T98G šūnu līnija
T98G šūnas veido cilvēka glioblastomas šūnu līniju, ko parasti izmanto biomedicīniskajos pētījumos. Šīs šūnas tiek izmantotas galvenokārt smadzeņu vēža pētījumos, lai izpētītu svarīgākās šūnas un molekulāros faktorus, kas veicina šo slimību. Turklāt tās palīdz pētniekiem atlasīt un testēt jaunus pretvēža medikamentus, kas var veicināt zāļu attīstību.
T98G šūnu līnijas vispārējās īpašības un izcelsme
Šī raksta sadaļa palīdzēs jums iepazīties ar T98G šūnu līnijas pamatīpašībām. Tajā tiks sniegta informācija par šūnu līnijas izcelsmi, morfoloģiju, izmēru un ploidiju. Turklāt tajā tiks sniegta vispusīga atbilde uz šādiem jautājumiem: Kas ir T98G šūnas? Kāda veida šūnas ir T98G? No kurienes cēlusies T98G? Kādas ir T98G šūnu līnijas īpašības? Kas ir glioblastomas šūnu līnija T98G U87?
- T98G šūnu līniju izveidoja GH Stein. To veido fibroblastu tipa šūnas, kas iegūtas no 61 gadu veca kaukāzieša vīrieša smadzeņu audiem, kuram bija multiformā glioblastoma [1].
- T98G šūnas nav tumorogēnas; tās neizraisa audzējus, ja tiek injicētas kailām pelēm. Tomēr tām ir tendence vairoties, ja šūnu kultūrā tiek nodrošināta atbilstoša fiksācija.
- Šīm šūnām ir fibroblastu līdzīga morfoloģija.
- Glioblastomas šūnu līnija T98G raksturojas ar hiperpentaploīdiju. Modālais hromosomu skaits svārstās no 128 līdz 132. 1,39 % šūnu populācijas var būt novērojama augstāka ploidija.
T98 pret T98G
Abas ir cilvēka glioblastomas šūnu līnijas, un tām ir līdzīga izcelsme. Vienīgā atšķirība starp šīm šūnu līnijām ir hromosomu skaits. T98G hromosomu skaits ir gandrīz divreiz lielāks nekā T98. Tāpēc T98G ir pazīstama kā T98 poliploīdais variants.
T98G pret U87
U87 un T98G ir abas cilvēka glioblastomas šūnu līnijas, kuras izmanto smadzeņu vēža pētījumos. U87 izrāda agresīvāku fenotipu salīdzinājumā ar T98G GBM.
2. Informācija par T98G šūnu līnijas kultivēšanu
Pirms sākt darbu ar šūnu līniju, ir ļoti svarīgi iepazīties ar informāciju par tās kultivēšanu. Tas palīdzēs jums laboratorijā viegli un ērti rīkoties ar šo šūnu līniju. Jums jāzina: kāds ir T98G šūnu līnijas dubultošanās laiks? Kāda barotne ir vispiemērotākā T98G šūnām? Kādas ir T98G šūnu augšanas īpašības? Kāds ir T98G šūnu sēšanas blīvums? Kā sasaldēt T98G šūnas?
Galvenie punkti T98G šūnu kultivēšanā
Dubultošanās laiks:
Aptuvenais T98G šūnu dubultošanās laiks ir 40 stundas. Tas var atšķirties atkarībā no kultivēšanas apstākļiem.
Pielipušas vai suspensijā:
T98G šūnas ir adhezīvas. Tās piestiprinās pie kultivēšanas trauku dibena un veido monoslāņus.
Dalīšanas attiecība:
T98G šūnas tiek subkultivētas sadalīšanas attiecībā no 1:2 līdz 1:5. Šim nolūkam šūnas vispirms mazgā ar 1X PBS buferu, pēc tam inkubē ar pārnesšanas šķīdumu (Accutase) 8–10 minūtes istabas temperatūrā. Pēc inkubācijas atdalītās šūnas pievieno svaigai augšanas videi un centrifugē. Pēc tam savākto šūnu nogulsni rūpīgi atkārtoti suspendē, un šūnas izdalītas kultūras kolbā, kas satur augšanas vidi.
Augšanas vide:
T98G šūnu kultivēšanai izmanto EMEM barotni, kas satur 10 % liellopu augļa serumu, 2 mM L-glutamīnu, 2,2 g/l NaHCO₃ un EBSS. Barotni jāmaina 3–4 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:
T98G šūnas tiek uzturētas mitrinātā inkubatorā, kas iestatīts uz 37 °C un pieslēgts CO₂ padevei.
