P19-celler – Forskning på embryonalt karsinom ved bruk av P19-celler
P19 er en embryonalt karsinomcellelinje fra mus. Den brukes mye i biomedisinsk forskning, hovedsakelig for å studere utviklingsbiologi, stamcellebiologi, celledifferensiering og legemiddelscreening. Siden P19-celler har evnen til å differensiere seg, kan de være nyttige i undersøkelser av komplekse biologiske prosesser som vevsdannelse og tidlig embryonal utvikling. I denne artikkelen vil vi diskutere grunnleggende fakta om P19-celler fra mus.
- Vekstmedium
- DMEM/Ham's F12-medium som inneholder 5 % føtalt bovint serum, 3,1 g/L glukose, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat, 15 mM HEPES og 1,2 g/L NaHCO₃ brukes til å dyrke P19-celler.
- Fordoblingstid
- Den rapporterte doblingstiden for P19-cellelinjen er omtrent 2 til 3 dager.
- Veksttype
- Den embryonale karsinomcellelinjen P19 er vedheftende.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-1
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill P19
- Generelle egenskaper og opprinnelse til P19-celler
- Informasjon om dyrking av P19-celler
- P19-cellelinjen: Fordeler og ulemper
- Forskningsanvendelser av P19-celler
- Kjøp din P19-cellelinje i dag
- P19-celler: Forskningspublikasjoner
- Ressurser for P19-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
- Utforsk P19-cellelinjen: Ofte stilte spørsmål
- Referanser
- Ofte stilte spørsmål
Generelle egenskaper og opprinnelse til P19-celler
Det er viktig å kjenne til en cellelinjes generelle egenskaper og opprinnelse før du begynner å arbeide med den. Dette avsnittet vil omhandle følgende: Hva er P19-cellelinjen? Hva er størrelsen på P19-cellen? Hva er opprinnelsen til P19-cellene?
- P19 er en type pluripotente embryonale karsinomceller som opprinnelig ble hentet fra et teratokarsinom utviklet hos en C3H/He-mus. Cellelinjen ble først etablert i 1982 av McBurney og Rogers.
- P19-celler kan vokse kontinuerlig i et serumtilskuddsberiket dyrkningsmedium. De kan differensieres til andre celletyper når de utsettes for ikke-toksiske stoffer som retinsyre og dimetylsulfoksid (DMSO) [1].
- Disse musekarsinomcellene har en epitelignende morfologi.
- P19-cellelinjen har en euploid mannlig karyotype (n=40; XY).
Informasjon om dyrking av P19-celler
P19-cellelinjen dyrkes mye i forskningslaboratorier på grunn av sine unike egenskaper. Dyrkingen er enkel og oversiktlig. Dette avsnittet inneholder all viktig informasjon du trenger for å opprettholde og dyrke P19-cellekulturen. Vi skal se på: Hva er doblingstiden for P19-celler? Hvordan dyrker man P19-cellelinjen? Er P19 en vedheftende cellelinje?
Viktige punkter for dyrking av P19-celler
Fordoblingstid:
Den rapporterte doblingstiden for P19-cellelinjen er omtrent 2 til 3 dager.
Adherente eller i suspensjon:
Den embryonale karsinomcellelinjen P19 er vedheftende.
Subkultureringsforhold:
P19-celler bør subkultiveres hver 48. time, og et delingsforhold på 1:10 bør opprettholdes for disse cellene. Adhærente celler vaskes med 1 X fosfatbuffersaltvann og inkuberes med Accutase til cellene dissocierer. Cellene tilsettes dyrkningsmedium og høstes ved sentrifugering. De oppsamlede cellene resuspenderes forsiktig og fordeles i nye kolber.
Vekstmedium:
DMEM/Ham's F12-medium som inneholder 5 % føtalt bovint serum, 3,1 g/L glukose, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat, 15 mM HEPES og 1,2 g/L NaHCO₃ brukes til å dyrke P19-celler.
