Media Kultur Sel

Sel yang dikultur memerlukan kontrol lingkungan yang cermat untuk pertumbuhan dan pemeliharaan yang sukses. Pendekatan yang komprehensif meliputi memastikan sterilitas, penyediaan nutrisi, stabilitas pH, dan kontrol suhu.

Kondisi Steril dan Pasokan Nutrisi

Untuk mencegah kontaminasi dan memastikan kelangsungan hidup sel, lingkungan yang steril sangat penting. Hal ini biasanya dicapai melalui teknik aseptik dan peralatan khusus seperti tudung aliran laminar. Nutrisi dipasok melalui media kultur, yang mengandung campuran bahan-bahan penting, termasuk:

  • Garam anorganik: Sangat penting untuk menjaga keseimbangan osmotik dan menyediakan ion-ion yang diperlukan untuk aktivitas seluler.
  • Karbohidrat: Berfungsi sebagai sumber energi; glukosa adalah gula yang paling umum digunakan.
  • Asam Amino: Bahan penyusun protein; beberapa di antaranya bersifat esensial dan tidak dapat disintesis oleh sel.
  • Vitamin: Bertindak sebagai faktor pendamping untuk reaksi enzimatik; vitamin B sangat penting untuk metabolisme sel.
  • Asam Lemak dan Lipid: Komponen penting untuk integritas dan fungsi membran sel.
  • Protein dan Peptida: Dalam media bebas serum, ini menggantikan faktor pertumbuhan dan protein pengikat yang biasanya dipasok oleh serum.
  • Serum: Sering kali dimasukkan sebagai sumber faktor pertumbuhan, meskipun alternatif bebas serum semakin populer untuk mengurangi variabilitas dan risiko kontaminasi.
  • stabilitas pH dan Suhu: Sel biasanya membutuhkan kisaran pH 7,2-7,4 untuk pertumbuhan yang optimal. Hal ini diatur oleh sistem penyangga, yang dapat berupa CO2 / bikarbonat atau secara kimiawi dengan menggunakan agen seperti HEPES. Suhu dipertahankan sekitar 37°C untuk meniru kondisi fisiologis.

Varian Media dan Optimasi

Selama bertahun-tahun, berbagai media basal telah dikembangkan untuk memenuhi jenis sel tertentu:

  • Larutan Garam Seimbang: Membentuk fondasi formulasi media yang lebih kompleks.
  • Media Basal, seperti Minimum Essential Medium (MEM), digunakan untuk kultur primer dan sel diploid.
  • Media Kompleks: Seperti RPMI 1640, media ini cocok untuk sel mamalia yang lebih luas.
  • Media Bebas Serum: Didesain untuk aplikasi spesifik, mengurangi risiko kontaminasi dari komponen yang berasal dari hewan.

Persiapan Media dan Kontrol Kualitas

Media dapat dibuat sendiri dari bahan-bahan penting atau dibeli sebagai larutan siap pakai. Kontrol kualitas meliputi memastikan tidak adanya kontaminan dan konsentrasi bahan yang tepat. Rekonstitusi media bubuk membutuhkan air bermutu tinggi, dan media yang disiapkan harus disterilkan, biasanya dengan penyaringan.

Penggunaan Serum dan Pertimbangan Keamanan

Penggunaan serum, khususnya fetal bovine serum (FBS), adalah hal yang umum karena kandungannya yang kaya akan faktor pertumbuhan. Namun, karena kekhawatiran tentang penyakit seperti BSE, protokol pengujian dan sumber yang ketat diikuti untuk memastikan keamanan.

Pedoman dan Tren Regulasi

Peraturan memandu bahan yang berasal dari hewan dalam kultur, menekankan pentingnya sumber dan pengujian. Kecenderungan untuk menghilangkan bahan-bahan tersebut jika memungkinkan tercermin dalam pengembangan alternatif media bebas serum dan bebas hewan.

Kesimpulannya, media kultur sel memainkan peran mendasar dalam pertumbuhan dan pemeliharaan sel secara in vitro. Setiap komponen dipilih dengan cermat dan dioptimalkan untuk meniru lingkungan in vivo, memastikan bahwa sel memiliki kondisi pertumbuhan, kelangsungan hidup, dan fungsionalitas.

DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) adalah media basal yang sangat serbaguna dan digunakan secara luas yang dirancang untuk mendukung pertumbuhan berbagai macam sel mamalia dalam penelitian biologi. Media ini berfungsi sebagai media yang ideal untuk menumbuhkan fibroblas primer, neuron, sel glial, HUVEC, sel otot polos, serta garis sel populer seperti HeLa, 293, Cos-7, dan PC-12.
Yang membedakan DMEM dari media lain adalah komposisinya yang unik. Media ini mengandung peningkatan empat kali lipat yang mengesankan dalam konsentrasi asam amino dan vitamin dibandingkan dengan Eagle's Minimal Essential Medium yang asli. Awalnya dikembangkan dengan glukosa rendah (1 g/L) dan natrium piruvat, DMEM sering digunakan dengan kadar glukosa yang lebih tinggi, baik dengan atau tanpa natrium piruvat. Khususnya, DMEM tidak mengandung protein, lipid, atau faktor pertumbuhan, sehingga memerlukan suplementasi. Untuk mencapai pertumbuhan yang optimal, pendekatan yang umum dilakukan adalah melengkapi DMEM dengan 10% Fetal Bovine Serum (FBS). Selain itu, DMEM menggunakan sistem penyangga natrium bikarbonat, yang membutuhkan lingkungan 5-10% CO2 untuk mempertahankan pH fisiologis.
Modified Eagle Medium (DMEM) dari Dulbecco sangat dihargai di antara media yang ditentukan untuk kultur sel dan jaringan, yang memenuhi kebutuhan pertumbuhan berbagai fenotipe sel yang sesuai. Media ini melampaui Eagle's Medium asli, yang dikembangkan pada tahun 1950-an untuk membudidayakan sel ayam, melalui formulasi tambahan yang disempurnakan yang dikenal sebagai modifikasi Dulbecco. Modifikasi ini secara signifikan meningkatkan kandungan asam amino dan vitamin tertentu hingga empat kali lipat dibandingkan dengan medium aslinya.
Dalam bidang kultur sel, DMEM memainkan peran penting sebagai media pertumbuhan untuk berbagai jenis sel, termasuk sel primer, sel punca, dan sel yang ditransformasi. Para peneliti juga menggunakan versi modifikasi DMEM untuk beragam aplikasi penelitian, seperti penemuan obat, rekayasa jaringan, dan studi tentang jalur pensinyalan sel.

Kontrol Kualitas

Disaring steril


Penyimpanan dan Umur Simpan

Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6-8 minggu.


Ketentuan Pengiriman

Suhu lingkungan


Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang terlalu sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.


Komposisi



Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)


Asam Amino
Glisin
30.00



L-Arginin HCl
84.00



L-Sistin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-Histidin HClH2O
42.00



L-Isoleusin
105.00



L-Leusin
105.00



L-Lisin HCl
146.00



L-Metionin
30.00



L-Fenilalanin
66.00



L-Serin
42.00



L-Treonin
95.00



L-Tryptophan
16.00



L-Tirosin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Vitamin
Kolin klorida
4.00



D-Kalsium Pantotenat
4.00



Asam Folat
4.00



myo-Inositol
7.20



Nikotinamida
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Tiamin HCl
4.00


Garam Anorganik
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Komponen Lainnya
D-Glukosa
4500.00



