A431 ląstelės - nuodugni epidermoidinės karcinomos ląstelių analizė dermatologiniuose tyrimuose

A431 yra žmogaus epidermoidinio vėžio ląstelių linija. Ji plačiai naudojama biomedicininių tyrimų srityje, daugiausia vėžio biologijos, imuninės onkologijos ir toksikologijos tyrimuose. Be to, A431 ląstelėse yra padidėjusi EGFR (epidermio augimo faktoriaus receptoriaus) ekspresija, todėl jos naudojamos kaip vertingas in vitro modelis ląstelių ciklui ir su vėžiu susijusiems ląstelių signalizacijos keliams tirti.

Šiame straipsnyje paaiškinami vėžio ląstelių linijos A431 pagrindai. Sužinosite šiuos dalykus:

A431 ląstelės: Bendrosios savybės ir kilmė
A431 ląstelių linija: Informacija apie kultivavimą
A431 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
A431 ląstelių panaudojimas moksliniams tyrimams
Mokslinės publikacijos su A431 ląstelėmis
A431 ląstelių linijos šaltiniai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1. A431 ląstelės: Bendrosios savybės ir kilmė

Ši straipsnio dalis padės sužinoti bendrą informaciją apie A431 ląstelių liniją, kurią reikia žinoti prieš pradedant su ja dirbti. Pavyzdžiui, kokia yra A431 ląstelių linijos kilmė? Kokios yra A431 ląstelių linijos savybės? Kokia yra A431 ląstelių morfologija? Iš kur kilusios A431 ląstelės?

A431, žmogaus odos vėžio ląstelių linija, buvo gauta iš 85 metų epidermoidine karcinoma sergančios pacientės epidermio [1]. Ją sukūrė D. J. Giardas ir kiti, sukūrę daug kitų ląstelių linijų iš solidinių navikų.
A-431 ląstelės pasižymi epitelio morfologija. Jos agreguojasi ir sudaro ląstelių klasterius.
Odos vėžio ląstelių linija a431 yra hipertriploidinė. Šios ląstelių linijos modalinis chromosomų skaičius yra 74, kuris pasitaiko maždaug 36 % ląstelių. Didesnės ploidijos taip pat būna maždaug 1 % ląstelių populiacijos.

Po oda augantis ir į audinius įsiskverbiantis navikas.

2.a431 ląstelių linija: Kultivavimo informacija

Žinant ląstelių linijos ląstelių kultivavimo reikalavimus ir procedūras, galima be vargo su ja dirbti. Šioje straipsnio dalyje sužinosite svarbiausius A431 ląstelių linijos kultivavimo aspektus. Pavyzdžiui, sužinosite, koks yra A431 ląstelių padvigubėjimo laikas? Ar A431 vėžio ląstelių linija yra adherentiška? Kokia auginimo terpė naudojama A431 ląstelėms auginti?

Pagrindiniai A431 ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	A431 ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas svyruoja nuo 80 iki 100 valandų.
Prigludusios ar suspenduotos:	A431 yra adherentinė ląstelių linija.
Sėjimo tankis:	ląstelių tankis: 1 x¹⁰⁴ ^{ląstelės/cm2} - idealus A431 ląstelių linijos ląstelių tankis. Esant tokiam tankumui, ląstelėms susilieti prireikia beveik 4 dienų. Adheravusios ląstelės plaunamos PBS (1x) ir inkubuojamos su "Accutase" perėjimo tirpalu. Po to ląstelės resuspenduojamos į mitybinę terpę ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelės vėl resuspenduotos ir išpilstytos į naujas kolbas augimui.
Augimo terpė:	A431 ląstelių linijai auginti naudojama DMEM terpė, papildyta 10 % galvijų fetaliniu serumu, 4,5 g/l gliukozės, 1,0 mM natrio piruvato, 1,5 g/l NaHCO3 ir 4 mM L-glutamino. Medžiaga turėtų būti keičiama kas 2-3 dienas per savaitę.
Augimo sąlygos:	A431 vėžio ląstelės auginamos drėkinamame inkubatoriuje su 5 % CO2 šaltiniu 37 °C temperatūroje.
Laikymas:	Ląstelių liniją galima laikyti elektriniame šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, nes tai padeda apsaugoti ląstelių gyvybingumą.
Šaldymo procesas ir terpė:	CM-1 arba CM-ACF yra dvi labai rekomenduojamos šaldymo terpės, naudojamos A431 ląstelėms užšaldyti. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo metodą, leidžiantį temperatūrai sumažėti tik 1 laipsniu per minutę.
Atšildymo procesas:	Užšaldytos A431 ląstelės 40-60 sekundžių atšildomos 37 °C temperatūros vandens vonelėje su antimikrobine medžiaga. Kai lieka tik nedidelis ledo gabalėlis, ląstelės užpilamos kultūrine terpe ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelės resuspenduojamos ir supilamos į auginimo kolbas.
Biologinės saugos lygis:	A431 kultūrų tvarkymui ir priežiūrai rekomenduojamas pirmasis biologinės saugos lygis.

