BEWO ląstelių linija

BeWo yra žmogaus choriokarcinomos išvesta ląstelių linija, plačiai naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Ji yra vertingas in vitro modelis sudėtingam placentos vystymosi ir žmogaus trofoblasto sinchronizacijos procesui tirti. Mokslininkai taip pat naudoja šias ląsteles trofoblasto ląstelių elgsenai, hormonų gamybai ir medžiagų pernešimui per placentą tirti. Be to, BeWo ląstelės taip pat gali būti naudojamos toksikologijoje, infekcijų ir ligų perdavimo tyrimuose.

Šiame straipsnyje pateikiamos pagrindinės žinios apie BeWo ląsteles, kurios gali padėti jums dirbti su jomis atliekant mokslinius tyrimus. Jis apima:

Bendrosios BeWo ląstelių savybės ir kilmė
BeWo ląstelių linija: Kultivavimo informacija
BeWo ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
BeWo ląstelių panaudojimas moksliniams tyrimams
Mokslinės publikacijos su BeWo ląstelėmis
BeWo ląstelių linijos ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1. Bendrosios "BeWo" ląstelių savybės ir kilmė

Išankstinės žinios apie ląstelių linijos kilmę ir bendrąsias savybes yra labai svarbios norint ją naudoti savo tyrimuose. Šioje straipsnio dalyje nagrinėjama "BeWo" ląstelių linijos kilmė, būdingos savybės ir daug daugiau. Čia sužinosite: Kas yra BeWo choriokarcinomos ląstelių linija? Kas yra BeWo sinchronizacija? Iš kur kilusios BeWo ląstelės? Kokia yra BeWo ląstelių morfologija? Kokia yra BeWo ploidija?

Placentos ląstelių linija BeWo atsirado 1968 m. iš vyriškos lyties vaisiaus placentos piktybinės gestacijos choriokarcinomos [1]. Taigi ji yra neįkainojamas placentos tyrimų modelis.
BeWo ląstelės pasižymi į epitelį panašia morfologija.
BeWo ląstelės yra palyginti mažos, nuo 20 iki 30 µM [2].
BeWo ląstelės pasižymi stabiliu kariotipu. Jų kamieninių linijų skaičius yra hipotetraploidinis. BeWo ląstelių modalinis chromosomų skaičius yra 86. Jis gali svyruoti nuo 71 iki 178.
BeWo ląstelės gamina keletą hormonų, t. y. žmogaus chorioninį somatomammotropiną, žmogaus chorioninį gonadotropiną (hCG) ir steroidinius hormonus.
BeWo ląstelės išreiškia molekulinius žymenis, įskaitant CK 7, E-kadheriną ir VE-kadheriną.

B30 sublinija

B30 yra BeWo ląstelių sublinija. Ji naudojama maistinių medžiagų įsisavinimui ir pernešimui tirti. Tai susiję su jų sparčiu augimu ant akytų membranų.

BeWo ir JEG-3

BeWo ir JEG-3 ląstelių linijos yra kilusios iš choriokarcinomų ir naudojamos placentos tyrimams. BeWo ląstelės gamina mažesnius hormonų kiekius nei JEG-3, pavyzdžiui, žmogaus chorioninį gonadotropiną (hCG) ir estradiolį.

Žmogaus kiaušialąstės vaisingumo vizualizacija, iliustruojanti blastocistos formavimosi etapus, stebimus per mikroskopą.

2. BeWo ląstelių linija: Kultivavimo informacija

Ląstelių kultūros palaikymas gali būti sudėtingas, jei nežinote svarbiausių detalių. Pavyzdžiui: Koks yra BeWo padvigubėjimo laikas? Kas yra "BeWo" ląstelių terpė? Kaip kultivuoti "BeWo" ląstelių liniją ir kaip užšaldyti "BeWo" ląsteles?

