Volume: 100 ml
Penyimpanan: ≤ –15°C
Sterilitas: Disaring steril
Larutan Glutamin Stabil (L-Alanyl-L-Glutamin, 200 mM) adalah bentuk dipeptida yang sangat stabil dari L-glutamin, dirancang sebagai pengganti langsung untuk L-glutamin konvensional dalam media kultur sel. L-glutamin adalah asam amino esensial dan sumber energi utama bagi sel yang dikultur, memainkan peran kritis dalam pertumbuhan sel, metabolisme, dan sintesis protein.
Aplikasi dan Manfaat
Dalam media cair standar, L-glutamine terdegradasi relatif cepat pada 37°C, menyebabkan pembentukan produk samping beracun seperti ion amonium yang dapat merugikan viabilitas sel dan hasil eksperimen. Glutamine stabil mengatasi keterbatasan ini dengan menyediakan bentuk dipeptida yang tidak terdegradasi dan tetap utuh dalam kondisi kultur.
Sel memecah ikatan dipeptida secara enzimatis untuk melepaskan L-glutamine sesuai kebutuhan, memastikan pasokan segar yang berkelanjutan sambil mencegah penumpukan produk limbah berbahaya. Hal ini membuat solusi ini sangat menguntungkan untuk kultur sel jangka panjang dan sistem pertumbuhan kepadatan tinggi.
Formulasi dan Penggunaan
Larutan L-Alanyl-L-Glutamine disiapkan dalam air berkualitas kultur sel dengan konsentrasi 200 mM dan disaring steril untuk aplikasi yang sensitif terhadap kontaminasi. Larutan ini dapat dilarutkan langsung ke dalam media lengkap sesuai kebutuhan eksperimental. Simpan pada suhu ≤ –15°C dan hindari siklus pembekuan-pencairan berulang untuk menjaga stabilitas produk.
Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Volume: 100 ml
Penyimpanan: +2°C hingga +8°C
Sterilitas: Disaring steril
Larutan Buffer HEPES (1 M), yang juga dikenal sebagai N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, adalah agen penyangga organik zwitterionik yang banyak digunakan dalam media kultur sel. Larutan ini dirancang untuk menjaga kondisi pH yang stabil dalam rentang fisiologis 6,7 hingga 8,6, mendukung fungsi sel yang optimal selama aplikasi in vitro.
Aplikasi dan Manfaat
HEPES menyediakan kapasitas penyangga yang andal dalam sistem kultur sel, terutama saat sel ditangani di luar inkubator CO₂. Penambahan 10–25 mM HEPES ke dalam media kultur memberikan stabilitas pH yang lebih baik selama periode manipulasi yang panjang, membantu mempertahankan kondisi eksperimental yang konsisten.
Buffer ini tidak dapat menembus membran, memiliki gangguan minimal terhadap reaksi biokimia, dan menunjukkan stabilitas kimia dan enzim yang kuat. Sifat-sifat ini membuatnya cocok untuk berbagai aplikasi kultur sel dan biokimia.
Formulasi dan Penggunaan
Larutan ini disediakan sebagai konsentrat 1 M yang disiapkan dalam air berkualitas kultur sel dan disaring steril untuk penggunaan di lingkungan yang sensitif terhadap kontaminasi. Larutan ini dapat dilarutkan hingga konsentrasi kerja yang diinginkan sesuai dengan persyaratan aplikasi. Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C dan tangani dalam kondisi aseptik untuk menjaga integritas produk.
Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Volume: 50 ml
Penyimpanan: +2°C hingga +8°C
Sterilitas: Disterilkan dengan penyaringan
Larutan D-(+)-Glukosa (Larutan Dextrosa) adalah suplemen steril siap pakai yang mengandung gula alami D-(+)-glukosa, komponen utama metabolisme seluler. Glukosa terlibat dalam proses biologis esensial seperti produksi energi, glikosilasi, dan pembentukan glikan yang berkontribusi pada struktur dan fungsi seluler.
Aplikasi dan Manfaat
Larutan glukosa ini secara luas digunakan sebagai suplemen dalam media kultur sel dan dalam berbagai aplikasi biologi seluler dan molekuler. Sebagai sumber karbon dan energi utama, glukosa mendukung pertumbuhan sel, proliferasi, dan aktivitas metabolik. Perannya dalam jalur biosintesis juga menjadikannya kritis untuk mempertahankan fisiologi seluler normal dan konsistensi eksperimental.
Formulasi dan Penggunaan
Larutan ini disediakan dengan konsentrasi tinggi 250 g/L glukosa, memungkinkan pencairan fleksibel ke dalam media kultur sesuai kebutuhan eksperimental. Larutan ini disaring steril untuk memastikan kesesuaiannya untuk aplikasi yang sensitif terhadap kontaminasi. Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C dan tangani secara aseptik untuk menjaga kualitas dan stabilitas produk.
Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Volume: 10 ml
Penyimpanan: +2°C hingga +8°C
Sterilitas: Disaring steril
Larutan Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) (100x) adalah suplemen yang didefinisikan secara kimiawi yang dirancang untuk berbagai aplikasi kultur sel. Larutan ini paling sering digunakan sebagai aditif pada media kultur sel dasar untuk mendukung pertumbuhan sel dalam kondisi serum rendah atau bebas serum.
