BxPC-3-cellelinje
BxPC-3 er en cellelinje fra menneskelig bukspyttkjertelkreft. Den brukes mye i kreftforskning. Forskere bruker hovedsakelig disse cellene til å studere biologien bak bukspyttkjertelkreft, identifisere terapeutiske mål og utvikle kreftmedisiner.
- Vekstmedium
- RPMI 1640-medium brukes til dyrking av BxPC-3-cellelinjen. Det tilsettes 10 % føtal bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/l NaHCO3 for å oppnå optimal cellevekst. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger per uke.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for BxPC-3-celler varierer mellom 48 og 60 timer.
- Veksttype
- BxPC-3 er en vedheftende cellelinje.
- Biosikkerhetsnivå
- BSL-3
- Tilgjengelig fra
- Cytion — Bestill BxPC-3
Denne artikkelen inneholder viktig informasjon om BxPC-3-cellelinjen som kan være til stor hjelp i arbeidet med den. Den vil hovedsakelig omhandle:
- Generell informasjon og opprinnelse til BxPC-3-cellelinjen
- Dyrking av BxPC-3-celler
- BxPC-3-cellelinjen: Fordeler og begrensninger
- Anvendelser av BxPC-3-celler i forskning
- Forskningspublikasjoner om BxPC-3-celler
- Ressurser for BxPC-3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
Generell informasjon og opprinnelse til BxPC-3-cellelinjen
Å kjenne til opprinnelsen til en cellelinje er avgjørende for dens anvendelighet i forskning. Kjennskap til dens egenskaper, inkludert morfologi, cellestørrelse og ploidi, gjør bruken enklere og mer praktisk. Her vil du lære om opprinnelsen og de generelle egenskapene til BxPC-3-celler: Hva er BxPC-3-celler? Hva er BxPC-3-cellelinjen? Hva er opprinnelsen til BxPC-3-cellelinjen? Hva er BxPC-3-morfologien?
- BxPC-3, humane bukspyttkjertelkreftceller, ble isolert fra en 61 år gammel europeisk kvinne med adenokarsinom i bukspyttkjertelen i 1986. Disse cellene ble bekreftet å være tumorigeniske selv etter at pasienten hadde gjennomgått flere stråle- og cellegiftbehandlinger. Dermed er den etablerte cellelinjen en uvurderlig modell for å studere utvikling og progresjon av kreft.
- BxPC-3-celler har en epitelcellelignende morfologi.
- Det modale kromosomtall for BxPC-3 er 59. Disse cellene har en homozygot deletesjon på kromosom 18q, som koder for SMAD4/DPC4-proteinet. Dessuten mangler cellelinjen den BxPC-3-kras-mutasjonen som er vanlig blant bukspyttkjertelsvulster. BxPC-3-braf-delesjon finnes også i disse bukspyttkjertelkreftcellene.
Hva er forskjellen mellom BxPC3 og PANC-1?
BxPC-3 PADC (duktalt adenokarsinom i bukspyttkjertelen) og PANC-1-celler er primære bukspyttkjertelkreftcellelinjer med epitelial morfologi. Her har førstnevnte celler mer epitel-lignende egenskaper, mens sistnevnte viser flere mesenkymale egenskaper [1].
Dyrking av BxPC-3-celler
BxPC-3-cellelinjen er mye brukt i kreftforskningslaboratorier. Du må kjenne til følgende viktige punkter for effektiv dyrking av denne bukspyttkjertelkreftcellelinjen. Du vil lære: Hva er doblingstiden for BxPC-3? Hvordan dyrker man BxPC-3-cellelinjen?
Viktige punkter for dyrking av BxPC-3-celler
Doblingstid for populasjonen:
Fordoblingstiden for BxPC-3-celler varierer mellom 48 og 60 timer.
Adherent eller i suspensjon:
BxPC-3 er en vedheftende cellelinje.
Delingsforhold:
BxPC-3-celler subkultiveres i et forhold på 1:2 til 1:4. Cellene vaskes med 1 x PBS og inkuberes med en passasjeløsning kalt accutase. Etter 8–10 minutter tilsettes ferskt medium til cellene, og cellene sentrifugeres. Pelletet resuspenderes igjen i medium, og cellene helles over i et nytt dyrkningskar for vekst.
