NCI-H460 šūnas — plaušu vēža pētījumu virzība, izmantojot NCI-H460 sniegtās atziņas
NCI-H460 ir no cilvēka iegūtas nesīkšūnu plaušu vēža šūnas, kuras parasti izmanto plaušu karcinomas un toksikoloģijas pētījumos. Šī šūnu līnija ir vērtīgs instruments dažādu vēža bioloģijas aspektu izpētei, kas saistīti ar audzēja attīstību, augšanu un rezistenci pret zālēm. Turklāt NCI-H460 šūnas ir piemērots modelis pretvēža reaģentu izstrādei.
- Augšanas barotne
- Kā NCI-H460 kultivēšanas barotni izmanto RPMI 1640. To papildina ar 10 % liellopu embriju serumu, 2,1 mM stabilu glutamīnu un 2,0 g/l NaHCO3. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
- Dubultošanās laiks
- NCI-H460 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 33 stundas.
- Augšanas veids
- NCI-H460 plaušu vēža šūnas ir adhezīvas.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- BSL-4
- Piegādātājs
- Cytion — Pasūtīt NCI-H460
NCI-H460 šūnas: izcelsme un vispārējās īpašības
Šūnu līnijas izcelsme un vispārējās īpašības lielā mērā ietekmē tās izmantošanu pētniecībā. Šī raksta sadaļa palīdzēs jums iepazīt NCI-H460 plaušu vēža šūnu izcelsmi un galvenās īpašības. Jūs uzzināsiet: Kas ir NCI-H460 šūnas? Kāds ir NCI-H460 šūnu līnijas tips? Kāda ir NCI-H460 morfoloģija?
- NCI-H460 šūnu līnija ir iegūta no pleiras izsvīduma, kas tika iegūts no Eiropas vīrieša, kuram bija lielšūnu plaušu vēzis. To 1982. gadā izveidoja A.F. Gazdar un kolēģi.
- NCI-H460 plaušu vēža šūnām piemīt epitēlija morfoloģija.
- NCI-H460 ir tumorogēna šūnu līnija ar hipotriploīdu kariotipu. Šo šūnu modālais hromosomu skaits ir 57. NCI-H460 šūnām ir arī 58 modālie hromosomu skaiti, kas sastopami līdzīgā proporcijā.
- Šīm plaušu vēža šūnām ir daudzas NCI-H460 mutācijas, kas raksturīgas nesīkšūnu plaušu audzējiem, piemēram, NCI-H460 KRAS mutācija, kas ir saistīta ar šūnu proliferāciju, augšanu, invāziju un metastāzēm.
Informācija par NCI-H460 šūnu kultivēšanu
Lai pareizi rīkotos ar NCI-H460 šūnu līniju un nodrošinātu tās uzturēšanu, jums jāzina šādi galvenie punkti. Šeit ir sniegta informācija par NCI-H460 šūnu dubultošanās laiku, NCI-H460 kultivēšanas vidi un pamata šūnu kultivēšanas procedūrām attiecībā uz NCI-H460 plaušu vēža šūnām.
Galvenie punkti par NCI-H460 šūnu kultivēšanu
Dubultošanās laiks:
NCI-H460 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 33 stundas.
Adhērentas vai suspensijā:
NCI-H460 plaušu vēža šūnas ir adhezīvas.
Subkultivācijas attiecība:
NCI-H460 šūnu līnijai ieteicamais sadalīšanas koeficients ir 1:2 un 1:4. Pēc vecā barotnes noņemšanas adhezīvās šūnas noskalo ar 1x fosfāta buferšķīdumu. Pēc tam šūnas inkubē ar Accutase pārnesšanas šķīdumu 8–10 minūtes istabas temperatūrā. Disociētās šūnas atkārtoti suspendē kultūras barotnē un centrifugē. Savāktās šūnas atkārtoti suspendē un ielej jaunā kolbā kultivēšanai.
Augšanas barotne:
Kā NCI-H460 kultivēšanas barotni izmanto RPMI 1640. To papildina ar 10 % liellopu embriju serumu, 2,1 mM stabilu glutamīnu un 2,0 g/l NaHCO3. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
Audzēšanas apstākļi:
NCI-H460 kultūras tiek uzturētas 37 °C temperatūrā mitrinātā inkubatorā ar nepārtrauktu 5 % CO₂ pievadi.
