COS-1 ląstelės: Ląstelinis darbinis arklys genų raiškos tyrimuose

COS-1 ląstelių linija yra į fibroblastus panaši ląstelė, kilusi iš beždžionių inkstų audinio, kurią mokslininkai dažnai naudoja beždžionių virusui SV40 tirti. Šios ląstelės lengvai transfekuojamos ir dažnai naudojamos rekombinantiniams baltymams kurti atliekant įvairius biocheminius, molekulinius ir ląstelių biologijos eksperimentus.

Šiame straipsnyje pateikiama išsami informacija apie COS-1 ląstelių liniją ir visa svarbiausia jums reikalinga informacija. Konkrečiai, įgysite žinių apie:

COS-1 ląstelių liniją: Kilmė ir bendra informacija.
COS-1 ląstelių privalumai ir trūkumai
COS-1 ląstelių moksliniai tyrimai
COS-1 ląstelės: Publikacijos
COS-1 ląstelių linijos šaltiniai, įskaitant protokolus, vaizdo įrašus ir kt
COS-1 ląstelių kultivavimas

1.cOS-1 ląstelių linija: Kilmė ir bendra informacija.

Prieš pradedant bet kokį darbą su ląstelių linija, labai svarbu iš esmės suprasti pačią ląstelių liniją. Tai apima tokią informaciją, kaip ląstelių kilmė, kaip jos buvo išskirtos ir jų savybės. Šiame skyriuje panagrinėsime pagrindinius COS-1 ląstelių ypatumus.

Kas yra COS-1 ląstelių linija?

COS-1 ląstelių liniją sudaro į fibroblastus panašios ląstelės, kurias J. W. F. Cowellas su kolegomis pirmą kartą sukūrė 1981 m. Šios ląstelės buvo sukurtos transformuojant žaliosios beždžionės epitelio ląstelių liniją, žinomą kaip CV-1, mutavusia Simiano viruso SV40 forma. Vėliau sukurta COS-1 ląstelių linija buvo nuodugniai apibūdinta, siekiant atkurti SV40 genomo sritį, kuri anksčiau buvo pašalinta iš replikacijos pradžios. Šios ląstelės išreiškia didelius T antigenus ir kitus baltymus, būtinus teisingai replikuoti žiedinius genomus, pavyzdžiui, plazmides.

Chlorocebus aethiops (Afrikos žalioji beždžionė)

COS-1 ląstelių morfologija panaši į fibroblastų, jos prilimpa prie paviršių ir pasiskirsto kaip monosluoksnis. Šiuo metu nėra žinomų COS-1 ląstelių linijos genetinių variantų. Tačiau gimininga ląstelių linija COS-7 taip pat kilusi iš CV-1 ląstelių ir pasižymi panašiomis savybėmis.

2.cOS-1 ląstelių privalumai ir trūkumai

COS-1 ląstelių linija turi unikalių privalumų ir trūkumų, kuriuos aptarsime toliau.

Privalumai

Patogumas transfekcijai: COS-1 ląstelių linija lengvai transfekuojama įvairiais metodais, įskaitant fizikinius ir cheminius metodus.
Lentivirusų gamyba: COS-1 ląstelių linija yra tinkamas pakavimo šeimininkas aukštos kokybės rekombinantinėms lentivirusinėms dalelėms gaminti be papildomų gryninimo etapų. Šios ląstelės tvirtai prilimpa prie plastikinių paviršių, todėl išvengiama transfekcijos supernatantų su viruso dalelėmis užteršimo [1].
Genų raiška: COS-1 ląstelių linija plačiai naudojama pereinamojo laikotarpio ir stabilios raiškos tyrimams, gaminant daugybę rekombinantinių baltymų peršvirkščiant žiedinėmis plazmidėmis su SV40 replikacijos pradžia [2].

Apribojimai

Ne žmogaus ląstelių linija: Kadangi COS-1 ląstelės yra kilusios iš nežmoginių primatų, rekombinantiniai baltymai, gauti naudojant šią ląstelių liniją, tinka tik laboratoriniams eksperimentams ir negali būti rekomenduojami naudoti žmonėms.

