KG-1-cellelinje
Generelle egenskaper og opprinnelse til KG-1-cellelinjen
En cellelinjes opprinnelse og generelle egenskaper hjelper en forsker med å avgjøre hvordan den skal brukes i arbeidet. Du kan undersøke denne informasjonen før du begynner å jobbe med den. Denne delen av artikkelen handler om opprinnelsen og egenskapene til KG-1-makrofager. Her vil du lære: Hva er KG-1-celler? Hva er KG-1a-cellelinjen? Hva er opprinnelsen til KG-1-cellelinjen? Hva er morfologien til KG-1?
- KG-1 er en lymfoblastlignende cellelinje avledet fra benmargsaspirat fra en kaukasisk mann (59 år) med akutt myelogen leukemi. Den ble etablert av Koeffler og Golde i 1978. Disse cellene befinner seg hovedsakelig i modningsstadiet som promyelocytter eller myeloblaster [1].
- KG-1-celler har en lymfoblastlignende morfologi.
- Karyotypen til KG-1-cellelinjen viser et pseudodiploidt modalt antall kromosomer.
KG-1 og KG-1a
KG-1a er en underlinje av de opprinnelige KG-1-cellene. Den ble utviklet etter 35 passasjer av KG-1-cellelinjen. Den er mindre differensiert sammenlignet med KG-1-cellelinjen. Videre er denne underlinjen cytokjemisk, morfologisk og funksjonelt mindre moden sammenlignet med den opprinnelige cellelinjen (KG-1).
Informasjon om dyrking av KG-1-cellelinjen
Denne delen av artikkelen vil dekke all viktig informasjon om dyrking av KG-1-celler som kan lette arbeidet ditt. Her vil du lære: Hva er doblingstiden for KG-1-cellelinjen? Hva er dyrkingsbetingelsene for KG-1-makrofager? Hvordan dyrker man KG-1-celler?
Viktige punkter for dyrking av KG-1-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for KG-1 er omtrent 45 timer. Den kan imidlertid variere avhengig av dyrkingsforholdene.
Adherent eller i suspensjon:
KG-1-cellene vokser i suspensjon.
Celle tetthet:
Den optimale celletettheten for KG1-cellelinjen er fra 1 til 3 x 105 celler/ml. For å foreta en subkultur overføres cellesuspensjonen til et sterilt rør og sentrifugeres. De høstede cellene tilsettes deretter ferskt medium og resuspenderes forsiktig. Deretter fordeles cellene i nye kolber og dyrkes ved optimal celletetthet. Cellene kan deles når de når en maksimal celletetthet på 1–2 × 10⁶ celler/ml.
Vekstmedium:
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) som inneholder 10 % FBS, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat og 3,0 g/L NaHCO₃ brukes til å dyrke KG-1-celler. Mediet bør skiftes ut etter tre dager.
Vekstbetingelser:
KG1 AML-cellelinjen dyrkes i en fuktet inkubator ved 37 °C og med 5 % CO₂-tilførsel.
Oppbevaring:
Frosne celler oppbevares i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk ultralavtemperaturfryser for å beskytte cellenes levedyktighet.
Fryseprosess og medium:
CM-1 eller CM-ACF er egnet for frysing av KG-1-celler. Cellene fryses ved hjelp av en langsom fryseprosess for å beskytte cellene mot temperatursjokk. Denne metoden gir et gradvis temperaturfall på 1 °C per minutt.
Tineprosess:
Cellene tines i et forvarmet vannbad ved 37 °C til det kun gjenstår en liten isklump. De tine cellene tilsettes ferskt medium og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Cellepelleten resuspenderes forsiktig og helles over i nye kolber som inneholder vekstmedium.
Biosikkerhetsnivå:
Et laboratorium med biosikkerhetsnivå 1 er avgjørende for å opprettholde KG-1-cellekulturer.
Publisert: 2023 | Sist oppdatert: mai 2026
KG-1-cellelinjen: Fordeler og begrensninger
I likhet med andre cellelinjer har også KG-1-cellelinjen for myeloid leukemi mange fordeler og begrensninger. I dette avsnittet skal vi se på noen av de viktigste, som kan være avgjørende når du skal bestemme om den skal brukes i din forskning.
Fordeler
De viktigste fordelene med KG-1-celler er:
-
Enkel dyrking
KG-1-celler kan enkelt dyrkes i forskningslaboratorier, og har ukompliserte krav til cellekultur. De enkle vedlikeholds- og vekstforholdene gjør dem tilgjengelige for et bredt spekter av forskere med grunnleggende cellekulturfasiliteter.
-
Modell for akutt myeloid leukemi (AML)
KG-1 AML-cellelinjen stammer fra en mannlig pasient med akutt myeloid leukemi (AML) og fungerer som et verdifullt verktøy for å undersøke biologien bak AML og for å drive forskning på potensielle behandlingsmetoder, noe som gir innsikt i sykdommens underliggende mekanismer og behandlingsstrategier.
Begrensninger
Begrensningene knyttet til KG1-cellelinjen er:
-
In vitro-modell
KG-1-celler er en verdifull in vitro-modell for AML-forskning; det er imidlertid viktig å merke seg at de kanskje ikke fullt ut gjenspeiler sykdommens kompleksitet in vivo, men fungerer som en forenklet cellemodell som kanskje ikke omfatter alle aspekter av AML-biologien.