Aplikasi dan Manfaat
Suplemen ITS kami menyediakan komponen esensial yang diperlukan untuk kinerja optimal media bebas serum. Dengan menambahkan ITS ke media nutrisi konvensional, kebutuhan serum sapi janin (FBS) untuk pemeliharaan rutin banyak garis sel dapat dikurangi secara signifikan. Hal ini membantu meminimalkan variabilitas yang terkait dengan penggunaan serum sambil mempertahankan pertumbuhan dan viabilitas sel yang konsisten.
Insulin mendukung penyerapan seluler dan metabolisme nutrisi utama, transferrin memfasilitasi transportasi zat besi, dan selenium berkontribusi pada pertahanan antioksidan dan aktivitas enzimatik. Bersama-sama, komponen-komponen ini mendorong metabolisme sel yang seimbang dan meningkatkan reproduktifitas dalam sistem kultur yang terdefinisi.
Formulasi dan Penggunaan
Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) disediakan sebagai larutan terkonsentrasi 100x dalam Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) tanpa fenol merah. Untuk aplikasi standar, encerkan dengan perbandingan 1:100 ke dalam media dasar yang sesuai untuk mencapai konsentrasi kerja yang direkomendasikan. Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C dan tangani dalam kondisi aseptik untuk menjaga stabilitas dan sterilitas produk.
Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Volume: 5 ml
Penyimpanan: +2°C hingga +8°C
Sterilitas: Disaring steril
Larutan Insulin Rekombinan Manusia adalah suplemen yang didefinisikan secara kimiawi yang umum digunakan untuk kultur sel mamalia, termasuk sel ovarium hamster Cina (CHO). Larutan berkualitas kultur sel ini mengandung insulin rekombinan manusia yang diekspresikan dalam Saccharomyces cerevisiae, memastikan kemurnian tinggi dan kinerja yang konsisten dalam aplikasi penelitian.
Aplikasi dan Manfaat
Insulin secara rutin ditambahkan ke media bebas serum dan yang didefinisikan secara kimiawi untuk mendorong pertumbuhan dan produktivitas sel. Sebagai hormon pengatur utama, insulin mendukung penyerapan, pemanfaatan, dan penyimpanan glukosa, asam amino, dan asam lemak oleh sel. Insulin juga menghambat pemecahan glikogen, protein, dan lipid, sehingga berkontribusi pada peningkatan viabilitas sel dan stabilitas metabolik dalam sistem kultur. Formulasi yang didefinisikan secara kimiawi mendukung reproduktifitas dan meminimalkan variabilitas dalam alur kerja kultur sel yang sensitif.
Sifat Biologis dan Penggunaan
Insulin adalah hormon polipeptida berantai ganda yang diproduksi secara alami oleh sel β pulau pankreas. Berat molekulnya sekitar 5.800 Da. Rantai α dan β dihubungkan oleh dua ikatan disulfida antar-rantai, dan rantai α mengandung satu ikatan disulfida intra-rantai. Untuk aplikasi kultur sel, larutan harus ditangani dalam kondisi aseptik dan disimpan pada suhu +2°C hingga +8°C untuk menjaga stabilitas dan kinerjanya.
Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Volume: 100 ml
Penyimpanan: +2°C hingga +8°C
Sterilitas: Disterilkan dengan penyaringan
Larutan Sodium Pyruvate (100 mM) adalah suplemen steril, siap pakai yang dirancang untuk menyediakan sumber energi tambahan yang mudah diakses untuk media kultur sel. Sodium pyruvate memainkan peran kunci dalam metabolisme energi seluler dan mendukung pertumbuhan sel-sel yang aktif secara metabolik dan berkembang biak dengan cepat, seperti sel tumor. Penambahan suplemen ini dapat meningkatkan viabilitas sel dan membantu menjaga stabilitas metabolik dalam sistem kultur.
Aplikasi dan Manfaat
Larutan ini secara luas digunakan dalam kultur sel rutin untuk memperkaya media dengan piruvat dan mempromosikan kondisi pertumbuhan optimal. Ia mendukung produksi ATP, mungkin membantu mengurangi stres oksidatif, dan berkontribusi pada peningkatan kinerja metabolik sel yang dikultur. Diproduksi dalam air berkualitas kultur sel dan disterilkan dengan penyaringan, produk ini memastikan kualitas konsisten dan reproduktifitas dalam alur kerja penelitian.
Penggunaan dan Kompatibilitas
Konsentrasi akhir yang direkomendasikan untuk sebagian besar aplikasi kultur sel adalah 1 mM natrium piruvat, dicapai dengan mengencerkan larutan stok 100 mM dengan perbandingan 1:100 ke dalam medium kultur lengkap. Solusi ini kompatibel dengan berbagai jenis medium dasar dan garis sel mamalia. Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C dan lindungi dari kontaminasi untuk menjaga stabilitas produk.
Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Volume: 100 ml Penyimpanan: ≤-15°C Kemandulan: Disaring dengan steril
Larutan Antibiotik / Antimikotik (100x ) adalah konsentrat steril dan siap pakai yang dirancang untuk mengurangi risiko kontaminasi mikroba dalam kultur sel dan aplikasi laboratorium terkait. Larutan 100x ini mengandung kombinasi penisilin, streptomisin, dan amfoterisin B yang telah teruji dengan baik
- memberikan aktivitas antimikroba spektrum luas terhadap bakteri Gram positif dan Gram negatif, ragi, dan jamur berserabut. Formulasi ini cocok untuk digunakan dalam kultur sel eukariotik, media bakteri, dan sistem yang sensitif terhadap kontaminasi lainnya, yang mendukung operasi laboratorium yang bersih dan konsisten.
Aplikasi dan Manfaat Dioptimalkan untuk protokol penelitian rutin, solusi ini banyak digunakan untuk menjaga kondisi aseptik dalam alur kerja kultur sel. Solusi ini menawarkan kinerja yang andal di lingkungan yang sensitif terhadap kontaminasi, membantu peneliti mengurangi risiko pertumbuhan mikroba yang berlebihan tanpa mengorbankan kesehatan sel atau kemampuan reproduksi eksperimental. Formulasi yang disaring steril menghilangkan kebutuhan akan langkah-langkah pelarutan tambahan, mendukung persiapan media yang efisien dan mengurangi variabilitas dalam prosedur laboratorium sehari-hari.
Penggunaan dan Kompatibilitas Untuk mencapai konsentrasi kerja standar, encerkan larutan 1:100 ke dalam media kultur lengkap Anda. Produk ini kompatibel dengan berbagai macam garis sel mamalia dan media basal. Dengan ketersediaan stok yang konsisten, para peneliti mendapat manfaat dari kontinuitas pasokan yang dapat diandalkan dan perencanaan logistik yang disederhanakan. Larutan harus disimpan pada suhu ≤ -15 ° C dan terlindung dari siklus pembekuan-pencairan berulang untuk menjaga stabilitas. Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Volume: 100 ml Penyimpanan: +2°C hingga +8°C Kemandulan: Disaring dengan steril
MEM Asam Amino Non-Esensial (100x ) adalah suplemen steril yang dirancang untuk meningkatkan pertumbuhan dan kelangsungan hidup sel dalam sistem kultur sel mamalia. Formulasinya sesuai dengan konsentrat 100x dari asam amino non-esensial yang ditemukan dalam Minimum Essential Medium (MEM) standar, memungkinkan suplementasi langsung media basal dengan persiapan minimal.
Aplikasi dan Manfaat Suplemen ini menyediakan kumpulan asam amino tambahan untuk sel yang berkembang biak dengan cepat atau untuk garis sel yang telah kehilangan kapasitas untuk mensintesis asam amino non-esensial secara de novo. Dengan mengurangi beban metabolisme biosintesis, ini mendukung peningkatan kinetika pertumbuhan, kelangsungan hidup yang lebih lama, dan konsistensi eksperimental yang lebih besar
- terutama dalam kultur yang peka terhadap nutrisi atau kultur dengan kepadatan tinggi.
Komposisi dan Penggunaan Solusinya meliputi glisin, L-alanin, L-asparagin, asam L-aspartat, asam L-glutamat, L-prolin, dan L-serin. Larutan ini kompatibel dengan MEM dan sebagian besar media standar lainnya. Untuk menggunakannya, encerkan 1:100 ke dalam media kultur akhir. Produk ini disaring secara steril dan siap digunakan tanpa langkah penanganan tambahan. Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.
Accutase adalah larutan pelepasan sel siap pakai yang telah disaring secara steril, dirancang sebagai alternatif yang lembut untuk trypsin/EDTA dalam memisahkan sel mamalia yang melekat dari peralatan kultur jaringan plastik standar dan permukaan yang dilapisi adhesi. Larutan ini menggabungkan aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik dalam larutan garam seimbang untuk memberikan pemisahan yang efektif namun terkendali, menjaga protein permukaan sel, serta mendukung viabilitas tinggi setelah pemindahan dan re-adhesi yang cepat.
Formulasi Accutase didasarkan pada larutan garam fosfat Dulbecco (DPBS) dengan EDTA dan fenol merah sebagai indikator pH visual. Enzim-enzim ini berasal dari sumber non-mamalia dan non-bakteri, sehingga Accutase sangat cocok untuk penelitian sel punca, alur kerja vaksin, dan aplikasi apa pun di mana kontaminan yang berasal dari hewan atau mikroba harus diminimalkan. Larutan ini mengalami auto-inhibisi pada 37 °C, sehingga tidak diperlukan reagen penetralisir atau media yang mengandung serum setelah pelepasan – sel dapat dipindahkan langsung ke media segar.
