INS-1 ląstelių linija

INS-1 yra gerai apibūdinta žiurkių insulinomos ląstelių linija, plačiai naudojama diabeto tyrimams. INS-1 ląstelės išskiria insuliną po gliukozės stimuliacijos, todėl jos naudojamos gliukozės metabolizmui, beta ląstelių fiziologijai ir insulino sekrecijos reguliavimui tirti. Be to, šios ląstelės taip pat naudojamos atrenkant, bandant ir kuriant galimus vaistus nuo cukrinio diabeto.

Šiame straipsnyje pateikiama visa būtina informacija apie INS-1 beta ląsteles, kurią reikia žinoti prieš naudojant jas savo tyrimuose. Daugiausia sužinosite:

Bendrąsias INS-1 ląstelių savybes ir kilmę
INS-1 ląstelių linija: INS INS INS INS INS INS INS INS INS INS INS INS INS
INS-1 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
INS-1 žiurkių insulinomos ląstelių mokslinių tyrimų taikymą
Mokslinės publikacijos su INS-1 beta ląstelėmis
INS-1 ląstelių linijos ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1. INS-1 ląstelių bendrosios savybės ir kilmė

Žinodami apie bendrąsias ląstelių linijos savybes ir kilmę, galite veiksmingai ir efektyviai ją naudoti savo tyrimuose. Šiame straipsnio skyriuje rasite informacijos apie INS-1 kilmę ir bendrąsias savybes. Sužinosite: Kas yra INS-1 žiurkių insulinomos ląstelių linija? Kokios yra bendrosios INS-1 savybės? Kas yra INS-1 832/3 ląstelių linija? Kas yra INS-1E?

INS-1 ląstelės iš pradžių buvo išskirtos iš 666 dienų amžiaus žiurkės, sergančios rentgeno spindulių sukelta transplantuojama insulinoma.
INS-1 ląstelės yra dvihormoninės. Jos vienu metu ekspresuoja insulino ir progliukagono baltymus. Šios ląstelės laikomos nesubrendusiomis, nes pasižymi mažu Nkx6.1 transkripcijos faktoriaus raiškos lygiu ir neturi alfa ląstelių žymenų [1].
Yra du INS-1 ląstelių subklonai, t. y. INS-1E ir INS-1 832/3.
INS-1E skiriasi nuo motininės ląstelių linijos INS-1 sekreto atsaku į gliukozę ir insulino kiekį.
INS-1 832/3 arba INS-1 832/13 taip pat yra INS-1 ląstelių linijos subklonas. Tai neįkainojamas modelis kasos salelių beta ląstelių funkcijai ir insulino sekrecijos reguliavimui tirti. Ji taip pat skiriasi nuo motininių INS-1 ląstelių gliukoze stimuliuojamos insulino sekrecijos (GSIS) kontekste.

3D insulino tarpininkaujamo gliukozės pasisavinimo modeliavimas.

2. INS-1 ląstelių linija: Kultivavimo informacija

Kad galėtumėte efektyviai dirbti su ląstelių linija ir ją prižiūrėti, turite žinoti toliau pateiktą kultivavimo informaciją. Šioje straipsnio dalyje bus aptarti visi svarbiausi INS-1 ląstelių kultivavimo klausimai: Kaip kultivuoti INS-1 beta ląsteles? Koks yra INS-1 ląstelių kultivavimo protokolas? Koks yra INS-1 ląstelių padvigubėjimo laikas? Kokia yra INS-1 žiurkių insulinoma ląstelių terpė?

Pagrindiniai INS-1 ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	INS-1 ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas yra maždaug 44 valandos.
Prisitvirtinusios arba suspenduotos:	INS-1 ląstelės auga ir suspensijos, ir adherentinės.
Subkultivavimo santykis:	INS-1 ląstelės subkultūruojamos 1:3 santykiu. Trumpai tariant, surenkamos suspenduotos ląstelės. Adheravusios ląstelės nuplaunamos PBS ir inkubuojamos su Accutase tirpalu. Po atskyrimo ląstelės užpilamos šviežia terpe. Po to tiek suspenduotos, tiek adherentinės ląstelės centrifuguojamos ir surenkamos. Ląstelės kruopščiai resuspenduojamos ir paskirstomos į naujas kolbas auginimui.
Augimo terpė:	INS-1rat insulinoma ląstelių linijai auginti naudojama RPM1 1640. Medžiaga papildyta 10 % termiškai inaktyvuoto galvijų embrioninio serumo, 2,1 mM stabilaus glutamino, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO3 ir 1 mM natrio piruvato.
Augimo sąlygos:	INS-1 ląstelės laikomos drėkinamajame inkubatoriuje, kurio temperatūra 37 °C, nuolat tiekiamas 5 % CO2.
Laikymas:	INS-1 beta ląstelės gali būti ilgai laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame šaldiklyje.
Šaldymo procesas ir terpė:	INS-1 ląstelėms užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF terpė, kurioje vyksta lėtas užšaldymo procesas. Per minutę temperatūra sumažėja tik 1 °C, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas.
Atšildymo procesas:	INS-1 ląstelės atšildomos vandens vonelėje, iš anksto nustatytoje 37 °C temperatūroje, 40-60 sekundžių. Po atšildymo ląstelės užpilamos šviežia terpe ir tiesiogiai supilamos į naują kolbą augimui. Po 24 valandų terpė pakeičiama, kad būtų pašalinti užšaldytos terpės komponentai.
Biologinės saugos lygis:	INS-1 žiurkių insulinomos ląstelėms auginti reikalinga 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