Anvendelser av KG-1-celler i forskning
KG-1 tilbyr flere lovende anvendelser innen biomedisinsk forskning. Noen av de viktigste forskningsområdene der KG1-makrofager brukes, inkluderer:
- Kreftforskning: KG-1-celler stammer fra en pasient med akutt myeloid leukemi og anses derfor som et verdifullt forskningsverktøy for å undersøke AML-biologien. Forskere bruker disse cellene til å studere de cellulære og molekylære mekanismene som driver utviklingen, veksten og medikamentresistensen ved AML. Dette innebærer også å identifisere og oppdage nye biomarkører, genetiske mutasjoner og signalveier knyttet til AML. For eksempel undersøkte en studie gjennomført i 2019 at det lange ikke-kodende RNA-et linc00239 fremmer doxorubicinresistens og ondartet atferd i celler fra akutt myeloid leukemi (KG-1). Ytterligere studier avdekket at lncRNA aktiverer PI3K/Akt/mTOR-signalveien for å utøve disse effektene i AML-celler [2].
- Toksikologi: KG1-cellelinjen er mye brukt i toksikologisk forskning. Forskere tester toksisiteten og effekten til potensielle terapeutiske midler, inkludert kjemoterapeutiske legemidler og målrettede terapier, på KG1-myeloide leukemiceller for å identifisere lovende legemiddelkandidater for fremtidige prekliniske og kliniske vurderinger. Forskning utført i 2018 analyserte toksisiteten til doxorubicin-holdige nano-niosomer på KG1-AML-cellelinjen. Studien antydet at nano-niosomer er en egnet bærer for legemiddeltilførsel, da de forbedrer behandlingens effektivitet [3]. I en annen undersøkelse utforsket forskere de terapeutiske effektene av brenneslete tilberedt av bladene fra planten Urtica dioica. Studien viste at dette vandige bladekstraktet fra planten har antitumoreffekter på celler fra akutt myeloid leukemi, KG-1 og U937 [4].
Publikasjoner om KG-1-celler
Denne delen av artikkelen oppsummerer noen interessante forskningspublikasjoner om KG-1-celler.
Quercetin gjør KG-1-celler fra human myeloid leukemi mer følsomme for TRAIL-indusert apoptose
Denne artikkelen ble publisert i Journal of Cellular Physiology (2019). Studien antydet at quercetin-forbindelsen gjør KG1-AML-cellelinjen mer følsom overfor TNF-relatert apoptoseinduserende ligand (TRAIL) og kan forsterke effekten av TRAIL-indusert cytotoksisitet i cellene.
KLF8 fremmer vekst og glykolyse i celler fra akutt myeloid leukemi via AKT/mTOR-signalveien
Denne artikkelen i *Tropical Journal of Pharmaceutical Research* (2022) foreslo at nedregulering av krüppel-lignende transkripsjonsfaktor 8 hemmer AML-celleproliferasjon og glykolyse, og fremmer apoptose gjennom regulering av AKT/mTOR-signalveien.
Effekter av sorafenib og arseniktrioksid på U937- og KG-1-cellelinjer: Apoptose eller autofagi?
Denne studien i Cell Journal (Yakhteh) (2020) undersøkte de potensielle effektene av arseniktrioksid og sorafenib på U937- og KG-1-celler.
Denne studien, publisert i Medical Oncology (2020), evaluerte OXPHOS og glykolyse som terapeutiske mål i AML-cellelinjen KG-1.
I denne artikkelen fra tidsskriftet Drug Design, Development, and Therapy fra 2020 ble det foreslått at kurkumin og talidomid i kombinasjon utøver synergistiske apoptotiske effekter i KG-1-celler ved å redusere uttrykket av STAT3 og Bcl-xL.
6. Ressurser for KG-1-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Her følger noen nettressurser om KG-1-celler.
- Subkultivering av suspensjonsceller: Denne videoen beskriver protokollen for subkultivering av suspensjonscellekulturer som KG-1.
Følgende lenke inneholder protokollen for KG-1-cellekulturen:
- KG-1-cellelinjen: Dette nettstedet inneholder omfattende grunnleggende informasjon om cellekultivering av KG-1-cellelinjen. Det inkluderer informasjon om dyrkningsmedier for cellelinjen samt protokoller for subkultivering og håndtering av kryokonserverte og proliferative kulturer.
Referanser
- Pelliccia, F., V. Ubertini og N. Bosco, Betydningen av molekylærcytogenetisk analyse før bruk av cellelinjer i forskning: Eksemplet med KG-1a-leukemi-cellelinjen. Oncol Lett, 2012. 4(2): s. 237–240.
- Yang, Y., et al., Langt ikke-kodende RNA linc00239 fremmer ondartet atferd og kjemoresistens mot doxorubicin, delvis via aktivering av PI3K/Akt/mTOR-signalveien i akutt myeloid leukemi-celler. Oncology Reports, 2019. 41(4): s. 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Fremstilling og undersøkelse av nano-niosomer som inneholder doxorubicin og evaluering av dets toksisitet på den akutte myeloblastiske leukemi-cellelinjen KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): s. 309–323.
- Hodroj, M.H., et al., Brennneslete hindrer veksten av celler fra akutt myeloid leukemi in vitro ved å fremme apoptose. Nutrients, 2020. 12(9): s. 2629.