NCI-H460-celler – Veiledning i lungekreftforskning med innsikt fra NCI-H460
NCI-H460 er humane ikke-småcellede lungekreftceller som ofte brukes i forskning på lungekreft og toksikologi. Denne cellelinjen er et verdifullt verktøy for å studere ulike aspekter av kreftbiologi, blant annet tumorutvikling, vekst og medikamentresistens. Videre er NCI-H460-celler en egnet modell for utvikling av kreftbekjempende midler.
- Vekstmedium
- RPMI 1640 brukes som dyrkingsmedium for NCI-H460. Det tilsettes 10 % føtalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3. Mediet bør skiftes 2 til 3 ganger i uken.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for NCI-H460 er omtrent 33 timer.
- Veksttype
- NCI-H460-lungekreftcellene er vedheftende.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-4
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill NCI-H460
NCI-H460-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper
Opprinnelsen og de generelle egenskapene til en cellelinje har stor betydning for dens anvendelse i forskning. Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å lære om opprinnelsen og de viktigste egenskapene til NCI-H460-lungekreftcellene. Du vil få vite: Hva er NCI-H460-celler? Hvilken type cellelinje er NCI-H460? Hva er morfologien til NCI-H460?
- NCI-H460-cellelinjen stammer fra pleural effusjon hos en europeisk mann med storcellet lungekreft. Den ble etablert i 1982 av A.F. Gazdar og kolleger.
- NCI-H460-lungekreftcellene har en epitelial morfologi.
- NCI-H460 er en tumorigenisk cellelinje med en hypotriploid karyotype. Det modale kromosomtall for disse cellene er 57. NCI-H460-celler har også 58 modale kromosomtall i tilsvarende frekvenser.
- Disse lungekreftcellene har mange NCI-H460-mutasjoner som ligner på ikke-småcellede lungesvulster, for eksempel NCI-H460 KRAS-mutasjonen, som er involvert i celleproliferasjon, vekst, invasjon og metastase.
Informasjon om dyrking av NCI-H460-celler
Du bør kjenne til følgende viktige punkter for riktig håndtering og vedlikehold av NCI-H460-cellelinjen. Her får du informasjon om NCI-H460-doblingstid, NCI-H460-dyrkningsmedium og grunnleggende cellekulturprosedyrer for NCI-H460-lungekreftceller.
Viktige punkter for dyrking av NCI-H460-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for NCI-H460 er omtrent 33 timer.
Adhærente eller i suspensjon:
NCI-H460-lungekreftcellene er vedheftende.
Subkultiveringsforhold:
Det anbefalte subkultiveringsforholdet for NCI-H460-cellelinjen er 1:2 og 1:4. Etter at det gamle mediet er fjernet, skylles de vedheftende cellene med 1 x fosfatbuffersaltvann. Deretter inkuberes cellene med Accutase-passasjeløsning i 8 til 10 minutter ved romtemperatur. De dissocierte cellene resuspenderes i et dyrkningsmedium og sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes på nytt og helles over i en ny kolbe for dyrking.
Vekstmedium:
RPMI 1640 brukes som NCI-H460-dyrkningsmedium. Det tilsettes 10 % føtalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger i uken.
Vekstbetingelser:
NCI-H460-kulturer holdes ved 37 °C i en fuktet inkubator med kontinuerlig tilførsel av 5 % CO₂.
Oppbevaring:
NCI-H460-lungekreftceller kan lagres i dampfasen av flytende nitrogen eller ved temperaturer under -150 °C i en elektrisk fryser for ultralave temperaturer for langvarig lagring.
Fryseprosess og medium:
CM-1- eller CM-ACF-medium brukes til å fryse ned og oppbevare NCI-H460-celler. En langsom frysemetode anbefales for å sikre maksimal celleviabilitet.
Tineprosess:
Frosne NCI-H460-celler tines i et forvarmet vannbad (ved 37 °C) i 40 til 60 sekunder, til det kun gjenstår en liten isklump. Tinte celler tilsettes ferskt medium og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Den oppsamlede cellepelleten resuspenderes på nytt, og cellene fordeles i nye kolber som inneholder medium for vekst. Det kan ta nesten 24 timer før NCI-H460-cellene fester seg til overflaten av kolben.
Biosikkerhetsnivå:
NCI-H460-lungekreftceller håndteres og oppbevares i laboratorier med biosikkerhetsnivå 1.
Publisert: 2023 | Sist gjennomgått: mai 2026
Fordeler og ulemper ved NCI-H460-celler
NCI-H460 er en mye brukt cellelinje i lungekreftforskning. Dette avsnittet vil omhandle de generelle fordelene og ulempene knyttet til NCI-H460-lungekreftceller.