Garam Natrium Fenol Merah
15.90



Natrium Piruvat
110.00

€25,00*
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Salah satu media kultur sel sintetis yang paling banyak digunakan adalah Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Dikembangkan oleh Harry Eagle, media ini pertama kali diperkenalkan pada tahun 1959 dan sejak saat itu menjadi pilihan populer untuk berbagai jenis sel yang ditumbuhkan dalam lapisan tunggal dan garis sel yang melekat.
Apa yang ada di EMEM?
EMEM adalah versi modifikasi dari media esensial minimum Eagle, yang mengandung Larutan Garam Seimbang Earle, asam amino non-esensial, L-glutamin, natrium piruvat, dan natrium bikarbonat. Penting untuk dicatat bahwa tingkat natrium bikarbonat ini dimaksudkan untuk digunakan dalam 5% CO2 di udara. Untuk menjaga efektivitasnya, disarankan untuk menyimpan media pada suhu 2°C hingga 8°C di tempat gelap saat tidak digunakan.
Untuk apa EMEM digunakan?
Eagle's minimal essential medium (EMEM) adalah medium kultur sel yang dapat mempertahankan sel dalam kultur jaringan. Medium ini mengandung konsentrasi asam amino yang lebih tinggi, sehingga memungkinkan perkiraan yang lebih akurat tentang komposisi protein sel mamalia yang dikultur. EMEM dapat digunakan untuk menumbuhkan berbagai sel, termasuk fibroblas, sel kanker hati manusia (HepG2) dan sel astrosit yang diturunkan dari progenitor otak janin manusia (PDA). Ini biasanya digunakan dengan adanya serum sapi janin (FBS), anak sapi, atau serum kuda.
Apa perbedaan EMEM dengan media kultur sel lainnya?
Meskipun EMEM dan media Eagle yang dimodifikasi Dulbecco (DMEM) memiliki beberapa kesamaan, keduanya juga berbeda. Kedua media tersebut kekurangan protein dan mengandung asam amino, garam, glukosa, dan vitamin yang diperlukan untuk menyediakan energi bagi sel dan mempertahankannya dalam kultur jaringan. Namun, formulasi DMEM dimodifikasi untuk mengandung hingga empat kali lebih banyak vitamin dan asam amino serta dua hingga empat kali lebih banyak glukosa daripada EMEM. Perlu dicatat bahwa EMEM juga berbeda dengan formulasi MEM yang asli.


Kontrol Kualitas

Disaring dengan steril


Penyimpanan dan Umur Simpan

Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6-8 minggu.


Ketentuan Pengiriman

Suhu lingkungan


Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang terlalu sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.



Komposisi



Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)


Asam Amino
L-Arginin HCl
126.00


L-Sistin 2 HCl
31.30


L-Glutamin
292.00


L-Histidin HClH2O
42.00


L-Isoleusin
52.00


L-Leusin
52.00


L-Lisin HCl
72.50


L-Metionin
15.00


L-Fenilalanin
32.00


L-Treonin
48.00


L-Tryptophan
10.00


L-Tirosin 2 Na 2H2O
51.90


L-Valine
46.00


Vitamin
Kolin Klorida
1.00


Vitamin
D-Kalsium Pantotenat
1.00


Asam Folat
1.00


myo-Inositol
2.00


Nikotinamida
1.00


Pyridoxal HCl
1.00


Riboflavin
0.10


Tiamin HCl
1.00


Garam Anorganik
CaCl2 2H2O
265.00


Garam Anorganik
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Komponen Lainnya
D-Glukosa
1000.00


Komponen Lainnya
Garam Natrium Fenol Merah
11.00

€25,00*
Ham's F12 Medium, w: 1,0 mM Glutamin stabil, w: 1,0 mM Natrium piruvat, w: 1,176 g/L NaHCO3
Ham's F-12 Medium, juga dikenal sebagai Ham's F-12 Nutrient Mix, adalah media basal yang banyak digunakan yang dirancang khusus untuk kultur sel. Medium ini telah digunakan secara luas untuk pelapisan sel tunggal bebas serum pada sel Ovarium Hamster Cina (CHO), sel paru-paru, dan sel L tikus. Selain itu, Ham's F-12 adalah media pilihan untuk Uji Toksisitas Klonal (CTA).
Salah satu keunggulannya yang menonjol adalah kemampuannya untuk mendukung pertumbuhan sel tanpa memerlukan suplementasi serum. Hal ini menghilangkan potensi gangguan yang disebabkan oleh komponen serum, memastikan hasil eksperimental yang konsisten dan dapat diandalkan. Dengan menyediakan lingkungan kultur bebas serum, Ham's F-12 Medium menawarkan kontrol yang lebih besar kepada para peneliti atas penyelidikan mereka.
Fitur utama lain dari Ham's F-12 Medium adalah kesesuaiannya untuk pelapisan sel tunggal. Hal ini menjadikannya pilihan yang sangat baik untuk berbagai garis sel, termasuk sel CHO, sel paru-paru, dan sel L tikus. Komposisi nutrisi yang dioptimalkan dari medium ini memfasilitasi perlekatan dan pertumbuhan sel individu secara efisien, memungkinkan pembentukan kultur sel yang homogen dengan kemampuan reproduksi yang lebih baik.
Selain itu, Ham's F-12 Medium telah mendapatkan pengakuan sebagai media yang disukai untuk Uji Toksisitas Klonal (CTA). Pengujian ini memainkan peran penting dalam menilai efek sitotoksik zat pada sel. Dengan menggunakan Ham's F-12 Medium dalam CTA, para peneliti dapat secara akurat mengevaluasi dampak dari berbagai senyawa atau perlakuan pada sel individu, memberikan wawasan yang berharga ke dalam profil toksikologi.
Kontrol kualitas

pH = 7,2 +/
- 0,02 pada 20-25 ° C.
Setiap lot telah diuji sterilitasnya dan tidak adanya mikoplasma dan bakteri.

Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C dalam keadaan gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan menurunkan kualitas produk.
Jangan memanaskan media hingga lebih dari 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, peralatan microwave).
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah ini dari botol dan hangatkan pada suhu kamar.
Umur simpan untuk media apa pun kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal pembuatan.

Komposisi




Komponen
mg / L


Garam Anorganik
Kalsium klorida x 2H2O
44,00



Tembaga (II) sulfat x 5H2O
0,00



Besi (II) sulfat x 7H2O
0,83



Magnesium klorida x 6H2O
122,00



Kalium klorida
223,65



Natrium klorida
7599,00



di-Natrium hidrogen fosfatanhidrat
142,04



Seng sulfat x 7H2O
0,86


Komponen lainnya
D (+)
- Glukosa anhidrat
1801,60



Hipoksantin
4,08



Asam linoleat
0,08



Asam DL-α-Lipoat
0,21



Fenol merah
1,20



Putrescine x 2HCl
0,16



Natrium piruvat
110,00



Timidin
0,73



NaHCO3
1176,00


Asam Amino
L-Alanin
8,91



L-Arginin x HCl
210,70



L-Asparagin x H2O
15,01



Asam L-Aspartat
13,31



L-Sistein x HCl x H2O
35,12



L-Alanyl-L-Glutamin
217,30



Asam L-Glutamat
14,71



Glisin
7,51



L-Histidin x HCl x H2O
20,96



L-Isoleusin
3,94



L-Leusin
13,12



L-Lisin x HCl
36,54



L-Metionin
4,48



L-Fenilalanin
4,96



L-Prolin
34,53



L-Serine
10,51



L-Treonin
11,91



L-Tryptophan
2,04



L-Tirosin
5,44



L-Valine
11,71


Vitamin
D (+)
- Biotin
0,01



D-Kalsium pantotenat
0,24



Kolin klorida
13,96



Asam folat
1,32



myo-Inositol
18,02



Nikotinamida
0,04



Piridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

€25,00*
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM: Ham's F12 adalah media basal yang dikenal luas dan digunakan secara luas dalam kultur sel untuk penelitian biologi. Media ini berfungsi sebagai sumber nutrisi mendasar untuk pertumbuhan berbagai lini sel mamalia, terutama ketika dilengkapi dengan Fetal Bovine Serum (FBS).

Formulasi unik ini menggabungkan Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) dan Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) dengan rasio 1:1 yang tepat. Penambahan L-glutamin semakin menyempurnakan komposisinya.

DMEM, yang berasal dari Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), menawarkan peningkatan konsentrasi asam amino dan vitamin dibandingkan dengan pendahulunya. Sebaliknya, Ham's F-12 didasarkan pada medium Ham's F-10, menyediakan serangkaian komponen esensial yang saling melengkapi.

Untuk mendukung pertumbuhan sel yang optimal, merupakan praktik umum untuk melengkapi DMEM: Ham's F12 dengan FBS pada konsentrasi khas 5-10%. Penambahan ini diperlukan karena media tidak memiliki hormon pertumbuhan, lipid, dan protein yang penting untuk perkembangan sel.

DMEM: Ham's F12 menggabungkan sistem penyangga pH dan sering kali dilengkapi dengan fenol merah, indikator pH. Sel yang dikultur dalam DMEM: Ham's F12, atau media apa pun yang menggunakan sistem penyangga bikarbonat, memerlukan lingkungan CO2 terkontrol 5-10% untuk mempertahankan tingkat pH yang sesuai.


Kontrol Kualitas

Disaring dengan steril


Penyimpanan dan Umur Simpan

Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6-8 minggu.


Ketentuan Pengiriman

Suhu lingkungan


Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang terlalu sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.


