BxPC-3 šūnu līnija
BxPC-3 ir cilvēka izcelsmes aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līnija. Tā tiek plaši izmantota vēža pētījumos. Pētnieki galvenokārt izmanto šīs šūnas, lai pētītu aizkuņģa dziedzera vēža bioloģiju, identificētu terapeitiskos mērķus un izstrādātu pretvēža zāles.
- Augšanas barotne
- BxPC-3 šūnu līnijas kultivēšanai izmanto RPMI 1640 barotni. Lai panāktu ideālu šūnu augšanu, tai pievieno 10 % teļa seruma, 2,1 mM stabilu glutamīnu un 2,0 g/l NaHCO3. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
- Dubultošanās laiks
- BxPC-3 šūnu dubultošanās laiks ir no 48 līdz 60 stundām.
- Augšanas tips
- BxPC-3 ir adhezīva šūnu līnija.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- BSL-3
- Piegādātājs
- Cytion — Pasūtīt BxPC-3
Šis raksts ietver svarīgu informāciju par BxPC-3 šūnu līniju, kas var ievērojami palīdzēt jums strādāt ar to. Galvenokārt tajā tiks apspriests:
- Vispārīga informācija un BxPC-3 šūnu līnijas izcelsme
- BxPC-3 šūnu kultivēšana
- BxPC-3 šūnu līnija: priekšrocības un ierobežojumi
- BxPC-3 šūnu pielietojums pētniecībā
- Pētniecības publikācijas par BxPC-3 šūnām
- Resursi par BxPC-3 šūnu līniju: protokoli, video un citi materiāli
Vispārīga informācija un BxPC-3 šūnu līnijas izcelsme
Zināšanas par šūnu līnijas izcelsmi ir ļoti svarīgas tās izmantošanai pētniecībā. Pārzinot tās īpašības, tostarp morfoloģiju, šūnu izmēru un ploidiju, tās izmantošana kļūst vienkāršāka un ērtāka. Šeit jūs uzzināsiet par BxPC-3 šūnu izcelsmi un vispārīgajām īpašībām: Kas ir BxPC-3 šūnas? Kas ir BxPC-3 šūnu līnija? Kāda ir BxPC-3 šūnu līnijas izcelsme? Kāda ir BxPC-3 morfoloģija?
- BxPC-3, cilvēka aizkuņģa dziedzera karcinomas šūnas, tika iegūtas 1986. gadā no 61 gadu vecas eiropietes ar aizkuņģa dziedzera adenokarcinomu. Šo šūnu tumorogēnā iedarbība tika apstiprināta pat pēc tam, kad paciente bija izgājusi vairākas staru un ķīmijterapijas sesijas. Tādējādi izveidotā šūnu līnija ir nenovērtējams modelis vēža attīstības un progresēšanas pētīšanai.
- BxPC-3 šūnām ir epitēlija šūnu morfoloģija.
- BxPC-3 šūnu hromosomu skaits ir 59. Šīm šūnām ir homozigota delecija 18. hromosomā, kas kodē SMAD4/DPC4 proteīnu. Turklāt šai šūnu līnijai trūkst BxPC-3 kras mutācijas, kas ir izplatīta aizkuņģa dziedzera audzējos. Šajās aizkuņģa dziedzera vēža šūnās ir konstatēta arī BxPC-3 BRAF delecija.
Kāda ir atšķirība starp BxPC3 un PANC-1?
BxPC-3 PADC (aizkuņģa dziedzera duktalais adenokarcinoms) un PANC-1 šūnas ir primārās aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līnijas ar epitēlija morfoloģiju. Šajā gadījumā pirmās šūnas piemīt vairāk epitēlija īpašības, savukārt otrajām ir vairāk mezenhīmālas īpašības [1].
BxPC-3 šūnu kultivēšana
BxPC-3 šūnu līnija tiek plaši izmantota vēža pētniecības laboratorijās. Lai efektīvi kultivētu šo aizkuņģa dziedzera vēža šūnu līniju, jums jāzina šādi galvenie punkti. Jūs uzzināsiet: kāds ir BxPC-3 šūnu dubultošanās laiks? Kā kultivēt BxPC-3 šūnu līniju?
Galvenie punkti BxPC-3 šūnu kultivēšanai
Populācijas dubultošanās laiks:
BxPC-3 šūnu dubultošanās laiks ir no 48 līdz 60 stundām.
Adherenta vai suspensijā:
BxPC-3 ir adhezīva šūnu līnija.
Dalīšanās attiecība:
BxPC-3 šūnas tiek subkultivētas attiecībā no 1:2 līdz 1:4. Šūnas tiek mazgātas ar 1 x PBS un inkubētas ar pasāžas šķīdumu, ko sauc par accutase. Pēc 8–10 minūtēm šūnām pievieno svaigu barotni, un šūnas tiek centrifugētas. Sedimentu atkārtoti suspendē barotnē, un šūnas ielej jaunā kultivēšanas traukā augšanai.
