Hep2 ląstelės ir jų vaidmuo gerklų vėžio tyrimuose

Hep 2 ląstelės yra pagrindinis in vitro modelis, plačiai naudojamas biomedicininių tyrimų srityse, pavyzdžiui, reumatologijoje, vėžio tyrimuose ir imunologijoje. Šios žmogaus ląstelės, kilusios iš gerklų karcinomos, yra neatsiejamos nuo gerklų navikų kilmės audinių ir specifinių požymių išaiškinimo. Jų reikšmė gerai pripažįstama transliaciniuose vėžio tyrimuose, kur jos labai prisidėjo prie gerklų vėžio prigimties ir kilmės supratimo, žymėdamos reikšmingą vietą gerklų vėžio tyrimų publikacijose [1].

Hep 2 ląstelių kilmė ir bendrosios savybės

Ląstelių linijos kilmė ir bendrosios savybės lemia jos pritaikomumą moksliniuose tyrimuose. Šiame skyriuje sužinosite apie Hep 2 ląstelių kilmę ir kai kurias svarbiausias savybes. Pavyzdžiui, sužinosite: Kas yra HEp 2 ląstelių linija? Koks yra Hep 2 ląstelių šaltinis? Ir kokia yra Hep 2 morfologija?

  • Hep 2, nemirtingą žmogaus epitelio ląstelių liniją, 1954 m. pirmą kartą aprašė H. W. Toolanas kaip gerklų karcinomos ląsteles. Tačiau pastaruoju metu pranešta, kad Hep 2 ląstelių linija sudaryta iš gimdos kaklelio adenokarcinomos ląstelių ir atsirado užteršus Hela ląstelių liniją [2].
  • Hep 2 ląstelėse yra Hela markerinių chromosomų ir nustatyta teigiama keratino bei žmogaus papilomos viruso DNR seka, tai patvirtinta atitinkamai imunoperoksidazės dažymu ir PGR.
  • Hela ląstelių linijos Hep 2 darinys Hep 2 pasižymi į epitelį panašia morfologija.
  • Hep 2 ląstelių linija pasižymi tiek struktūriniais, tiek skaitmeniniais chromosomų sutrūkinėjimais su beveik triploidiniu kariotipu [3].

HeLa gimdos kaklelio vėžio ląstelių dalijimasis mikroskopu.

Hep 2 ląstelių linija: Kultivavimo informacija

Prieš pradėdami dirbti su ląstelių linija, turime žinoti šiuos svarbiausius jos kultivavimo aspektus. Ši informacija gali būti naudinga norint veiksmingai kultivuoti ir palaikyti ląstelių liniją. Turėtumėte žinoti: Koks yra HEp 2 ląstelių padvigubėjimo laikas? Ar Hep 2 ląstelės yra adherentiškos? Koks yra Hep2 ląstelių sėjimo tankis?

Populiacijos padvigubėjimo laikas:

Hep 2 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 40 valandų.

Prigludusios ar suspenduotos:

Hep 2 ląstelės yra adherentiškos ir auga į monosluoksnius.

Sėjimo tankis:

Hep 2 ląstelių kultūrai idealus sėjos tankis yra 1 x104 ląstelės/cm2. Sėjimui adheravusios Hep 2 ląstelės nuplaunamos 1 x PBS tirpalu, po to inkubuojamos su "Accutase" disociacijos tirpalu. Po 8-10 minučių inkubacijos aplinkos temperatūroje ląstelės resuspenduojamos terpėje ir centrifuguojamos. Tada surinktos ląstelės išpilstomos į šviežią terpę ir supilamos į naujas kolbas kultivavimui.

Auginimo terpė:

Hep 2 ląstelėms auginti naudojama EMEM arba Eagle'o minimali pagrindinė terpė. Ši terpė papildyta 10 % FBS, 1,0 g/l gliukozės, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutamino, 1 % NEAA ir 1 mM natrio piruvato, kad ląstelės augtų idealiai. Medžiaga turėtų būti atnaujinama 2-3 kartus per savaitę.

Augimo sąlygos:

Hep 2, kaip ir kitos žinduolių ląstelių linijos, taip pat auginama drėkinamame inkubatoriuje, kurio temperatūra 37 °C ir nuolat tiekiamas 5 % CO2.

Laikymas:

Hep 2 ląstelės gali būti laikomos itin žemos temperatūros elektriniuose šaldikliuose (žemesnėje nei -150 °C temperatūroje) arba skystojo azoto garų fazėje, kad būtų laikomos ilgą laiką.

Šaldymo procesas ir terpė:

Hep 2 ląstelėms užšaldyti rekomenduojama CM-1 arba CM-ACF. Ląstelės turėtų būti užšaldomos taikant lėtą užšaldymo procesą, leidžiantį palaipsniui sumažinti temperatūrą 1 °C ir apsaugantį ląstelių gyvybingumą.