Fordeler
Fordelene ved NCI-H460-cellelinjen for ikke-småcellet lungekreft er:
-
Tumorens opprinnelse
NCI-H460-cellelinjen stammer fra en pasient med storcellet lungekreft og representerer denne spesifikke lungekrefttypen. Den brukes som modell for å studere lungekreftbiologi og utvikle nye og effektive behandlinger. NCI-H460-celler har tumorigenisk potensial og kan injiseres i immunsvake mus for å skape in vivo-tumormodeller for å studere tumorvekst, utvikling og effekten av potensielle legemidler.
-
Høye proliferasjonshastigheter
NCI-H460 har høyere veksthastigheter enn andre cellelinjer for ikke-småcellet lungekreft, for eksempel A549. Denne fordelen øker tilgjengeligheten og hjelper forskere med å gjennomføre reproduserbare og tidsavhengige eksperimenter.
Ulemper
Ulempene ved NCI-H460-lungekreftcellene er:
-
Homogenitet
NCI-H460-cellene er homogene, da de stammer fra en enkelt pasienttumor. De mangler derfor generelt den kompleksiteten og heterogeniteten som observeres i pasienttumorer.
Forskningsanvendelser av NCI-H460-celler
NCI-H460-lungekreftcellene brukes i stor utstrekning i studier knyttet til lungekreft. Her er noen av de viktigste forskningsanvendelsene av NCI-H460-celler:
- Lungekreftforskning: NCI-H460-cellene er en uvurderlig modell for å undersøke celle- og molekylære mekanismer som er involvert i tumorutvikling, vekst og metastasering. Videre brukes de til å studere viktige signalveier, molekylære mål og ulike genetiske mutasjoner knyttet til utviklingen av lungekreft. Det er gjennomført flere studier på NCI-H460-celler for å undersøke disse faktorene grundig. En studie gjennomført i 2019 antydet at overekspressert nukleært ubikvitært kasein og substrat for syklinavhengige kinaser (NUCKS) er involvert i svulstcellevekst via regulering av PI3K/AKT-signalveien [1]. På samme måte benyttet en in vitro- og in vivo-studie NCI-H460-celler for å undersøke rollen til eIF4E-genet. Funnene viste at eIF4E-genet er involvert i vekst av lungekreft og angiogenese, og at det kan brukes som mål for utvikling av lovende legemidler mot lungekreft [2].
- Legemiddelutvikling: NCI-H460, en human lungekreftcellelinje, brukes mye i studier innen legemiddelutvikling. Forskere bruker disse cellene til å undersøke toksisiteten og effekten av nye legemiddelkandidater, målrettede terapier og behandlinger som hovedsakelig retter seg mot NCI-H460 KRAS-mutasjoner. I en studie utført av Haoyue Hu og kolleger i 2023 ble NCI-H460-celler brukt til å undersøke den krefthemmende effekten av legemidlet anlotinib. Resultatene viste at anlotinib delvis påvirket veksten av KRAS-muterte lungekreftceller ved å hemme MEK/ERK-signalkaskaden [3]. På samme måte ble en fenolforbindelse, karnoinsyre, undersøkt for antiproliferative og proapoptotiske egenskaper ved bruk av NCI-H460-celler [4].
- Legemiddelresistens: NCI-H460-cellelinjen er ideell for å studere mekanismen bak legemiddelresistens ved lungekreft. Forskere bruker disse cellene til å utvikle modeller for legemiddelresistens for å identifisere underliggende gener, molekylære faktorer og signalveier. For eksempel ble det i en studie utviklet pemetrexed, et multitargetet antifolatmiddel, mot resistente NCI-H460-celler for å studere de underliggende molekylære mekanismene for pemetrexed-resistens i ikke-småcellede lungekreftceller [5].
Kjøp NCI-H460-cellelinjen: Din inngangsport til lungekreftforskning
Forskningspublikasjoner om NCI-H460-celler
Her er noen interessante forskningspublikasjoner om lungekreftcellelinjen NCI-H460.
Et naturlig glukan fra svart bønne hemmer kreftcellers spredning via PI3K-Akt- og MAPK-signalveiene
Denne studien i tidsskriftet Molecules (2023) antydet at et naturlig α-1,6-glukan, BBWPW, fra svarte bønner hemmer spredningen av NCI-H460-celler ved å regulere PI3K/AKT/MAPK-signalveien.
Denne artikkelen i Phytomedicine (2019) undersøkte at dioscin-6′-O-acetat, et nytt naturlig stoff, utøver en antiproliferativ effekt på NCI-H460-lungekreftceller.
miRNA-425-5p fremmer veksten av lungekreft via PTEN/PI3K/AKT-signalaksen
Forskning publisert i BMC Pulmonary Medicine (2020) viser at mikroRNA-425-5p fremmer tumorigenese i lungekreft gjennom PTEN/PI3K/AKT-signalveien.