INS-1 ląstelės, augančios salelėse, 10x ir 20x padidinimas.

3. iNS-1 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos ląstelių linijos, INS-1 taip pat turi tam tikrų išskirtinių savybių, susijusių su tam tikrais privalumais ir trūkumais. Čia paminėjome keletą svarbiausių iš jų.

Privalumai

Pagrindiniai INS-1 ląstelių linijos privalumai yra šie:

Gerai apibūdinta
INS-1 yra gerai žinoma ir apibūdinta ląstelių linija. Ji naudota daugelyje mokslinių tyrimų. Ji ilgiau išlaiko savo fenotipines savybes ir insulino sekrecijos gebėjimą, todėl užtikrina patikimus ir nuoseklius eksperimentų rezultatus.
Beta ląstelių modelis
INS-1 ląstelės naudojamos kasos salelių beta ląstelėms tirti, nes jos išskiria insuliną ir reaguoja į gliukozės kiekio svyravimus.

trūkumai

INS-1 ląstelių trūkumai yra šie:

Ne žmogaus kilmės
INS-1 beta ląstelės nėra žmogaus kilmės. Jos buvo gautos iš žiurkių insulinomos. Dėl to gali atsirasti rūšiai būdingų skirtumų ir gali būti ribojamas tiesioginis eksperimentų rezultatų pritaikymas žmogaus fiziologijai.

4. INS-1 žiurkių insulinomos ląstelių INS-1 pritaikymas moksliniams tyrimams

INS-1 beta ląstelės plačiai naudojamos diabeto tyrimams. Čia paminėti keli perspektyvūs šios ląstelių linijos taikymo būdai.

Insulino sekrecijos tyrimai: INS-1 ląstelės geba išskirti insuliną, todėl jos plačiai naudojamos insulino sekrecijos ląsteliniams mechanizmams tirti. Mokslininkai tiria esminius veiksnius, susijusius su insulino išsiskyrimu, įskaitant gliukozės apykaitą, signalinius kelius, hormonus ir farmakologines medžiagas. Tyrimu nustatyta, kad nuo K + ATP jonų kanalo priklausomas kelias reguliuoja insulino sekreciją INS-1 beta ląstelėse [2]. Be to, tyrimai atskleidė, kad GLP-1R ir AKT/PDX1 keliai taip pat dalyvauja insulino sekrecijoje INS-1 žiurkių insulinomos ląstelėse [3].
Beta ląstelių funkcijos tyrimai: INS-1 ląstelės pasižymi į kasos salelių beta ląsteles panašiomis savybėmis, tokiomis kaip jautrumas gliukozės apykaitai ir insulino sekrecija. Todėl jos naudojamos beta ląstelių fiziologiniams procesams ir funkcijoms tirti. 2022 m. atliktame tyrime panaudotos INS-1 ląstelės ir sukurtas beta ląstelių disfunkcijos modelis naudojant _H2O2 Jie tyrė ląstelių gyvybingumą, insulino sekreciją ir su oksidaciniu stresu susijusius žymenis šiose ląstelėse, reaguojant į gydymą natūraliais junginiais [4].
Vaistų atradimas ir kūrimas: Žiurkių insulinomos ląstelės INS-1 plačiai naudojamos antidiabetiniams junginiams ar vaistams tirti ir išbandyti. Jos gali būti panaudotos tiriant galimą gydomųjų medžiagų poveikį insulino sekrecijai ir kitiems svarbiems parametrams. Tyrimu nustatyta, kad loganinas, kinų vaistažolių formulės sudedamoji dalis, apsaugojo INS-1 ląstelių insulino sekrecijos funkciją ir pasižymėjo galimu antidiabetiniu poveikiu. Komponentas šį teigiamą poveikį sukėlė slopindamas FOXO1 geno branduolio translokaciją per PI3K/AKT kelią [5].