Atšildymo procesas:

Užšaldytų ląstelių buteliukas greitai atšildomas maišant37 °C temperatūrosvandens vonelėje, kol lieka nedidelis ledo gabalėlis. Tada ląstelės sudedamos į šviežią terpę ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Vėliau ląstelių granulės resuspenduojamos terpėje ir ląstelės išpilstomos į kultūrų kolbas. Kad ląstelės priliptų, jos turi beveik 24 valandas ilsėtis.

Biologinės saugos lygis

Hep 2 ląstelių kultūroms tvarkyti ir prižiūrėti rekomenduojama 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

Hep 2 ląstelės prieš ir po to, kai jos pasiekia konfliuencinį lygį.

Hep 2 ląstelių privalumai ir apribojimai

Beveik visoms ląstelių linijoms būdingas unikalus privalumų ir apribojimų derinys, kuris padeda jas naudoti mokslinių tyrimų srityje. Šiame skyriuje aprašomi keli pagrindiniai Hep 2 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai.

Privalumai

Pagrindiniai Hep 2 ląstelių linijos privalumai yra šie:

  • Žmogaus kilmė: Hep 2 yra kilusi iš žmogaus epitelio ląstelių, todėl yra vertingas in vitro modelis žmogaus ligoms ir virusinėms infekcijoms tirti
  • ANA nustatymas: Hep 2 ląstelių linija turi savitą baltymų masyvą, kuriame yra daugybė antigenų, todėl ji yra puikus substratas antinukleariniams antikūnams (ANA) nustatyti. Ši savybė leidžia specifiškai ir labai jautriai nustatyti ANA serume, todėl tai yra labai svarbi diagnostinė priemonė jungiamojo audinio ligoms nustatyti

Apribojimai

  • Chromosominės anomalijos: Hep 2 ląstelėms būdingos įvairios skaitmeninės ir struktūrinės chromosomų anomalijos. Šios anomalijos gali turėti įtakos ląstelių elgsenai ir apriboti jų pritaikomumą tam tikruose laboratoriniuose eksperimentuose
  • Tumorigeniškumas: Hep 2 - iš naviko kilusi žmogaus epitelinių ląstelių linija - gali turėti genetinių anomalijų, kurių paprastai nebūna epitelinėse ląstelėse. Todėl Hep 2 ląstelių naudojimas gali būti ribojamas atliekant konkrečius tyrimus, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama normaliai ląstelių fiziologijai.

Hep 2 ląstelių linijos taikymo biomedicininiuose tyrimuose plėtra

Hep 2 ląstelių linija yra pavyzdinis modelis daugeliui biomedicininių tyrimų sričių. Šios ląstelės, garsėjančios savo universalumu, atlieka svarbų vaidmenį in vitro eksperimentuose, pradedant receptorių analize ir baigiant sudėtingų ligų tyrimais.

Vėžio mechanizmų ir terapinių taikinių tyrimas su Hep 2 ląstelėmis

Hep 2 ląstelės, kurios yra navikinės, yra labai svarbios tiriant vėžio biologijos subtilybes. Jos padeda įžvelgti vėžio signalinius kelius, atlikti mechanistinius tyrimus ir yra pagrindinis priešvėžinių vaistų atrankos ir vertinimo elementas. Pavyzdžiui, įžvalgiame tyrime Hep 2 panaudota siekiant nustatyti miRNA-33a įtaką vėžio ląstelių dauginimuisi. Rezultatai atskleidė antiproliferacinį miRNA-33a poveikį per jos sąveiką su PIM1, žinomu onkogenu, o tai rodo, kad tai naujas terapinis taikinys [4]. Kitu atveju Hep 2 buvo panaudota vertinant Marsdenia tenacissima cinko oksido nanodalelių terapinį potencialą, išryškinant jų antiproliferacinį ir apoptozinį veiksmingumą [5].

Virologijos tyrimų pažanga naudojant Hep 2 ląstelių įžvalgas

Hep 2 ląstelės yra jautrios įvairiems žmogaus virusams, todėl jos yra neįkainojamas šaltinis virusologiniuose tyrimuose. Jos buvo veiksmingai panaudotos SARS-CoV-2 viruso genams išreikšti, siekiant atskleisti sudėtingą viruso ir šeimininko ląstelių mechanizmų sąveiką [6]. Šis pritaikymas ypač svarbus dabartiniu laikotarpiu, kai tokių virusinių infekcijų, kaip COVID-19, supratimas ir kova su jomis yra pasaulinis prioritetas.

