HK-ZFN-AURKB-mEGFP細胞
一般情報
| 説明 | HK-ZFN-AURKB-mEGFP細胞株は、ジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)技術を用いてmEGFP(単量体増強緑色蛍光タンパク質)と融合したAURKB(オーロラキナーゼB)タンパク質を発現するように設計された遺伝子操作ヒト細胞モデルである。AURKBはセリン/スレオニンキナーゼで、有糸分裂期の染色体分離、細胞質分裂、有糸分裂紡錘体チェックポイントの制御に重要な役割を果たしている。mEGFPとの融合により、AURKBの活性と細胞内での局在をリアルタイムで可視化することができ、細胞分裂中のダイナミックな挙動に関する詳細な研究が容易になる。 この細胞株は、有糸分裂の分子機構とAURKBの特異的機能を研究する研究者にとって強力なツールとなる。mEGFPを組み込むことで、蛍光ベースのアッセイとライブセルイメージングが可能になり、AURKBの時空間的分布に関する知見が得られる。ZFN技術の使用は、正確なゲノム統合を保証し、AURKB発現の忠実性を維持する。このモデルは、AURKBがしばしば過剰発現され、腫瘍形成に関連し、治療的介入の標的となりうる癌研究において特に価値がある。 |
|---|---|
| 生物 | 人間 |
| 組織 | 子宮内頸部 |
| 病気 | 腺癌 |
特徴
| 年齢 | 30年 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| エスニシティ | アフリカ系アメリカ人 |
| 形態学 | モザイク状の石の形をした上皮様細胞 |
| 成長特性 | 信者 |
規制データ
| 引用 | HK-ZFN-AURKB-mEGFP (Cytion カタログ番号 300173) |
|---|---|
| バイオセーフティレベル | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| セロサウルス・アクセション | CVCL_VL13 |
| 預金者 | エレンバーグ・ラボ(EMBL) |
| GMOステータス | GMO-S1:このHeLa京都株は、有糸分裂キナーゼイメージングのために、内在性AURKB遺伝子座にZFNを組み込んだmEGFP融合体を含む。この分類はドイツ国内でのみ適用され、他の地域では異なる場合があります。 |
生体分子データ
| 製品紹介 | EGFP(増強型緑色蛍光タンパク質) |
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ハンドリング
| 培地 | DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a) |
|---|---|
| サプリメント | 培地に10% FBSを加える |
| 解離試薬 | アキュターゼ |
| サブカルチャー | 接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。 |
| フルード更新 | 週2~3回 |
| フリーズ・ミディアム | 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。 |
| 細胞の解凍と培養 |
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| インキュベーションの雰囲気 | 37℃、5%CO2、加湿雰囲気。 |
| フラスコ・コーティング | なし |
| 凍結手順 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 配送条件 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 保管条件 | 長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。 |
品質管理/遺伝子プロファイル/HLA
| 不妊症 | マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。 細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査を受けている。 |
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