Fitur Utama
Cairan 1x yang sudah disaring steril dan siap pakai – tidak perlu pengenceran atau rekonstitusi
Aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik yang digabungkan untuk disosiasi yang lembut
Setiap batch distandarisasi ke aktivitas pemisahan yang ditentukan untuk konsistensi antar-lot
Asal enzim non-mamalia dan non-bakteri
Menghambat sendiri pada 37 °C – tidak memerlukan larutan penetralisir
Diformulasikan dalam PBS Dulbecco dengan EDTA
Phenol red disertakan sebagai indikator pH visual
pH 6,8 – 7,8
Aplikasi Umum
Accutase dengan lembut memisahkan berbagai jenis sel yang melekat dan sensitif, termasuk sel induk embrionik manusia (hESCs), sel induk pluripotent yang diinduksi manusia (iPSCs), sel induk saraf, neuron primer, dan garis sel yang melekat yang dibudidayakan secara rutin seperti HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21, dan A549. Contoh penggunaan meliputi:
Subkultur rutin dan pemindahan sel mamalia yang melekat
Disosiasi sel tunggal yang lembut pada hESCs, iPSCs, dan garis sel sensitif lainnya
Persiapan sampel untuk analisis sitometri aliran dan FACS
Analisis penanda permukaan sel di mana integritas epitop sangat penting
Uji migrasi sel, proliferasi, dan apoptosis
Uji ketenangan sel melalui studi kelaparan serum dan transfeksi onkogen
Uji migrasi sel tumor dan sel krest saraf
Peningkatan skala produksi dalam alur kerja bioreaktor
Untuk pekerjaan rutin, gunakan sekitar 10 ml Accutase per 75 cm2 permukaan kultur dan inkubasi selama 5–10 menit pada suhu kamar. Waktu inkubasi yang optimal harus ditentukan untuk setiap lini sel dan tidak boleh melebihi satu jam. Sebelum penambahan, bilas lapisan sel dengan larutan garam bebas Ca2+/Mg2+ seperti DPBS tanpa kalsium dan magnesium untuk menghilangkan sisa serum dan kation divalen.
Penanganan & Penyimpanan
Simpan botol yang belum dibuka dalam keadaan beku pada suhu -15 °C atau lebih rendah. Lelehkan pada suhu ruang atau semalaman pada suhu +2 °C hingga +8 °C. Jangan melelehkan Accutase dalam bak air bersuhu 37 °C, karena suhu tinggi dapat mengurangi aktivitas enzim. Setelah dilelehkan, larutan dapat disimpan hingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C; jangan disimpan pada suhu ruang. Jangan memanaskan reagen terlebih dahulu hingga 37 °C sebelum digunakan – tambahkan langsung ke sel yang telah dicuci pada suhu kamar. Untuk masa simpan yang lama, disarankan untuk membagi reagen menjadi beberapa bagian sekali pakai untuk menghindari siklus pencairan berulang. Selalu lakukan pekerjaan dalam kondisi aseptik.
Kualitas
Diproduksi di bawah standar kualitas yang ketat. Setiap batch Accutase disaring secara steril dan diuji sterilitas, pH, penampilan, dan aktivitas disosiasi untuk memastikan kinerja yang konsisten dan dapat direproduksi dari lot ke lot.
Spesifikasi Produk
Spesifikasi
Detail
Jenis produkReagen pelepasan sel / disosiasi
FormatCairan yang telah disaring secara steril, siap pakai
Volume100 ml
Konsentrasi kerja1x (siap pakai)
Aktivitas enzimKombinasi proteolitik dan kolagenolitik
Asal enzimNon-mamalia dan non-bakteri
Sistem bufferPBS Dulbecco dengan EDTA
Indikator pHMerah fenol
Rentang pH6,8 – 7,8
PenampilanLarutan bening, berwarna merah pucat hingga oranye
Suhu penyimpanan-15 °C atau lebih rendah
Stabilitas setelah dicairkanHingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C
Volume penggunaan yang disarankan~10 ml per 75 cm² permukaan kultur
Waktu inkubasi tipikal5 – 10 menit pada suhu kamar
Kondisi pengirimanDibekukan dengan es kering
Tujuan penggunaanHanya untuk penggunaan penelitian dan produksi lebih lanjut
Formulasi (Komposisi per Liter)
Komponen
Konsentrasi (mg/L)
Garam Anorganik
Natrium klorida (NaCl)8000,00
Disodium hidrogen fosfat (Na₂HPO₄)1150,00
Klorida kalium (KCl)200,0
Kalium dihidrogen fosfat (KH₂PO₄)200,00
Komponen Lain
EDTA · 4Na (EDTA tetrasodium)220,00
Fenol merah3,00
Campuran enzim eksklusif (aktivitas proteolitik dan kolagenolitik)1x
Accutase adalah merek dagang terdaftar milik Innovative Cell Technologies, Inc.
Formulasi cair yang siap pakai dan telah disaring secara steril ini dilengkapi dengan Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamin, D-glukosa (1,0 g/L), dan 2,2 g/L natrium bikarbonat (NaHCO3), sehingga cocok untuk digunakan dalam atmosfer inkubator yang dikontrol CO2 (biasanya 5 % CO2). Fenol merah yang disertakan berfungsi sebagai indikator pH, sehingga memudahkan pemantauan visual kondisi media selama kultur sel.
