som omhandler A375-celler.

Vitamin D og dets kalsiumfattige analoger modulerer de krefthemmende egenskapene til cisplatin og dakarbazin i den humane melanom A375-cellelinjen

Denne studien ble publisert i Journal of Oncology i 2019. Studien viste at samtidig behandling med vitamin D og analoger forbedrer den krefthemmende aktiviteten til cisplatin og dakarbazin i A375-melanomceller.

In vitro-evaluering av anti-melanomeffektene (A375-cellelinje) av gel- og helbladekstrakter fra utvalgte aloe-arter

Denne forskningen ble publisert i Journal of Herbal Medicine i 2022. Denne studien undersøkte anti-melanomeffektene av aloe vera-gel i A375-melanomceller.

Fermitin-familiemedlem 2 fremmer melanomprogresjon ved å forsterke bindingen av p-α-Pix til Rac1 for å aktivere MAPK-veien

Denne studien i Oncogene (2021) foreslår at fermitin-familiemedlem 2 (FERMT2 eller kindlin-2) fremmer melanomprogresjon ved å aktivere MAPK ved å binde seg til p-α-Pix og Rac1.

FARP1 fremmer celleproliferasjon ved å modulere MAPK-signalveien i kutant melanom

Denne studien i The American Journal of Dermatopathology (2019) foreslår at FARP1 kan bidra til utvikling og progresjon av hudmelanom. Dermed kan det være et nyttig terapeutisk mål.

Cytotoksisk og apoptotisk potensial av Phyllodium elegans-ekstrakter på kreftcellelinjer fra mennesker

Denne forskningsartikkelen ble publisert i Bioengineered (2019). Denne studien undersøkte den cytotoksiske og apoptotiske aktiviteten til et planteekstrakt av Phyllodium elegans på humane kreftcellelinjer, inkludert A375.

Ressurser for A375 cellelinje: Protokoller, videoer og mer

Følgende er noen nettressurser som omhandler A375-celler.

A375-celletransfeksjon: Denne videoveiledningen hjelper deg med å lære A375-celletransfeksjon trinn for trinn.
Celledyrking: Denne videoen inneholder svært nyttig informasjon om dyrking av cellelinjer.

Celledyrkingsprotokollene for A375-celler er oppført her.

A375 cellelinje: Denne lenken inneholder nyttig informasjon om dyrking og vedlikehold av A375-cellelinjen, inkludert A375-medier og håndtering av frosne og prolifererende A375-kulturer.

Ofte stilte spørsmål (FAQ) for A375-celler

Referanser

Avram, S., et al., Standardisering av A375 humane melanommodeller på kyllingembryo chorioallantoic membran og Balb/c nakenmus. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 retter seg mot ZEB1 og demper invasjonen av den svært aggressive melanomcellelinjen A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C hemmer melanom A375-celleproliferasjon og metastase via undertrykkelse av PI3K/Akt- og MAPK/ERK-veier. Livsvitenskap, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Grapefrukt-avledede mikro- og nanovesikler viser distinkte metabolomprofiler og krefthemmende aktiviteter i den humane melanomcellelinjen A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.