NCI-H1299 ląstelės: Plaučių vėžio ląstelių NCI-H1299 tyrimai ir klinikinė reikšmė
NCI-H1299 yra imortalizuota žmogaus nesmulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių linija, plačiai naudojama imuninės onkologijos, vėžio ir vaistų paieškos tyrimuose. Be to, mokslininkai šias ląsteles naudojo tirti jautrumą vaistams, pagrindinius signalinius kelius ir molekulinius mechanizmus, susijusius su plaučių vėžiu. Be to, šios ląstelės naudojamos tiriant virusines infekcijas, pavyzdžiui, SARS-CoV-2.
Bendrosios NCI-H1299 ląstelių savybės ir kilmė
Pirmas dalykas, kurį reikia žinoti apie ląstelių liniją, yra jos kilmė ir bendrosios charakteristikos, nes jos padeda numatyti jos panaudojimą tyrimuose. Ši straipsnio dalis padės jums sužinoti svarbią informaciją apie NCI-H1299 kilmę ir savybes. Pavyzdžiui, kas yra NCI-H1299 plaučių vėžio ląstelės? Kokio tipo ląstelės yra NCI-H1299? Kokio dydžio yra NCI-H1299 ląstelės? Kuo skiriasi A549 ir NCI-H1299?
- NCI-H1299 ląstelių linija buvo gauta iš 43 metų kaukazietiškos lyties vėžiu sergančio paciento plaučių limfmazgių metastazių.
- Šios ląstelės turi homozigotinę dalinę p53 geno deleciją, todėl jos neišreiškia p53 baltymo. NCI-H1299 p53 baltymo raiškos trūkumas lemia H1299 plaučių vėžio ląstelių proliferacijos tendenciją.
- Be p53, šiose imortalizuotose ląstelėse nustatyta ir NCI-H1299 KRAS mutacija, lemianti jų augimo, dauginimosi, migracijos ir invazijos savybes.
- NCI-H1299 kariotipas yra beveik diploidinis.
- NCI-H1299 ląstelių morfologija panaši į epitelio ląstelių.
- Šios ląstelės yra plokščios, o jų storis mažesnis nei 5 µm.
NCI-H1299 ir A549
NCI-H1299 ir A549 yra nesmulkiojo plaučių vėžio ląstelių linijos. NCI-H1299 ląstelės yra agresyvesnės ir jautresnės nei A549. Abiejose yra gana panašių mutacijų, pavyzdžiui, KRAS. Tačiau, skirtingai nei NCI-H1299 ląstelėse, A549 ląstelėse ekspresuojamas P53 genas.
Kultivavimo informacija
Palaikyti ląstelių linijos kultūrą nėra lengva, kol nežinote visos svarbiausios informacijos apie ją, įskaitant: Kas yra NCI-H1299 padvigubėjimo laikas? Koks yra NCI-H1299 sėjimo tankis? Kas yra NCI-H1299 ląstelių terpė? Kaip auginti NCI-H1299 ląstelių linijas? Šiame skyriuje sužinosite atsakymus į visus šiuos klausimus apie NCI-H1299 ląstelių kultivavimą.
Pagrindiniai NCI-H1299 ląstelių kultivavimo aspektai
|
Padvigubėjimo laikas: |
NCI-H1299 ląstelių padvigubėjimo laikas yra 22-30 valandų. |
|
Prigludusios arba suspenduotos: |
NCI-H1299 yra adherentinė ląstelių linija. |
|
Subkultivavimo santykis: |
NCI-H1299 ląstelės subkultūruojamos rekomenduojamu santykiu nuo 1:3 iki 1:6. Sėjant adherentinės ląstelės plaunamos 1x PBS ir inkubuojamos su "Accutase" perėjimo tirpalu 8-10 min. aplinkos temperatūroje. Atsiskyrusios ląstelės užpilamos šviežia mitybine terpe ir centrifuguojamos. Tada ląstelių granulės resuspenduojamos ir ląstelės supilamos į naujas kolbas su auginimo terpe. |
|
Augimo terpė: |
RPM1 1640 yra ideali NCI-H1299 ląstelių terpė. Ji papildyta 10 % embrioninio galvijų serumo, 4500 mg/l gliukozės, 2,0 mM L-glutamino, 1 mM natrio piruvato, 1500 mg/l NaHCO3 ir 10 mM HEPES. Medžiaga turėtų būti atnaujinama kas 2-3 kartus per savaitę. |
|
Augimo sąlygos: |
NCI-H1299 plaučių vėžio ląstelių kultūros palaikomos drėkinamame inkubatoriuje 37 °C temperatūroje su 5 % CO2. |
|
Laikymas: |
NCI-H1299 ląstelių liniją galima ilgai laikyti skysto azoto garų fazėje arba itin žemos temperatūros šaldikliuose žemesnėje nei -150 °C temperatūroje. |
|
Šaldymo procesas ir terpė: |
CM-1 arba CM-ACF yra NCI-H1299 ląstelių šaldymo terpės. Ląstelės užšaldomos taikant lėtą užšaldymo procesą, kai temperatūra per minutę sumažėja tik 1 laipsniu, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas. |
