NCI-H1299 šūnas: pētījumi un klīniskā nozīme saistībā ar NCI-H1299 plaušu vēža šūnām
NCI-H1299 ir imortalizēta cilvēka nesīkšūnu plaušu vēža šūnu līnija, ko plaši izmanto imūnonkoloģijas, vēža un zāļu atklāšanas pētījumos. Turklāt pētnieki izmantoja šīs šūnas, lai pētītu zāļu jutību, pamatā esošos signālceļus un molekulāros mehānismus, kas saistīti ar plaušu vēzi. Bez tam šīs šūnas tiek izmantotas, lai pētītu vīrusu infekcijas, piemēram, SARS-CoV-2.
- Augšanas barotne
- RPM1 1640 ir ideāla NCI-H1299 šūnu barotne. Tā sastāvā ir 10 % liellopu embriju serums, 4500 mg/l glikozes, 2,0 mM L-glutamīna, 1 mM nātrija piruvāta, 1500 mg/l NaHCO3 un 10 mM HEPES. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
- Šūnu skaita dubultošanās laiks
- NCI-H1299 šūnu dubultošanās laiks ir 22–30 stundas.
- Augšanas veids
- NCI-H1299 ir adhezīva šūnu līnija.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- BSL-1
- Piegādātājs
- Cytion — Pasūtīt NCI-H1299
- NCI-H1299 šūnu vispārīgās īpašības un izcelsme
- Informācija par kultivēšanu
- Iegādājieties NCI-H1299 šūnu līniju: augstas kvalitātes pētniecības rīki plaušu vēža bioloģijas izpētei
- NCI-H1299 šūnu priekšrocības un trūkumi
- NCI-H1299 šūnu izmantošana pētniecībā
- Zinātniskās publikācijas, kurās aprakstītas NCI-H1299 šūnas
- Resursi par NCI-H1299 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
- Bieži uzdotie jautājumi par NCI-H1299 šūnu līniju
- Atsauces
- Bieži uzdotie jautājumi
NCI-H1299 šūnu vispārējās īpašības un izcelsme
Pirmā lieta, kas jāzina par šūnu līniju, ir tās izcelsme un vispārējās īpašības, jo tās palīdz izstrādāt tās izmantošanu savos pētījumos. Šī raksta sadaļa palīdzēs jums uzzināt svarīgu informāciju par NCI-H1299 izcelsmi un īpašībām. Piemēram, kas ir NCI-H1299 plaušu vēža šūnas? Kāda veida šūnas ir NCI-H1299? Kāds ir NCI-H1299 šūnu izmērs? Kāda ir atšķirība starp A549 un NCI-H1299?
- NCI-H1299 šūnu līnija ir iegūta no limfmezgla metastāzes plaušās 43 gadus vecam kaukāziešu izcelsmes vīrieša pacientam ar vēzi.
- Šīm šūnām ir homozigota p53 gēna daļēja delecija; tādējādi tās neekspresē p53 proteīnu. NCI-H1299 p53 proteīna ekspresijas trūkums veicina H1299 plaušu vēža šūnu proliferatīvo tendenci.
- Papildus p53 šīm imortalizētajām šūnām ir konstatēta NCI-H1299 KRAS mutācija, kas nosaka to augšanas, proliferācijas, migrācijas un invāzijas īpašības.
- NCI-H1299 kariotips ir gandrīz diploīds.
- NCI-H1299 šūnām ir epitēlija šūnu līdzīga morfoloģija.
- Šīs šūnas ir saplacinātas, un to biezums ir mazāks par 5 µm.
NCI-H1299 un A549
NCI-H1299 un A549 ir neplaušu mazā šūnu vēža šūnu līnijas. NCI-H1299 šūnas ir agresīvākas un jutīgākas salīdzinājumā ar A549. Abām ir salīdzinoši līdzīgas mutācijas, piemēram, KRAS. Tomēr, atšķirībā no NCI-H1299 šūnām, A549 šūnas ekspresē P53 gēnu.
