Užterštumas ląstelių kultūroje: Ką daryti ir kaip to išvengti?

Ląstelių kultūrų užterštumas tebėra viena didžiausių laboratorinių tyrimų problemų, galinčių pakenkti eksperimento teisingumui ir atkuriamumui. "Cytion" supranta, kad sterilių sąlygų palaikymas yra labai svarbus ir kokį poveikį užterštumas gali turėti jūsų vertingiems tyrimams.

Prevencijos strategijos: Pirmoji gynybos linija

Ląstelių kultūrų užterštumo prevencijai reikia visapusiško požiūrio, kuris prasideda nuo tinkamos įrangos ir griežtų protokolų. "Cytion" rekomenduoja sudaryti griežtą prevencinės techninės priežiūros tvarkaraštį visai kultūrų įrangai, įskaitant reguliarų CO2 inkubatorių, mikroskopų ir biologinės saugos spintų kalibravimą. Gerai prižiūrima ląstelių bankininkystės sistema yra labai svarbi siekiant išsaugoti neužterštas atsargines atsargas.

Griežtai nerekomenduojama nuolat naudoti antibiotikų kaip prevencinės priemonės, nes tai gali paslėpti nedidelį užterštumą ir paskatinti atsparių padermių vystymąsi. Vietoj to daugiausia dėmesio skirkite griežtai aseptinei technikai ir tinkamiems steriliems protokolams. Dirbant su jautriomis ląstelių linijomis, tokiomis kaip HeLa ląstelės, bet koks technikos pažeidimas gali lemti greitą užterštumo plitimą.

Pagrindinės prevencijos priemonės:

• Reguliarus darbo paviršių valymas ir dezinfekavimas
• Tinkamas asmeninių apsaugos priemonių naudojimas
• Sterilūs darbo metodai atliekant visas ląstelių auginimo procedūras
• Reguliari įrangos veikimo stebėsena
• Išsamūs darbuotojų mokymai apie aseptinę techniką

Siekdami optimalios prevencijos, įgyvendinkite standartizuotą tyrimų tvarkaraštį, naudodamiesi mūsų mikoplazmos tyrimų paslaugomis, kad būtų užtikrintas ankstyvas bet kokio galimo užkrėtimo nustatymas.

Aptikimo metodai: Ankstyvas taršos atpažinimas

Ankstyvas užteršimo nustatymas yra labai svarbus siekiant išlaikyti ląstelių kultūrų vientisumą. Vizualinė apžiūra mikroskopu išlieka pirmoji aptikimo linija, tačiau ją reikėtų papildyti reguliariais sterilumo tyrimais. "Cytion" rekomenduoja įdiegti mūsų ląstelių linijų autentiškumo nustatymo paslaugą kaip reguliaraus stebėsenos protokolo dalį.

Dažniausi užterštumo požymiai yra šie:

• Netikėti terpės pH pokyčiai (spalvos pokyčiai)
• Drumsta arba drumsta terpės išvaizda
• Neįprasti ląstelių morfologijos pokyčiai
• Sumažėjęs augimo greitis
• Plūduriuojančios šiukšlės

Norint aptikti plika akimi dažnai nematomą mikoplazmą, būtina reguliariai atlikti tyrimus. Mūsų " Premium Mycoplasma" testas gali nustatyti užterštumą, kol jis dar nepakenkė jūsų tyrimų vientisumui. Ypač dirbant su tokiomis jautriomis linijomis kaip HEK293 ląstelės, labai svarbu sudaryti reguliarų tyrimų tvarkaraštį.

Reagavimo protokolai: Imtis neatidėliotinų veiksmų

Aptikus taršą, būtina imtis skubių ir ryžtingų veiksmų. "Cytion" rekomenduojama nedelsiant išmesti užterštas kultūras ir grįžti prie ankstesnių, neužterštų atsargų. Jei dirbate su tokiomis vertingomis linijomis kaip MCF-7 ląstelės, tinkama ląstelių bankininkystės sistema tampa neįkainojama.

Aptikę užteršimą, nedelsdami imkitės šių veiksmų:

• Užteršimo atvejį kruopščiai dokumentuokite
• Sunaikinkite visas užkrėstas kultūras laikydamiesi tinkamų biologinės saugos protokolų
• Karantinuokite visas galimai paveiktas medžiagas
• Nuodugniai išvalykite ir nukenksminkite paveiktą darbo vietą
• Peržiūrėkite ir patikrinkite užšaldytų atsargų būklę

Virusinio užteršimo atveju, kuris yra ypač sudėtingas, rekomenduojame iš patikimo šaltinio įsigyti naujų, sertifikuotų neužterštų atsargų. Dirbdami su šviežiomis atsargomis, pasinaudokite mūsų ląstelių linijų autentiškumo nustatymo paslaugomis, kad užtikrintumėte naujų kultūrų vientisumą.

Atminkite, kad labai nerekomenduojama bandyti "gelbėti" užkrėstas kultūras antibiotikais, nes tai gali užmaskuoti pagrindines problemas ir paskatinti atsparių padermių vystymąsi. Vietoj to sutelkite dėmesį į prevenciją ir palaikykite tinkamas atsargines atsargas naudodami mūsų užšaldymo protokolus.