Komposisi



Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)


Asam Amino
Glisin
18.75


L-Alanin
4.45


L-Arginin HCl
147.50


L-Asparagin H₂O
7.50


Asam L-Aspartat
6.65


L-Sistein HCl H₂O
17.56


L-Sistin 2 HCl
31.29


Asam L-Glutamat
7.35


L-Glutamin
365.00


L-Histidin HCl H₂O
31.48


L-Isoleusin
54.47


L-Leusin
59.05


L-Lisin HCl
91.25


L-Metionin
17.24


L-Fenilalanin
35.48


L-Proline
17.25


L-Serine
26.25


L-Treonin
53.45


L-Tryptophan
9.02


Garam Disodium L-Tirosin
48.10


L-Valine
52.85


Vitamin
D-Biotin
0.0035


Kolin Klorida
8.98


D-Kalsium Pantotenat
2.24


Asam Folat
2.66


myo-Inositol
12.60


Nikotinamida
2.02


Piridoksin HCl
0.031


Piridoksal HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Tiamin HCl
2.17


Vitamin B12
0.68


Garam Anorganik
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe (NO₃) ₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Komponen Lainnya
D-Glukosa
3151.00


Hipoksantin
2.40


HEPES
3574.50


Asam Linoleat
0.042


Asam Lipoat
0.105


Garam Natrium Fenol Merah
8.63


Putrescine 2 HCl
0.081


Natrium Piruvat
55.00


Timidin
0.365

€25,00*
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Sodium piruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3
Memperkenalkan Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, modifikasi khusus dari Ham's F-12 medium yang dirancang untuk memenuhi persyaratan unik penelitian biologi. Media canggih ini menawarkan keunggulan yang berbeda, meningkatkan kultivasi hepatosit manusia primer, serta sel hati tikus dan ayam, terutama dalam kondisi serum yang berkurang.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium diformulasikan dengan hati-hati untuk mengoptimalkan kondisi kultur sel. Media ini memiliki komposisi yang diperkaya, memberikan peningkatan kadar komponen penting seperti asam amino dan natrium piruvat, serta elemen tambahan termasuk putrescine, timidin, hipoksantin, dan seng. Penambahan ini memungkinkan para peneliti untuk melengkapi media dengan serum minimal atau komponen yang ditentukan untuk jenis sel tertentu, memfasilitasi kondisi eksperimental yang tepat.

Khususnya, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium tidak mengandung protein atau faktor pertumbuhan. Oleh karena itu, suplementasi dengan faktor pertumbuhan dan Fetal Bovine Serum (FBS) sering kali diperlukan, yang memungkinkan para peneliti untuk menyesuaikan media dengan kebutuhan garis sel spesifik mereka. Untuk kinerja yang optimal, konsentrasi FBS harus dioptimalkan secara hati-hati untuk setiap lini sel, memastikan pertumbuhan dan fungsionalitas yang optimal.

Untuk mempertahankan pH fisiologis, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium menggunakan sistem penyangga natrium bikarbonat (2,5 g / L), yang membutuhkan lingkungan 5-10% CO2 yang terkendali selama budidaya. Hal ini memastikan pH medium tetap berada dalam kisaran ideal untuk pertumbuhan dan kelangsungan hidup sel
Kontrol kualitas

pH = 7,2 +/
- 0,02 pada 20-25 ° C.
Setiap lot telah diuji sterilitasnya dan tidak adanya mikoplasma dan bakteri.

Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C dalam keadaan gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan menurunkan kualitas produk.
Jangan memanaskan media hingga lebih dari 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, peralatan microwave).
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah ini dari botol dan hangatkan pada suhu kamar.
Umur simpan untuk media apa pun kecuali media dasar adalah 8 minggu dari tanggal pembuatan.