Vekstmedium:
RPMI 1640-medium brukes til dyrking av BxPC-3-cellelinjen. Det tilsettes 10 % føtal bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/l NaHCO3 for å oppnå ideell cellevekst. Mediet bør skiftes 2 til 3 ganger per uke.
Vekstbetingelser:
BxPC-3-cellekulturer oppbevares i en fuktet inkubator ved 37 °C koblet til en 5 % CO2-tilførsel.
Oppbevaring:
Frosne celler oppbevares vanligvis ved temperaturer under -150 °C eller i dampfasen av flytende nitrogen for å beskytte cellenes levedyktighet.
Fryseprosess og medium:
CM-1 eller CM-ACF kan brukes til å fryse BxPC-3-cellekulturer. Det følges en langsom fryseprosess som kun tillater et temperaturfall på 1 °C for å forhindre at cellene utsettes for sjokk.
Tineprosess:
Frosne BxPC-3-celler tines i et forhåndsinnstilt vannbad ved 37 °C i 40 til 60 sekunder. Etter at det er igjen en liten isklump, tilsettes cellene ferskt dyrkningsmedium og sentrifugeres for å fjerne elementer fra frysemediet. Deretter resuspenderes cellepelleten, og cellene dispenseres i kolben for vekst.
Biosikkerhetsnivå:
BxPC-3-cellekulturer oppbevares i laboratorier med biosikkerhetsnivå 1.
BxPC-3-cellelinjen: Fordeler og begrensninger
BxPC-3 er en velkjent cellelinje for adenokarsinom i bukspyttkjertelen som har flere fordeler og begrensninger. De viktigste fordelene og ulempene ved cellelinjen er oppført her.
Fordeler
De viktigste fordelene med BxPC-3-celler er:
-
In vitro-modell for kreft i bukspyttkjertelen
BxPC-3-celler, avledet fra pasienter med adenokarsinom i bukspyttkjertelen, viser relevante egenskaper, noe som gjør dem til en egnet modell for å studere oppførselen til kreft i bukspyttkjertelen in vitro.
-
Tumorigenisk cellelinje
BxPC-3-celler har tumorigeniske egenskaper og kan danne svulster når de injiseres i nakne eller immunsvekkede mus. Disse svulstene ligner sterkt på primære adenokarsinom-svulster i bukspyttkjertelen, noe som gjør BxPC-3-xenotransplantatmodellen ideell for å studere kreftvekst og -progresjon.
Begrensninger
Begrensningene knyttet til BxPC-3-cellelinjen er:
-
Kryssforurensning
BxPC-3-cellelinjen medfører, som alle andre, en risiko for krysskontaminering. Forskere bør utvise forsiktighet og følge strenge protokoller for forebygging av kontaminering når de håndterer disse cellene.
-
Langsom vekst
BxPC-3-celler har en relativt langsom proliferasjonshastighet, med en doblingstid på mellom 48 og 60 timer. Denne egenskapen kan kreve lengre inkubasjonsperioder for spesifikke eksperimenter, noe som potensielt kan føre til forsinkelser i forskningsfremdriften.
Anvendelser av BxPC-3-celler i forskning
BxPC-3-celler har mange anvendelser innen kreftforskning. De vanligste anvendelsene er:
- Forskning på bukspyttkjertelkreft: BxPC-3-celler etterligner adenokarsinom i bukspyttkjertelen og brukes derfor til å utforske de genetiske og molekylære mekanismene som ligger til grunn for tumorutvikling og -vekst. I tillegg avdekker forskere nye biomarkører og terapeutiske mål ved hjelp av disse cellene. Videre uttrykker BxPC-3-celler i betydelig grad angiogene faktorer, dvs. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) og vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), noe som gjør dem egnet for å studere angiogenese. Angiogenese er en avgjørende prosess knyttet til kreftvekst og metastasering. En studie publisert i 2022 viste at overekspresjon av laminin-5 gamma-2 (LAMC2) i BxPC3 PDAC (pankreatisk duktal adenokarsinom) forsterker tumorigenesen ved å regulere BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR-signalveien [2].
