Gå til hjemmesiden

Publisert: 17. oktober 2023 | Sist oppdatert: mai 2026

A431-celler: Opprinnelse, dyrkingsbetingelser og forskningsanvendelser

A431 er en human epidermoid karsinomcellelinje avledet fra huden til en 85 år gammel kvinnelig pasient. Det er en av de mest brukte cellelinjene i biomedisinsk forskning, særlig innen kreftbiologi, immuno-onkologi, dermatologi og legemiddelutvikling. A431-celler overuttrykker epidermal vekstfaktorreseptoren (EGFR) — med omtrent 2–3 millioner reseptorer per celle, omtrent 20–50 ganger mer enn normale epitelceller — noe som gjør dem til gullstandarden som in vitro-modell for studier av EGFR-signalering og testing av EGFR-rettede terapier som cetuximab og erlotinib. A431-celler er eksklusivt tilgjengelige fra Cytion, din uavhengige europeiske cellebank.

📋 A431-cellelinje — Kortfattet informasjon
Art / Opprinnelse
Menneske (kvinne, 85 år gammel)
Vev
Hudepidermis (epidermoid karsinom)
Morfologi
Epitelial, vedheftende
Fordoblingstid
80–100 timer
Vekstmedium
DMEM + 10 % FBS
Biosikkerhetsnivå
BSL-1
Viktig egenskap
EGFR-overekspresjon (~2–3 millioner reseptorer/celle)
Viktige biomarkører
EGFR (amplifisert), TP53 (mutant), KRAS (villtype), PTEN (uttrykt)

A431-celler: Generelle egenskaper og opprinnelse

Denne delen omhandler de viktigste biologiske egenskapene til A431-cellelinjen – inkludert opprinnelse, morfologi, karyotype og EGFR-overekspresjon, som gjør den unik og verdifull for forskning.

A431-cellelinjens opprinnelse og historie

  • A431, en human hudkreftcellelinje, ble hentet fra epidermis hos en 85 år gammel kvinnelig pasient med epidermoidkarsinom [1]. Den ble etablert av D.J. Giard et al., som utviklet flere andre cellelinjer fra solide svulster.
  • Cellelinjen har blitt distribuert i stor skala og validert av uavhengige cellebanker over hele verden, inkludert Cytion, som en pålitelig og reproduserbar forskningsmodell.

A431 Morfologi og karyotype

  • A-431-celler har epitelial morfologi. De aggregerer og danner celleklynger under standard dyrkningsbetingelser.
  • A431-hudkreftcellelinjen er hypertriploid. Det modale kromosomtall er 74, som forekommer i omtrent 36 % av cellene. Høyere ploidier forekommer også i rundt 1 % av cellepopulasjonen.

EGFR-ekspresjon i A431-celler

Overekspresjon av EGFR er det karakteristiske trekket ved A431-celler og den viktigste årsaken til deres utbredte bruk. A431-celler bærer en genomisk amplifikasjon av EGFR-genlokuset, noe som resulterer i omtrent 2–3 millioner EGFR-reseptorer per celle — 20 til 50 ganger høyere enn normale epitelceller. Dette gjør A431 til gullstandarden for positiv kontroll for:

  • Validering av EGFR-antistoff ved hjelp av Western blot, strømningscytometri og immunfluorescens
  • Testing av EGFR-rettede monoklonale antistoffer som cetuximab og panitumumab
  • Evaluering av EGFR-tyrosinkinasehemmere (TKI-er) som erlotinib, gefitinib og afatinib
  • Studering av nedstrøms signalveier, inkludert PI3K/AKT/mTOR og RAS/MAPK/ERK

Svulst som vokser under huden og sprer seg til vevet under — illustrasjon av A431-xenotransplantatmodell.

► Videobeskrivelse (transkripsjon)

Denne animasjonen viser veksten av A431-hudkreftceller (epidermoidkarsinom) under overflaten av menneskelig hudvev. Svulstmassen utvider seg og infiltrerer de omkringliggende hudlagene, noe som illustrerer den invasive naturen til denne kreftcellelinjen og dens nytteverdi som en in vivo-xenotransplantasjonsmodell.

A431-cellelinje: Informasjon om dyrking

Å kjenne til en cellelinjes dyrkingskrav gjør håndteringen problemfri. Dette avsnittet omhandler doblingstid, vekstmedium, passering, kryokonservering og biosikkerhetskrav for A431-cellelinjen.

Viktige punkter for dyrking av A431-celler

Fordoblingstid:

Doblingstiden for A431-celler varierer fra 80 til 100 timer.

Adherent eller i suspensjon:

A431 er en vedheftende cellelinje.