Augšanas barotne:
BxPC-3 šūnu līnijas kultivēšanai izmanto RPMI 1640 barotni. Lai panāktu ideālu šūnu augšanu, tai pievieno 10 % teļa serumu, 2,1 mM stabilu glutamīnu un 2,0 g/l NaHCO3. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.
Augšanas apstākļi:
BxPC-3 šūnu kultūras tiek uzturētas 37 °C mitrinātā inkubatorā, kas ir pieslēgts 5 % CO2 padevei.
Uzglabāšana:
Saldētas šūnas parasti uzglabā temperatūrā zem -150 °C vai šķidrā slāpekļa tvaika fāzē, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju.
Sasaldēšanas process un barotne:
BxPC-3 šūnu kultūru sasaldēšanai var izmantot CM-1 vai CM-ACF. Lai novērstu šoku šūnām, tiek izmantots lēns sasaldēšanas process, kas ļauj temperatūrai pazemināties tikai par 1 °C.
Atkausēšanas process:
Sasaldētās BxPC-3 šūnas atkausē iepriekš iestatītā 37 °C ūdens vannā 40–60 sekundes. Kad paliek neliels ledus gabaliņš, šūnām pievieno svaigu kultūras vidi un centrifugē, lai noņemtu sasaldēšanas vides elementus. Pēc tam šūnu nogulsnes atkārtoti suspendē un šūnas ievada kolbā augšanai.
Bioloģiskās drošības līmenis:
BxPC-3 šūnu kultūras tiek uzturētas 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorijās.
BxPC-3 šūnu līnija: priekšrocības un ierobežojumi
BxPC-3 ir labi pazīstama aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas šūnu līnija, kurai piemīt vairākas priekšrocības un ierobežojumi. Šeit ir uzskaitītas šīs šūnu līnijas galvenās priekšrocības un trūkumi.
Priekšrocības
BxPC-3 šūnu galvenās priekšrocības ir šādas:
-
Aizkuņģa dziedzera vēža in vitro modelis
BxPC-3 šūnas, kas iegūtas no pacientiem ar aizkuņģa dziedzera adenokarcinomu, uzrāda atbilstošas īpašības, padarot tās par piemērotu modeli aizkuņģa dziedzera vēža uzvedības pētīšanai in vitro.
-
Tumorogēna šūnu līnija
BxPC-3 šūnas piemīt tumorogēnas īpašības, un tās var veidot audzējus, ja tiek injicētas kailām vai imūndeficītām pelēm. Šie audzēji ļoti līdzinās primārajiem aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas audzējiem, padarot BxPC-3 ksenotransplantātu modeli ideālu vēža augšanas un progresēšanas pētīšanai.
Ierobežojumi
Ar BxPC-3 šūnu līniju saistītie ierobežojumi ir šādi:
-
Krusteniskā kontaminācija
BxPC-3 šūnu līnijai, tāpat kā jebkurai citai, piemīt krusteniskas kontaminācijas risks. Pētniekiem jāievēro piesardzība un stingri kontaminācijas novēršanas protokoli, strādājot ar šīm šūnām.
-
Lēns augšanas temps
BxPC-3 šūnām ir salīdzinoši lēns vairošanās ātrums, un to dubultošanās laiks ir no 48 līdz 60 stundām. Šī īpašība var prasīt ilgākus inkubācijas periodus konkrētiem eksperimentiem, kas var izraisīt pētījumu gaitu aizkavēšanos.
BxPC-3 šūnu pielietojums pētniecībā
BxPC-3 šūnas piedāvā daudzus pielietojumus vēža pētniecībā. Visbiežāk tās tiek izmantotas:
- Aizkuņģa dziedzera vēža pētījumi: BxPC-3 šūnas imitē aizkuņģa dziedzera adenokarcinomu un tādējādi tiek izmantotas, lai pētītu ģenētiskos un molekulāros mehānismus, kas ir pamatā audzēja attīstībai un augšanai. Turklāt pētnieki, izmantojot šīs šūnas, atklāj jaunus biomarķierus un terapeitiskos mērķus. Turklāt BxPC-3 šūnas ievērojami ekspresē angiogēnos faktorus, t. i., interleikīnu-8 (IL-8), prostaglandīnu E2 (PGE2) un asinsvadu endotēlija augšanas faktoru (VEGF), kas padara tās piemērotas angiogēnēzes pētīšanai. Šajā kontekstā angiogēnese ir būtisks process, kas saistīts ar vēža augšanu un metastāzēm. 2022. gadā publicētā pētījumā tika noskaidrots, ka laminīna-5 gamma-2 (LAMC2) pārmērīga ekspresija BxPC3 PDAC (aizkuņģa dziedzera duktalajā adenokarcinomā) pastiprina tā tumorigenēzi, regulējot BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR signālceļa [2].