Informācija par kultivēšanu
Šūnu līnijas kultūras uzturēšana nav viegla, kamēr nezināt visu svarīgo informāciju par to, tostarp: kāds ir NCI-H1299 dubultošanās laiks? Kāda ir NCI-H1299 sēšanas blīvums? Kāda ir NCI-H1299 šūnu barotne? Kā kultivēt NCI-H1299 šūnu līnijas? Šī sadaļa palīdzēs jums uzzināt atbildes uz visiem šiem jautājumiem par NCI-H1299 šūnu kultivēšanu.
Galvenie punkti NCI-H1299 šūnu kultivēšanai
Dubultošanās laiks:
NCI-H1299 dubultošanās laiks ir no 22 līdz 30 stundām.
Pielipušas vai suspensijā:
NCI-H1299 ir adhezīva šūnu līnija.
Subkultivācijas attiecība:
NCI-H1299 šūnas tiek subkultivētas ieteicamajā attiecībā no 1:3 līdz 1:6. Sēšanai adhezīvās šūnas mazgā ar 1x PBS un inkubē ar Accutase pasāžēšanas šķīdumu 8–10 minūtes istabas temperatūrā. Atdalītās šūnas tiek pievienotas svaigai kultūras barotnei un centrifugētas. Pēc tam šūnu nogulsnes tiek atkārtoti suspendētas, un šūnas tiek pārlietas jaunās kolbās, kas satur augšanas barotni.
Augšanas barotne:
RPM1 1640 ir ideāla NCI-H1299 šūnu barotne. To papildina ar 10 % teļa serumu, 4500 mg/l glikozes, 2,0 mM L-glutamīna, 1 mM nātrija piruvāta, 1500 mg/l NaHCO₃ un 10 mM HEPES. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:
NCI-H1299 plaušu vēža šūnu kultūras tiek uzturētas mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā ar 5 % CO₂ pievadi.
Uzglabāšana:
NCI-H1299 šūnu līniju var ilgtermiņā uzglabāt šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai ultra-zemas temperatūras saldētavās temperatūrā zem -150 °C.
Sasaldēšanas process un barotne:
CM-1 vai CM-ACF ir NCI-H1299 šūnu sasaldēšanas barotnes. Šūnas tiek sasaldētas, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu, kas ļauj temperatūrai pazemināties tikai par 1 grādu minūtē, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju.
Atkausēšanas process:
Sasaldētās NCI-H1299 šūnas ātri maisa iepriekš uzsildītā ūdens vannā 37 grādos pēc Celsija 40–60 sekundes, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Atkausētajām šūnām pievieno svaigu barotni, un tās var tieši kultivēt jaunās kolbās vai centrifugēt. Pirmajā gadījumā barotne jānomaina pēc 24 stundu inkubācijas. Centrifugēšana palīdz noņemt sasaldēšanas barotnes elementus. Pēc tam ievāktās šūnas atkārtoti suspendē svaigā barotnē un pārnes jaunā kolbā kultivēšanai.
Bioloģiskās drošības līmenis:
NCI-H1299 šūnu kultūras apstrādei ir nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.
Iegādājieties šūnu līniju NCI-H1299: augstas kvalitātes pētniecības rīki plaušu vēža bioloģijas izpētei
NCI-H1299 šūnu priekšrocības un trūkumi
Tāpat kā citām cilvēka vēža šūnu līnijām, arī NCI-H1299 piemīt dažas atšķirīgas īpašības, kas saistītas ar konkrētām priekšrocībām un trūkumiem. Šeit mēs esam apkopojuši dažas nozīmīgākās.
