HROHep03 セル

Cytion's Freeze Medium CM-1 は、融解後の細胞の生存率と機能性を最高レベルに保つように設計された最先端の凍結保存培地です。この汎用性の高い培地は、ヒトおよび動物細胞を含む幅広い種類の細胞に適しており、多様な研究用途に不可欠なツールとなっています。凍結保護剤と必須栄養素を絶妙なバランスで配合したFreeze Medium CM-1は、凍結過程における氷結晶形成と細胞ストレスを最小限に抑え、細胞の完全性を維持します。
Freeze Medium CM-1の主な特徴は以下の通り：

幅広い適合性：プライマリー細胞、幹細胞、樹立細胞株など、幅広い種類の細胞に有効。
高い生存率融解後の細胞の回復と生存率を最大化するように最適化されており、信頼性の高い実験結果を保証する。
すぐに使えるすぐに使用できるように調製・滅菌されているため、調製時間とコンタミネーションのリスクが軽減される。
安定性の向上：標準的な凍結保存条件下で一貫した性能を維持し、再現性のある結果を保証します。
長い保存期間：CM-1は血清を含む、すぐに使用可能な凍結保存培地で、冷蔵庫で最長1年間保存可能です。


細胞の凍結にCM-1を使用する

接着細胞および浮遊細胞の凍結にCM-1を使用するには、以下の手順に従う：

接着細胞の場合は、洗浄して培養基材から剥離する。浮遊細胞の場合は、そのまま次のステップに進む。
細胞を数え、適切な濃度であることを確認する。
細胞を遠心してペレット化し、CM-1凍結培地に再懸濁する。
再懸濁した細胞をクライオバイアルに移す。
細胞を長期保存に移す前に、緩慢凍結法を用いる。





方法
手順
手順





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マニュアル凍結

段階的に温度を下げ、細胞の生存性を確保する方法。

1️⃣ 細胞を凍結培地中、4℃のフリーザーに40分間置く。
2️ ⃣ -80℃のフリーザーに24時間移す。
3️ ⃣ 長期保存のため、細胞を液体窒素で保存する。



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Mr.Frostyの使用

電力を使わずに凍結速度を制御できる便利な装置。

1️ ⃣ 細胞を凍結培地を入れたクライオバイアルに準備する。
2️ ⃣ Mr.Frosty容器にクライオバイアルを入れる。
3️⃣ 液体窒素に移す前に、-80℃で24時間保存する。



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コントロールレートフリーザー

サーモ・フィッシャー社などの高精度フリーザーで、温度を 制御して下げるように設計されている。

1️ ⃣ 徐々に温度が下がるように装置をプログラムする。
2️ ⃣ 準備した細胞をフリーザーに入れる。
3️ ⃣ 凍結サイクル終了後、細胞を液体窒素に移す。









クライオバイアルは-130℃以下で保存するか、長期保存のために液体窒素中で保存する。


成分

FBS、DMSO、グルコース、塩類を含む。
緩衝能：pH=7.2～7.6


Cytion's Freeze Medium CM-1 は、凍結保存のための信頼性の高いソリューションを提供し、幅広い研究用途において解凍後の高い細胞生存率と機能性を保証します。

DMEM:Ham's F12は、生物学的研究における細胞培養で広く認知され、多用されている基礎培地です。特に胎児牛血清（FBS）を添加した場合、さまざまな哺乳類細胞株の増殖に必要な栄養素の主要な供給源となります。

この独自の配合は、ダルベッコ改良イーグル培地（DMEM）とハムF-12（ハム栄養混合液F-12）を正確な1:1の比率で組み合わせたものです。L-グルタミンの添加により、その組成はさらに強化されています。

イーグル最小必須培地（EMEM）を起源とするDMEMは、その前身と比較してアミノ酸およびビタミンの濃度が高くなっています。一方、ハムF-12はハムF-10培地を基にしており、必須成分の補完的なセットを提供します。

最適な細胞増殖をサポートするため、DMEM:ハムズF-12に通常5～10％濃度のFBSを添加するのが一般的です。この添加は、培地に細胞の発達に不可欠な成長ホルモン、脂質、タンパク質が不足しているため必要です。