A-431 sferoidai, esant skirtingam ląstelių tankiui.

3.a431 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai

A431 ląstelių linija pasižymi išskirtinėmis savybėmis ir turi keletą privalumų ir trūkumų. Toliau pateikiame kelių iš jų santrauką.

Privalumai

Pagrindiniai A431 vėžio ląstelių linijos privalumai yra šie:

EGFR hiperekspresija	A431 ląstelėse yra padidėjusi epidermio augimo faktoriaus receptoriaus (EGFR) ekspresija. Jos naudojamos kaip teigiama kontrolė tiriant EGFR signalizaciją ir jos reikšmę vėžiui. Jos taip pat naudojamos naujiems vėžio gydymo būdams vertinti.
Vėžiškumas	A431 ląstelės yra tumorigeninės ir gali formuoti navikus. Jos gali būti naudojamos kuriant ksenograftinius vėžio modelius, kurie yra vertinga priemonė tiriant naviko augimo dinamiką ir vertinant naujus vėžio gydymo būdus.

Trūkumai

A431 ląstelių trūkumai yra šie:

Genetinės anomalijos	A431 yra vėžio ląstelių linija, turinti genetinių mutacijų ir pakitimų, dėl kurių ji gali skirtis nuo pirminių naviko savybių.
Mikrobinis užterštumas	A431 yra linkusi į mikrobinį užterštumą, visų pirma bakterinį. Tačiau standartinių aseptinių auginimo sąlygų laikymasis gali padėti išvengti tokio užteršimo A431 ląstelių kultūrose.

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300112

4. A431 ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams

A431 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimams. Čia pateikiami keli perspektyvūs šios odos vėžio ląstelių linijos taikymo būdai. Vėžio biologija: Odos vėžio ląstelių linija A431 yra puikus mokslinių tyrimų įrankis tiriant vėžio augimą, vystymąsi, metastazes ir invaziją lemiančius ląstelių ir molekulinius mechanizmus.