|
Atšildymo procesas: |
Užšaldytos NCI-H1299 ląstelės greitai maišomos iš anksto įkaitintoje 37 laipsnių Celsijaus temperatūros vandens vonelėje 40-60 sekundžių, kol lieka nedidelis ledo gabalėlis. Atšildytos ląstelės užpilamos šviežia terpe ir gali būti tiesiogiai auginamos naujose kolbose arba centrifuguojamos. Pirmuoju atveju terpę reikia pakeisti po 24 valandų inkubacijos. Centrifugavimas padeda pašalinti užšalusios terpės elementus. Po to surinktos ląstelės resuspenduojamos šviežioje terpėje ir išpilstomos į naują kolbą kultivavimui. |
|
Biologinės saugos lygis: |
NCI-H1299 ląstelių kultūroms auginti būtina 1 biologinės saugos lygio laboratorija. |
Įsigykite NCI-H1299 ląstelių liniją: aukštos kokybės mokslinių tyrimų priemonės plaučių vėžio biologijai tirti
NCI-H1299 ląstelių privalumai ir trūkumai
Kaip ir kitos žmogaus vėžio ląstelių linijos, NCI-H1299 taip pat pasižymi tam tikromis išskirtinėmis savybėmis, susijusiomis su tam tikrais privalumais ir trūkumais. Čia apibendrinome keletą svarbiausių iš jų.
Privalumai
Pagrindiniai NCI-H1299 nesmulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių linijos privalumai yra šie:
-
In vitro plaučių vėžio modelis
NCI-H1299 ląstelių linijos buvo sukurtos iš plaučių vėžio metastazių limfmazgiuose, todėl pasižymi gana panašiomis savybėmis. Todėl šios ląstelės gali būti in vitro modelis plaučių vėžio biologijai, ląstelių ir molekuliniams mechanizmams tirti, galimiems vaistams tirti ir išbandyti.
-
Lengva auginti
NCI-H1299 ląsteles lengva kultivuoti ir išlaikyti tyrimų laboratorijoje. Nėra jokių įmantrių ląstelių auginimo reikalavimų ir procedūrų.
-
NCI-H1299 P53 ir NCI-H1299 KRAS mutacijos
NCI-H1299 ląstelėse nėra p53 geno raiškos, todėl ląstelės gali intensyviai daugintis. Be to, jos turi KRAS mutaciją, kuri prisideda prie ląstelių augimo, dauginimosi, invazijos ir migracijos. Atsižvelgdami į tai, mokslininkai naudoja H1299 ląsteles molekuliniams mechanizmams, susijusiems su KRAS ir P53 mutacijomis, tirti.
Trūkumai
NCI-H1299 ląstelių trūkumai yra šie:
-
Audinių specifiškumas
NCI-H1299 kilusios iš plaučių audinio. Todėl jos pritaikomumas dažniausiai apsiriboja plaučių karcinomos tyrimais. Ji gali nevisiškai atspindėti kitų vėžio tipų heterogeniškumą ir bendrąsias savybes.
NCI-H1299 ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams
NCI-H1299 ląstelių linija plačiai naudojama plaučių vėžio tyrimams. Čia paminėtos kelios perspektyvios šios ląstelių linijos taikymo sritys.
- Vėžio biologija: NCI-H1299 ląstelės yra puikus mokslinių tyrimų įrankis vėžio vystymuisi, progresavimui ir susijusiems ląstelių bei molekuliniams mechanizmams tirti. Šiose ląstelėse yra tam tikrų mutacijų, todėl tyrėjai gali tirti vėžinių ląstelių elgesį, signalinius kelius ir genų raiškos profilius. Keliuose tyrimuose NCI-H1299 nesmulkialąstelinės plaučių karcinomos ląstelių linija naudota plaučių vėžio biologijai tirti. Pavyzdžiui, 2018 m. atliktame tyrime, naudojant NCI-H1299 ląsteles, buvo tiriamas signalizacijos kelias, susijęs su plaučių vėžio ląstelių apoptoze. Tyrėjai nustatė, kad PI3K/AKT kelias prisideda prie ląstelių dauginimosi, o jo slopinimas gali sukelti vėžio ląstelių mirtį [1]. Panašiai kitame tyrime buvo nagrinėjami mechanizmai, susiję su NCI-H1299 epitelio-mezenchiminiu perėjimu (EMT). Šiame tyrime pasiūlyta, kad ekstraląstelinis baltymas SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) prisideda prie NCI-H1299 EMT ir migracijos, taigi skatina ląstelių navikinę genezę - SPARC baltymas veikia kaip TGF-β1 signalų tarpininkas [2].