Denne artikkelen i Molecular Medicine Reports (2017) foreslo antitumorpotensialet og de underliggende mekanismene til quinalizarin-forbindelsen i NCI-H460 og andre lungekreftceller.
Denne studien i Food and Function (2019) belyser den potensielle antikrefteffekten av ekstrakt fra Eucalyptus globulus Labill. ved bruk av NCI-H460-celler. Funnene viste at planteekstraktet utøvde disse effektene ved å øke p53-ekspresjonen i NCI-H460-celler og modulere cellecyklusprofilen.
Ressurser for NCI-H460-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Her er noen nettressurser om NCI-H460-lungekreftcellene.
- Transfeksjon av NCI-H460-celler: Denne videoopplæringen er en trinnvis veiledning for transfeksjon av NCI-H460-celler med plasmid-DNA.
Følgende lenker inneholder viktig informasjon om cellekultur for H460-celler.
- NCI-H460-celler: Dette nettstedet gir viktig informasjon om NCI-H460-cellemedier, subkultivering, frysing og tining.
- Passering av NCI-H460-celler: Dette dokumentet vil veilede deg om passering og subkultivering av NCI-H460-cellelinjen. I tillegg vil det også hjelpe deg med å lære transfeksjonsprotokollen for NCI-H460-celler.
En nærmere titt på NCI-H460-cellelinjen: Vanlige spørsmål og innsikt
NCI-H460-cellelinjen stammer fra en pasient med storcellet lungekarsinom, noe som gjør den til en verdifull modell for studier av denne typen lungekreft.
NCI-H460-celler brukes til å undersøke lungekreftbiologi, utvikle nye behandlinger og vurdere effekten av potensielle legemidler. De kan også injiseres i immundefekte mus for å skape in vivo-tumormodeller for å studere tumorvekst og -utvikling.
Både NCI-H460- og A549-cellelinjene er avledet fra lungekarsinomer, men NCI-H460 representerer storcellet karsinom, mens A549 representerer adenokarsinom. Denne forskjellen i histologisk subtype påvirker cellelinjenes egenskaper og atferd.
Ja, NCI-H460-celler har tumorgenetisk potensial og kan implanteres i immundefekte mus for å skape xenograftmodeller, noe som gjør det enklere å studere storcellet lungekarsinom in vivo.
Kombinasjon av paklitaksel med andre forbindelser kan forsterke de cytotoksiske effektene på NCI-H460-celler, noe som potensielt kan forbedre behandlingsresultatene ved lungekreft.
Ja, NCI-H460-celler uttrykker hypoksantin-guanin-fosforibosyltransferase, som er viktig for nukleotidmetabolismen og celleproliferasjon.
NCI-H460-celler brukes ofte i kreftforskning og toksikologisk forskning for å studere tumorvekst, vurdere cytotoksiske effekter av stoffer og undersøke mekanismer for legemiddelresistens.
NCI-H460-celler uttrykker vanligvis nevrofilamenttriplettproteiner, som er involvert i opprettholdelsen av cytoskjelettstrukturen og kan spille en rolle i kreftcellenes migrasjon og invasjon.
Blant annet er κB-stien involvert i reguleringen av NCI-H460-cellenes spredning og overlevelse, noe som gir potensielle mål for behandling av lungekreft.
Ja, NCI-H460-celler brukes ofte som in vitro-modeller for å vurdere de cytotoksiske effektene av kjemoterapeutiske midler, inkludert paklitaksel og karboplatin, noe som bidrar til utviklingen av effektive kreftbehandlinger.
Referanser
- Hu, C., et al., NUCKS fremmer proliferasjon, migrasjon og invasjon av lungekreftceller gjennom Pi3k/Akt-signalveien. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, en ny eIF4E/eIF4G-interaksjonshemmer, hemmer veksten av lungekreftceller og angiogenese gjennom Ras/MNK/ERK/eIF4E-signalveien. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: s. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib har krefthemmende effekter på KRAS-muterte lungekreftceller ved å undertrykke MEK/ERK-signalveien. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579–3587.
- Corveloni, A.C., et al., Karnosinsyre viser antiproliferative og proapoptotiske effekter i tumorale NCI-H460- og ikke-tumorale IMR-90-lungeceller. Journal of Toxicology and Environmental Health, del A, 2020. 83(10): s. 412–421.
- Xu, Y.-L., et al., Etablering og karakterisering av pemetrexed-resistente NCI-H460/PMT-celler. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (tidligere Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): s. 731–739.