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マクロファージおよび免疫学研究におけるRAW 264.7細胞株

RAW 264.7細胞株は、免疫学研究の分野において極めて重要な、マウス由来マクロファージの堅牢なin vitroモデルとして機能します。この細胞株は、雄のBALB/cマウスに由来し、アベルソンマウス白血病ウイルスによって形質転換され、マクロファージ様細胞株となりました。 機能的な安定性と、貪食作用およびピノサイトーシスの両方を遂行する固有の能力を備えていることから、RAW 264.7細胞は宿主と病原体の相互作用の研究に不可欠であり、免疫学研究の礎となっています[1,2]。

📋 RAW 264.7 細胞株 — 概要
培養培地
製品ページを参照
倍加時間
製品ページを参照
増殖様式
付着性
バイオセーフティレベル
BSL-1

形態学的特徴および増殖挙動

観察によると、RAW 264.7 細胞は半付着性の増殖を示し、紡錘形の付着細胞と球形の浮遊生存細胞の両方を形成する傾向があり、細胞径は 10~20 µm の範囲です。 この多形性および培養条件への適応性により、RAW 264.7 細胞は、実験操作や観察のための汎用性の高いツールとなっています。

免疫機能および抗原提示

抗原提示細胞として、RAW 264.7 細胞は免疫系において極めて重要な役割を果たしています。その機能は、単なる病原体の認識にとどまらず、抗原の処理や T 細胞への提示にまで及び、それによって包括的な免疫応答を調整しています。この動態により、免疫系がどのように異物を識別し、無力化するのかについて、より深い理解が得られます。

マクロファージの分極:M0、M1、およびM2のパラダイム

RAW 264.7細胞は、M0マクロファージとしての基礎状態において、M1(炎症誘発性)またはM2(抗炎症性)のいずれかの表現型へと分極する驚くべき能力を有している。 この分極能力により、研究者は、さまざまなサイトカインや環境要因がマクロファージの機能や免疫応答に及ぼす影響や効果を研究するためのモデルを得ることができます [3,4]。

破骨細胞形成と骨リモデリング

RAW 264.7 細胞は、それ自体が破骨細胞ではありませんが、破骨細胞形成のプロセスである破骨細胞発生の研究において重要な役割を果たしてきました。これらの細胞は、破骨細胞の遺伝子発現や、受容体活性化に対する反応性の解明を促進します。 この研究は、骨リモデリングの調節異常が特徴である骨粗鬆症などの疾患の病態生理を理解する上で、極めて重要な意味を持っています。

RAW 264.7 に関する細胞培養情報

実験を始める前に、この強力な細胞株に関する基本的な情報を理解しておく必要があります。RAW 264.7細胞の倍加時間はご存知ですか? この細胞の播種密度はどれくらいでしょうか?また、接着性細胞でしょうか?さらに、RAW 264.7の最適な培養条件とは何でしょうか?この素晴らしい細胞株を扱う上で必要なすべての答えを知るために、ぜひ読み進めてください!

細胞培養情報

RAW 264.7 細胞株

細胞数倍加時間

11~30時間

付着性または浮遊性

主に付着性だが、一部の細胞集団は浮遊性

播種密度

4 × 10^4 細胞/cm^2

推奨培養液

10% 胎児牛血清および L-グルタミン(2.5 mM)を添加した RPMI 1640

最適な培養条件

5% CO₂、37°Cの加湿インキュベーター

培地の交換

週に2~3回

保存

液体窒素の気相中

凍結培地

CM-1 または CM-ACF

凍結プロセス

徐冷

解凍プロセス

37°Cの水浴中で急速に撹拌

生物安全レベル

BSL-2実験室での実施を推奨

RAW 264.7 cells

異なるコンフルエンシー状態のマウス由来RAW 264.7マクロファージ。

RAW 264.7セルの長所と短所

長所

  • 培養が容易:RAW 264.7細胞株は、複雑な要件を必要とせず、実験室で容易に培養・維持することができます。
  • 特性が十分に解明されている:RAW 264.7は特性が十分に解明された細胞株であり、安定した表現型および機能的特徴を有しています。
  • マクロファージのin vitroモデル:RAW 264.7細胞はマクロファージであるため、貪食作用やピノサイトーシスといった、マクロファージに不可欠な機能を示します。そのため、マクロファージのin vitroモデルとして頻繁に用いられています。
  • 破骨細胞への分化:RAW 264.7細胞は、特定の分子因子を用いて破骨細胞へと分化させることができます。これらの分化細胞は、破骨細胞と同様に骨リモデリングを行う能力を有しています。

欠点

  • 初代マクロファージの再現性が低い:形質転換細胞株であるRAW 264.7は、初代マクロファージの特徴を正確に再現できていない可能性があり、遺伝子発現、表現型、機能においていくつかの違いがあるかもしれない。
  • 薬剤スクリーニングにおける制限:RAW 264.7細胞は、あらゆる種類の薬剤スクリーニングアッセイに適しているとは限らず、一部の薬剤に対する反応が初代マクロファージとは異なる場合があります。
  • 強い細胞接着性:RAW 264.7 細胞は培養フラスコの表面に強く接着するため、剥離が難しい場合があります。

マクロファージの模倣および免疫学的研究におけるRAW 264.7細胞の応用

細胞の免疫学的応答のモデル化

本物のマクロファージの機能を反映した RAW 264.7 細胞株は、病原体や免疫学的刺激に対する細胞応答を調査するための重要なモデルです。 この側面を強調したある研究では、熱殺菌した乳酸菌がこれらの細胞に及ぼす免疫調節作用および抗酸化作用を評価し、免疫系の調節に関する重要な知見をもたらしました [ 5 ]。