Uzglabāšana:
NCI-H460 plaušu vēža šūnas var ilgtermiņā uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai temperatūrā zem -150 °C elektriskā ultra-zemas temperatūras saldētavā.
Sasaldēšanas process un barotne:
NCI-H460 šūnu sasaldēšanai un uzglabāšanai izmanto CM-1 vai CM-ACF barotni. Lai maksimāli saglabātu šūnu dzīvotspēju, ieteicams izmantot lēnas sasaldēšanas metodi.
Atkausēšanas process:
Sasaldētās NCI-H460 šūnas atkausē iepriekš uzsildītā ūdens vannā (37 °C temperatūrā) 40–60 sekundes, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Atkausētajām šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē, lai atdalītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Savākto šūnu nogulsni atkārtoti suspendē, un šūnas pārnes jaunās kolbās, kurās ir barotne augšanai. NCI-H460 šūnām var būt nepieciešamas gandrīz 24 stundas, lai piestiprinātos pie kolbas virsmas.
Bioloģiskās drošības līmenis:
Ar NCI-H460 plaušu vēža šūnām strādā un tās uztur bioloģiskās drošības 1. līmeņa laboratorijās.
Publicēts: 2023 | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs
NCI-H460 šūnu priekšrocības un trūkumi
NCI-H460 ir plaši izmantota šūnu līnija plaušu vēža pētījumos. Šajā sadaļā tiks aplūkotas vispārējās priekšrocības un trūkumi, kas saistīti ar NCI-H460 plaušu vēža šūnām.
Priekšrocības
NCI-H460 nesīkšūnu plaušu vēža šūnu līnijas priekšrocības ir šādas:
-
Audzēja izcelsme
NCI-H460 šūnu līnija tika iegūta no pacienta ar lielšūnu plaušu karcinomu, tādējādi pārstāvot šo konkrēto plaušu vēža veidu. Tās tiek izmantotas kā modelis, lai pētītu plaušu vēža bioloģiju un izstrādātu jaunus un efektīvus ārstēšanas veidus. NCI-H460 šūnām piemīt tumorogēns potenciāls, un tās var injicēt imūndeficītiem pelēm, lai izveidotu in vivo audzēju modeļus audzēja augšanas, attīstības un potenciālo zāļu efektivitātes pētīšanai.
-
Augsts proliferācijas ātrums
NCI-H460 šūnas izrāda augstākus augšanas rādītājus nekā citas nesīkšūnu plaušu vēža šūnu līnijas, piemēram, A549. Šī priekšrocība palielina to pieejamību un palīdz pētniekiem veikt reproducējamus un laika ziņā jutīgus eksperimentus.
Trūkumi
Ar NCI-H460 plaušu vēža šūnām saistītie trūkumi ir šādi:
-
Homogenitāte
NCI-H460 šūnas ir homogēnas, jo tās tika iegūtas no viena pacienta audzēja. Tāpēc tām parasti trūkst sarežģītības un heterogenitātes, kas novērojama pacientu audzējos.
NCI-H460 šūnu izmantošana pētniecībā
NCI-H460 plaušu vēža šūnas plaši izmanto pētījumos, kas saistīti ar plaušu karcinomu. Šeit ir daži no svarīgākajiem NCI-H460 šūnu izmantošanas veidiem pētniecībā:
- Plaušu vēža pētījumi: NCI-H460 šūnas ir nenovērtējams modelis, lai pētītu šūnu un molekulāros mehānismus, kas iesaistīti audzēja attīstībā, augšanā un metastāzē. Turklāt tās tiek izmantotas, lai pētītu būtiskos signālu pārraides ceļus, molekulāros mērķus un dažādas ģenētiskās mutācijas, kas saistītas ar plaušu vēža progresēšanu. Lai efektīvi izpētītu šos faktorus, ir veikti vairāki pētījumi ar NCI-H460 šūnām. 2019. gadā veiktajā pētījumā tika izvirzīts pieņēmums, ka pārmērīgi ekspresētais kodola ubikvitārais kazeīns un ciklīna atkarīgo kināžu substrāts (NUCKS) ir iesaistīts audzēja šūnu augšanā, regulējot PI3K/AKT signālceļu [1]. Līdzīgi, in vitro un in vivo pētījumā, izmantojot NCI-H460 šūnas, tika pētīta eIF4E gēna loma. Rezultāti atklāja, ka eIF4E gēns ir iesaistīts plaušu karcinomas augšanā un angiogēnēzē, un to var izmantot kā mērķi, lai izstrādātu daudzsološus pretplaušu vēža medikamentus [2].