Utsåingstetthet:

1 x 104 celler/cm2 er ideelt for A431-cellelinjen. Cellene når konfluens på omtrent 4 dager ved denne tettheten. Adhærente celler vaskes med PBS (1×) og inkuberes med Accutase-passasjeløsning, deretter resuspenderes de i dyrkningsmedium, sentrifugeres og dispenseres i nye kolber.

Vekstmedium:

DMEM-medium tilsatt 10 % føtalt bovint serum (FBS), 4,5 g/l glukose, 1,0 mM natriumpyruvat, 1,5 g/l NaHCO3 og 4 mM L-glutamin. Mediet bør skiftes ut hver 2.–3. dag.

Vekstbetingelser:

A431-kreftceller dyrkes i en fuktet inkubator med 5 % CO ved 37 °C.

Oppbevaring:

Oppbevares i en elektrisk fryser eller i væskenitrogen ved under −150 °C for å beskytte cellenes levedyktighet.

Fryseprosess og medium:

CM-1 eller CM-ACF er de anbefalte frysemediene for A431-celler. Bruk en kontrollert, langsom frysemetode (−1 °C/min).

Tineprosess:

Tin frosne A431-celler raskt i et vannbad ved 37 °C (40–60 sekunder). Når det gjenstår en liten isklump, tilsett dyrkningsmedium og sentrifuger. Resuspender de høstede cellene og overfør til dyrkningsflasker.

Biosikkerhetsnivå:

Biosikkerhetsnivå 1 (BSL-1) anbefales for håndtering av A431-kulturer.

A431 epidermoid carcinoma cells forming spheroids at different densities

A431-epidermoidkarsinomceller som danner sfæroider ved ulike celletettheter.


Bestill A431-celler til din forskning
Sertifisert kvalitet • ISO-sertifisert • Rask levering over hele verden

Fordeler og ulemper ved A431-cellelinjen

A431-cellelinjen har særpreg som gjør den både svært nyttig og kontekstuelt begrenset. Her er en balansert oppsummering.

Fordeler

De viktigste fordelene med A431-kreftcellelinjen er:

Overekspresjon av EGFR

A431-celler overuttrykker EGFR med 2–3 millioner reseptorer per celle, og fungerer som gullstandarden for positiv kontroll i studier av EGFR-signalering og validering av anti-EGFR-medisiner (cetuximab, erlotinib, gefitinib).

Tumorigenisitet

A431-celler er tumorigeniske og danner lett svulster hos immunsvekkede mus, noe som gjør dem til et pålitelig verktøy for xenotransplantasjonskreftmodeller for å studere svulstvekstdynamikk og vurdere nye kreftbehandlinger in vivo.

Godt karakterisert

Tiår med publisert forskning betyr at A431-celler er grundig karakterisert på genomisk, proteomisk og fenotypisk nivå, noe som gir et solid vitenskapelig grunnlag for eksperimentell utforming.

3D-sfæroiddannelse

A431-celler danner lett kompakte 3D-sfæroider under betingelser med svært lav vedheft, noe som gjør dem kompatible med moderne organoid- og sfæroide-screeningplattformer for studier av legemiddelpenetrasjon og -effekt.

Ulemper

Ulempene ved A431-celler er:

Genetiske avvik

A431 er en kreftcellelinje med akkumulerte genetiske mutasjoner og kromosomale forandringer (hypertriploid, modalt antall 74) som kanskje ikke fullt ut gjenspeiler de opprinnelige tumoregenskapene.

Risiko for mikrobiell kontaminering

A431 er utsatt for bakteriell kontaminering. Det er avgjørende å opprettholde strenge aseptiske rutiner og rutinemessig mykoplasmatesting for å oppnå pålitelige resultater.

Ikke representativt for alle EGFR-tumorer

Siden EGFR-ekspresjonen i A431 er drevet av genamplifikasjon snarere enn mutasjon (som ved lungekreft), kan funnene ikke nødvendigvis overføres direkte til EGFR-mutante svulster, slik som ikke-småcellet lungekreft (NSCLC).

Forskningsanvendelser av A431-celler

A431-cellelinjen brukes i stor utstrekning innenfor flere forskningsdisipliner. Den unike EGFR-biologien, tumorigenisiteten og det godt karakteriserte genomet gjør den til en av de mest allsidige humane kreftcellelinjene som finnes.