Uzglabāšana:
Sasaldētas šūnas var uzglabāt temperatūrā zem -150 °C vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē, lai ilgtermiņā saglabātu šūnu dzīvotspēju.
Sasaldēšanas process un barotne:
T98G šūnas ieteicams sasaldēt CM-1 vai CM-ACF šūnu sasaldēšanas vidē. Šim nolūkam ieteicams lēns sasaldēšanas process, kas ļauj temperatūrai pazemināties tikai par 1 °C minūtē. Tas novērš šoku šūnām un saglabā to dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:
Sasaldētās šūnas maigi atkausē, ievietojot tās iepriekš uzsildītā ūdens vannā 37 grādu temperatūrā uz 40 līdz 60 sekundēm. Pēc tam tās atkārtoti suspendē svaigā augšanas vidē un pārnes uz jaunu kolbu. Pēc 24 stundu inkubācijas vidi nomaina, lai izvadītu sasaldēšanas vides sastāvdaļas.
Bioloģiskās drošības līmenis:
T98G kultūras tiek uzturētas 1. bioloģiskās drošības laboratorijā.
Publicēts: 2023 | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs
- T98G šūnu līnija: priekšrocības un trūkumi
- T98G šūnu pielietojumi
- 2. Informācija par T98G šūnu līnijas kultivēšanu
- Galvenie punkti T98G šūnu kultivēšanā
- T98G šūnu līnijas vispārējās īpašības un izcelsme
- 5. Zinātniskie raksti par T98G šūnām
- Resursi par T98G šūnām: protokoli, video un citi materiāli
- Bieži uzdotie jautājumi
T98G šūnu līnija: priekšrocības un trūkumi
T98G ir plaši izmantota cilvēka izcelsmes glioblastomas šūnu līnija. Tai ir vairākas priekšrocības un trūkumi, kas to atšķir no citām. Šajā raksta sadaļā ir aprakstīti daži nozīmīgākie no tiem.
Priekšrocības
T98G šūnu priekšrocības ir šādas:
-
Labi raksturota
Labi izstrādāta un labi raksturota šūnu līnija. Plaši pētīta un dokumentēta literatūrā.
-
In vitro modelis
Atspoguļo glioblastomas, visagresīvākā smadzeņu audzēja, raksturīgās īpašības. Vērtīgs instruments slimības izpētei, bioloģijas izpratnei un ārstēšanas metožu izstrādei.
Trūkumi
Ar T98G šūnām saistītie trūkumi ir šādi:
-
Heterogenitāte
Ģenētiskā heterogenitāte T98G šūnu populācijā var izraisīt eksperimentālo rezultātu nekonsekvenci un apgrūtināt datu interpretāciju.
T98G šūnu pielietojumi
T98G šūnu līnija ir vērtīgs instruments, ko izmanto vēža pētniecībā. Šeit ir uzskaitīti daži no galvenajiem T98G šūnu izmantošanas veidiem pētniecībā:
- Vēža pētniecība: T98G šūnu līnija ir vērtīgs instruments glioblastomas audzēju bioloģijas izpētei. Šīs šūnas galvenokārt izmanto, lai pētītu sarežģītos molekulāros mehānismus, kas ir glioblastomas attīstības un progresēšanas pamatā. Turklāt tās izmanto, lai identificētu ģenētiskās mutācijas, kas veicina audzēja augšanu, kā arī citus vēža šūnu mehānismus. Jangs Čens (Yang Chen) un kolēģi veica pētījumus ar šīm šūnām un atklāja, ka miRNA-21 pārmērīgā ekspresija samazina PDCD4 (programmētās šūnu nāves proteīna 4) līmeni T98G šūnās. Tas izraisa PDCD4-mediētās T98G šūnu apoptozes inhibīciju. Tādējādi pētījums liecina, ka miRNA-21 varētu būt potenciāls mērķis terapiju izstrādei [2]. Līdzīgi šim pētījumam Fanqiang Kong un kolēģi pētīja mikroRNA-15a lomu T98G glioblastomas šūnu proliferācijā un invāzijā. Viņi atklāja, ka miRNA-15a-5p veicina šos šūnu procesus, iedarbojoties uz šūnu adhezijas molekulu 1 (CADM1) [3].