Priekšrocības
NCI-H1299 nesīkšūnu plaušu vēža šūnu līnijas galvenās priekšrocības ir šādas:
-
In vitro plaušu vēža modelis
NCI-H1299 šūnu līnijas ir izveidotas no plaušu karcinomas limfmezglu metastāzēm un tādējādi tām piemīt salīdzinoši līdzīgas īpašības. Tāpēc šīs šūnas var kalpot kā in vitro modelis, lai pētītu plaušu vēža bioloģiju, šūnu un molekulāros mehānismus, kā arī atlasītu un pārbaudītu potenciālos ārstnieciskos līdzekļus.
-
Viegli kultivējamas
NCI-H1299 šūnas ir viegli kultivējamas un uzturamas pētniecības laboratorijā. Nav sarežģītu šūnu kultivēšanas prasību un procedūru.
-
NCI-H1299 P53 un NCI-H1299 KRAS mutācija
NCI-H1299 šūnām trūkst p53 gēna ekspresijas, kas ļauj šūnām strauji vairoties. Turklāt tām piemīt KRAS mutācija, kas veicina šūnu augšanu, vairošanos, invāziju un migrāciju. Ņemot vērā šos faktorus, pētnieki izmanto H1299 šūnas, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas saistīti ar KRAS un P53 mutācijām.
Trūkumi
NCI-H1299 šūnu trūkumi ir šādi:
-
Audu specifiskums
NCI-H1299 šūnas ir iegūtas no plaušu audiem. Tāpēc to pielietojamība galvenokārt ir ierobežota ar plaušu karcinomas pētījumiem. Tās var pilnībā neatspoguļot citu vēža veidu heterogenitāti un vispārējās īpašības.
NCI-H1299 šūnu izmantošana pētniecībā
NCI-H1299 šūnu līnija tiek plaši izmantota plaušu vēža pētījumos. Šeit ir minēti daži daudzsološi šīs šūnu līnijas pielietojumi.
- Vēža bioloģija: NCI-H1299 šūnas ir lielisks pētniecības instruments, lai izpētītu vēža attīstību, progresēšanu un ar to saistītos šūnu un molekulāros mehānismus. Šīs šūnas ir apveltītas ar noteiktām mutācijām, kas ļauj pētniekiem izpētīt ar tām saistīto vēža šūnu uzvedību, signālceļus un gēnu ekspresijas profilus. Vairākos pētījumos ir izmantota NCI-H1299 nesīkšūnu plaušu karcinomas šūnu līnija, lai pētītu plaušu vēža bioloģiju. Piemēram, 2018. gadā veiktajā pētījumā, izmantojot NCI-H1299 šūnas, tika izpētīts signālceļš, kas ir iesaistīts plaušu vēža šūnu apoptozē. Pētnieki atklāja, ka PI3K/AKT ceļš veicina šūnu proliferāciju, un tā inhibīcija var izraisīt vēža šūnu nāvi [1]. Tāpat citā pētījumā tika izpētīti mehānismi, kas saistīti ar NCI-H1299 epitēlija-mezohinēzes pāreju (EMT). Šajā pētījumā tika izvirzīts pieņēmums, ka ekstracelulārā olbaltumviela SPARC (sekretētā skābā un cisteīna bagātā olbaltumviela) veicina NCI-H1299 EMT un migrāciju, tādējādi sekmējot audzēju veidošanos šajās šūnās — SPARC olbaltumviela darbojas kā TGF-β1 signālceļa mediators [2].
- Zāļu atklāšana un skrīninga veikšana: cilvēka plaušu vēža šūnu līnija NCI-H1299 tiek plaši izmantota, lai novērtētu potenciālo zāļu toksicitāti un efektivitāti. Turklāt pētnieki to izmanto, lai izpētītu pretvēža zāļu darbības mehānismu. Pētījumos šīs šūnas ir izmantotas arī, lai identificētu iespējamos zāļu mērķmolekulas un rezistences mehānismus. Piemēram, Xiao-Yun Shen un kolēģu veiktajā pētījumā tika izpētīts dabiskā savienojuma bruceīna D (BD) pretvēža potenciāls. Rezultāti liecināja, ka BD ievērojami kavē NCI-H1299 šūnu proliferāciju, invāziju un migrāciju. Tāpēc to var uzskatīt par potenciālu papildterapiju nesīkšūnu plaušu karcinomas ārstēšanai [3]. Līdzīgi kādā pētījumā tika novērtēta ksantohumola citotoksiskā iedarbība gan atsevišķi, gan kombinācijā ar ķīmijterapijas zāļu cisplatīnu uz NCI-H1299 plaušu vēža šūnām [4].