- Legemiddelutvikling: BxPC-3-cellelinjen fungerer som en uvurderlig testmodell for kreftmedisiner. Forskere undersøker potensielle legemidlers cytotoksiske, antimetastatiske og apoptotiske effekter på BxPC3 PDAC. En studie utført av Alexandria Turner og kolleger i 2020 undersøkte de apoptotiske egenskapene til fruktekstrakter fra Elaeocarpus reticulatus i BxPC-3-celler fra bukspyttkjertelkreft [3]. Tilsvarende ble det i 2020 gjennomført forskning som fastslo kreftbekjempende potensialet til et metanolisk ekstrakt av en plante kalt Oxialis obtriangulata i BxPC-3-celler. Dessuten studerte forskerne også den cellulære mekanismen gjennom hvilken planteekstraktet utøvde terapeutiske effekter [4].
5. Forskningspublikasjoner om BxPC-3-celler
Denne delen inneholder en liste over noen av de mest siterte og interessante publikasjonene om BxPC-3-cellelinjen.
Licocoumarone induserer celledød i BxPC-3-adenokarsinomceller i bukspyttkjertelen ved å hemme DYRK1A
Denne publikasjonen i Chemico-Biological Interactions (2020) undersøkte de apoptotiske effektene av et naturprodukt, licocoumarone, på BxPC-3-celler fra bukspyttkjertelkreft.
Denne forskningsartikkelen ble publisert i Anticancer Research (2022). Studien foreslo at hydroksyklorokin forårsaker BxPC3-celledød ved å hemme BCL-XL-genet.
Denne forskningen ble publisert i 2020 i Journal of Cellular Biochemistry. Studien fastslår at et naturlig stoff, salidrosid, viser kreftbekjempende egenskaper i BxPC-3-celler ved å regulere HIF-1α (hypoksiinduserbar faktor) og LOXL2-signalkaskaden.
Denne artikkelen i Biomedicine & Pharmacotherapy antyder at ibrutinib kan brukes som en effektiv strålefølsomhetsforsterker hos pasienter med bukspyttkjertelkreft. In vitro-studier i BxPC-3-celler indikerer at det reduserer BxPC3 EGFR-fosforylering og uttrykk av pAKT og nedstrømsgener som oppreguleres av strålebehandling.
Chelidonin induserer apoptose via GADD45a-p53-regulering i humane bukspyttkjertelkreftceller
Denne studien i Integrative Cancer Therapies foreslo at et naturprodukt, chelidonin, utøver apoptotisk aktivitet i humane bukspyttkjertelceller BxPC-3 via regulering av BxPC3 p53- og GADD45a-signalering.
Ressurser for BxPC-3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer
BxPC-3-cellelinjen har mange interessante fordeler som gjør den egnet for forskningsbruk. Mange nettressurser om BxPC-3-cellelinjen omtaler protokoller for håndtering, vedlikehold og transfeksjon.
- BxPC3-transfeksjon: Denne videoen er en trinnvis veiledning for å lære transfeksjonsprotokollen for BxPC-3-celler.
Denne delen av artikkelen inneholder noen lenker som forklarer BxPC3-cellekulturprotokoller.
- BxPC3-cellekultur: Dette nettstedet vil hjelpe deg med å lære protokoller for subkultivering og håndtering av kryokonserverte og proliferative BxPC-3-kulturer.
Referanser
- Kim, Y., et al., Sammenlignende proteomisk profilering av cellelinjer for duktal adenokarsinom i bukspyttkjertelen. Mol Cells, 2014. 37(12): s. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overekspresjon av laminin-5 gamma-2 fremmer tumorigenese av duktal adenokarsinom i bukspyttkjertelen gjennom EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskaden. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): s. 362.
- Turner, A., et al., Fruktekstrakter fra Elaeocarpus reticulatus reduserer levedyktigheten og induserer apoptose i bukspyttkjertelkreftceller in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: s. 2073–2084.
- An, E.-J., et al., Kreftbekjempende potensial hos Oxialis obtriangulata i bukspyttkjertelkreftceller gjennom regulering av den ERK/Src/STAT3-medierte signalveien. Molecules, 2020. 25(10): s. 2301.