  • Kreftbiologi: A431 er et kraftig verktøy for å undersøke cellulære og molekylære mekanismer som driver kreftvekst, metastase og invasjon. Studier har kartlagt PI3K/AKT/mTOR- og RAS/MAPK/ERK-signalveiene i denne cellelinjen, og det er vist at hemming av disse induserer apoptose i A431-hudtumorceller [2, 3].
  • Testing av EGFR-rettet terapi: A431-celler er referansestandarden for evaluering av anti-EGFR-terapeutika — monoklonale antistoffer (cetuximab, panitumumab) og småmolekylære TKI-er (erlotinib, gefitinib, afatinib, osimertinib).
  • Legemiddeltesting og evaluering: A431-celler brukes til å evaluere nye kandidater til kreftmedisiner. En studie fra 2022 av Rahim et al. demonstrerte potente antiproliferative effekter av biogent syntetiserte sølvnano-partikler fra Alstonia angustiloba på A431-celler [4].
  • Tumor-xenotransplantasjonsmodeller: A431-celler er tumorigeniske i immunsvake mus, noe som muliggjør subkutane og ortotopiske xenotransplantasjonsmodeller for in vivo-effektstudier. Lim et al. brukte A431-avledede xenotransplantater til å evaluere de strålesensibiliserende effektene av eksogent EGF in vivo [5].
  • Hudtoksisitet og dermatologisk forskning: A431-celler brukes mye av farmasøytiske og kosmetiske selskaper for å vurdere dermal toksisitet, hudpenetrasjon og sikkerhetsprofiler for topisk påførte forbindelser.
  • 3D-sfæroid- og organoidmodeller: A431-celler danner kompakte 3D-sfæroider under betingelser med ultralav vedheft eller hengende dråpe, noe som muliggjør mer fysiologisk relevante studier av legemiddelpenetrasjon og -resistens.
  • Validering av EGFR-antistoff: På grunn av sin ekstreme EGFR-tetthet er A431-celler standard positiv kontroll for validering av anti-EGFR-antistoffer i Western blot, immunfluorescens, IHC og strømningscytometri.

A431 sammenlignet med andre hudkreftcellelinjer

Å velge riktig cellelinje er avgjørende for eksperimentell validitet. Her er en sammenligning av A431 med andre vanlige hud- og plateepitelkreftcellelinjer:

Egenskap A431 A375 (melanom) SCC-25 (oral SCC) HaCaT (keratinocytter)
KrefttypeEpidermoidkarsinomMalignt melanomOral plateepitelkarsinomImmortaliserte keratinocytter
EGFR-ekspresjon+++ (~2–3M/celle)+ (lav)++ (moderat)++ (moderat)
TumorigenisitetJaJaJaNei
MorfologiEpitelial, vedheftendeSpindelformet, vedheftendeEpitelial, vedheftendeEpitelial, vedheftende
BSL1111
Primær anvendelseEGFR-forskning, testing av kreftmedisinerMelanombiologi, BRAF-hemmereHode- og nakkekreft, strålingsstudierHudbiologi, barrierefunksjon

Forskningspublikasjoner om A431-celler

Her er noen viktige fagfellevurderte publikasjoner som omhandler hudkreftcellelinjen A431.

Effekten av biopolymeriske PVA-AuNPs og PCL-kurkumin-ladede elektrospunne nanofibre og deres antikreftaktivitet mot A431-hudkreftcellelinjen

Publisert i Materials Today Communications (2020). Evaluerte kreftbekjempende potensialet til poly-ε-kaprolakton-nanofibre lastet med curcumin og polyvinylalkohol-AuNPs mot A431-kreftceller.

miRNA-221 fremmer utviklingen av kutan plateepitelkarsinom ved å påvirke PTEN

Publisert i Cellular & Molecular Biology Letters (2019). Forslag om at mikroRNA-221 spiller en onkogen rolle i kutan plateepitelkarsinom ved å målrette seg mot PTEN-tumorsuppressorgenet.

Soppvinkristin fra Eutypella spp-CrP14 isolert fra Catharanthus roseus induserer apoptose i den humane plateepitelkarsinomcellelinjen A431

Publisert i BMC Complementary Medicine and Therapies (2016). Viste at vinkristin fra soppen Eutypella spp–CrP14 induserer apoptose i A431-celler.

Overekspresjon av CDC42SE1 i A431-celler reduserte celleproliferasjonen ved å hemme Akt-signalveien

Publisert i Cells (2019). Identifiserte CDC42SE1 som en potensiell biomarkør for utvikling av hudkreft, der nedregulering av dette proteinet fremmer tumorutvikling i A431-celler.

Metformin hemmer proliferasjonen av A431-celler ved å modulere PI3K/Akt-signalveien

Publisert i Experimental and Therapeutic Medicine (2015). Påviste at metformin undertrykker A431-proliferasjon ved å regulere PI3K/Akt-signalveien.

Ressurser for A431-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer

Følgende ressurser gir praktisk veiledning for arbeid med A431-celler i laboratoriet.

Vi har oppdaget at du befinner deg i et annet land eller bruker et annet språk i nettleseren enn det som er valgt for øyeblikket. Vil du godta de foreslåtte innstillingene?

Lukk