Mokslininkai plačiai naudojo šią ląstelių liniją intensyviai tyrinėdami ląstelių signalizacijos kelius, susijusius su įvairiais vėžinių ląstelių procesais. Pavyzdžiui, 2018 m. atliktame tyrime ištirta, kad PI3K/AKT/mTOR signalinis kelias dalyvauja vėžio ląstelių proliferacijoje, o šio kelio slopinimas sukelia odos naviko ląstelių A431 apoptozę [2]. Be to, kitame tyrime taip pat pranešta apie PI3K/AKT/mTOR kelio indėlį į odos vėžio ląstelių metastazavimą ir perėjimą iš epitelio į mezenchiminį audinį (EMT), o tai rodo jo lemiamą vaidmenį vėžio vystymuisi ir progresavimui [3]. Vaistų tyrimas ir vertinimas: A431 ląstelės naudojamos potencialių kandidatų į vaistus nuo vėžio veiksmingumui ir efektyvumui įvertinti. Mokslininkai nustatė vaistų poveikį vėžio ląstelių proliferacijai, metastazėms, invazijai ir apoptozei atlikdami keletą laboratorinių eksperimentų - tyrimus atliko Nurhidayah Ab. Rahimas su kolegomis naudojo A431 ląsteles ir vertino biogeniniu būdu susintetintų Alstonia angustiloba augalo sidabro nanodalelių terapinį potencialą 2022 m. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad angustiloba-AgNPs pasižymėjo antiproliferaciniu poveikiu odos plokščiosios karcinomos ląstelėms [4]. Vėžio ksenograftų modeliai: A431 ląstelių linija yra tumorigeninė ir gali suformuoti navikus, kai ji inokuliuojama į pelių modelį. Taigi ji yra naudinga priemonė kuriant pelių ksenograftų modelius vėžio biologijai in vivo tirti. Keliuose tyrimuose A431 vėžio ląstelių linija buvo panaudota kuriant navikų ksenograftų modelius. Pavyzdžiui, Yu Jin Lim ir jo komanda, naudodami A431 ląsteles, sukūrė odos naviko ksenograftinį pelių modelį, kad įvertintų egzogeninio epidermio augimo faktoriaus (EGF) priešvėžinį ir radiosensibilizuojantį poveikį in vivo [5]. Mokslinės publikacijos, kuriose pateikiamos A431 ląstelės Toliau pateikiame keletą svarbių mokslinių publikacijų, kuriose pateikiama A431 odos karcinomos ląstelių linija. Biopolimerinių PVA-AuNPs ir PCL-Curcumin pakrautų elektrospūdytų nanopluoštų veiksmingumas ir jų priešvėžinis aktyvumas prieš A431 odos vėžio ląstelių liniją Šis straipsnis paskelbtas žurnale "Materials Today Communications" 2020 m. Tyrime įvertintas poli-ε-kaprolaktono kurkuminu įkrautų elektrospūdytų nanopluoštų ir polivinilo alkoholio-AuNPs priešvėžinis potencialas prieš A431 vėžio ląsteles. miRNA-221 skatina odos plokščialąstelinės karcinomos progresavimą, veikdama PTEN Šiame tyrime, paskelbtame žurnale Cellular & Molecular Biology Letters (2019 m.), siūloma, kad mikroRNA-221 atlieka onkogeninį vaidmenį odos plokščialąstelinėje karcinomoje, veikdama PTEN geną. Vinkristinas iš grybo Eutypella spp-CrP14, išskirtas iš Catharanthus roseus, sukelia žmogaus plokščiosios karcinomos ląstelių linijos A431 apoptozę Šis tyrimas, publikuotas žurnale BMC Complementary Medicine and Therapies (2016), rodo, kad vinkristinas, antrinis metabolitas, išskirtas iš grybo Eutypella spp - CrP14, sukelia A431 ląstelių apoptozę. CDC42SE1 perteklinė ekspresija A431 ląstelėse sumažino ląstelių proliferaciją slopindama Akt kelią Šis tyrimas buvo paskelbtas 2019 m. žurnale "Cells". Šiame tyrime CDC42SE1 genas pasiūlytas kaip svarbus odos vėžio progresavimo biomarkeris, nes jo redukcija palengvina navikogenezę. Metforminas slopina A431 ląstelių proliferaciją moduliuodamas PI3K/Akt signalinį kelią Šis tyrimas buvo paskelbtas 2015 m. žurnale Experimental and therapeutic medicine. Jame siūloma, kad metforminas slopina odos vėžio ląstelių linijos a431 proliferaciją reguliuodamas PI3K/Akt signalinį kelią. 6. Ląstelių linijos A431 šaltiniai: Čia pateikiami keli internetiniai ištekliai, susiję su odos vėžio ląstelių linija A431. A-431 ląstelių transfekcija: Šioje nuorodoje pateikiamas žingsnis po žingsnio A431 vėžio ląstelių transfekcijos vadovas. Šioje nuorodoje pateikiama informacija apie A431 ląstelių kultūrą. A431 vėžio ląstelių linija: Šioje nuorodoje pateikiama būtina informacija apie A431 ląstelių liniją. Joje pateikiama informacija apie auginimo terpę, ląstelių tankį, kriokonservuotų ir proliferacinių kultūrų tvarkymą ir t. t. A431 ląstelių auginimas: Šioje svetainėje pateikiamas trumpas A431 ląstelių linijos kultivavimo protokolas.

Nuorodos

Quadri, M., et al., Odos plokščialąstelinės karcinomos tyrimai in vitro ir in vivo: naujos 3D priemonės ir gyvūnų modeliai. Front Med (Lozana), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n-butyl ester against A431 skin carcinoma cell line goes via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Molekulinės medicinos ataskaitos, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al, Eukaliptolis nukreiptas į PI3K/Akt/mTOR kelią, kad slopintų odos vėžio metastazes.

Kancerogenezė, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Alstonia angustiloba-sidabro nanodalelių antiproliferacinių mechanizmų tyrimas odos plokščialąstelinėje karcinomoje (A431 ląstelių linija).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: p. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells.

Vėžio tyrimai ir gydymas: Official Journal of Korean Cancer Association, 2015. 47(4): p. 921-930.