Fitur Utama
Formulasi MEM Eagle klasik dengan Larutan Garam Seimbang Earle (EBSS)
Termasuk 2 mM L-glutamin – siap digunakan
2,2 g/L natrium bikarbonat – dibuffer untuk inkubasi 5% CO2
Dengan D-glukosa (1,0 g/L) sebagai sumber karbon utama
Dengan fenol merah sebagai indikator pH
Tanpa HEPES dan tanpa natrium piruvat
Media cair yang disaring secara steril, siap pakai
pH 7,0 – 7,6
Aplikasi Umum
EMEM mendukung kultur berbagai macam garis sel mamalia, termasuk HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21, dan banyak sel primer. Aplikasi umum meliputi:
Pemeliharaan rutin dan perluasan garis sel yang melekat
Alur kerja propagasi virus dan produksi vaksin
Aplikasi sitotoksisitas dan bioassay
Studi transfeksi dan ekspresi protein
Penelitian dasar dalam biologi sel dan biologi molekuler
Untuk pertumbuhan sel yang optimal, EMEM biasanya ditambah dengan 5–10 % serum janin sapi (FBS) dan, tergantung pada garis selnya, dengan asam amino non-esensial (NEAA) dan antibiotik seperti penisilin/streptomisin.
Penanganan & Penyimpanan
Simpan botol yang belum dibuka pada suhu +2 °C hingga +8 °C, terlindung dari cahaya. Setelah dibuka, gunakan dalam kondisi aseptik. L-Glutamin dalam larutan dapat mengalami degradasi secara bertahap – kami merekomendasikan penggunaan media dalam waktu 4 minggu setelah dibuka untuk hasil terbaik, atau menambahkan L-glutamin segar sebelum digunakan jika disimpan dalam jangka waktu yang lebih lama. Biarkan media menghangat hingga 37 °C sebelum ditambahkan ke sel.
Kualitas
Diproduksi sesuai standar kualitas yang ketat. Setiap batch diuji untuk sterilitas, pH, osmolalitas, dan tingkat endotoksin guna memastikan kinerja yang konsisten dalam aplikasi kultur sel.
Spesifikasi Produk
Spesifikasi
Detail
Jenis produkMEM
Kategori ProdukMedia kultur sel
FormatCair
SterilYa
Ukuran500 ml
L-GlutaminDengan L-glutamin (2 mM)
GlukosaDengan glukosa (1,0 g/L)
Natrium bikarbonatDengan NaHCO3 (2,2 g/L)
HEPESTanpa HEPES
Natrium piruvatTanpa natrium piruvat
Fenol merahDengan fenol merah
Larutan garamLarutan Garam Seimbang Earle (EBSS)
pH7,0 – 7,6
Kandungan endotoksinTidak ditentukan
Penyimpanan+2 °C hingga +8 °C
Formulasi (Komposisi per Liter)
Komponen
Konsentrasi (mg/L)
Garam Anorganik
Kalsium klorida · 2H₂O265,00
Magnesium sulfat97,72
Klorida kalium400,00
Natrium klorida6.800,00
Natrium dihidrogen fosfat, anhidrat122,00
Natrium bikarbonat (NaHCO3)2.200,00
Asam Amino
L-Arginine · HCl126,00
L-Sistin · 2HCl31,30
L-Glutamin292,00
L-Histidin · HCl · H₂O42,00
L-Isoleusin52,00
L-Leusin52,00
L-Lisin · HCl72,50
L-Metionin15,00
L-Fenilalanin32,00
L-Treonin48,00
L-Triptofan10,00
L-Tirosin · 2Na · 2H₂O51,90
L-Valin46,00
Vitamin
D-Kalsium pantotenat1,00
Klorida kolin1,00
Asam folat1,00
myo-inositol2,00
Nikotinamida1,00
Piridoksal · HCl1,00
Riboflavin0,10
Tiamin · HCl1,00
Komponen Lain
D(+)-Glukosa1.000,00
Merah fenol10,00
Fitur utama dari Freeze Medium CM-1 meliputi:
Kompatibilitas Luas: Efektif untuk berbagai jenis sel, termasuk sel primer, sel punca, dan garis sel yang sudah mapan.
Viabilitas Tinggi: Dioptimalkan untuk memaksimalkan pemulihan dan viabilitas sel pasca-pencairan, memastikan hasil eksperimental yang andal.
Siap Digunakan: Disiapkan dan disterilkan dengan mudah untuk aplikasi langsung, mengurangi waktu persiapan dan risiko kontaminasi.
Stabilitas yang Ditingkatkan: Mempertahankan kinerja yang konsisten dalam kondisi kriopreservasi standar, memastikan hasil yang dapat direproduksi.
Umur simpan yangpanjang: CM-1 adalah media kriopreservasi siap pakai yang mengandung serum dan siap pakai yang dapat disimpan di lemari es hingga satu tahun.
Menggunakan CM-1 untuk Membekukan Sel
Untuk menggunakan CM-1 untuk membekukan sel yang melekat dan suspensi, ikuti langkah-langkah berikut
Untuk sel yang melekat, cuci dan pisahkan dari substrat kultur. Untuk sel suspensi, lanjutkan langsung ke langkah berikutnya.
Hitung sel untuk memastikan mereka berada pada konsentrasi yang tepat.
Sentrifus sel untuk membuat pelet, lalu resuspensi dalam media beku CM-1.
Pindahkan sel yang telah diresuspensi ke dalam kriovial.