Komposisi




Komponen
mg / L


Garam Anorganik
Kalsium klorida x 2H2O
135,24



Tembaga (II) sulfat x 5H2O
0,00



Besi (II) sulfat x 7H2O
0,83



Magnesium klorida x 6H2O
105,72



Magnesium sulfat x 7H2O
394,49



Kalium klorida
283,29



Kalium dihidrogen fosfat
58,52



Natrium klorida
7597,20



di-Natrium hidrogen fosfatanhidrat
115,02



Seng sulfat x 7H2O
0,14


Komponen Lainnya
D (+)
- Glukosa anhidrat
1260,00



Hipoksantin
4,08



Asam DL-α-Lipoat
0,21



Fenol merah
3,00



Putrescine x 2HCl
0,32



Natrium piruvat
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidin
0,73


Asam Amino
L-Alanin
17,82



L-Arginin x HCl
421,40



L-Asparagin x H2O
30,02



Asam L-Aspartat
26,62



L-Sistein x HCl x H2O
70,24



L-Glutamin
292,20



Asam L-Glutamat
29,42



Glisin
15,01



L-Histidin x HCl x H2O
41,92



L-Isoleusin
7,87



L-Leusin
26,24



L-Lisin x HCl
73,04



L-Metionin
8,95



L-Fenilalanin
9,91



L-Prolin
69,06



L-Serine
21,02



L-Treonin
23,82



L-Tryptophan
4,08



L-Tirosin
10,87



L-Valine
23,42


Vitamin
D (+)
- Biotin
0,07



D-Kalsium pantotenat
0,48



Kolin klorida
13,96



Asam folat
1,32



myo-Inositol
18,02



Nikotinamida
0,04



Piridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

€108,00*
Media McCoys 5A (dimodifikasi), w: 3,0 g/L Glukosa, w: Glutamin stabil, w: 2,0 mM Natrium piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
McCoy's 5A Medium adalah medium yang sangat direkomendasikan dan dirancang khusus untuk memfasilitasi pertumbuhan dan replikasi virus dalam kultur sel primer. Medium ini telah mendapatkan pengakuan yang signifikan atas kinerjanya yang luar biasa dalam berbagai aplikasi penelitian biologi. Salah satu aplikasi utama McCoy's 5A Medium adalah penggunaannya dalam budidaya garis sel karsinoma kolon manusia. Secara khusus, medium ini telah digunakan dalam studi tentang reseptor protein G yang mengandung ulangan asam amino leusin (LGR5) dan perannya dalam metastasis kanker kolon. Media ini telah digunakan secara efektif dalam budidaya beberapa garis sel kanker kolon, termasuk HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b, dan TENN, memungkinkan peneliti untuk menyelidiki mekanisme di balik metastasis kanker kolon. Selain penggunaannya dalam penelitian kanker, McCoy's 5A Medium terbukti tak tergantikan dalam studi osteoblas. Peneliti yang meneliti reaktivitas ion pada hidroksiapatit defisiensi kalsium dalam medium kultur sel standar telah menggunakan medium ini untuk menumbuhkan osteoblas. Aplikasi ini memfasilitasi pemahaman yang lebih baik tentang interaksi antara osteoblas dan hidroksiapatit defisiensi kalsium, berkontribusi pada kemajuan dalam bidang penelitian tulang. McCoy's 5A Medium dirumuskan secara teliti dengan memodifikasi asam amino yang terdapat dalam Basal Medium Eagle untuk memberikan dukungan optimal bagi sel tumor hati. Formulasi yang diperkaya ini memungkinkan kesesuaiannya untuk berbagai garis sel yang telah ditetapkan, serta sel primer, sehingga meningkatkan fleksibilitas dan aplikasinya dalam berbagai lingkungan penelitian. McCoy's 5A Medium memperluas efek biokimia dan fisiologisnya melampaui sel tumor hati. Medium ini telah berhasil digunakan untuk mendukung pertumbuhan dalam kultur primer sumsum tulang, kulit, gusi, ginjal, omentum, kelenjar adrenal, paru-paru, limpa, embrio tikus, dan jenis sel lainnya. Rentang aplikasi yang luas ini membuktikan kegunaan yang luas dari McCoy's 5A Medium dalam mendukung pertumbuhan dan pemeliharaan berbagai jenis sel untuk penelitian biologi yang komprehensif. Formulasi Media McCoy's 5A (dimodifikasi) ini mengandung 3,0 g/L Glukosa, Glutamin stabil, 2,0 mM Natrium piruvat, dan 2,2 g/L NaHCO₃. Kontrol kualitas pH = 7,2 ± 0,02 pada suhu 20-25°C.  Setiap batch telah diuji untuk sterilitas dan ketiadaan mycoplasma dan bakteri. Pemeliharaan Simpan di lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C dalam kondisi gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C dapat mengurangi kualitas produk.  Jangan memanaskan medium melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, microwave).  Jika hanya sebagian medium yang akan digunakan, ambil jumlah tersebut dari botol dan panaskan pada suhu ruangan. Umur simpan untuk semua medium kecuali medium dasar adalah 6 hingga 8 minggu sejak tanggal pembukaan. Komposisi Komponen mg/L Garam AnorganikKlorida kalsium x 2H₂O132,00 Magnesium sulfat97,67 Klorida kalium400,00 Natrium klorida6.460,00 Fosfat hidrogen disodium (anhidrat)504,00 Komponen LainD(+)-Glukosa (anhidrat)3.000,00 Glutathione (tereduksi)0,50 Peptone daging600.00 Garam natrium fenol merah11,00 Asam AminoL-Alanin13,36 L-Arginine x HCl42,14 L-Asparagin x H₂O45,03 Asam Aspartat L19,97 L-Sistein x HCl x H₂O31,75 L-Glutamin (stabil)219,15 Asam glutamat L22,07 Glycine7,51 L-Histidin x HCl x H₂O20,96 L-hidroksiprolin19,67 L-Isoleusin39,36 L-Leusin39,36 L-Lisin x HCl36,54 L-Metionin14,92 L-Fenilalanin16,52 L-Proline17,27 L-Serin26,28 L-Treonin17,87 L-Triptofan3,06 L-Tirosin garam disodium26,10 L-Valin17,57 VitaminAsam p-aminobenzoat1,00 Asam askorbat0,56 D(+)-Biotin0,20 D-Kalsium pantotenat0,20 Klorida kolin5,00 Asam folat10,00 Myo-inositol36,00 Nicotinamida0,50 Asam nikotinat0,50 Pyridoxal HCl0,50 Pyridoxine HCl0,50 Riboflavin0,20 Tiamin HCl0,20 Vitamin B122,0