3.cOS-1 ląstelių moksliniai tyrimai

Vienas iš svarbiausių aspektų aptariant ląstelių liniją yra jos pritaikymas moksliniams tyrimams. Šiame skirsnyje bus nagrinėjamos svarbiausios COS-1 ląstelių taikymo sritys moksliniams tyrimams.

Rekombinantinių baltymų gamyba: COS-1 ląstelių linija plačiai naudojama rekombinantiniams baltymams gaminti, naudojant trumpalaikę arba stabilią žiedinių vektorių, turinčių SV40 replikacijos pradžią, transfekciją. Neseniai atliktame tyrime biologai panaudojo COS-1 ląstelių liniją arklių chorioniniam gonadotropinui, rekombinantiniam reprodukciniam hormonui, gaminti [3]. Panašiai kitame tyrime COS-1 ląstelės buvo panaudotos rekombinantiniam vištienos monokloniniam antikūnui prieš tam tikro tipo gripo virusą gaminti [4].
Į virusą panašių dalelių gamyba: COS-1 ląstelės naudojamos kaip pakavimo šeimininkai aukštos kokybės lentivirusams gaminti ir gali būti naudojamos virusinėms vakcinoms gaminti. Atliktame tyrime COS-1 ląstelių linija panaudota neužkrečiamoms, bet labai imunogeniškoms į Dengė virusą panašioms dalelėms, kurios yra veiksmingos vakcinos kandidatės, gaminti [5].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305005

4.cOS-1 ląstelės: Publikacijos

Keletas svarbių publikacijų apie COS-1 ląsteles:

Dengės viruso dalelių gamyba ir gryninimas iš COS-1 ląstelių: Šiame leidinyje "Bio-Protocol" aprašomas COS-1 ląstelių naudojimas labai imunogeniškoms į Dengė virusą panašioms dalelėms gaminti.
Rekombinuoto arklių chorioninio gonadotropino ekspresijos analizė trijose šeimininkų sistemose - E. coli BL21C, vabzdžių ląstelių lizate Sf ir žinduolių ląstelėse COS-1: Šiame tyrime mokslininkai palygino rekombinantinio reprodukcinio hormono, pvz., arklių chorioninio gonadotropino, gamybą ir potransliacinį modifikavimą skirtingose raiškos sistemose, įskaitant COS-1 žinduolių ląsteles.
Tyrė į erkes panašias flavivirusines daleles kaip genų terapijos pristatymo sistemą: Šiame tyrime buvo naudojamos COS-1 ląstelės į erkinio encefalito virusą (TBEV) panašioms dalelėms gaminti. Šias daleles siūloma naudoti kaip maršrutinį laivą reikiamiems replikonams (t. y. terapiniams genams) pristatyti.
Rekombinantinio vištienos monokloninio antikūno prieš H9N2 paukščių gripo viruso neuraminidazę gamyba: Šiame AMB Express žurnale paskelbtame straipsnyje COS-1 ląstelės panaudotos rekombinantiniams vištiškiems monokloniniams antikūnams prieš paukščių gripo viruso H9N2 tipo neuraminidazę gaminti.
Žmogaus Kv kanalų, išreikštų žinduolių ląstelėse, tirpinimas be detergentų: Šiame tyrime žmogaus Kv kanalams išreikšti buvo naudojama COS-1 žinduolių ląstelių linija, kad būtų galima atlikti kai kuriuos solubilizacijos eksperimentus.

COS-1 ląstelės esant dideliam ir mažam susiliejimui

5.cOS-1 ląstelių linijos ištekliai, įskaitant protokolus, vaizdo įrašus ir kt

Ląstelių kultūrų protokolai

COS-1 ląstelių kultūra: Šioje nuorodoje pateikiama vertingos informacijos apie COS-1 ląstelių skaidymą, užšaldymą ir atšildymą.
COS-1 ląstelės: Šioje nuorodoje pateikiama pagrindinė informacija apie COS-1 ląstelių liniją.

Transfekcijos protokolai

Čia pateikiama keletas šaltinių, kuriuose aprašomas COS-1 ląstelių transfekcijos metodas.