550,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300471

5. Mokslinių tyrimų publikacijos su INS-1 beta ląstelėmis

Pateikiame keletą svarbių mokslinių publikacijų, kuriose naudojama INS-1 žiurkių insulinomos ląstelių linija.

Alfa-mangostinas pagerina insulino sekreciją ir apsaugo INS-1 ląsteles nuo streptozotocino sukeltų pažeidimų

Šis tyrimas 2018 m. paskelbtas žurnale "Internation Journal of Molecular Sciences". Tyrime pasiūlyta, kad geltonas kristalinis natūralus junginys alfa-mangostinas skatina insulino sekreciją INS-1 beta ląstelėse ir apsaugo jas nuo beta ląstelių toksino streptozotocino sukeltų pažeidimų.

Gliukoze stimuliuojamos insulino sekrecijos stiprinimas INS-1 ląstelėse epikatechinu nepriklauso nuo jo antioksidacinio aktyvumo

Šis tyrimas buvo paskelbtas 2018 m. žurnale acta pharmacologica sinica. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad epikatechino junginys skatina gliukoze stimuliuojamą insulino sekreciją sočiųjų riebalų rūgščių prisotintose INS-1 beta ląstelėse per CaMKII kelio aktyvinimą.

Naujai atrastas Stevia rebaudiana Bertoni fenilietanoidinis glikozidas veikia insulino sekreciją žiurkių INS-1 salelės β ląstelėse

Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale Molecules (2019), siūloma, kad naujas natūralus junginys feniletanoidų glikozidas veikia insulino sekreciją INS-1 žiurkių insulinoma ląstelėse, todėl turi antidiabetinį potencialą.

Loureirinas B skatina insulino sekreciją per GLP-1R ir AKT/PDX1 kelius

Šis tyrimas paskelbtas žurnale "European Journal of Pharmacology" (2022). Tyrime pasiūlyta, kad natūralus produktas Loureirin B didina insulino sekreciją INS-1 kasos salelių beta ląstelėse per AKT/PDX1 ir GLP-1R kelių moduliaciją.

Withania coagulans priešvėžinis aktyvumas in vitro prieš HeLa, MCF-7, RD, RG2 ir INS-1 vėžio ląsteles ir fitocheminė analizė

Šiame Integrative Medicine Research (2018) straipsnyje įvertintas Withania coagulans ekstrakto priešvėžinis potencialas naudojant INS-1 vėžio ląsteles.

6. INS-1 ląstelių linijos šaltiniai: InS INS INS INS viruso šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Čia pateikiami keli internetiniai ištekliai, kuriuose aprašomos INS-1 ląstelės:

Suspenduotų ląstelių subkultūrinimas: Šiame vaizdo įraše pateikiamas išsamus ląstelių, augančių suspensinėse kultūrose, subkultūrinimo vadovas.
Prigludusių ląstelių subkultūrinimas: Šiame vaizdo įraše rasite bendrąjį adherentinių ląstelių subrandinimo protokolą.

Toliau pateiktoje nuorodoje pateikiamas INS-1 ląstelių kultivavimo protokolas:

INS-1 ląstelių linija: Šioje svetainėje pateikiama visa informacija apie INS-1 ląstelių kultūrą. Joje pateikiama informacija apie INS-1 ląstelių kultūrą ir užšaldymo terpę, subkultūrinimo protokolai, kriokonservuotų ir proliferuojančių INS-1 kultūrų tvarkymas.

Nuorodos

Acosta-Montalvo, A., et al., Progliukagono gaminamų peptidų raiška ir sekrecija žiurkių insulinoma INS-1 ląstelėse. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J. E. ir J. S. Han, A Portulaca oleracea L. extract promotes insulin secretion via a K+ ATP channel dependent pathway in INS-1 pancreatic β-cells. Mitybos tyrimai ir praktika, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al, Loureirin B skatina insulino sekreciją per GLP-1R ir AKT/PDX1 kelius. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenine and swietenolide from Swietenia macrophylla king improve insulin secretion and attenuate apoptosis in H2O2 induced INS-1 cells. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al, Anti-diabetinis loganino poveikis slopinant FOXO1 branduolio translokaciją per PI3K/Akt signalinį kelią INS-1 ląstelėse. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.