NCH612細胞

€1,080.00*

製品はドライアイスで凍結保存された状態でクライオチューブにて出荷されます。各クライオチューブには通常、付着性細胞株の場合3×10⁶細胞、浮遊性細胞株の場合5×10^⁶ 細胞が含まれます（詳細はバッチごとのCoAを参照）。

税抜き価格＋送料

cryovial

製品番号 300121

安全データシート

製品シート

第三者協定

説明	NCH612は、ヒトの脳組織に由来する患者由来の乏突起膠細胞株であり、退形成性乏突起膠腫（WHO悪性度III）の関連研究モデルとなっている。この細胞株はIDH1 R132H変異を保有しており、これは乏突起膠腫にしばしばみられる特徴的な遺伝子変化である。この変異は、神経膠腫のCpG島メチル化表現型（G-CIMP）を含むエピジェネティックな修飾を引き起こし、腫瘍の発生と進行に寄与する。注目すべきことに、NCH612は染色体1pと19qの部分欠失を示し、これは乏突起膠腫によく見られる遺伝的特徴であり、予後の改善や特定の治療に対する反応性と関連している。研究により、NCH612はDNAメチル化酵素阻害剤デシタビン（DAC）に対して特に感受性が高いことが示されている。DACによる治療は、主にTERT（テロメラーゼ逆転写酵素）のダウンレギュレーションとDNA損傷応答に関与するサイクリン依存性キナーゼ阻害剤p21のアップレギュレーションを介して、細胞増殖とコロニー形成を低下させる。興味深いことに、この感受性はIDH1変異と1p/19qコードレーションの両方に関連しているようで、NCH1681のようなこの欠失のない他のIDH1変異グリオーマ細胞株はDACに抵抗性を示す。これらの所見は、DACのようなエピジェネティック療法が、1p/19q欠失を有するIDH1変異型未分化乏突起膠腫に特に有効である可能性を示唆している。さらに分子生物学的研究を進めると、NCH612細胞にDACを投与すると、DNA複製、細胞周期制御、リソソーム機能に関連する経路が濃縮されることが明らかになり、この薬剤の作用機序に光が当てられた。DACによるTERTの抑制はp21によって媒介され、エピジェネティック治療に対する反応におけるこの経路の重要な役割を強調している。NCH612は、その遺伝的およびエピジェネティックなプロフィールが明確に定義されていることから、退形成性乏突起膠腫の生物学を研究し、1p/19qコードレーションを有するIDH1変異腫瘍を標的とした標的療法を開発するための貴重なin vitroモデルである。
生物	人間
組織	脳
病気	退形成性乏突起膠腫、WHO悪性度III、IDH1変異（R132H）

年齢	39年
性別	男性
エスニシティ	白人
成長特性	スフェロイド培養

引用	NCH612 (Cytion カタログ番号 300121)
バイオセーフティレベル	1
NCBI_TaxID	9606
セロサウルス・アクセション	CVCL_x913

培地	DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
サプリメント	培地に、10％FBS、5mg/L ヘパリン、20ng/mL bFGF、20μg/L EGF、5mg/L インスリン、100mg/L トランスフェリン、5,2μg/L Na-セレニット、6,3μg/L プロゲステロン、161,1μg/L プトレシン、50mg/L ヒドロコルチンソンを添加する。
サブカルチャー	スフェロイド培養を再培養する場合は、まず、1000μlのフィルターチップ付きエッペンドルフ・ピペットを用いて、上下に5～10回ピペッティングし、スフェロイドを機械的に解離させる。この後、混合物を300g、室温で5分間遠心し、細胞をペレット化する。上清を捨て、細胞ペレットを新しい培地に懸濁する。最後に、再懸濁した細胞を新しい培養容器に移し、スフェロイド形成をさらに促進する。このアプローチは、スフェロイドの効率的な分解を確実にし、新しい環境での継続的な増殖に備える。
播種密度	1 × 10^⁵ 細胞/mL
フルード更新	新鮮な培地は、2～3日ごとに加えなければならない（細胞培養フラスコのサイズにより2～5ml）。
解凍後の回復	ゆっくり。解凍後、少なくとも48時間は細胞を凍結から回復させる。
フリーズ・ミディアム	凍結保存培地としては、50％基礎培地＋40％FBS＋10％DMSO、またはCM-1（Cytionカタログ番号800100）を使用する。この培地には、回復を促進し、凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤が含まれている。
細胞の解凍と培養	輸送中の最適温度を維持するため、細胞はドライアイスで輸送される。凍結バイアルを受け取ったら、細胞の完全性を保つために-150℃以下で直ちに保存するか、直ちに培養が必要な場合はステップ3に進む。直ちに培養する場合は、バイアルを清浄な水と抗菌剤を入れた37℃のウォーターバスに浸し、小さな氷の塊が残るまで40～60秒間静かに攪拌して速やかに融解する。凍結バイアルを開封する前に70％エタノールで消毒する。消毒したバイアルを注意深く開け、細胞懸濁液を8mlの室温培養液を入れた15ml遠心チューブに移し、穏やかに混ぜる。混合物を300 x gで3分間遠心して細胞を分離し、残留凍結培地を含む上清を注意深く捨てる。細胞ペレットを10mlの新しい培養液に静かに懸濁する。接着細胞の場合は、懸濁液を2つのT25培養フラスコに分け、懸濁培養の場合は、細胞の相互作用と増殖を効果的に促進するために、全ての培地を1つのT25培養フラスコに移す。細胞株の継続的な増殖と維持のため、確立された継代培養プロトコールに従い、信頼できる実験結果を確保する。
インキュベーションの雰囲気	37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。
フラスコ・コーティング	なし
凍結手順	凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。
配送条件	凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。
保管条件	長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

不妊症	マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査を受けている。
HLA対立遺伝子	A: '02:01:01 B: '57:01:01, '57:01:01G C: '04:01:01 DRB1: '11:01:01 DQA1: '05:05:01 DQB1: '03:01:01 DPB1*: '04:02:01 E: '01:03:02

この細胞株は、第三者との契約が必要であるため、標準的なサイシオンのMTAでは入手できないことにご注意ください。

NCH612細胞

一般情報

特徴

規制データ

生体分子データ

ハンドリング

品質管理／遺伝子プロファイル／HLA

第三者協定