U87MG-celler – Glioblastomforskning ved bruk av U87MG og dens betydning for studier av hjernekreft
U-87 MG, den humane primære glioblastomcellelinjen, er mye brukt i biologisk forskning. Disse cellene benyttes særlig innen nevrovitenskap og immunonkologi.
- Vekstmedium
- U-87 MG-cellelinjen dyrkes i EMEM (Eagle's minimal essential medium) tilsatt 1,0 g/L L-glukose, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat og 10 % FBS-løsning. Mediet bør skiftes ut hver 2. til 3. dag.
- Fordoblingstid
- U 87 MG-celler har en fordoblingstid på mellom 18 og 38 timer.
- Veksttype
- U 87 MG er en vedheftende cellelinje. Cellene har en langstrakt form og vokser som monolag.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-1
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill U-87 MG
- Generelle egenskaper og opprinnelse til U-87 MG-cellelinjen
- Informasjon om dyrking av U-87 MG-celler
- Fordeler og ulemper ved U-87 MG-celler
- Forskningsanvendelser med U-87 MG-celler
- Bestill din U-87 MG-gliomcellelinje i dag
- U-87 MG-cellelinje: Forskningspublikasjoner
- Ressurser for U-87 MG-celler: Protokoller, videoer og mer
- Innblikk i U-87 MG-gliomforskning: Ofte stilte spørsmål
- Referanser
- Ofte stilte spørsmål
Generelle egenskaper og opprinnelse til U-87 MG-cellelinjen
Denne delen vil gå gjennom opprinnelsen og de generelle egenskapene til U87-cellelinjen. Du vil lære: Hva er U-87 MG-celler? Hvor kommer U87-cellen fra? Hva er den fulle formen av U-87 MG? Hvor store er U87-cellene? Hva er morfologien til U87-cellelinjen?
- U87-cellelinjen er en glioblastom- og astrocytomcellelinje. Den ble etablert i 1966 ved Uppsala universitet. Cellene ble hentet fra en 44 år gammel kaukasisk mann som led av glioblastom. Denne cellelinjen kalles formelt U 87 MG, som står for Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG-celler har en epitelcellelignende morfologi.
- Størrelsen på U 87 MG-cellene varierer mellom 12 og 14 µm i diameter.
- Denne humane glioblastomcellelinjen er hypodiploid og har et modalt kromosomtall på 44 i omtrent 48 % av cellepopulasjonen. Imidlertid forekommer det også høyere ploidier hos 5,9 % av cellepopulasjonen.
Informasjon om dyrking av U-87 MG-celler
Før du arbeider med U 87 MG-celler, bør du sette deg inn i følgende viktige punkter for dyrking av disse glioblastomcellene. Spesielt bør du vite: Hva er populasjonsdoblingstiden for U 87 MG-celler? Hvilket dyrkningsmedium brukes til dyrking av U87-celler? Hva er utsåingstettheten for U-87 MG-cellelinjen?
Viktige punkter for dyrking av U-87 MG-celler
Populasjonsdoblingstid:
U 87 MG-celler har en populasjonsdoblingstid på mellom 18 og 38 timer.
Adherente eller i suspensjon:
U 87 MG er en vedheftende cellelinje. Cellene har en langstrakt form og vokser som monolag.
Utsåingstetthet:
Det anbefales å så glioblastomcellelinjen U 87 MG med en celletetthet på 1 x 104 celler/cm2. Adhærente U87-celler vaskes med 1 x PBS og inkuberes med Accutase-løsning. Deretter sentrifugeres de dissocierte cellene og gjenvinnes. Cellene resuspenderes forsiktig og tilsettes i nye kolber som inneholder vekstmedium.
Vekstmedium:
U 87 MG-cellelinjen dyrkes i EMEM (Eagle's minimal essential medium) tilsatt 1,0 g/L L-glukose, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat og 10 % FBS-løsning. Mediet bør skiftes ut hver 2. til 3. dag.
Vekstbetingelser:
U-87 MG-celler krever en fuktet inkubator med 5 % CO₂-tilførsel og en temperatur på 37 °C for optimal vekst.
Oppbevaring:
U87-cellene oppbevares enten i dampfasen av flytende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C for å opprettholde maksimal levedyktighet hos glioblastomcellene.
Fryseprosess og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier er egnet for frysing av U 87 MG-celler. En langsom fryseprosess anbefales, da dette forhindrer at cellene utsettes for sjokk og beskytter cellenes levedyktighet.
Tineprosess:
Frosne ampuller med U-87 MG-cellelinjen tines i et vannbad ved 37 °C. Cellene tilsettes vekstmedium, resuspenderes og overføres til nye kolber for dyrking. Alternativt kan U87-cellene sentrifugeres for å fjerne frysemediet og deretter dyrkes.
