1 protokolas: Aseptinių technikų, skirtų grynai ląstelių kultūrų praktikai, įsisavinimas
Ląstelių kultūrų tyrimuose aseptinių sąlygų laikymasis yra labai svarbus eksperimentų sėkmei ir atkuriamumui. "Cytion" sukūrėme išsamius protokolus, kad užtikrintume, jog jūsų vertingos ląstelių linijos išliktų neužterštos, o tyrimų rezultatai būtų kuo geresni.
| Pagrindinės išvados | |
|---|---|
| ? Asmeninė apsauga | Prieš pradėdami visada mūvėkite sterilias pirštines, dėvėkite laboratorinį chalatą ir naudokite tinkamas asmenines apsaugos priemones |
| ? Paviršiaus dezinfekavimas | 70 % izopropanolis būtinas spintai ir įrangai sterilizuoti |
| ? Oro srauto valdymas | Palaikykite tinkamą laminarinį srautą, mažindami greitus judesius |
| ⚠️ Užteršimo prevencija | Niekada nelieskite veido ar išorinių paviršių dirbdami gaubte |
| ? Atliekų tvarkymas | Tinkamas užterštų medžiagų šalinimas naudojant natrio hipochloritą |
Asmeninė apsauga: Sterilios technikos pagrindas
Tinkamos asmeninės apsaugos priemonės (AAP) yra neužterštos ląstelių kultūros pagrindas. Prieš pradėdami dirbti su mūsų HeLa ląstelėmis ar bet kokiomis jautriomis ląstelių linijomis, tyrėjai privalo mūvėti sterilias pirštines, dėvėti švarų laboratorinį chalatą, užsidėti apsauginį skydelį, avėti batus ir užsidėti galvos apdangalą. Ši daugiasluoksnė apsauga yra ne tik asmeninis saugumas - ji labai svarbi siekiant apsaugoti vertingas kultūras, pavyzdžiui, mūsų MCF-7 ląsteles, nuo galimo užteršimo. Dirbdami su pirštinėmis nepamirškite, kad užteršimas gali įvykti per sąlytį su išoriniais paviršiais. Jei pirštinės užterštos, nedelsdami dezinfekuokite jas 70 % izopropanoliu ir leiskite 30 sekundžių tinkamai dezinfekuoti. Dirbant su specializuotomis linijomis, pavyzdžiui, mūsų PC-3 ląstelėmis, rekomenduojame keisti pirštines po darbo su bet kokiomis galimai užterštomis medžiagomis.
Paviršiaus dezinfekavimas: Sterilios darbo vietos kūrimas
Prieš pradedant bet kokius ląstelių kultūrų auginimo darbus, būtina kruopščiai dezinfekuoti biologinės saugos kabinetą. Pradėkite purkšti visus spintos paviršius 70 % izopropanoliu - patikrinta sterilizavimo priemone, kuri veiksmingai pašalina mikrobinius teršalus ir greitai išgaruoja. Dirbant su jautriomis ląstelių linijomis, tokiomis kaip HeLa ar MCF-7 ląstelės, kiekvieną į kabinetą patenkančią įrangą reikia nuvalyti izopropanoliu suvilgyta servetėle. Tai apima terpės buteliukus, pipetės antgalių dėžutes ir pagalbines pipetes. Ilgalaikiam sterilumo palaikymui, ypač dirbant su mūsų U2OS ląstelėmis, rekomenduojame periodiškai giliai valyti atitinkamomis dezinfekcinėmis priemonėmis ir reguliariai fumiguoti kabinetą pagal gamintojo rekomendacijas.
Oro srauto valdymas: Laminarinio srauto vientisumo palaikymas
Tinkamas oro srauto valdymas biologinės saugos spintoje yra labai svarbus siekiant apsaugoti kultūras nuo oro teršalų. Dirbdami su jautriomis ląstelių linijomis, tokiomis kaip mūsų U937 ląstelės, atlikite sklandžius, apgalvotus judesius, kad išsaugotumėte laminarinio srauto barjerą. Staigūs judesiai sukelia turbulenciją, dėl kurios gali būti pažeistas sterilumas ir į kultūras gali patekti teršalų. Siekdami optimaliai apsaugoti vertingas linijas, pavyzdžiui, mūsų HUVEC ląsteles, užtikrinkite, kad visi darbai būtų atliekami bent 6 colių atstumu nuo spintos priekinio krašto. Kad išlaikytumėte spintos sterilumą, kalbėjimas, kosulys ar čiaudulys turi būti nukreipti nuo darbo zonos. Tai ypač svarbu dirbant su mūsų pirminėmis ląstelių linijomis, pavyzdžiui, žmogaus mezenchiminėmis kamieninėmis ląstelėmis, kurios yra ypač jautrios užteršimui.
Užterštumo prevencija: Nulinės tolerancijos metodas
Kryžminės taršos prevencija reikalauja griežtos disciplinos ląstelių kultūrų aplinkoje. Dirbdami su mūsų HeLa ląstelėmis arba HUVEC ląstelėmis, būtinai stenkitės, kad rankos su pirštinėmis nesiliestų su nesteriliais paviršiais. Procedūrų metu niekada nelieskite veido, plaukų ar daiktų, esančių už kabineto ribų. Jei įvyko išorinis kontaktas, prieš tęsdami darbą nedelsdami pakeiskite pirštines. Ilgalaikei ląstelių linijų priežiūrai rekomenduojame naudotis mūsų mikoplazmos tyrimo paslaugomis, kad būtų užtikrintas kultūros vientisumas.
Atliekų tvarkymas: Tinkami šalinimo protokolai
Tinkamas ląstelių kultūrų atliekų šalinimas yra labai svarbus laboratorijos saugai ir užterštumo kontrolei. Visas skystas atliekas, kuriose yra biologinės medžiagos, reikia apdoroti natrio hipochloritu (10 000 ppm) ir palaikyti biologinės saugos spintoje mažiausiai dvi valandas - geriausia per naktį. Tai ypač svarbu dirbant su mūsų specializuotomis linijomis, tokiomis kaip MCF-7 ar MSC ląstelės. Pasibaigus apdorojimo laikotarpiui, atliekas išmeskite per atitinkamas drenažo sistemas su dideliu kiekiu vandens. Kietoms atliekoms naudokite specialius biologinio pavojaus konteinerius ir laikykitės institucinių autoklavavimo procedūrų.
Ląstelių kultūrų kompetencijos palaikymas
Aseptinės technikos įvaldymas yra sėkmingo darbo su ląstelių kultūromis pagrindas. "Cytion" laikosi šių griežtų standartų, kad užtikrintų aukščiausios kokybės ląstelių linijas jūsų tyrimams. Siekdami nuolatinės paramos ir kokybės užtikrinimo, rekomenduojame reguliariai tikrinti ląstelių linijų autentiškumą ir atlikti mikoplazmos tyrimus. Mūsų išsamūs " Cell Culture Basics" ištekliai yra prieinami jūsų mokslinių tyrimų meistriškumui palaikyti.