Pagrindiniai "BeWo" ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	BeWo ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas yra maždaug 30 valandų.
Adhezija arba suspensija:	BeWo yra adherentinė ląstelių linija.
Ląstelių sėjimo tankis:	Rekomenduojamas BeWo ląstelių sėjimo tankis yra 1 x¹⁰⁴ ^{ląstelės/cm2}. Sėjimui iš ląstelių pašalinama sena terpė ir ląstelės nuplaunamos 1 x PBS. Po to įpilama "Accutase" (pasėlio tirpalo) ir ląstelės inkubuojamos 8-10 min. aplinkos temperatūroje. Tada atsiskyrusios ląstelės užpilamos auginimo terpe ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelės resuspenduojamos ir supilamos į naują kolbą.
Auginimo terpė:	BeWo ląstelėms auginti naudojama Hamo F12K terpė, kurioje yra 10 % FBS, 2,0 mM L-glutamino, 2,0 mM natrio piruvato ir 2,5 g/l NaHCO3. BeWo ląstelių terpė turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos:	BeWo ląstelės palaikomos drėkinamame inkubatoriuje, kurio temperatūra 37 °C, o CO2 kiekis - 5 %.
Laikymas:	BeWo ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame itin žemos temperatūros šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje.
Šaldymo procesas ir terpė:	BeWo ląsteles rekomenduojama užšaldyti CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpėje. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo metodą. Šis metodas leidžia sumažinti temperatūrą tik 1 laipsniu per minutę, todėl ląstelės nepatiria šoko ir apsaugomas ląstelių gyvybingumas.
Atšildymo procesas:	Užšaldytos ląstelės atšildomos panardinant jas į iš anksto nustatytą 37 °C temperatūros vandens vonią 40-60 sekundžių, kol lieka nedidelis ledo gabalėlis. Tada įpilama šviežios augimo terpės ir ląstelės centrifuguojamos, kad būtų pašalinti šaldymo terpės komponentai. Surinktos ląstelių granulės resuspenduojamos ir išpilstomos į auginimo kolbą.
Biologinės saugos lygis:	BeWo ląstelių kultūroms tvarkyti ir prižiūrėti būtina 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

Žmogaus choriokarcinomos ląstelių linijos BEWO epitelio, daugiakampės morfologijos ir salelės pavidalo augimo vaizdas, naudojant 10x ir 20x didinimo mikroskopą.

3. BeWo ląstelių linijos privalumai ir trūkumai

BeWo ląstelės pasižymi unikaliomis savybėmis ir turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Šiame skyriuje išnagrinėsime kai kuriuos iš jų.

Privalumai

Pagrindiniai "BeWo" choriokarcinomos ląstelių linijos privalumai yra šie:

In vitro placentos ląstelių modelis
BeWo ląstelės yra in vitro modelis, kuriuo galima tirti trofoblasto ląstelių elgseną ir placentos sincifikaciją, atkartojant procesus, kuriuos sunku stebėti in vivo.
Hormonų gamyba
BeWo ląstelės išskiria hormonus, tokius kaip hCG ir placentos laktogenas, todėl yra vertingos hormonų reguliavimo tyrimams ir reprodukcinės biologijos tyrimams.

Trūkumai

BeWo trofoblasto ląstelių trūkumai:

Vėžio ląstelių linija
BeWo ląstelės buvo gautos iš choriokarcinomos, kuri yra placentos navikas. Ši kilmė gali nevisiškai atspindėti normalią placentos ląstelių funkciją.

4. BeWo ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams

BeWo ląstelių linija plačiai naudojama placentos tyrimams. Čia paminėtos kelios konkrečios šios ląstelių linijos taikymo sritys:

Placentos ir su nėštumu susiję tyrimai: BeWo ląstelės yra labai svarbios atliekant placentos ir su nėštumu susijusius tyrimus. Pavyzdžiui, mokslininkai šias ląsteles naudoja medžiagoms, įskaitant vaistus, maistines medžiagas ir toksinus, pernešti per placentos barjerą. Be to, jie taip pat tiria hormonų, įskaitant žmogaus chorioninį gonadotropiną (hCG), placentos laktogeną ir steroidinius hormonus, gamybą ir reguliavimą. Tai svarbu norint suprasti hormonų pokyčius nėštumo metu. 2018 m. atliktais tyrimais buvo tiriamas bromintų antipirenų (BFR) poveikis žmogaus trofoblastinių ląstelių linijos (BeWo) sulfotransferazės aktyvumui. Šis fermentas dalyvauja reguliuojant skydliaukės hormono viduląstelinį kiekį [3].
Infekcijų ir ligų tyrimai: BeWo ląstelės taip pat naudojamos patogenų ir placentos ląstelių sąveikai tirti. Šie tyrimai vertingi siekiant suprasti ligas, kurios gali būti perduodamos iš motinos vaisiui, ir kuriant vaisiaus sveikatos apsaugos strategijas. Be to, ši ląstelių linija padeda mokslininkams tirti nėštumo metu atsirandančias komplikacijas, pavyzdžiui, preeklampsiją. Pavyzdžiui, 2023 m. Michalinos Bralewskos atliktame tyrime buvo panaudotas BeWo trofoblasto ląstelių modelis ir nustatyta, kad tiek chromograninas A (CgA), tiek iš jo gautas peptidas katestatinas (CST) gali atlikti svarbų vaidmenį sudėtingame preeklampsijos (PE) patogenezės procese [4]. Kitame tyrime buvo tiriamas trichosantino priešvėžinis potencialas naudojant BeWo choriokarcinomos ląstelių liniją. Tyrimo metu taip pat buvo dedamos papildomos pastangos atrasti biomarkerius, atliekant lyginamąją proteominę analizę prieš eksperimentą ir po jo [5].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300123

5. Mokslinių tyrimų publikacijos su "BeWo Cells

Čia pateikiamos kelios svarbios mokslinių tyrimų publikacijos, kuriose naudojamos BeWo trofoblasto ląstelės.