Biosikkerhetsnivå:
Biosikkerhetsnivå 1 kreves ved håndtering av U 87 MG-cellekulturer.
Fordeler og ulemper ved U-87 MG-celler
Når vi tenker på en cellelinje, er det første som faller oss inn: Hva er fordelene ved å bruke U-87 MG-celler? Hva er ulempene ved U-87-celler?
Fordeler
U-87 MG-cellelinjer brukes mye i forskning. Noen av fordelene ved denne cellelinjen er:
Fordeler
- Enkel å dyrke: U-87 MG-celler er enkle å holde i kultur. De stiller ikke krevende eller kompliserte krav til cellekultivering.
- Homogenitet: U-87 MG er en homogen cellelinje. De fleste cellene i en populasjon har samme genetiske sammensetning og deler dermed lignende egenskaper. Disse cellene brukes til å studere celleprosesser, legemiddelscreening og testing.
- Godt karakterisert: Denne glioblastomcellelinjen er godt karakterisert med hensyn til vekstegenskaper, morfologi og genuttrykk, noe som gjør den til et verdifullt forskningsverktøy.
Ulemper
- Begrenset anvendelighet: U-87 MG er en glioblastomcellelinje, så anvendelsesområdene er primært begrenset til å studere glioblastomer og underliggende molekylære mekanismer. Den er kanskje ikke egnet for å undersøke andre krefttyper.
Forskningsanvendelser med U-87 MG-celler
U87MG-glioblastomcellelinjen brukes i stor utstrekning i kreftstudier, særlig i glioblastomforskning. Noen av forskningsanvendelsene av U 87 MG-celler er:
- Forskning innen kreftbiologi: U87-cellelinjen brukes til å studere kreftvekst og -utvikling, underliggende molekylære mekanismer, signalveier og tumorens mikromiljø. En studie publisert i 2020 benyttet en in vitro-modell for glioblastom, U-87 MG-cellelinjen, for å undersøke BMAL1-genet (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) som et terapeutisk mål. Resultatene viste at BMAL1-genet hemmer glioblastomcellers proliferasjon, migrasjon og invasjon ved å undertrykke genuttrykket av syklin B1, metalloproteinase-9 og fosfo-AKT [1]. En annen studie utført i 2019 benyttet U87-cellelinjen og undersøkte at nedregulert uttrykk av transkripsjonsfaktoren lipopolysakkarid-indusert tumornekrosefaktor-alfa (LITAF) kan øke strålefølsomheten til gliomceller gjennom oppregulering av FOXO-1-signalveien. LITAF er også kjent som p53-indusert gen 7 (PIG7) [2].
- Legemiddelutvikling: U-87 MG-celler kan brukes til screening og testing av legemidler, slik at forskere kan identifisere nye potensielle kreftmedisiner og vurdere deres effekt og toksisitet. I en studie ble U-87-MG-glioblastomcellelinjen brukt til å evaluere det kreftbekjempende og antioksidante potensialet til Inula helenium (L.)-ekstrakt [3]. Tilsvarende nevnte en annen publikasjon bruk av U-87-cellelinjen for å teste den cytotoksiske og apoptotiske effekten av planteekstrakter [4]. Videre undersøkte en studie publisert i 2018 den cytotoksiske effekten av sesquiterpenalkaloider ekstrahert fra Nuphar-planter på følsomme og medikamentresistente U-87-MG-cellelinjer [5].
Bestill din U87 MG-gliomcellelinje i dag
U-87 MG-cellelinje: Forskningspublikasjoner
Her er noen fremtredende forskningspublikasjoner som omhandler U-87 MG-cellelinjen.
Denne artikkelen, publisert i Neuroreport i 2018, foreslo at hypoksi kan øke migrasjonen og invasjonen av humane glioblastomceller ved å regulere PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalveien.
Denne studien ble publisert i tidsskriftet «Frontiers in Pharmacology» i 2020. Forskningsresultatene viser at et flavonoid, Eriodictyol, har krefthemmende effekter på U87-cellelinjen og hemmer celleproliferasjon og metastasering. Forbindelsen utøver sine antitumoregenskaper ved å modulere PI3K/Akt/NF-κB-signalveien.
Denne studien, publisert i «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2018), tyder på at en kinesisk urteformel kalt Xihuang-pillen kan indusere apoptose i U87-celler ved å påvirke den ROS-aktiverte Akt/mTOR/FOXO1-kaskaden.
LITAF øker strålefølsomheten til humane gliomceller via FoxO1-signalveien
Denne forskningsartikkelen ble publisert i tidsskriftet *Cellular and Molecular Neurobiology* i 2019. Studien foreslo at en transkripsjonsfaktor, LITAF, nedregulerer og øker strålefølsomheten til gliomceller ved å regulere FOXO-1-signalveien.
