KG-1 šūnu līnija
KG-1 šūnu līnijas vispārējās īpašības un izcelsme
Šūnu līnijas izcelsme un vispārējie raksturlielumi palīdz pētniekam izlemt, kā to izmantot savā darbā. Jūs varat iepazīties ar šo informāciju, pirms sākat darbu ar šo šūnu līniju. Šī raksta sadaļa ir veltīta KG-1 makrofāgu izcelsmei un raksturlielumiem. Šeit jūs uzzināsiet: Kas ir KG-1 šūnas? Kas ir KG-1a šūnu līnija? Kāda ir KG-1 šūnu līnijas izcelsme? Kāda ir KG-1 morfoloģija?
- KG-1 ir limfoblastveidīga šūnu līnija, kas iegūta no kaukāzieša (59 gadi) kaulu smadzeņu aspirāta, kuram bija akūta mielogēnā leikēmija. To 1978. gadā izveidoja Koeffler un Golde. Šīs šūnas galvenokārt atrodas promielocītu vai mieloblastu nobriešanas stadijā [1].
- KG-1 šūnām piemīt limfoblastveida morfoloģija.
- KG-1 šūnu līnijas kariotips uzrāda pseidodiploīdu hromosomu modālo skaitu.
KG-1 un KG-1a
KG-1a ir KG-1 šūnu pamatlīnijas apakšlīnija. Tā tika izveidota pēc 35 KG-1 šūnu līnijas pasāžām. Salīdzinājumā ar KG-1 šūnu līniju tā ir mazāk diferencēta. Turklāt šī apakšlīnija citokīmiski, morfoloģiski un funkcionāli ir mazāk nobriedusi salīdzinājumā ar vecāko šūnu līniju (KG-1).
Informācija par KG-1 šūnu līnijas kultivēšanu
Šajā raksta sadaļā tiks apkopota visa nepieciešamā informācija par KG-1 šūnu kultivēšanu, kas var atvieglot jūsu darbu. Šeit jūs uzzināsiet: kāds ir KG-1 šūnu līnijas dubultošanās laiks? Kādi ir KG-1 makrofāgu kultivēšanas apstākļi? Kā kultivēt KG-1 šūnas?
Galvenie punkti par KG-1 šūnu kultivēšanu
Dubultošanās laiks:
KG-1 dubultošanās laiks ir aptuveni 45 stundas. Tomēr tas var atšķirties atkarībā no kultivēšanas apstākļiem.
Pielipušas vai suspensijā:
KG-1 šūnas aug suspensijā.
Šūnu blīvums:
Optimālais šūnu blīvums KG-1 šūnu līnijai ir no 1 līdz 3 x 105 šūnu/ml. Lai veiktu subkultivēšanu, šūnu suspensiju pārnes sterilizētā mēģenē un centrifugē. Pēc tam ievāktās šūnas pievieno svaigu barotni un rūpīgi atkārtoti suspendē. Pēc tam šūnas tiek sadalītas jaunās kolbās un kultivētas optimālā šūnu blīvumā. Šūnas var sadalīt, kad tās sasniedz maksimālo šūnu blīvumu 1–2 × 10⁶ šūnu/ml.
Augšanas barotne:
IMDM (Iscove’s Modified Dulbecco’s Medium), kas satur 10 % FBS, 4,5 g/l glikozes, 4 mM L-glutamīna, 1,0 mM nātrija piruvāta un 3,0 g/l NaHCO₃, ko izmanto KG-1 šūnu kultivēšanai. Barotni jāmaina pēc trim dienām.
Augšanas apstākļi:
KG1 AML šūnu līniju kultivē mitrinātā inkubatorā 37 °C temperatūrā un ar 5 % CO₂ pievadi.
Uzglabāšana:
Sasaldētās šūnas tiek glabātas šķidrā slāpekļa tvaika fāzē vai temperatūrā zem -150 °C elektriskā ultra-zemas temperatūras saldētavā, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju.
Sasaldēšanas process un barotne:
KG-1 šūnu sasaldēšanai piemērots ir CM-1 vai CM-ACF. Šūnas tiek sasaldētas, izmantojot lēnu sasaldēšanas procesu, lai pasargātu šūnas no jebkāda šoka. Šī metode ļauj temperatūru pazemināt pakāpeniski par 1 °C minūtē.