AMPK signalų veikimas reguliuoja žmogaus trofoblasto ląstelių linijos BeWo mitofagiją ir mitochondrijų ATP gamybą

Šiame "Frontiers in Bioscience-Landmark" (2022) paskelbtame tyrime siūloma, kad AMPK signalizacija aktyvuoja BeWo trofoblasto ląstelių mitofagiją per FUNDC1 ir PRKN palengvintus mitofagijos kelius. Dėl to mitofagija padeda palaikyti ATP gamybą ir mitochondrijų membranos potencialą.

Etilparabenas sukelia žmogaus placentos BeWo ląstelių apoptozinę ląstelių mirtį per Kaspazės-3 kelią

Šis straipsnis paskelbtas žurnale "Animal Cells and Systems" (2020). Tyrime siūloma, kad etilparabenas tarpininkauja BeWo ląstelių apoptozei reguliuodamas kaspazės 3 kelią.

Žmogaus placentos audinių ir ląstelių linijų (BeWo, JEG-3, JAR ir HTR-8/SVneo) ksenobiotikų ir steroidų išsiskyrimo potencialo apibūdinimas kiekybiniais proteomikos metodais

Šiame vaistų metabolizmo ir dispozicijos (2023) tyrime buvo naudojamos placentos ląstelių linijos, įskaitant BeWo, JAR, JEG-3 ir HTR-8/SVneo, siekiant ištirti ksenobiotikų ir steroidų nusėdimą ląstelėse.

Apelinas ir apelino receptorius žmogaus placentoje: JEG-3 ir BeWo ląstelių proliferacijos ir ląstelių ciklo reguliavimas, raiška, signalizavimo kelias ir trofoblasto JEG-3 ir BeWo ląstelių proliferacijos ir ląstelių ciklo reguliavimas

Šiame moksliniame straipsnyje, išspausdintame žurnale "International Journal of Molecular Medicine" (2020 m.), siūloma, kad APJ receptoriaus ligandas apelinas skatina BeWo ląstelių proliferaciją per APJ ir ERK1/2, stat3 ir AMPK signalus. Taigi, jis gali būti esminis adipokinas, reguliuojantis placentos vystymąsi.

Vaistai nuo priepuolių ir vaisiaus maistinės medžiagos: poveikis cholino transporteriams žmogaus placentos ląstelių linijoje

Šiame žurnale Epilepsia (2021) paskelbtame tyrime buvo nagrinėjamas vaisiaus maistinių medžiagų ir vaistų nuo traukulių poveikis cholino pernešėjams žmogaus trofoblastinių ląstelių linijoje BeWo.

6. Šaltiniai, skirti BeWo ląstelių linijai: BeoWoe šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

Čia pateikiami keli internetiniai šaltiniai apie BeWo ląsteles:

In vitro transfekcija: Šis vaizdo įrašas padės jums išmokti in vitro plazmidinės DNR transfekcijos protokolą adherentinėms ląstelėms.

Šioje nuorodoje pateikiama informacija apie BeWo ląstelių kultūrą:

BeWo ląstelės: Šioje svetainėje pateikiama pagrindinė ląstelių kultūros informacija apie BeWo ląstelių liniją. Tai apima informaciją apie ląstelių terpę ir kultivavimo sąlygas. Joje taip pat pateikiami subkultūravimo ir kriokonservuotų bei proliferacinių kultūrų tvarkymo protokolai.

Nuorodos

Weber, M. ir kt., Šešių žmogaus trofoblastinių ląstelių linijų citogenomika. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
Kolokol'tsova, T., et al, Ilgalaikės kultūros trofoblastų charakteristikos. Eksperimentinės biologijos ir medicinos biuletenis, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt ir H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo (Skydliaukės hormonų sulfotransferazės aktyvumo sutrikimas dėl bromuotų antipirenų cheminių medžiagų žmogaus choriokarcinomos placentos ląstelių linijoje ). Chemosphere, 2018 m. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, CgA-Derived CST Protein Level Reduction in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y. ir kt. palyginamoji proteominė vaisto trichosantino pridėjimo į BeWo ląstelių liniją analizė. Molekulės, 2022. 27(5): p. 1603.