Denne artikkelen ble publisert i tidsskriftet «Biointerface Research in Applied Chemistry» (2019). Forskerne brukte U87MG-celler til å undersøke den cytotoksiske effekten av kurkumin-ladede PLGA-nanopartikler.
Ressurser for U-87 MG-celler: Protokoller, videoer og mer
U87MG-glioblastomcellelinjen brukes i mange kreftforskningslaboratorier. Noen ressurser som omhandler denne cellelinjen er:
- Transfeksjon av U87-cellelinjen: Dette dokumentet beskriver en transfeksjonsprotokoll for U87MG-celler.
- Transfeksjon av U87MG-cellelinjen: Denne videoen er en veiledning som forklarer transfeksjonsprotokollen for U87-celler trinn for trinn.
Ressursen for cellekulturprotokollen for U87-celler er oppført nedenfor:
- U87 MG-celler: Denne lenken inneholder grunnleggende informasjon om U87 MG-cellelinjen. Den inkluderer korte protokoller for celledeling, frysing og tining av celler.
Innblikk i forskning på U87 MG-gliom: Ofte stilte spørsmål
Gliomcellelinjer, som U87 glioblastomceller, er dyrkede celler avledet fra humane gliomer som brukes i utstrakt grad i kreftforskning for å studere tumorbiologi, genetikk og legemiddelrespons. De fungerer som modeller for å forstå tumoratferd og teste terapeutiske strategier.
En isogen cellelinje er celler som er avledet fra én enkelt celle, noe som sikrer genetisk ensartethet. I gliomforskningen gir isogene linjer en konsistent modell for å studere genetiske endringer og deres innvirkning på tumorvekst og respons på behandling.
DNA-profilen til gliomcellelinjer er avgjørende for å identifisere genetiske endringer, forstå tumorutvikling og utvikle målrettede terapier. Den bidrar til klassifisering av svulster basert på genetiske markører som IDH1-mutasjoner.
Serum i cellekulturmedier tilfører gliomceller viktige vekstfaktorer, hormoner og næringsstoffer. Serumsammensetningen kan imidlertid påvirke den eksperimentelle reproduserbarheten, og derfor brukes det i økende grad serumfrie eller definerte serumbetingelser.
Cellecytotoksisitet i gliomcellelinjer vurderes ved hjelp av analyser som flowcytometri, som måler cellenes helse, levedyktighet og død etter behandling med legemidler eller immunceller som NK-celler (natural killer cells).
NK-cellers cytotoksisitet spiller en avgjørende rolle i forskningen på gliombehandling, ettersom NK-celler kan gjenkjenne og drepe tumorceller uten forutgående sensitivisering. Ved å studere NK-cellers interaksjon med gliomceller kan man utvikle strategier for å forbedre NK-cellenes evne til å fjerne svulster.
Opprinnelsessvulsten gir informasjon om svulstens opprinnelige biologiske miljø og egenskaper. Forståelse av dette gjør det lettere å korrelere funn fra cellelinjestudier med faktisk tumoratferd og pasientprognose.
Elektronmikroskopi gir detaljert visualisering av cellulære og subcellulære strukturer i gliomcellelinjer, noe som er avgjørende for å undersøke cellenes morfologi, organellenes tilstand og endringer etter behandling.
NKG2D-liganden uttrykkes på tumorceller og binder seg til NKG2D-reseptoren på NK-celler, noe som utløser en cytotoksisk respons. Ved å studere denne interaksjonen kan vi forstå og potensielt forbedre immunresponsen mot gliom.
3D-cellekulturmodeller etterligner svulstens mikromiljø på en mer nøyaktig måte, noe som gir bedre innsikt i gliomvekst, migrasjon og legemiddelresistens. Denne teknikken er avgjørende for mer relevante translasjonsstudier innen onkologi.
Referanser
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 hemmer proliferasjon, migrasjon og invasjon av U87MG-celler ved å nedregulere syklin B1, fosfo-AKT og metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF øker strålefølsomheten til humane gliomceller via FoxO1-signalveien. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871–882.
- Koc, K., et al., antioksidant- og kreftbekjempende egenskaper ved ekstrakt av Inula helenium (L.) i den humane U-87 MG-glioblastomcellelinjen. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh og A. Ghasempour, «Cytotoksisitet og induksjon av apoptose i brystkreft-, hudkreft- og glioblastomceller ved hjelp av planteekstrakter». Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131–5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoksisitet av sesquiterpenalkaloider fra Nuphar-planter mot følsomme og medikamentresistente cellelinjer. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279–6286.