Atkausēšanas process:
Šūnas atkausē iepriekš uzsildītā ūdens vannā 37 °C temperatūrā, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Atkausētām šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē, lai atdalītu sasaldēšanas barotnes sastāvdaļas. Šūnu nogulsnes uzmanīgi atkārtoti suspendē un ielej jaunās kolbās, kas satur augšanas barotni.
Bioloģiskās drošības līmenis:
KG-1 šūnu kultūru uzturēšanai ir nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.
Publicēts: 2023 | Pēdējā pārskatīšana: 2026. gada maijs
KG-1 šūnu līnija: priekšrocības un ierobežojumi
Tāpat kā citām šūnu līnijām, arī KG-1 mieloīdās leikēmijas šūnu līnijai ir daudzas priekšrocības un ierobežojumi. Šajā sadaļā mēs iepazīsimies ar dažiem nozīmīgākajiem, kas var būt izšķiroši, lemjot par tās izmantošanu jūsu pētījumos.
Priekšrocības
KG-1 šūnu galvenās priekšrocības ir šādas:
-
Viegla kultivēšana
KG-1 šūnas viegli kultivējamas pētniecības laboratorijās, jo tām nav sarežģītas šūnu kultivēšanas prasības. To vienkāršā uzturēšana un audzēšanas apstākļi nodrošina pieejamību plašam pētnieku lokam, kuriem ir pieejamas pamata šūnu kultivēšanas iekārtas.
-
Akūtas mieloīdās leikēmijas (AML) modelis
KG-1 AML šūnu līnija, kas iegūta no vīrieša pacienta ar akūtu mieloīdo leikēmiju (AML), kalpo kā vērtīgs instruments AML bioloģijas izpētei un pētījumiem par potenciālajiem ārstēšanas līdzekļiem, sniedzot ieskatu šīs slimības pamatmehānismos un ārstēšanas stratēģijās.
Ierobežojumi
Ar KG1 šūnu līniju saistītie ierobežojumi ir šādi:
-
In vitro modelis
KG-1 šūnas ir vērtīgs in vitro modelis AML pētniecībai; tomēr ir svarīgi atzīmēt, ka tās var pilnībā neatspoguļot slimības sarežģītību in vivo, kalpojot kā vienkāršots šūnu modelis, kas var neaptvert visus AML bioloģijas aspektus.
KG-1 šūnu pielietojums pētniecībā
KG-1 piedāvā vairākus daudzsološus pielietojumus biomedicīniskajos pētījumos. Daži no svarīgākajiem pētījumiem, kuros izmantoti KG1 makrofāgi, ietver:
- Vēža pētījumi: KG-1 šūnas tika iegūtas no akūtas mieloīdās leikēmijas pacienta, tādēļ tās tiek uzskatītas par vērtīgu pētniecības rīku AML bioloģijas izpētei. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pētītu šūnu un molekulāros mehānismus, kas virza AML attīstību, izaugsmi un rezistenci pret zālēm. Tas ietver arī jaunu biomarķieru, ģenētisko mutāciju un ar AML saistīto signālceļu identificēšanu un atklāšanu. Piemēram, 2019. gadā veiktajā pētījumā tika noskaidrots, ka gara nekodējošā RNS linc00239 veicina doksorubicīna rezistenci un ļaundabīgu uzvedību akūtas mieloīdās leikēmijas šūnās KG-1. Turpmākie pētījumi atklāja, ka lncRNA aktivizē PI3K/Akt/mTOR signālceļu, lai izraisītu šos efektus AML šūnās [2].
- Toksikoloģija: KG1 šūnu līnija tiek plaši izmantota toksikoloģijas pētījumos. Pētnieki pārbauda potenciālo terapeitisko līdzekļu toksicitāti un efektivitāti, tostarp ķīmijterapijas zāles un mērķtiecīgas terapijas, uz KG1 mieloīdās leikēmijas šūnām, lai identificētu daudzsološus zāļu kandidātus turpmākajiem pirmsklīniskajiem un klīniskajiem novērtējumiem. 2018. gadā veiktajā pētījumā tika analizēta doksorubicīnu saturošo nano-niosomu toksicitāte uz KG1 AML šūnu līniju. Pētījumā tika izvirzīts pieņēmums, ka nano-niosoms ir piemērots zāļu piegādes nesējs, jo tas uzlabo ārstēšanas efektivitāti [3]. Citā pētījumā pētnieki izpētīja no Urtica dioica auga lapām pagatavotās nātru tējas terapeitisko iedarbību. Pētījums atklāja, ka šis auga lapu ūdens ekstrakts izraisa pretvēža iedarbību akūtas mieloīdās leikēmijas šūnās KG-1 un U937 [4].