DMEM:ハムズF-12にはpH緩衝システムが組み込まれており、pH指示薬であるフェノールレッドが添加されることが多い。DMEM:ハムズF-12、あるいは重炭酸塩緩衝システムを利用するあらゆる培地で培養される細胞は、適切なpHレベルを維持するために、5～10%のCO2濃度に制御された環境を必要とする。 


品質管理

滅菌ろ過済み


保存および有効期限

+2°C～+8°Cで、光を避けて保存してください。
開封後は 4°C で保存し、6～8 週間以内に使用してください。


輸送条件

周囲温度


保管

+2°C～+8°Cの暗所で冷蔵保存してください。製品の品質が低下するため、凍結や +37°C への頻繁な加熱は避けてください。
培地を 37°C 以上に加熱したり、電子レンジなどの制御できない熱源を使用したりしないでください。
培地の一部のみを使用する場合は、必要な量を取り出し、使用前に室温まで温めてください。


成分



カテゴリー
成分
濃度 (mg/L)


アミノ酸
グリシン
18.75


L-アラニン
4.45


L-アルギニン塩酸塩
147.50


L-アスパラギン・水和物
7.50


L-アスパラギン酸
6.65


L-システイン塩酸塩・水和物
17.56


L-シスチン・2HCl
31.29


L-グルタミン酸
7.35


L-グルタミン
365.00


L-ヒスチジン塩酸塩・水和物
31.48


L-イソロイシン
54.47


L-ロイシン
59.05


L-リジン塩酸塩
91.25


L-メチオニン
17.24


L-フェニルアラニン
35.48


L-プロリン
17.25


L-セリン
26.25


L-トレオニン
53.45


L-トリプトファン
9.02


L-チロシン 2Na・2H₂O
55.79


L-バリン
52.85


ビタミン
D-ビオチン
0.0035


塩化コリン
8.98


D-パントテン酸カルシウム
2.24


葉酸
2.66


ミオイノシトール
12.60


ニコチンアミド
2.02


ピリドキシン塩酸塩
0.031


ピリドキサール塩酸塩
2.00


リボフラビン
0.219


チアミン塩酸塩
2.17


ビタミンB12
0.68



無機塩
CaCl2・2H2O
154.50


硫酸銅・五水和物
0.0013


Fe(NO₃)₃・9H₂O
0.05


FeSO4・7H2O
0.417


KCl
311.80


MgCl2・6H2O
61.20


MgSO4・7H2O
100.00


NaCl
6996.00


NaHCO3
1200.00


Na₂HPO₄
71.02


NaH₂PO₄・2H₂O
70.87


ZnSO4・7H2O
0.432



その他の成分
D-グルコース
3151.00


ヒポキサンチン
2.40


HEPES
3574.50


リノール酸
0.042


リポ酸
0.105


フェノールレッドナトリウム塩
8.63


プトレシン2塩酸塩
0.081


ピルビン酸ナトリウム
55.00


チミジン
0.365

EDTAおよびフェノールレッド配合 Accutase 細胞剥離液 – 100 ml

Accutaseは、標準的な組織培養用プラスチック器具や接着コーティングされた表面から接着性哺乳類細胞を分離するために、トリプシン/EDTAに代わる穏やかな代替品として設計された、即用型の無菌ろ過済み細胞剥離液です。バランスのとれた塩溶液中にタンパク質分解酵素およびコラーゲン分解酵素の活性を組み合わせることで、効果的かつ制御された細胞分離を実現し、細胞表面タンパク質を保持するとともに、継代後の高い生存率と迅速な再付着をサポートします。

Accutaseの配合は、EDTAおよびpHの可視指標としてフェノールレッドを加えたダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（DPBS）を基にしています。 酵素は非哺乳類および非細菌由来であるため、Accutaseは幹細胞研究、ワクチン開発ワークフロー、および動物由来または微生物由来の汚染物質を最小限に抑える必要があるあらゆる用途に特に適しています。本溶液は37°Cで自己阻害するため、剥離後に中和試薬や血清含有培地を必要とせず、細胞を新鮮な培地に直接移すことができます。

