BxPC-3 ląstelių linija
BxPC-3 yra žmogaus išvesta kasos vėžio ląstelių linija. Ji plačiai taikoma vėžio tyrimams. Mokslininkai dažniausiai naudoja šias ląsteles kasos vėžio biologijai tirti, terapiniams taikiniams nustatyti ir vaistams nuo vėžio kurti.
Šiame straipsnyje pateikiama svarbiausia informacija apie BxPC-3 ląstelių liniją, kuri gali labai padėti dirbti su ja. Jame bus aptarta:
- Bendroji informacija apie BxPC-3 ląstelių liniją ir jos kilmę
- BxPC-3 ląstelių kultivavimas
- BxPC-3 ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai
- BxPC-3 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
- Mokslinės publikacijos apie BxPC-3 ląsteles
- Šaltiniai, skirti BxPC-3 ląstelių linijai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt
1. bendra informacija apie BxPC-3 ląstelių liniją ir jos kilmę
Žinios apie ląstelių linijos kilmę yra labai svarbios, kad ją būtų galima pritaikyti moksliniams tyrimams. Žinant jos savybes, įskaitant morfologiją, ląstelių dydį ir ploidiją, jos naudojimas tampa paprastesnis ir patogesnis. Čia sužinosite apie BxPC-3 ląstelių kilmę ir bendrąsias savybes: Kas yra BxPC-3 ląstelės? Kas yra BxPC-3 ląstelių linija? Kokia yra BxPC-3 ląstelių linijos kilmė? Kokia yra BxPC-3 morfologija?
- BxPC-3, žmogaus kasos karcinomos ląstelės, buvo gautos 1986 m. iš 61 metų europietės, sergančios kasos adenokarcinoma. Šios ląstelės buvo patvirtintos kaip navikinės net ir po to, kai pacientei buvo atliktas ne vienas radioterapijos ir chemoterapijos seansas. Taigi sukurta ląstelių linija yra neįkainojamas modelis vėžio vystymuisi ir progresavimui tirti.
- BxPC-3 ląstelės pasižymi į epitelines ląsteles panašia morfologija.
- BxPC-3 modalinis chromosomų skaičius yra 59. Šios ląstelės turi homozigotinę 18q chromosomos, kuri koduoja SMAD4/DPC4 baltymą, deleciją. Be to, ši ląstelių linija neturi BxPC-3 kras mutacijos, paplitusios tarp kasos navikų. Šiose kasos vėžio ląstelėse taip pat nustatyta BxPC-3 braf delecija.
Kuo skiriasi BxPC3 ir PANC-1?
BxPC-3 PADC (kasos latakų adenokarcinoma) ir PANC-1 ląstelės yra pirminės kasos vėžio ląstelių linijos, pasižyminčios epitelio morfologija. Šiuo atveju pirmosios ląstelės pasižymi daugiau į epitelį panašiomis savybėmis, o vėlesnės - labiau mezenchiminėmis savybėmis [1].
2. bxPC-3 ląstelių kultivavimas
BxPC-3 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimų laboratorijose. Norint veiksmingai kultivuoti šią kasos vėžio ląstelių liniją, reikia žinoti šiuos svarbiausius dalykus. Sužinosite: Koks yra bxpc3 padvigubėjimo laikas? Kaip kultivuoti BxPC-3 ląstelių liniją?