Publikācijas par KG-1 šūnām
Šajā raksta sadaļā ir uzskaitītas dažas interesantas pētnieciskās publikācijas par KG-1 šūnām.
Kvercetīns paaugstina cilvēka mieloīdās leikēmijas KG-1 šūnu jutību pret TRAIL izraisītu apoptozi
Šis raksts tika publicēts žurnālā „Journal of Cellular Physiology” (2019). Pētījumā tika izvirzīts pieņēmums, ka kvercetīns paaugstina KG1 AML šūnu līnijas jutību pret TNF-saistīto apoptozi izraisošo ligandu (TRAIL) un var pastiprināt TRAIL izraisītās citotoksicitātes iedarbību šūnās.
KLF8 veicina akūtas mieloīdās leikēmijas šūnu augšanu un glikolīzi caur AKT/mTOR ceļu
Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā „Tropical Journal of Pharmaceutical Research” (2022), tika izvirzīts pieņēmums, ka krüppel-līdzīgā transkripcijas faktora 8 ekspresijas samazināšana nomāc AML šūnu proliferāciju un glikolīzi, veicinot apoptozi, regulējot AKT/mTOR signālceļu.
Sorafeniba un arsēna trioksīda ietekme uz U937 un KG-1 šūnu līnijām: apoptoze vai autofāgija?
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Cell Journal” (Yakhteh) (2020), tika pētīta arsēna trioksīda un sorafeniba potenciālā ietekme uz U937 un KG-1 šūnām.
Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Medical Oncology“ (2020), tika novērtēti OXPHOS un glikolīze kā terapeitiskie mērķi akūtas mieloīdās leikēmijas (AML) šūnu līnijā KG-1.
Šajā 2020. gada žurnāla „Drug Design, Development, and Therapy“ publikācijā tika izvirzīts pieņēmums, ka kurkumīna un talidomīda savienojumi sinerģiski izraisa apoptozi KG-1 šūnās, samazinot STAT3 un Bcl-xL ekspresiju.
6. Resursi par KG-1 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
Tālāk ir uzskaitīti daži tiešsaistes resursi par KG-1 šūnām.
- Suspensijas šūnu subkultivēšana: Šajā videoklipā ir aprakstīts protokols tādu suspensijas šūnu kultūru subkultivēšanai kā KG-1.
Šajā saitē ir pieejams KG-1 šūnu kultūras protokols:
- KG-1 šūnu līnija: Šajā tīmekļa vietnē ir pieejama pamatinformācija par KG-1 šūnu līnijas kultivēšanu. Tajā ir iekļauta informācija par šūnu līnijas barotnēm, kā arī protokoli par subkultivēšanu un krioprezervētu un proliferatīvu kultūru apstrādi.
Atsauces
- Pelliccia, F., V. Ubertini un N. Bosco, „Molekulārās citogenētiskās analīzes nozīme pirms šūnu līniju izmantošanas pētniecībā: KG-1a leikēmijas šūnu līnijas gadījums”. Oncol Lett, 2012. 4(2): 237.–240. lpp.
- Yang, Y., et al., Garā nekodējošā RNS linc00239 veicina ļaundabīgu uzvedību un rezistenci pret doksorubicīnu, daļēji aktivizējot PI3K/Akt/mTOR ceļu akūtas mieloīdās leikēmijas šūnās. Oncology Reports, 2019. 41(4): 2311.–2320. lpp.
- Bahrami-Banan, F., et al., Doksorubicīnu saturošu nano-niosomu sagatavošana un izpēte, kā arī to toksicitātes novērtēšana attiecībā uz akūtas mieloblastiskās leikēmijas šūnu līniju KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): 309.–323. lpp.
- Hodroj, M.H., et al., Nātru tēja in vitro kavē akūtas mieloīdās leikēmijas šūnu augšanu, veicinot apoptozi. „Nutrients”, 2020. 12(9): 2629. lpp.