- Vaistų atradimas ir atranka: NCI-H1299 - žmogaus plaučių vėžio ląstelių linija - plačiai naudojama potencialių vaistų toksiškumui ir veiksmingumui įvertinti. Be to, mokslininkai ją naudoja priešvėžiniams vaistams tirti. Tyrimuose šios ląstelės taip pat naudojamos galimiems vaistų taikiniams ir atsparumo mechanizmams nustatyti. Pavyzdžiui, Xiao-Yun Shen ir kolegų atliktame tyrime buvo tiriamas natūralaus junginio bruceino D (BD) priešvėžinis potencialas. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad BD reikšmingai stabdo NCI-H1299 ląstelių proliferaciją, invaziją ir migraciją. Todėl jis gali būti laikomas potencialia pagalbine terapija gydant nesmulkialąstelinę plaučių karcinomą [3]. Panašiai tyrime buvo vertinamas citotoksinis ksantohumolio vien tik ir kartu su chemoterapiniu vaistu cisplatina poveikis NCI-H1299 plaučių vėžio ląstelėms [4].
Mokslinių tyrimų publikacijos su NCI-H1299 ląstelėmis
Kai kurios svarbios ir dažniausiai cituojamos mokslinių tyrimų publikacijos apie NCI-H1299 plaučių karcinomos ląstelių liniją pateikiamos čia.
Šis straipsnis publikuotas žurnale "Human and Experimental Toxicology" (2021 m.). Tyrime siūloma, kad indolas-3-karbinolis sukelia H1299 ląstelių apoptozę per reaktyvių deguonies rūšių (ROS) lygio padidėjimą.
Šis tyrimas buvo paskelbtas 2018 m. žurnale "Cellular Physiology and Biochemistry". Tyrimo rezultatai atskleidė, kad kofeino rūgšties ir paklitakselio derinys pasižymi sinergetiniu priešvėžiniu poveikiu nesmulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių linijai NCI-H1299.
Šis mokslinis straipsnis paskelbtas žurnale "Molecular Medicine Reports" (2018 m.). Tyrime įvertintas priešvėžinis triterpenoidinio saponino tubeimozido-1 poveikis ir jį lemiantys mechanizmai NCI-H1299 ląstelių linijoje.
Pristimerinas sukelia apoptozę ir slopina H1299 plaučių vėžio ląstelių proliferaciją, migraciją
Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale "Journal of Cancer" (2020), siūloma, kad natūralus junginys pristimerinas slopina NCI-H1299 ląstelių proliferaciją ir migraciją.
Žmogaus plaučių adenokarcinomos H1299 ląstelių VIPR1 geno reguliavimo mechanizmas
Šiame žurnale Medical Oncology (2019) paskelbtame tyrime buvo nagrinėjamas galimas VIPR1 geno perteklinės ekspresijos poveikis NCI-H1299 adenokarcinomos ląstelių linijai.
NCI-H1299 ląstelių linijos ištekliai: Žiniasklaidos šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt
Čia pateikiami keli internetiniai ištekliai, susiję su NCI-H1299 ląstelėmis.
- NCI-H1299 transfekcija: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas NCI-H1299 ląstelių linijos pereinamosios transfekcijos protokolas.
- Adherentinės ląstelių linijos subkultūrinimas: Šiame vaizdo įraše sužinosite bendrą adherentinės ląstelių linijos subkultūrinimo procedūrą.
Šioje nuorodoje pateikiama informacija apie NCI-H1299 ląstelių kultūrą.
- NCI-H1299 ląstelių linija: Ši nuoroda padės sužinoti apie NCI-H1299 ląstelių pasavimo ir transfekcijos protokolą.
Dažniausiai užduodami klausimai apie NCI-H1299 ląstelių liniją
Nuorodos
- Gu, J. ir kt., EGCG sukeltos apoptozės plaučių vėžio ląstelėse tyrimas slopinant PI3K/Akt signalinį kelią. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al, SPARC veikia kaip TGF-β1 tarpininkas skatinant epitelio-mezenchiminį perėjimą A549 ir H1299 plaučių vėžio ląstelėse. Biofactors, 2018. 44(5): p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al, A study on the mechanism of bruceine D in the treatment of non-small cell lung cancer H1299 cells. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Xanthohumol ir jo derinio su cisplatina citotoksinis poveikis žmogaus metastazavusio plaučių vėžio H1299 ląstelėms. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): p. 1-15.