主な特徴

希釈や再構成が不要な、すぐに使用可能な1倍希釈の滅菌ろ過済み液
穏やかな解離を実現する、タンパク質分解酵素とコラーゲン分解酵素の複合活性
ロット間の均一性を確保するため、各バッチの解離活性は規定値に標準化されています
非哺乳類および非細菌由来の酵素
37 °Cで自己阻害するため、中和溶液は不要
EDTAを含むダルベッコPBSで調製
視覚的pH指示薬としてフェノールレッドを含有
pH 6.8～7.8


代表的な用途
Accutase は、ヒト胚性幹細胞 (hESC)、ヒト誘導多能性幹細胞 (iPSC)、神経幹細胞、初代神経細胞、および HeLa、HEK 293、CHO、MDCK、Vero、NIH/3T3、BHK-21、A549 などの日常的に培養される接着性細胞株など、多種多様な接着性および感受性の高い細胞を穏やかに解離します。 代表的な用途には以下が含まれます：

接着性哺乳類細胞の日常的な継代およびパッシング
hESC、iPS細胞、およびその他の感受性の高い細胞株の穏やかな単一細胞分離
フローサイトメトリーおよびFACS解析のためのサンプル調製
エピトープの完全性が重要な細胞表面マーカーの解析
細胞遊走、増殖、アポトーシスアッセイ
血清飢餓法による静止期アッセイおよび癌遺伝子導入研究
腫瘍細胞および神経堤細胞の遊走アッセイ
バイオリアクターワークフローにおける生産スケールアップ

日常的な作業では、培養表面75 cm²あたり約10 mlのAccutaseを添加し、室温で5～10分間インキュベートします。最適なインキュベーション時間は各細胞株ごとに決定する必要があり、1時間を超えてはいけません。添加前に、残留血清および二価陽イオンを除去するため、カルシウムおよびマグネシウムを含まないDPBSなどのCa²⁺/Mg²⁺フリー塩溶液で細胞層を洗浄してください。

取り扱いおよび保存
未開封のボトルは、-15 °C以下で凍結保存してください。解凍は室温、または+2 °C～+8 °Cで一晩かけて行ってください。高温は酵素活性を低下させるため、37 °Cの水浴でAccutaseを解凍しないでください。解凍後、溶液は+2 °C～+8 °Cで最長2ヶ月間保存可能です。室温での保存は避けてください。 使用前に試薬を37 °Cまで予温しないでください。室温で洗浄済みの細胞に直接添加してください。長期保存のためには、繰り返しの解凍サイクルを避けるため、単回使用分への分注が推奨されます。常に無菌条件下で作業してください。

品質
厳格な品質基準に基づいて製造されています。Accutaseの各バッチは、無菌ろ過され、無菌性、pH、外観、および解離活性について試験されており、ロット間の性能の一貫性と再現性が確保されています。

製品仕様



仕様
詳細



製品タイプ細胞剥離／解離試薬
形態滅菌ろ過済み液体、即用型
容量100 ml
使用濃度1x（即用型）
酵素活性タンパク質分解およびコラーゲン分解の複合作用
酵素の由来非哺乳類および非細菌由来
緩衝液系EDTA含有ダルベッコPBS
pH指示薬フェノールレッド
pH範囲6.8 – 7.8
外観透明、淡紅色～橙色の溶液
保存温度-15 °C以下
解凍後の安定性+2 °C～+8 °Cで最大2ヶ月
推奨使用量培養面積75 cm²あたり約10 ml
標準的な培養時間室温で5～10分
輸送条件ドライアイスで凍結
使用目的研究用および製造用のみ



製剤（1リットルあたりの組成）



成分
濃度 (mg/L)




無機塩

塩化ナトリウム（NaCl）8000.00
リン酸水素二ナトリウム (Na2HPO4)1150.00
塩化カリウム (KCl)200.00
リン酸二水素カリウム (KH₂PO₄)200.00