これを補完するように、2019年に実施された研究では、植物 Polygonatum sibiricum 由来の多糖類に RAW 264.7 を曝露した際の免疫学的影響が解明されました。 この研究は、これらの化合物が NF-κB/MAPK シグナル伝達経路の活性化によって免疫応答を誘発すると結論づけ、分子レベルでの深い理解をもたらしました [6]。

破骨細胞分化の解明

破骨細胞分化研究の代替モデルとして機能するRAW 264.7細胞は、破骨細胞の挙動や分化経路の解明に寄与している。このような研究は、骨吸収のメカニズムや骨粗鬆症の病態生理に関する知見を拡大するものである。細胞内の変化をモニタリングし、これらの細胞内のヘム代謝を分析するために、高度なイメージング技術がしばしば利用される。

破骨細胞分化に関する分子的知見の獲得

RAW 264.7細胞は、主にマクロファージモデルとしての役割を担っているが、in vitroでの破骨細胞分化研究にも用いられている。 これらの細胞に破骨細胞様特性を誘導することで、研究者は分化過程や前破骨細胞の挙動に関する知見を得ることができますが、こうした研究においては、細胞株固有の特性や由来を考慮することが極めて重要です。

天然物の生物活性スクリーニング

天然物の生物活性スクリーニングも、RAW 264.7 細胞が優れた性能を発揮するもう一つの応用分野です。例えば、ハーブの混合物の免疫刺激特性を調査した韓国の研究におけるこの細胞株の使用は、天然物質中の生物活性化合物を特定する上でのこの細胞株の有効性を示しました [ 7 ]。

当社のRAW 264.7細胞を用いて、研究の先駆者になりましょう

RAW 264.7細胞を用いた研究論文

マウスマクロファージ細胞株RAW 264.7に関する多くの研究論文が公開されています:

RAW 264.7細胞:リソース、プロトコル、動画など

RAW 264.7細胞は、トランスフェクション研究で頻繁に使用されます。以下のリソースでは、RAW 264.7細胞株に使用されるさまざまなトランスフェクション法について解説しています。

RAW 264.7 細胞株に関連する動画

RAW 264.7 細胞株に関する必須のFAQ:マクロファージ模倣および破骨細胞分化研究に関する知見

RAW 264.7細胞株は、雄性BALB/cマウスのAbelsonマウス白血病ウイルス(A-MuLV)によって誘導された腫瘍の腹水から得られた。

RAW 264.7細胞は、自然免疫応答を示す貪食やピノサイトーシスといった重要な機能を果たすことから、マクロファージのモデルとして用いられている。

そう、RAW264.7細胞は破骨細胞ではないが、破骨細胞形成の過程や破骨細胞形成遺伝子の発現を研究するのに用いることができ、骨の健康や骨粗鬆症のような疾患の理解に貢献する。

RAW 264.7細胞は、マクロファージ応答を模倣することで微生物刺激に応答するため、宿主と病原体の相互作用や、さまざまな生物学的システムに対する細胞応答を研究するのに理想的である。

RAW 264.7細胞におけるサイトカイン産生は、炎症プロセスや、NF-κB/MAPK経路のような免疫応答に関与する細胞シグナル伝達経路を理解する上で極めて重要である。

いいえ、RAW264.7細胞は初代細胞ではなく、不死化細胞株です。初代細胞とは、生きた組織から直接採取した細胞のことで、培養中の寿命は限られています。

RAW 264.7細胞は、その増殖をサポートする特定の培地で培養され、実験に使用するための機能的安定性を確保するために、制御された温度および大気条件下で維持される。

RAW 264.7細胞は、基底状態(M0)では、培養中に受ける刺激に応じて、M1様炎症促進性またはM2様抗炎症性のいずれかを示すように極性化することができる。

そう、RAW264.7細胞は、植物由来化合物を含む天然物の潜在的な免疫調節効果や治療効果を評価するために頻繁に使用される。

代表的なマーカーには、耐性酸性ホスファターゼや貪食活性などの機能的マーカーと並んで、RAW264.7細胞のマクロファージ様表現型を確認するためによく使われるF4/80やCD11bがある。

参考文献

  1. Taciak, B. ほか, 連続継代によるRAW 264.7細胞株の表現型および機能的安定性の評価. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
  2. Wang, S. 他, 炎症性マクロファージはNotchシグナル伝達経路の調節を介して骨細胞の成熟および石灰化を阻害する. Molecular Medicine, 2022. 28(1): p. 102.
  3. Orekhov, A.N. 他, 単球の分化とマクロファージの分極. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
  4. Khabipov, A. 他, 「膵臓がん細胞によるRAW 264.7マクロファージの分極化――腫瘍促進性マクロファージの研究モデル」. Anticancer Research, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
  5. Kang, C.-H. 他, 熱殺菌乳酸菌は、RAW 264.7 細胞において誘導型一酸化窒素合成酵素およびシクロオキシゲナーゼ-2を介して一酸化窒素の産生を抑制する. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
  6. Zhang, J. 他、Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute 由来の多糖類は、NF-κB/MAPK 経路を介して RAW264.7 細胞株で免疫応答を誘導する。 RSC Advances, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
  7. Trinh, T.A. 他、RAW 264.7 マクロファージにおける免疫応答の増強に対する生薬製剤の効果。Biomolecules, 2020. 10(3): p. 424.