€30,00*
IMDM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Natrium piruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) adalah media pertumbuhan yang kompleks dan diperkaya untuk kultur sel. IMDM adalah modifikasi dari DMEM yang mengandung selenium dan memiliki tambahan asam amino, vitamin, dan garam anorganik dibandingkan dengan DMEM. Media ini tidak mengandung zat besi dan membutuhkan suplementasi dengan Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM menggunakan sistem penyangga natrium bikarbonat dan membutuhkan lingkungan dengan kadar CO2 5-10% untuk mempertahankan pH fisiologis.
IMDM sangat cocok untuk kultur sel yang berkembang biak dengan cepat dan berkepadatan tinggi, termasuk sel Jurkat, COS-7, dan sel makrofag. Berbagai modifikasi IMDM yang tersedia untuk berbagai aplikasi kultur sel dapat ditemukan dengan menggunakan alat pemilih media. Media cair menyediakan nutrisi penting untuk semua aplikasi kultur sel. Setiap media kultur sel berkualitas tinggi kami diproduksi sesuai dengan formula yang diterbitkan pada awalnya atau modifikasi yang diperlukan untuk kinerja dan stabilitas media kultur yang konsisten.
IMDM vs DMEM
IMDM mengandung kalium nitrat sebagai pengganti ferri nitrat dan HEPES serta natrium piruvat. Komponen tambahan dalam IMDM membuatnya lebih cocok untuk jenis sel khusus dan aplikasi spesifik daripada DMEM.
IMDM vs RPMI
IMDM dan RPMI memiliki formulasi yang berbeda yang mungkin relevan untuk stimulasi PMA/ionomisin. Salah satu perbedaan yang signifikan adalah konsentrasi Ca2+. Sementara RPMI mengandung 0,42 mM Ca2+, IMDM mengandung 1,49 mM.
Kontrol kualitas

pH = 7,2 +/
- 0,02 pada suhu 20-25°C.
Setiap lot telah diuji sterilitasnya dan tidak adanya mikoplasma dan bakteri.

Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C dalam gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan menurunkan kualitas produk.
Jangan memanaskan media hingga lebih dari 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, peralatan microwave).
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah ini dari botol dan hangatkan pada suhu kamar.
Umur simpan untuk media apa pun kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal pembuatan.
Komposisi