Vekstbetingelser:
En fuktet inkubator innstilt på 37 °C med 5 % CO₂-tilførsel er avgjørende for vekst og dyrking av den embryonale karsinomcellelinjen P19.
Oppbevaring:
Frosne P19-celleampuller bør oppbevares ved temperaturer under -150 °C i en fryser eller i dampfasen av flytende nitrogen for å opprettholde cellenes levedyktighet på lang sikt.
Fryseprosess og medium:
CM-1- eller CM-ACF-medier kan brukes til å fryse P19-celler ved hjelp av en langsom fryseprosess som beskytter cellene mot sjokk og bevarer deres levedyktighet.
Tineprosess:
Frosne P19-celler kan tines i et vannbad ved 37 °C ved å riste ampullen kraftig i 40 til 60 sekunder. Cellene tilsettes ferskt medium og sentrifugeres for å fjerne elementer fra frysemediet. Cellepaletten resuspenderes på nytt, og cellene helles over i en ny kolbe for vekst.
Biosikkerhetsnivå:
Det kreves laboratoriemiljøer på biosikkerhetsnivå 1 for P19-cellelinjen.
P19-cellelinjen: Fordeler og ulemper
I dette avsnittet vil vi diskutere fordelene og ulempene ved P19-cellelinjen.
Fordeler
- Differensieringspotensial: P19-celler kan differensiere seg til ulike celletyper, blant annet kardiomyocytter, nevroner og mikroglia. De trenger ikke-toksiske stoffer for differensiering, som retinsyre og dimetylsulfoksid (DMSO). Retinsyre induserer utviklingen av nevroner, mikroglia og astroglia, mens DMSO setter i gang utviklingen av pulserende kardiomyocytter og glatte muskelceller. P19-celler er dermed nyttige i studiet av celledifferensiering og utviklingsprosesser.
- Modellsystem: Den pluripotente embryonale karsinomcellelinjen P19 er en verdifull modell for å studere tidlig embryonal utvikling. Forskere bruker P19-celler til å belyse cellesignalveier og de cellulære og molekylære mekanismene som er involvert i disse prosessene.
Ulemper
- Mus-opprinnelse: P19 er en embryonal karsinomcellelinje fra mus. Følgelig kan funnene fra studier som bruker disse cellene kanskje ikke fullt ut overføres til menneskelig biologi og prosesser.
Forskningsanvendelser av P19-celler
P19-celler har flere forskningsanvendelser på grunn av deres differensieringsevne og relevans for utviklingsbiologi og stamcelleforskning. Noen av de viktigste forskningsanvendelsene av P19-embryonale karsinomceller inkluderer:
- Studier av celledifferensiering: Som kjent kan P19-celler differensiere seg til nevroner, mikroglia, glatte muskelceller og kardiomyocytter; de brukes derfor mye til å studere celledifferensieringsprosesser. I tillegg bidrar de til forskning på nevral og kardial utvikling og de underliggende mekanismene. En studie gjennomført i 2018 viste at reaktive oksygenarter (ROS) styrer differensieringen av P19-celler til bestemte celletyper og hindrer induksjonen av andre [3]. En annen studie undersøkte den retinsyremedierte nevrale differensieringsprosessen og påviste involvering av PI3K/Akt/GSK3β-signalveien [4].
- Utviklingsbiologi: P19-celler er en uvurderlig modell for å studere tidlig embryonal utvikling. De hjelper forskere med å forstå komplekse biologiske prosesser, slik som vevsdannelse under embryoutviklingen. I forskningen ble P19-celler brukt til å studere molekylære faktorer som bidrar til dannelsen av ventrikkelseptumdefekt (VSD). Funnene avslørte at et langt ikke-kodende RNA, SNHG6, bidrar til VSD ved å negativregulere miRNA-101 og aktivere Wnt/β-katenin-signalveien [5].