Ląstelių funkcijų iššifravimas: Genų manipuliavimas Hep 2 ląstelėse

Hep 2 ląstelių linijos gebėjimas prisitaikyti prie genetinių manipuliacijų pabrėžia jos naudingumą atliekant mechanistinius tyrimus. Tyrėjai naudojasi šia savybe, kad moduliuotų genų raišką ir išsiaiškintų konkrečių genų vaidmenį ląstelės funkcijoms. Vienas iš svarbių tyrimų buvo susijęs su pernelyg didele RNR jungiančio baltymo RBM6 ekspresija Hep 2 ląstelėse, o tai leido ištirti jo naviko slopinimo potencialą ir suteikti vertingų įžvalgų apie vėžio molekulinius pagrindus [7].

Ligų diagnostikos gerinimas taikant Hep 2 ląstelių linijas

Be šių mokslinių tyrimų sričių, Hep 2 ląstelės yra pripažintos dėl savo diagnostinių gebėjimų, ypač nustatant ANA, kurios yra labai svarbios diagnozuojant autoimunines ligas, tokias kaip sisteminė raudonoji vilkligė. Tikslumas, kuriuo Hep 2 ląstelės gali nustatyti ANA, padeda diagnozuoti ir kurti tikslinius gydymo būdus, gerina mūsų supratimą apie autoimunines patologijas ir gerina pacientų priežiūrą.

Šios įvairios Hep 2 ląstelės labai prisidėjo prie pažangos vėžio tyrimų, virusinių infekcijų tyrimų ir ląstelinių mechanizmų tyrinėjimo srityse. Jų indėlis į kliniškai svarbių duomenų gavimą yra neįkainojamas, o tai patvirtina jų nepakeičiamą vaidmenį tiek laboratorijoje, tiek klinikoje. Kadangi moksliniai tyrimai ir toliau vystosi, Hep 2 ląstelių linija neabejotinai išliks pirmaujanti, padėdama atrasti naujus gydymo būdus ir praplėsdama mūsų žinias apie žmogaus sveikatą ir ligas.

Užtikrinkite savo HEp-2 ląstelių liniją šiandien

Hep 2 ląstelės: Mokslinės publikacijos

Toliau pateikiamos įdomios ir dažniausiai cituojamos mokslinių tyrimų publikacijos apie Hep 2 ląsteles.

Hep2 ląstelių linijos ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Hep 2 yra gerai žinoma ląstelių linija. Yra keletas šaltinių, kuriuose aprašoma Hep 2 ląstelių linija.

  • Hep2 ląstelių linijos subkultūrinimas: Šiame vaizdo įraše pateikiamas "žingsnis po žingsnio" vadovas, kaip subkultūruoti Hep 2 ląsteles.
  • Hep 2 ląstelių ANA tyrimas: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas antikūnų prieš branduolius (ANA) tyrimas naudojant Hep 2 ląstelių liniją.
  • Hep 2 kultivavimas: Šioje nuorodoje pateikiama pagrindinė informacija apie Hep 2 ląstelių kultivavimą. Joje pateikiama informacija apie ląstelių dalijimą, užšaldymą ir atšildymą.

Dažniausiai užduodami klausimai apie HEp-2 ląsteles biomedicininiuose tyrimuose

Nuorodos

  1. Fusi, M. ir S. Dotti, HEp-2 ląstelių linijos pritaikymas visiškai be gyvūnų auginimo sistemoms ir ląstelių augimo analizė realiuoju laiku. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
  2. Gorphe, P., Išsami Hep-2 ląstelių linijos apžvalga transliaciniuose gerklų vėžio tyrimuose. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
  3. Wang, M., et al., Cancer-associated fibroblasts in a human HEp-2 established laryngeal xenografted tumor are not derived from cancer cells through epithelial-mesenchymal transition, phenotyically activated but kariotyically normal. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
  4. Karatas, O.F., miR-33a antiproliferacinis potencialas gerklų vėžio Hep-2 ląstelėse per taikinį PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
  5. Wang, Y., et al, Synthesis of Zinc oxide nanoparticles from Marsdenia tenacissima inhibits the cell proliferation and induces apoptosis in laryngeal cancer cells (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
  6. Zhang, J., et al, A systemic and molecular study of subcellular localization of SARS-CoV-2 proteins (Sisteminis ir molekulinis SARS-CoV-2 baltymų subląstelinės lokalizacijos tyrimas). Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
  7. Wang, Q., et al., RNR surišantis baltymas RBM6 kaip naviką slopinantis genas slopina gerklų karcinomos augimą ir progresavimą. Gene, 2019. 697: p. 26-34.

Nustatėme, kad esate kitoje šalyje arba naudojate kitą naršyklės kalbą nei šiuo metu pasirinkta. Ar norite priimti siūlomus nustatymus?

Uždaryti