Komponen
mg / L


Garam Anorganik
Kalsium klorida x 2 H2O
219,00



Kalium klorida
330,00



Kalium nitrat
0.076



Magnesium sulfat anhidrat
97,73



Natrium klorida
4,505.00



Natrium dihidrogen fosfat anhidrat
109,00



Natrium selenit
0,02


Komponen lainnya
D (+)
- Glukosa anhidrat
4,500.00



HEPES
5,958.00



Natrium piruvat
110,00



Fenol merah
15,00


Asam Amino
L-Alanin
25,00



L-Arginin x HCl
84,00



L-Asparagin x H2O
25,00



Asam L-Aspartat
30,00



L-Sistin x 2HCl
91,24



L-Glutamin
584,00



Asam L-Glutamat
75,00



Glisin
30,00



L-Histidin x HCl x H2O
42,00



L-Isoleusin
104,80



L-Leusin
104,80



L-Lisin x HCl
146,20



L-Metionin
30,00



L-Fenilalanin
66,00



L-Prolin
40,00



L-Serine
42,00



L-Treonin
95,20



L-Tryptophan
16,00



L-Tirosin x 2Na
104,20



L-Valine
93,60


Vitamin
D (+)
- Biotin
0.013



D-Kalsium pantotenat
4,00



Kolin klorida
4,00



Asam folat
4,00



myo-Inositol
7,20

€25,00*
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI 1640 Medium, juga dikenal sebagai medium RPMI, adalah medium kultur sel yang sangat serbaguna yang banyak digunakan dalam penelitian biologi untuk menumbuhkan berbagai sel mamalia. Dikembangkan oleh George E. Moore, Robert E. Gerner, dan H. Addison Franklin pada tahun 1966 di Pusat Kanker Komprehensif Roswell Park yang terkenal, media ini mendapatkan namanya dari asalnya di Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Awalnya dirancang untuk mendukung pertumbuhan sel leukemia manusia dalam kultur suspensi dan monolayer, RPMI 1640 Medium telah berevolusi melalui modifikasi oleh para peneliti dan pemasok komersial agar sesuai untuk berbagai macam sel mamalia. Ini sangat kompatibel dengan garis sel seperti HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrosit, dan karsinoma.
Media RPMI 1640 berbeda dari media kultur sel lainnya karena komposisinya yang unik. Media ini mengandung sejumlah besar fosfat, asam amino, dan vitamin. Khususnya, ini mencakup biotin, vitamin B12, dan PABA, yang tidak ada dalam Eagle's Minimal Essential Medium atau Dulbecco's Modified Eagle Medium. Selain itu, RPMI 1640 Medium menunjukkan konsentrasi vitamin inositol dan kolin yang meningkat secara signifikan. Namun, tidak mengandung protein, lipid, atau faktor pertumbuhan. Oleh karena itu, suplementasi dengan 10% Fetal Bovine Serum (FBS) umumnya diperlukan untuk memberikan kondisi optimal untuk pertumbuhan sel.
Sistem penyangga RPMI 1640 Medium bergantung pada natrium bikarbonat dan membutuhkan lingkungan 5-10% CO2 untuk mempertahankan pH yang sesuai secara fisiologis. Dimasukkannya agen pereduksi glutathione semakin membedakan media ini dari yang lain.
Kontrol Kualitas

Disaring dengan steril


Penyimpanan dan Umur Simpan

Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6-8 minggu.


Ketentuan Pengiriman

Suhu lingkungan


Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang terlalu sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.



Komposisi




Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)


Asam Amino
Glisin
10.00



L-Alanyl-L-Glutamin
434.40



L-Arginin
200.00



L-AsparaginH2O
56.82



Asam L-Aspartat
20.00



L-Sistin 2HCl
65.20



Asam L-Glutamat
20.00



L-Histidin HClH2O
20.27



L-Hidroksi-L-Prolin
20.00



L-Isoleusin
50.00



L-Leusin
50.00



L-Lisin HCl
40.00



L-Metionin
15.00



L-Fenilalanin
15.00



L-Proline
20.00



L-Serine
30.00



L-Treonin
20.00



L-Tryptophan
5.00



L-Tirosin 2Na 2H2O
28.83



L-Valine
20.00


Vitamin
p-Amino Benzoic Acid
1.00



D-Biotin
0.20



Kolin Klorida
3.00



D-Kalsium Pantotenat
0.25



Asam Folat
1.00



myo-Inositol
35.00



Nikotinamida
1.00



Piridoksin HCl
1.00



Riboflavin
0.20



Tiamin HCl
1.00



Vitamin B12
0.005


Garam Anorganik
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Komponen Lainnya
D-Glukosa
2000.00



L-Glutathione Berkurang
1.00



Garam Natrium Fenol Merah
5.30

€25,00*

Kami telah mendeteksi bahwa Anda berada di negara lain atau menggunakan bahasa peramban yang berbeda dari yang dipilih saat ini. Apakah Anda ingin menerima pengaturan yang disarankan?

Tutup