- Legemiddelprøving: Den embryonale karsinomcellelinjen P19 fra mus brukes også til å screene potensielle legemiddelkandidater. I en studie ble differensierte P19-celle-nevroner brukt til å undersøke de nevrobeskyttende, acetylkolinesterasehemmende effektene av syntetisk L-Dopa og et vandig ekstrakt fra Mucuna pruriens-frø. Resultatene viste at planteekstraktet ga lovende resultater sammenlignet med L-Dopa [6].
Kjøp P19-cellelinjen din i dag
P19-celler: Forskningspublikasjoner
Denne delen av artikkelen vil omhandle noen interessante forskningspublikasjoner som omhandler P19-celler.
Denne artikkelen ble publisert i Oncology Reports i 2017. Studien antydet at kjønnshormoner fra hypofysen driver adhesjon, proliferasjon og migrasjon hos teratokarsinomcellelinjer, inkludert P19-celler.
Det lange ikke-kodende RNA-et uc.4 påvirker celledifferensiering gjennom TGF-beta-signalveien
Denne publikasjonen i tidsskriftet Experimental & Molecular Medicine (2018) benyttet P19-celler og undersøkte funksjonen til det lange, ikke-kodende RNA-et uc.4. Funnene viste at uc.4 påvirker celledifferensiering ved å modulere TGF-beta-signalveien.
Denne forskningsartikkelen ble publisert i 2018 i tidsskriftet Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. Studien fant at naturlig hjernevevsekstrakt og 3D-cellekultur kan fremskynde P19-embryonale karsinomcellers differensiering til nevrale celler.
Denne studien ble publisert i Journal of Ethnopharmacology i 2020. Studien antydet at bladekstrakt fra Cichorium intybus L. kan indusere differensiering av P19-embryonale karsinomceller til insulinproduserende β-celler i bukspyttkjertelen.
Denne forskningen ble publisert i Molecules (2022). Studien undersøkte de nevrobeskyttende og acetylkolinesterasehemmende effektene av Mucuna pruriens-frøekstrakt på P19-celle-nevroner.
Ressurser for P19-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Her følger noen ressurser om P19-celler.
- Protokoll for nevrodifferensiering av P19-celler: Denne artikkelen inneholder protokollen for nevrodifferensiering av P19-celler og annen nyttig informasjon om P19-celledifferensiering.
- Transfeksjon av P19-celler: Denne lenken vil hjelpe deg med å lære protokollen for transfeksjon av P19-celler.
Følgende lenke inneholder protokollen for P19-cellekultur.
- P19-celler: Dette nettstedet inneholder all nyttig informasjon om P19-cellelinjen, inkludert dyrkingsbetingelser, P19-cellemedier, celledeling og mye mer.
Utforskning av P19-cellelinjen: Ofte stilte spørsmål
Referanser
- McBurney, M.W., P19 embryonale karsinomceller. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): s. 135–40.
- Bressler, J., et al., P19-embryonale karsinomcellelinje: En modell for å studere interaksjoner mellom gener og miljø. Cell Culture Techniques, 2011: s. 223–240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey og G. Rödel, Mitokondrielle ROS styrer differensieringen av pluripotente P19-celler fra mus. Stem Cell Research, 2018. 30: s. 180–191.
- Fu, F., et al., All-trans-retinsyre induserer differensieringen av P19-celler til nevroner involvert i PI3K/Akt/GSK3β-signalveien. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): s. 4386–4396.
- Jiang, Y., et al., Langt ikke-kodende RNA SNHG6 bidrar til dannelse av ventrikkelseptumdefekt via negativ regulering av miR-101 og aktivering av Wnt/β-katenin-signalveien. Die Pharmazie – An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2019. 74(1): s. 23–28.
- Kamkaen, N., et al., Vannbasert ekstrakt fra Mucuna pruriens-frø forbedret de nevrobeskyttende og acetylkolinesterasehemmende effektene sammenlignet med syntetisk L-dopa. Molecules, 2022. 27(10): s. 3131.