COS-1 ląstelių pereinamoji transfekcija: Šiame dokumente pateikiamas COS-1 ląstelių linijos pereinamosios transfekcijos protokolas.

Vaizdo įrašai, susiję su COS-1 ląstelių linija

Toliau pateikti vaizdo įrašų šaltiniai gali padėti gauti bendros informacijos apie COS-1 ląstelių kultivavimą, priežiūrą ir transfekciją.

Ląstelių perleidimas: Šiame vaizdo įraše aptariami pagrindiniai žinduolių ląstelių linijų kultivavimo būdai.
Prigludusių ląstelių užšaldymas: Šiame vaizdo įraše pateikiama informacija apie adherentinių ląstelių linijų užšaldymą.
Transfekcijos protokolas: Šiame vaizdo įraše pateikiama žinduolių ląstelių transfekcijos procedūra.

6.cOS-1 ląstelių kultivavimas

Būdingas	Informacija
Padvigubėjimo laikas	Maždaug 48 valandos
Prisitvirtinusios arba suspenduotos	Prigludę auga kaip monosluoksnis ant kolbos paviršiaus
Sėjimo tankis	2-4 x 10^4 ląstelės/cm²; prilipusios ląstelės nuplaunamos 1x PBS, apdorojamos Accutase, centrifuguojamos, resuspenduojamos ir išpilstomos į naują kolbą
Augimo terpė	Dulbeko modifikuota Eagle terpė (DMEM), kurioje yra 10 % FBS; terpė turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę
Augimo sąlygos (temperatūra, CO2)	Reikalingas drėkinamas inkubatorius su 5 % CO2 ir 37 °C temperatūra
Laikymas	Žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, skysto azoto garų fazėje
Šaldymo procesas ir terpė	Lėtas užšaldymo metodas, kai temperatūra sumažėja tik 1 °C, naudojant CM-1 arba CM-ACF terpę
Atšildymo procesas	Užšaldytos ląstelės atšildomos inkubuojant jas 37 °C temperatūros vandens vonelėje 40-60 sekundžių ir greitai maišant. Centrifuguokite ląsteles, kad pašalintumėte šaldymo terpę, resuspenduokite granules ir išpilstykite į kolbą su šviežia terpe. Adhezija trunka maždaug 24 valandas.
Biologinės saugos lygis	Dirbant su COS-1 ląstelėmis rekomenduojamas 1 biologinės saugos lygis

Tikimės, kad šiame straipsnyje pateikta pakankamai informacijos, kuri padės jums pradėti dirbti su COS-1 ląstelėmis. Užsisakykite iš mūsų, jei norite naudoti šią ląstelių liniją savo moksliniams tyrimams.

Nuorodos

Smith, S.L. ir T. Shioda, COS-1 beždžionių inkstų epitelio ląstelių kaip pakavimo šeimininko privalumai gaminant mažos apimties aukštos kokybės rekombinantinius lentivirusus. Journal of virological methods, 2009. 157(1): p. 47-54.
MacKenzie, C.J. ir T. Shioda, COS-1Cells as Packaging Host for Production of Lentiviruses. Current protocols in cell biology, 2011. 50(1): p. 26.7. 1-26.7. 15.
Bhardwaj, A., et al, Expression analysis of recombinant equine chorionic gonadotropin in three host systems (Rekombinuoto arklių chorioninio gonadotropino raiškos analizė trijose šeimininkų sistemose): E. coli BL21C, Sf vabzdžių ląstelių lizate ir COS-1 žinduolių ląstelėse. Indian Journal of Animal Research, 2021. 55(1): p. 40-45.
Wang, F., et al. rekombinantinio vištienos monokloninio antikūno prieš H9N2 paukščių gripo viruso neuraminidazę generavimas. AMB Express, 2020 m. 10: p. 1-7.
Galula, J. U., G.-J. J. Chang ir D.-Y. Chao, Dengės viruso į virusą panašių dalelių gamyba ir gryninimas iš COS-1 ląstelių. Bio-protokolas, 2019 m. 9(12): p. e3280-e3280.