- Zāļu testēšana un terapiju izstrāde: T98G kalpo kā lielisks glioblastomas in vitro modelis jaunu zāļu skrīningam un nodrošina platformu potenciālo vēža terapiju efektivitātes novērtēšanai. Pētnieki arī testē dažādus savienojumus un terapijas, lai identificētu un atklātu zāļu kandidātus ar visdaudzsološākajām pretglioblastomas īpašībām. Tas veicina jaunu zāļu un ārstēšanas stratēģiju izstrādi, dodot cerību glioblastomas pacientiem. Šādā pētījumā tika izpētīts dabiskā savienojuma, ko sauc par korilagīnu, pretvēža potenciāls temozolomīdam rezistentajā T98G GBM šūnu līnijā. Pētījuma rezultāti liecināja, ka korilagīns kombinācijā ar temozolomīdu šūnās izraisa spēcīgāku antiproliferatīvu un antiapoptotisku iedarbību [4].
5. Zinātniskās publikācijas par T98G šūnām
Tālāk ir uzskaitītas dažas interesantas un bieži citētas pētnieciskās publikācijas par T98G, glioblastomas šūnu līniju.
REV-ERB agonista SR9009 ķīmijterapeitiskā iedarbība uz cilvēka glioblastomas T98G šūnām
Šajā publikācijā žurnālā „ASN Neuro“ (2019) tika pētīta REV-ERB agonista SR9009 pretvēža iedarbība uz T98G glioblastomas šūnām.
Šajā pētniecības rakstā, kas publicēts žurnālā „Neurochemical Research“ (2019), tika izvirzīts pieņēmums, ka nātrija butirāts un kvercetīns sinerģiski inhibē aizsargājošo autofāgiju T98G šūnās un palielina šūnu apoptozi.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Genes“ (2023), T98G hipoksijai pielāgotajai šūnu līnijai tika veikta RNS sekvencēšana, un tika ierosināts, ka IRE1 (inozitola atkarīgais enzīms 1) ir daudzsološs terapeitiskais mērķis.
MikroRNA-548c-3p inhibē T98G gliomas šūnu proliferāciju un migrāciju, samazinot c-Myb ekspresiju
Šis raksts tika publicēts žurnālā „Oncology Letters“ (2017). Pētījumā tika noskaidrots, ka miRNA-548c-3p iedarbojas uz T98G onkogēniem (c-Myb), lai inhibētu T98G šūnu proliferāciju un migrāciju.
Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā „Journal of Medicinal Plants Research“ (2011), tika izvirzīts pieņēmums, ka Dracocephalum tanguticum hloroforma ekstrakts izraisa antiproliferatīvu iedarbību uz T98G šūnām, modulējot kaspāzes-3, Bax un P21 gēnus.
Resursi par T98G šūnām: protokoli, video un citi materiāli
Šeit ir minēti pieejamie resursi, kuros aprakstīti T98G šūnu kultivēšanas un transfekcijas protokoli.
- T98G transfekcija: Šajā pētniecības rakstā ir iekļauts T98G transfekcijas protokols. Tajā īsi izskaidrots šīs metodes darbības princips un nepieciešamie reaģenti.
Šīs saites ļoti palīdzēs jums apgūt T98G šūnu kultivēšanas protokolu un atvieglos darbu ar tām.
- T98G šūnas: Šajā tīmekļa vietnē ir iekļauta būtiska informācija par T98G šūnu kultivēšanas protokoliem, tostarp par subkultivēšanu un proliferatīvo un kriokonservēto kultūru apstrādi. Turklāt tā palīdzēs jums iepazīties ar šūnu augšanas barotnēm, apstākļiem un dubultošanās laiku.
Atsauces
- Haehl, E., Endotēlija šūnu izraisīta radiorezistence glioblastomā. 2021, Tībingenes Universitāte.
- Chen, Y., et al., MikroRNA-21 samazina audzēja supresora PDCD4 ekspresiju cilvēka glioblastomas šūnā T98G. „Cancer Letters”, 2008. 272(2): 197.–205. lpp.
- Kong, F., et al., MikroRNA‑15a‑5p veicina T98G glioblastomas šūnu proliferāciju un invāziju, iedarbojoties uz šūnu adhezijas molekulu 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): 1.–1. lpp.
- Milani, R., et al., „Corilagin izraisa augstu apoptozes līmeni temozolomīdam rezistentajā T98G gliomas šūnu līnijā”. Oncol Res, 2018. 26(9): 1307.–1315. lpp.