- Zāļu atklāšana un izstrāde: BxPC-3 šūnu līnija kalpo kā nenovērtējams pretvēža zāļu testēšanas modelis. Pētnieki izpēta potenciālo zāļu citotoksisko, pretmetastāzes un apoptozes ietekmi uz BxPC3 PDAC. Pētījumā, ko 2020. gadā veica Aleksandrija Tērnere un kolēģi, tika pētītas Elaeocarpus reticulatus augļu ekstraktu apoptozes īpašības BxPC-3 aizkuņģa dziedzera vēža šūnās [3]. Līdzīgi 2020. gadā tika veikts pētījums, kurā noteica auga Oxialis obtriangulata metanola ekstrakta pretvēža potenciālu BxPC-3 šūnās. Turklāt pētnieki izpētīja arī šūnu mehānisko ceļu, caur kuru augu ekstrakts izraisīja terapeitisko iedarbību [4].
5. Zinātniskie raksti par BxPC-3 šūnām
Šajā sadaļā ir uzskaitīti daži no visbiežāk citētajiem un interesantākajiem publikācijām par BxPC-3 šūnu līniju.
Licokumarons izraisa BxPC-3 aizkuņģa dziedzera adenokarcinomas šūnu nāvi, inhibējot DYRK1A
Šajā publikācijā žurnālā Chemico-Biological Interactions (2020) tika pētīta dabiskā vielas licokumarona apoptozes ietekme uz BxPC-3 aizkuņģa dziedzera vēža šūnām.
Šis pētījuma raksts tika publicēts žurnālā „Anticancer Research” (2022). Pētījumā tika izvirzīta hipotēze, ka hidroksihlorokvīns izraisa BxPC3 šūnu nāvi, inhibējot BCL-XL gēnu.
Šis pētījums tika publicēts 2020. gadā žurnālā „Journal of Cellular Biochemistry”. Pētījumā norādīts, ka dabiskais savienojums salidrosīds izrāda pretvēža iedarbību BxPC-3 šūnās, regulējot HIF-1α (hipoksijas induciblo faktoru) un LOXL2 signālu kaskādi.
Šis raksts žurnālā „Biomedicine & Pharmacotherapy” liecina, ka ibrutinibu var izmantot kā lielisku radiosensibilizatoru pacientiem ar aizkuņģa dziedzera vēzi. In vitro pētījums ar BxPC-3 šūnām liecina, ka tas samazina BxPC3 EGFR fosforilāciju un pAKT ekspresiju, kā arī lejuplinkā esošo gēnu ekspresiju, ko regulē augšup radioterapija.
Chelidonīns izraisa apoptozi, regulējot GADD45a-p53 cilvēka aizkuņģa dziedzera vēža šūnās
Šis pētījums žurnālā „Integrative Cancer Therapies” liecina, ka dabiskais produkts chelidonīns izraisa apoptozi cilvēka aizkuņģa dziedzera šūnās BxPC-3, regulējot BxPC3 p53 un GADD45a signālu pārraidi.
Resursi par BxPC-3 šūnu līniju: protokoli, video un cits
BxPC-3 šūnu līnijai ir daudzas pievilcīgas priekšrocības, kas to padara piemērotu izmantošanai pētniecībā. Daudzos tiešsaistes resursos par BxPC-3 šūnu līniju ir minēti tās apstrādes, uzturēšanas un transfekcijas protokoli.
- BxPC3 transfekcija: Šis video ir soli pa solim izstrādāts ceļvedis, lai apgūtu transfekcijas protokolu BxPC-3 šūnām.
Šajā raksta sadaļā ir iekļautas dažas saites, kurās izskaidroti BxPC3 šūnu kultūras protokoli.
- BxPC3 šūnu kultūra: Šī tīmekļa vietne palīdzēs jums apgūt protokolus par kriokonservētu un proliferatīvu BxPC-3 kultūru subkultivēšanu un apstrādi.
Atsauces
- Kim, Y., et al., Pancreatic ductal adenocarcinoma šūnu līniju salīdzinošā proteomiskā profilēšana. Mol Cells, 2014. 37(12): 888.–98. lpp.
- Kirtonia, A., et al., Laminin-5 gamma-2 pārmērīga ekspresija veicina aizkuņģa dziedzera duktalās adenokarcinomas tumorigenēzi caur EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR kaskādi. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): 362. lpp.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus augļu ekstrakti samazina dzīvotspēju un izraisa apoptozi aizkuņģa dziedzera vēža šūnās in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: 2073.–2084. lpp.
- An, E.-J., et al., Oxialis obtriangulata pretvēža potenciāls aizkuņģa dziedzera vēža šūnās, regulējot ERK/Src/STAT3 mediēto ceļu. Molecules, 2020. 25(10): 2301. lpp.