Pagrindiniai BxPC-3 ląstelių kultivavimo aspektai
|
Populiacijos padvigubėjimo laikas: |
BxPC-3 ląstelių padvigubėjimo laikas svyruoja nuo 48 iki 60 valandų. |
|
Prisitvirtinusios arba suspensijoje: |
BxPC-3 yra adherentinė ląstelių linija. |
|
Padalijimo santykis: |
BxPC-3 ląstelės kultivuojamos santykiu nuo 1:2 iki 1:4. Ląstelės plaunamos 1 x PBS ir inkubuojamos su perėjimo tirpalu, vadinamu accutase. Po 8-10 minučių į ląsteles įpilama šviežios terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Granulės vėl resuspenduojamos terpėje ir ląstelės supilamos į naują auginimo indą. |
|
Augimo terpė: |
BxPC-3 ląstelių linijai auginti naudojama RPMI 1640 terpė. Kad ląstelės augtų idealiai, ji papildoma 10 % galvijų fetaliniu serumu, 2,1 mM stabiliu glutaminu ir 2,0 g/l NaHCO3. Medžiaga turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę. |
|
Augimo sąlygos: |
BxPC-3 ląstelių kultūros laikomos 37 °C temperatūros drėkinamajame inkubatoriuje, prijungtame prie 5 % CO2 šaltinio. |
|
Laikymas: |
Paprastai užšaldytos ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas. |
|
Šaldymo procesas ir terpė: |
BxPC-3 ląstelių kultūroms užšaldyti galima naudoti CM-1 arba CM-ACF. Kad ląstelės nepatirtų šoko, šaldoma lėtai, temperatūrai nukritus tik 1 °C. |
|
Atšildymo procesas: |
Užšaldytos BxPC-3 ląstelės atšildomos iš anksto nustatytoje 37 °C temperatūros vandens vonelėje 40-60 sekundžių. Kai lieka nedidelis ledo gabalėlis, ląstelės užpilamos šviežia mitybine terpe ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės elementai. Tada ląstelių granulės resuspenduojamos ir ląstelės paskirstomos į kolbą auginimui. |
|
Biologinės saugos lygis: |
BxPC-3 ląstelių kultūros laikomos 1 biologinės saugos lygio laboratorijose. |
3. bxPC-3 ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai
BxPC-3 yra gerai žinoma kasos adenokarcinomos ląstelių linija, turinti keletą privalumų ir trūkumų. Čia išvardyti pagrindiniai šios ląstelių linijos privalumai ir trūkumai.
Privalumai
Pagrindiniai BxPC-3 ląstelių privalumai yra šie:
-
In vitro kasos vėžio modelis
BxPC-3 ląstelės, gautos iš kasos adenokarcinoma sergančių pacientų, pasižymi atitinkamomis savybėmis, todėl yra tinkamas modelis kasos vėžio elgsenai in vitro tirti.
-
Vėžinių ląstelių linija
BxPC-3 ląstelės pasižymi tumorigeninėmis savybėmis ir gali formuoti navikus, kai yra įšvirkščiamos nuogoms arba imunosupresinėms pelėms. Šie navikai labai panašūs į pirminius kasos adenokarcinomos navikus, todėl BxPC-3 ksenograftų modelis idealiai tinka vėžio augimui ir progresavimui tirti.
Apribojimai
Su BxPC-3 ląstelių linija susiję šie apribojimai:
-
Kryžminė tarša
BxPC-3 ląstelių linijai, kaip ir bet kuriai kitai, būdinga kryžminės taršos rizika. Tyrėjai, dirbdami su šiomis ląstelėmis, turėtų būti atsargūs ir griežtai laikytis užteršimo prevencijos protokolų.
-
Lėtas augimo greitis
BxPC-3 ląstelės santykinai lėtai dauginasi, o jų padvigubėjimo laikas trunka nuo 48 iki 60 valandų. Dėl šios savybės gali prireikti ilgesnių inkubavimo laikotarpių atliekant tam tikrus eksperimentus, dėl to gali vėluoti tyrimų eiga.
4. bxPC-3 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
BxPC-3 ląstelės gali būti plačiai naudojamos vėžio tyrimuose. Labiausiai paplitusios jų taikymo sritys yra šios:
- Kasos vėžio tyrimai: BxPC-3 ląstelės imituoja kasos adenokarcinomą, todėl jos naudojamos tiriant genetinius ir molekulinius mechanizmus, lemiančius naviko vystymąsi ir augimą. Be to, mokslininkai, naudodami šias ląsteles, atskleidžia naujus biomarkerius ir terapinius taikinius. Be to, BxPC-3 ląstelėse yra daug angiogeninių veiksnių, t. y. interleukino-8 (IL-8), prostaglandino E2 (PGE2) ir kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus (VEGF), todėl jos tinka angiogenezei tirti. Angiogenezė yra labai svarbus procesas, susijęs su vėžio augimu ir metastazėmis. 2022 m. paskelbtame tyrime buvo ištirta, kad laminino-5 gama-2 (LAMC2) perteklinė ekspresija BxPC3 PDAC (kasos latakų adenokarcinomoje) sustiprina jos navikogenezę reguliuojant BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT / mTOR signalinį kelią [2].