Gunakan metode pembekuan lambat sebelum memindahkan sel ke penyimpanan jangka panjang
Metode
Deskripsi
Langkah-langkah
❄️
Pembekuan Manual
Metode langkah demi langkah yang melibatkan penurunan suhu secara bertahap untuk memastikan kelangsungan hidup sel
1️⃣ Tempatkan sel dalam media pembekuan di dalam freezer 4°C selama 40 menit.
2️⃣ Pindahkan ke dalam freezer -80°C selama 24 jam.
3️⃣ Simpan sel dalam nitrogen cair untuk pengawetan jangka panjang
❄️
Menggunakan Tn. Frosty
Alat yang nyaman yang memungkinkan laju pembekuan terkontrol tanpa daya listrik
1️⃣ Siapkan sel dalam kriovial dengan media pembekuan.
2️⃣ Tempatkan cryovial dalam wadah Mr.
3️⃣ Simpan pada suhu -80°C selama 24 jam sebelum dipindahkan ke nitrogen cair
❄️
Pembeku Laju Terkendali
Pembeku presisi tinggi dari Thermo Fisher atau produsen lain yang dirancang untuk penurunan suhu terkontrol
1️⃣ Memprogram perangkat untuk menurunkan suhu secara bertahap.
2️⃣ Tempatkan sel yang telah disiapkan di dalam freezer.
3️⃣ Setelah siklus pembekuan, pindahkan sel ke nitrogen cair
Simpan kriovial pada suhu di bawah -130°C atau dalam nitrogen cair untuk pengawetan jangka panjang.
Bahan
Mengandung FBS, DMSO, Glukosa, Garam
Kapasitas penyangga: pH = 7,2 hingga 7,6
Freeze Medium CM-1 dari Cytion menawarkan solusi yang dapat diandalkan untuk kriopreservasi, memastikan kelangsungan hidup sel yang tinggi dan fungsionalitas pasca-pencairan untuk berbagai aplikasi penelitian.
Ham's F-12K (Kaighn's) Medium diformulasikan dengan hati-hati untuk mengoptimalkan kondisi kultur sel. Media ini memiliki komposisi yang diperkaya, memberikan peningkatan kadar komponen penting seperti asam amino dan natrium piruvat, serta elemen tambahan termasuk putrescine, timidin, hipoksantin, dan seng. Penambahan ini memungkinkan para peneliti untuk melengkapi media dengan serum minimal atau komponen yang ditentukan untuk jenis sel tertentu, memfasilitasi kondisi eksperimental yang tepat.
Khususnya, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium tidak mengandung protein atau faktor pertumbuhan. Oleh karena itu, suplementasi dengan faktor pertumbuhan dan Fetal Bovine Serum (FBS) sering kali diperlukan, yang memungkinkan para peneliti untuk menyesuaikan media dengan kebutuhan garis sel spesifik mereka. Untuk kinerja yang optimal, konsentrasi FBS harus dioptimalkan secara hati-hati untuk setiap lini sel, memastikan pertumbuhan dan fungsionalitas yang optimal.
Untuk mempertahankan pH fisiologis, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium menggunakan sistem penyangga natrium bikarbonat (2,5 g / L), yang membutuhkan lingkungan 5-10% CO2 yang terkendali selama budidaya. Hal ini memastikan pH medium tetap berada dalam kisaran ideal untuk pertumbuhan dan kelangsungan hidup sel
Kontrol kualitas
pH = 7,2 +/
- 0,02 pada 20-25 ° C.
Setiap lot telah diuji sterilitasnya dan tidak adanya mikoplasma dan bakteri.
Pemeliharaan
Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C dalam keadaan gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan menurunkan kualitas produk.
Jangan memanaskan media hingga lebih dari 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, peralatan microwave).
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah ini dari botol dan hangatkan pada suhu kamar.
Umur simpan untuk media apa pun kecuali media dasar adalah 8 minggu dari tanggal pembuatan.
Komposisi
Komponen
mg / L
Garam Anorganik
Kalsium klorida x 2H2O
135,24
Tembaga (II) sulfat x 5H2O
0,00
Besi (II) sulfat x 7H2O
0,83
Magnesium klorida x 6H2O
105,72
Magnesium sulfat x 7H2O
394,49
Kalium klorida
283,29
Kalium dihidrogen fosfat
58,52
Natrium klorida
7597,20
di-Natrium hidrogen fosfatanhidrat
115,02
Seng sulfat x 7H2O
0,14
Komponen Lainnya
D (+)
- Glukosa anhidrat
1260,00
Hipoksantin
4,08
Asam DL-α-Lipoat
0,21
Fenol merah
3,00
Putrescine x 2HCl
0,32
Natrium piruvat
220,00
NaHCO3
2500,00
Timidin
0,73
Asam Amino
L-Alanin
17,82
L-Arginin x HCl
421,40
L-Asparagin x H2O
30,02
Asam L-Aspartat
26,62
L-Sistein x HCl x H2O
70,24
L-Glutamin
292,20
Asam L-Glutamat
29,42
Glisin
15,01
L-Histidin x HCl x H2O
41,92
L-Isoleusin
7,87
L-Leusin
26,24
L-Lisin x HCl
73,04
L-Metionin
8,95
L-Fenilalanin
9,91
L-Prolin
69,06
L-Serine
21,02
L-Treonin
23,82
L-Tryptophan
4,08
L-Tirosin
10,87
L-Valine
23,42
Vitamin
D (+)
- Biotin
0,07
D-Kalsium pantotenat
0,48
Kolin klorida
13,96
Asam folat
1,32
myo-Inositol
18,02
Nikotinamida
0,04
Piridoksin x HCl
0,06
Riboflavin
0,04
Tiamin x HCl
0,34
Vitamin B12
1,36
Phosphate-buffered saline (PBS) adalah larutan penyangga yang banyak digunakan dalam penelitian biologi dan kimia. Larutan ini memainkan peran penting dalam menjaga keseimbangan pH dan osmolaritas selama berbagai prosedur eksperimental, termasuk pemrosesan jaringan dan kultur sel. Larutan PBS kami diformulasikan secara cermat dengan bahan-bahan dengan kemurnian tinggi untuk memastikan stabilitas dan keandalan dalam setiap percobaan. Osmolaritas dan konsentrasi ion PBS kami sangat mirip dengan tubuh manusia, membuatnya isotonik dan tidak beracun bagi sebagian besar sel.