Zinātniskie raksti, kuros aprakstītas NCI-H1299 šūnas
Šeit ir apkopotas dažas nozīmīgākās un visbiežāk citētās pētniecības publikācijas par NCI-H1299 plaušu karcinomas šūnu līniju.
Šis raksts ir publicēts žurnālā „Human and Experimental Toxicology“ (2021). Pētījumā tika izvirzīts pieņēmums, ka indol-3-karbinols inducē apoptozi H1299 šūnās, paaugstinot reaktīvo skābekļa sugu (ROS) līmeni.
Šis pētījums tika publicēts 2018. gadā žurnālā „Cellular Physiology and Biochemistry”. Pētījuma rezultāti atklāja, ka kofeīnskābes un paklitaksela kombinācija izraisa sinerģisku pretvēža iedarbību nesīkšūnu plaušu vēža šūnu līnijā NCI-H1299.
Šis pētījuma raksts tika publicēts žurnālā „Molecular Medicine Reports“ (2018). Pētījumā tika novērtēta triterpenoīda saponīna tubeimosīda-1 pretvēža iedarbība un tās pamatmehānismi NCI-H1299 šūnu līnijā.
Pristimerin izraisa apoptozi un kavē proliferāciju un migrāciju H1299 plaušu vēža šūnās
Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā „Journal of Cancer” (2020), tika izvirzīts pieņēmums, ka dabiskais savienojums pristimerīns nomāc NCI-H1299 šūnu proliferāciju un migrāciju.
VIPR1 gēna regulēšanas mehānisms cilvēka plaušu adenokarcinomas H1299 šūnās
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Medical Oncology“ (2019), tika pētīta VIPR1 gēna pārmērīgas ekspresijas iespējamā ietekme uz NCI-H1299 adenokarcinomas šūnu līniju.
Resursi par NCI-H1299 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
Šeit ir daži tiešsaistes resursi, kas veltīti NCI-H1299 šūnām.
- NCI-H1299 transfekcija: Šajā videoklipā ir izskaidrots NCI-H1299 šūnu līniju pārejošās transfekcijas protokols.
- Adherento šūnu līnijas subkultivēšana: Šis video palīdzēs jums apgūt vispārējo subkultivēšanas procedūru adherento šūnu līnijai.
Šajā saitē ir informācija par NCI-H1299 šūnu kultivēšanu.
- NCI-H1299 šūnu līnija: Šī saite palīdzēs jums iepazīties ar NCI-H1299 šūnu pasāžēšanas un transfekcijas protokolu.
Biežāk uzdotie jautājumi par NCI-H1299 šūnu līniju
Atsauces
- Gu, J., et al., Pētījums par EGCG izraisīto apoptozi plaušu vēža šūnās, inhibējot PI3K/Akt signālceļu. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): 4557.–4563. lpp.
- Sun, W., et al., SPARC darbojas kā TGF-β1 mediators, veicinot epitēlija-mezodermālo pāreju A549 un H1299 plaušu vēža šūnās. Biofactors, 2018. 44(5): 453.–464. lpp.
- Shen, X.-Y., et al., Pētījums par bruceīna D iedarbības mehānismu nesīkšūnu plaušu vēža H1299 šūnu ārstēšanā. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): 500. lpp.
- Long, B., et al., Ksantohumola un tā kombinācijas ar cisplatīnu citotoksiskā iedarbība uz cilvēka metastātiskā plaušu vēža H1299 šūnām. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): 1.–15. lpp.