- Zāļu atklāšana un izstrāde: cilvēka plaušu vēža šūnu līnija NCI-H460 tiek plaši izmantota zāļu atklāšanas un izstrādes pētījumos. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai izpētītu jauno zāļu kandidātu, mērķtiecīgo terapiju un ārstēšanas metožu, kas galvenokārt vērstas pret NCI-H460 KRAS mutācijām, toksicitāti un efektivitāti. Pētījumā, ko 2023. gadā veica Haoyue Hu un kolēģi, tika izmantotas NCI-H460 šūnas, lai pētītu zāļu anlotiniba pretvēža iedarbību. Rezultāti liecināja, ka anlotinibs daļēji ietekmēja KRAS mutāciju nesošo plaušu vēža šūnu augšanu, inhibējot MEK/ERK signālķēdi [3]. Tāpat, izmantojot NCI-H460 šūnas, tika pārbaudīts fenola savienojums — karnozīnskābe — attiecībā uz antiproliferatīvo un proapoptotisko aktivitāti [4].
- Zāļu rezistence: NCI-H460 šūnu līnija ir ideāli piemērota plaušu karcinomas zāļu rezistences mehānisma pētīšanai. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai izstrādātu zāļu rezistences modeļus un identificētu pamatā esošos gēnus, molekulāros faktorus un signālceļus. Piemēram, vienā pētījumā tika izmantotas pret pemetreksedu rezistentas NCI-H460 šūnas, lai pētītu pemetrekseda rezistences molekulāros mehānismus nesīkšūnu plaušu vēža šūnās [5].
Iegādājieties šūnu līniju NCI-H460: jūsu ceļš uz plaušu vēža pētniecību
Zinātniskie raksti par NCI-H460 šūnām
Šeit ir dažas interesantas pētniecības publikācijas par NCI-H460 plaušu karcinomas šūnu līniju.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Molecules“ (2023), tika izvirzīts pieņēmums, ka dabiskais α-1,6-glikāns BBWPW no melnajām pupiņām kavē NCI-H460 šūnu proliferāciju, regulējot PI3K/AKT/MAPK signālceļu.
Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā „Phytomedicine“ (2019), tika pētīts, ka dioscin-6′-O-acetāts, jauns dabīgs savienojums, izraisa antiproliferatīvu iedarbību uz NCI-H460 plaušu vēža šūnām.
miRNA-425-5p veicina plaušu vēža augšanu, iedarbojoties uz PTEN/PI3K/AKT signālceļu
Žurnālā „BMC Pulmonary Medicine“ (2020) publicētajā pētījumā norādīts, ka mikroRNA-425-5p veicina plaušu karcinomas audzēja veidošanos, iedarbojoties caur PTEN/PI3K/AKT signālceļu.
Šajā rakstā žurnālā „Molecular Medicine Reports“ (2017) tika izvirzīts pieņēmums par hinalizarīna savienojuma pretvēža potenciālu un tā pamatmehānismiem NCI-H460 un citās plaušu vēža šūnās.
Šis pētījums žurnālā „Food and Function“ (2019) uzsver Eucalyptus globulus Labill. ekstrakta potenciālo pretvēža iedarbību, izmantojot NCI-H460 šūnas. Rezultāti liecināja, ka augu ekstrakts izrādīja šo iedarbību, palielinot p53 ekspresiju NCI-H460 šūnās un modulējot šūnu cikla profilu.
Resursi par NCI-H460 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
Šeit ir daži tiešsaistes resursi, kuros aprakstītas NCI-H460 plaušu vēža šūnas.
- NCI-H460 šūnu transfekcija: Šis video pamācības materiāls ir soli pa solim izklāstīta instrukcija par NCI-H460 šūnu transfekciju ar plazmīdas DNS.
Šajās saitēs ir svarīga informācija par H460 šūnu kultivēšanu.
- NCI-H460 šūnas: Šī tīmekļa vietne sniedz svarīgu informāciju par NCI-H460 šūnu barotnēm, subkultivēšanu, sasaldēšanu un atkausēšanu.