Komposisi Larutan PBS Kami
Larutan PBS kami adalah campuran yang disesuaikan dengan pH dari buffer fosfat tingkat ultra murni dan larutan garam. Pada konsentrasi kerja 1X, larutan ini mengandung:
8000 mg/L Natrium klorida (NaCl)
200 mg/L Kalium klorida (KCl)
1150 mg/L Natrium fosfat dibasa anhidrat (Na2HPO4)
200 mg/L Kalium fosfat monobasa anhidrat (KH2PO4)
Komposisi ini memastikan pH dan keseimbangan ionik yang optimal, cocok untuk berbagai aplikasi biologis.
Aplikasi Solusi PBS Kami
Larutan PBS kami ideal untuk berbagai aplikasi dalam penelitian biologi. Sifatnya yang isotonik dan tidak beracun membuatnya cocok untuk pengenceran zat dan pembilasan wadah sel. Larutan PBS yang mengandung EDTA efektif untuk melepaskan sel yang melekat dan menggumpal. Namun, logam divalen seperti seng tidak boleh ditambahkan ke dalam PBS, karena dapat menyebabkan pengendapan. Dalam kasus seperti itu, buffer Good direkomendasikan. Selain itu, larutan PBS kami merupakan alternatif yang dapat diterima untuk media transpor virus untuk transpor dan penyimpanan virus RNA, termasuk SARS-CoV-2.
Kontrol Kualitas
Disaring dengan steril
Penyimpanan dan Umur Simpan
Simpan pada suhu +2°C hingga +25°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 2°C hingga 25°C dan gunakan dalam waktu 24 bulan.
Ketentuan Pengiriman
Suhu lingkungan
Pemeliharaan
Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.
Komposisi
Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)
Garam
Kalium klorida
200
Kalium fosfat monobasa anhidrat
200
Natrium klorida
8000
Natrium fosfat dibasa anhidrat anhidrat
1150
Awalnya dirancang untuk mendukung pertumbuhan sel leukemia manusia dalam kultur suspensi dan monolayer, RPMI 1640 Medium telah berevolusi melalui modifikasi oleh para peneliti dan pemasok komersial agar sesuai untuk berbagai macam sel mamalia. Ini sangat kompatibel dengan garis sel seperti HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrosit, dan karsinoma.
Media RPMI 1640 berbeda dari media kultur sel lainnya karena komposisinya yang unik. Media ini mengandung sejumlah besar fosfat, asam amino, dan vitamin. Khususnya, ini mencakup biotin, vitamin B12, dan PABA, yang tidak ada dalam Eagle's Minimal Essential Medium atau Dulbecco's Modified Eagle Medium. Selain itu, RPMI 1640 Medium menunjukkan konsentrasi vitamin inositol dan kolin yang meningkat secara signifikan. Namun, tidak mengandung protein, lipid, atau faktor pertumbuhan. Oleh karena itu, suplementasi dengan 10% Fetal Bovine Serum (FBS) umumnya diperlukan untuk memberikan kondisi optimal untuk pertumbuhan sel.
Sistem penyangga RPMI 1640 Medium bergantung pada natrium bikarbonat dan membutuhkan lingkungan 5-10% CO2 untuk mempertahankan pH yang sesuai secara fisiologis. Dimasukkannya agen pereduksi glutathione semakin membedakan media ini dari yang lain.
Kontrol Kualitas
Disaring dengan steril
Penyimpanan dan Umur Simpan
Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6-8 minggu.
Ketentuan Pengiriman
Suhu lingkungan
Pemeliharaan
Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang terlalu sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.