その他の成分

EDTA・4Na（テトラナトリウムEDTA）220.00
フェノールレッド3.00
独自配合酵素ブレンド（タンパク質分解活性およびコラーゲン分解活性）1x



AccutaseはInnovative Cell Technologies, Inc.の登録商標です。

製品概要
容量：100ml 保存：15℃以下 無菌：無菌ろ過
抗生物質/抗真菌剤溶液（100x）は、細胞培養および関連するラボアプリケーションにおける微生物汚染リスクを低減するために設計された、無菌ですぐに使用できる濃縮液です。この100倍希釈液は、ペニシリン、ストレプトマイシン、アムホテリシンBの定評ある配合で、グラム陽性菌、グラム陰性菌、酵母、糸状菌に対して幅広い抗菌活性を示します。この製剤は、真核細胞培養、細菌培地、およびその他の汚染に敏感なシステムでの使用に適しており、クリーンで一貫性のあるラボ業務をサポートします。
用途と利点 日常的な研究プロトコール用に最適化されたこのソリューションは、細胞培養ワークフローにおける無菌状態の維持に広く使用されています。汚染に敏感な環境で信頼性の高い性能を発揮し、細胞の健康状態や実験の再現性を損なうことなく、微生物の過剰増殖のリスクを低減します。無菌ろ過製剤は、追加の可溶化工程を必要とせず、合理的な培地調製をサポートし、日常的なラボ手順のばらつきを低減します。
使用法と適合性 標準作業濃度を達成するには、溶液を100分の1に希釈し、完全培地に添加します。本製品は、広範な哺乳類細胞株および基礎培地に適合します。安定した在庫により、研究者は信頼できる供給継続性と簡素化されたロジスティクス計画の恩恵を受けることができます。安定性を維持するため、溶液は-15℃以下で保存し、凍結融解の繰り返しから保護してください。 研究用のみ。診断や治療には使用できません。ヒトおよび動物には使用できません。

リン酸緩衝生理食塩水（PBS）溶液
リン酸緩衝生理食塩水（PBS）は、生物学および化学の研究において広く使用されている緩衝液である。組織処理や細胞培養を含む様々な実験手順において、pHバランスと浸透圧の維持に重要な役割を果たしています。当社のPBS溶液は、あらゆる実験において安定性と信頼性を確保するために、高純度成分を用いて細心の注意を払って調合されています。当社のPBSの浸透圧とイオン濃度は、人体の浸透圧に近いため、ほとんどの細胞に対して等張で無毒です。

PBS溶液の組成
当社のPBS溶液は、超高純度グレードのリン酸緩衝液と生理食塩水をpH調整したものです。1倍濃度で、以下を含む：

8000 mg/L 塩化ナトリウム（NaCl）
200 mg/L 塩化カリウム（KCl）
1150 mg/L 二塩基性無水リン酸ナトリウム (Na2HPO4)
200 mg/L 無水リン酸一塩基性カリウム (KH2PO4)

この組成により、最適なpHとイオンバランスが確保され、幅広い生物学的用途に適しています。

PBS溶液の用途
当社のPBS溶液は、生物学研究における様々な用途に最適です。等張で無毒性であるため、物質の希釈や細胞容器の洗浄に適しています。EDTAを含むPBS溶液は、付着・凝集した細胞の剥離に効果的です。しかし、亜鉛のような二価の金属は沈殿の原因となるため、PBSに添加すべきではない。このような場合は、Good's緩衝液を推奨する。さらに、当社のPBS溶液は、SARS-CoV-2を含むRNAウイルスの輸送および保存のためのウイルス輸送培地の代替品として許容される。

品質管理

無菌ろ過


保管および保存期間

遮光し、+2℃～+25℃で保存する。
開封後は2℃～25℃で保存し、24ヶ月以内に使用してください。


出荷条件

周囲温度


メンテナンス

冷蔵で+2℃～+8℃の暗所に保管する。製品の品質を低下させるため、凍結や+37℃への頻繁な加温は避けてください。
培地を37℃以上に加熱したり、電子レンジのような制御されていない熱源を使用しないでください。
培地の一部のみを使用する場合は、必要な量を取り出し、室温まで温めてから使用してください。

組成



カテゴリー
成分
濃度(mg/L)


塩類
塩化カリウム
200



無水リン酸一塩基性カリウム
200



塩化ナトリウム
8000



無水リン酸二塩基性ナトリウム
1150