- NCI-H460 šūnu pārstādīšana: Šis dokuments sniegs norādījumus par NCI-H460 šūnu līnijas pārstādīšanu un subkultivēšanu. Turklāt tas palīdzēs apgūt NCI-H460 šūnu transfekcijas protokolu.
NCI-H460 šūnu līnijas izpēte: bieži uzdotie jautājumi un secinājumi
NCI-H460 šūnu līnija ir iegūta no pacienta ar lielšūnu plaušu karcinomu, tāpēc tā ir vērtīgs modelis šāda veida plaušu vēža izpētei.
NCI-H460 šūnas tiek izmantotas, lai pētītu plaušu vēža bioloģiju, izstrādātu jaunus ārstēšanas veidus un novērtētu potenciālo zāļu efektivitāti. Tās var injicēt arī imūndeficītām pelēm, lai izveidotu in vivo audzēju modeļus audzēju augšanas un attīstības izpētei.
Gan NCI-H460, gan A549 šūnu līnijas ir iegūtas no plaušu karcinomām, taču NCI-H460 pārstāv lielšūnu karcinomu, savukārt A549 - adenokarcinomu. Šī histoloģiskā apakštipa atšķirība ietekmē to īpašības un uzvedību.
Jā, NCI-H460 šūnām piemīt audzēja potenciāls, un tās var implantēt imūndeficītām pelēm, lai izveidotu ksenotransplantātu modeļus, kas atvieglo lielšūnu plaušu karcinomas izpēti in vivo.
Paklitaksela kombinēšana ar citiem savienojumiem var pastiprināt tā citotoksisko iedarbību uz NCI-H460 šūnām, potenciāli uzlabojot plaušu vēža ārstēšanas rezultātus.
Jā, NCI-H460 šūnas ekspresē hipoksantīna guanīna fosforibosiltransferāzi, kas ir būtiska nukleotīdu metabolismam un šūnu proliferācijai.
NCI-H460 šūnas parasti izmanto vēža un toksikoloģijas pētījumos, lai pētītu audzēju augšanu, novērtētu savienojumu citotoksisko iedarbību un zāļu rezistences mehānismus.
NCI-H460 šūnām ir raksturīga neirofilamentu tripletu proteīnu ekspresija, kas ir iesaistīti citoskeleta struktūras uzturēšanā un kuriem var būt nozīme vēža šūnu migrācijā un invazijā.
ΚB ceļš, cita starpā, ir iesaistīts NCI-H460 šūnu proliferācijas un izdzīvošanas regulēšanā, piedāvājot potenciālus mērķus terapeitiskai iejaukšanai plaušu vēža gadījumā.
Jā, NCI-H460 šūnas parasti izmanto in vitro modeļos, lai novērtētu ķīmijterapeitisko līdzekļu, tostarp paklitaksela un karboplatīna, citotoksisko iedarbību, palīdzot izstrādāt efektīvus vēža ārstēšanas līdzekļus.
Atsauces
- Hu, C., et al., NUCKS veicina plaušu vēža šūnu proliferāciju, migrāciju un invāziju caur Pi3k/Akt signālceļu. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): 55.–61. lpp.
- Qi, X., et al., EGPI-1, jauns eIF4E/eIF4G mijiedarbības inhibitors, kavē plaušu vēža šūnu augšanu un angiogēnēzi, iedarbojoties caur Ras/MNK/ERK/eIF4E signālceļu. „Chemico-Biological Interactions”, 2022. 352: 109773. lpp.
- Hu, H., et al., Anlotinib izraisa pretvēža iedarbību uz KRAS mutāciju nesošām plaušu vēža šūnām, nomācot MEK/ERK ceļu. Cancer Management and Research, 2020: 3579.–3587. lpp.
- Corveloni, A.C., et al., Karnosīnskābe izrāda antiproliferatīvu un proapoptotisku iedarbību uz audzēja NCI-H460 un neaudzēja IMR-90 plaušu šūnām. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A, 2020. 83(10): 412.–421. lpp.
- Xu, Y.-L. u.c., Pemetreksedam rezistentu NCI-H460/PMT šūnu izveide un raksturošana. „Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry” (agrāk „Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents”), 2019. 19(6): 731.–739. lpp.