- Vaistų atradimas ir kūrimas: BxPC-3 ląstelių linija yra neįkainojamas vaistų nuo vėžio bandymų modelis. Mokslininkai tiria potencialių vaistų citotoksinį, antimetastazinį ir apoptozinį poveikį BxPC3 PDAC. Alexandria Turner ir kolegų 2020 m. atliktame tyrime buvo tiriamos Elaeocarpus reticulatus vaisių ekstraktų apoptozės savybės BxPC-3 kasos vėžio ląstelėse [3]. Panašiai 2020 m. buvo atliktas tyrimas, kurio metu nustatytas augalo Oxialis obtriangulata metanolinio ekstrakto priešvėžinis potencialas BxPC-3 ląstelėse. Be to, mokslininkai taip pat tyrė ląstelių mechanistinį kelią, per kurį augalo ekstraktas daro gydomąjį poveikį [4].
5.mokslinės publikacijos apie BxPC-3 ląsteles
Šiame skyriuje pateikiami kai kurie dažniausiai cituojami ir įdomiausi leidiniai, kuriuose minima BxPC-3 ląstelių linija.
Licokumaronas sukelia BxPC-3 kasos adenokarcinomos ląstelių mirtį slopindamas DYRK1A
Šioje publikacijoje žurnale "Chemico-Biological Interactions" (2020 m.) nagrinėjamas natūralaus produkto likokumarono apoptozinis poveikis BxPC-3 kasos vėžio ląstelėms.
Hidroksichlorochinas skatina Bcl-xL slopinimo sukeltą apoptozę BxPC-3 žmogaus kasos vėžio ląstelėse
Šis mokslinis straipsnis paskelbtas žurnale "Anticancer Research" (2022 m.). Tyrime siūloma, kad hidroksichlorochinas sukelia BxPC3 ląstelių mirtį slopindamas BCL-XL geną.
Šis tyrimas paskelbtas 2020 m. žurnale "Journal of Cellular Biochemistry". Tyrime teigiama, kad natūralus junginys salidrozidas pasižymi priešvėžiniu poveikiu BxPC-3 ląstelėms, reguliuodamas HIF-1α (hipoksiją indukuojančio veiksnio) ir LOXL2 signalizavimo kaskadą.
Ibrutinibo poveikis kasos vėžio ląstelių radiojautrumui, veikiant EGFR/AKT/mTOR signalinį kelią
Šiame žurnale "Biomedicine & Pharmacotherapy" paskelbtame straipsnyje teigiama, kad ibrutinibas gali būti naudojamas kaip puikus kasos vėžiu sergančių pacientų radiosensibilizatorius. In vitro tyrimas su BxPC-3 ląstelėmis rodo, kad jis mažina BxPC3 EGFR fosforilinimą ir pAKT bei tolesnių genų raišką, kurią reguliuoja radioterapija.
Chelidoninas sukelia apoptozę per GADD45a-p53 reguliaciją žmogaus kasos vėžio ląstelėse
Šiame "Integrative Cancer Therapies" žurnale paskelbtame tyrime siūloma, kad natūralus produktas chelidoninas žmogaus kasos vėžio ląstelėse BxPC-3 veikia apoptotiškai reguliuodamas BxPC3 p53 ir GADD45a signalizaciją.
6. bxPC-3 ląstelių linijos ištekliai: Bxxxxxxxxxxxxxxxxr
BxPC-3 ląstelių linija turi daug žavių privalumų, dėl kurių ją galima naudoti moksliniams tyrimams. Daugelyje internetinių šaltinių apie BxPC-3 ląstelių liniją minimas jos tvarkymas, priežiūra ir transfekcijos protokolas.
- BxPC3 transfekcija: Šiame vaizdo įraše žingsnis po žingsnio aprašomas BxPC-3 ląstelių transfekcijos protokolas.
Šį straipsnio skyrių sudaro kelios nuorodos, kuriose paaiškinami BxPC3 ląstelių kultūros protokolai.
- BxPC3 ląstelių kultūra: Ši svetainė padės jums išmokti kriokonservuotų ir proliferacinių BxPC-3 kultūrų subkultūravimo ir tvarkymo protokolų.
Nuorodos
- Kim, Y. ir kt. pankreatinės latakinės adenokarcinomos ląstelių linijų lyginamasis proteominis profiliavimas. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al, Elaeocarpus reticulatus vaisių ekstraktai sumažina kasos vėžio ląstelių gyvybingumą ir sukelia apoptozę in vitro. Molekulinės biologijos ataskaitos, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Oxialis obtriangulata priešvėžinis potencialas kasos vėžio ląstelėse reguliuojant ERK/Src/STAT3 medijuojamą kelią. Molekulės, 2020. 25(10): p. 2301.