Komposisi
Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)
Asam Amino
Glisin
10.00
L-Alanyl-L-Glutamin
434.40
L-Arginin
200.00
L-AsparaginH2O
56.82
Asam L-Aspartat
20.00
L-Sistin 2HCl
65.20
Asam L-Glutamat
20.00
L-Histidin HClH2O
20.27
L-Hidroksi-L-Prolin
20.00
L-Isoleusin
50.00
L-Leusin
50.00
L-Lisin HCl
40.00
L-Metionin
15.00
L-Fenilalanin
15.00
L-Proline
20.00
L-Serine
30.00
L-Treonin
20.00
L-Tryptophan
5.00
L-Tirosin 2Na 2H2O
28.83
L-Valine
20.00
Vitamin
p-Amino Benzoic Acid
1.00
D-Biotin
0.20
Kolin Klorida
3.00
D-Kalsium Pantotenat
0.25
Asam Folat
1.00
myo-Inositol
35.00
Nikotinamida
1.00
Piridoksin HCl
1.00
Riboflavin
0.20
Tiamin HCl
1.00
Vitamin B12
0.005
Garam Anorganik
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Komponen Lainnya
D-Glukosa
2000.00
L-Glutathione Berkurang
1.00
Garam Natrium Fenol Merah
5.30
Formulasi unik ini menggabungkan Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) dan Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) dalam perbandingan 1:1 yang tepat. Penambahan L-glutamin semakin meningkatkan komposisinya.
DMEM, yang berasal dari Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), menawarkan konsentrasi asam amino dan vitamin yang lebih tinggi dibandingkan pendahulunya. Sebaliknya, Ham's F-12 didasarkan pada media Ham's F-10, yang menyediakan rangkaian komponen esensial yang saling melengkapi.
Untuk mendukung pertumbuhan sel yang optimal, praktik umum adalah menambahkan FBS ke dalam DMEM:Ham's F12 dengan konsentrasi tipikal 5-10%. Penambahan ini diperlukan karena medium tersebut kekurangan hormon pertumbuhan, lipid, dan protein yang krusial bagi perkembangan sel.
DMEM:Ham's F12 dilengkapi dengan sistem penyangga pH dan sering ditambahkan fenol merah, indikator pH. Sel yang dibudidayakan dalam DMEM:Ham's F12, atau media apa pun yang menggunakan sistem penyangga bikarbonat, memerlukan lingkungan CO2 yang terkontrol sebesar 5-10% untuk mempertahankan tingkat pH yang sesuai.
Kontrol Kualitas
Disaring secara steril
Penyimpanan dan Umur Simpan
Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada 4°C dan gunakan dalam waktu 6–8 minggu.
Kondisi Pengiriman
Suhu ruangan
Perawatan
Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan berulang hingga +37°C, karena hal ini dapat menurunkan kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkontrol seperti alat microwave.
Jika hanya sebagian media yang akan digunakan, ambil jumlah yang diperlukan dan panaskan hingga suhu kamar sebelum digunakan.
Komposisi
Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)
Asam Amino
Glycine
18,75
L-alanin
4,45
L-Arginine HCl
147,50
L-Asparagin H₂O
7,50
Asam L-Aspartat
6,65
L-Sistein HCl H₂O
17,56
L-Sistin 2 HCl
31,29
Asam L-Glutamat
7,35
L-Glutamin
365,00
L-Histidin HCl H₂O
31,48
L-Isoleusin
54,47
L-Leusin
59,05
L-Lisin HCl
91,25
L-Metionin
17,24
L-Fenilalanin
35,48
L-Prolin
17,25
L-Serin
26,25
L-Treonin
53,45
L-Triptofan
9,02
L-Tirosin 2 Na 2 H₂O
55,79
L-Valin
52,85
Vitamin
D-Biotin
0,0035
Klorida Kolin
8,98
D-Kalsium Pantotenat
2,24
Asam Folat
2,66
myo-inositol
12,60
Nikotinamida
2,02
Pyridoxine HCl
0,031
Pyridoxal HCl
2,00
Riboflavin
0,219
Tiamin HCl
2,17
Vitamin B12
0,68
Garam Anorganik
CaCl₂·2H₂O
154,50
CuSO₄·5H₂O
0,0013
Fe(NO₃)₃·9H₂O
0,05
FeSO₄ 7 H₂O
0,417
KCl
311,80
MgCl₂ 6 H₂O
61,20
MgSO4 7 H2O
100,00
NaCl
6996,00
NaHCO3
1200,00
Na₂HPO₄
71,02
NaH₂PO₄·2H₂O
70,87
ZnSO4 7 H2O
0,432
Komponen Lain
D-Glukosa
3151,00
Hipoksantin
2,40
HEPES
3574,50
Asam Linoleat
0,042
Asam lipoat
0,105
Garam Natrium Fenol Merah
8,63
Putresin 2 HCl
0,081
Natrium Piruvat
55,00
Timidin
0,365
Medium 199 menawarkan berbagai aplikasi di lapangan. Secara efektif dapat mempertahankan kompleks kumulus-ovum (COC) dan mendukung pematangan oosit secara in vitro. Selain itu, ini digunakan dalam pembilasan garis aspirasi selama pengumpulan sel telur dari sapi Holstein Jerman. Selain itu, Medium 199 berfungsi sebagai media yang sangat baik untuk kultur sel endotel jantung yang berasal dari tikus. Aplikasi ini menunjukkan keserbagunaan dan kemampuan beradaptasi Medium 199 untuk berbagai kebutuhan eksperimental.
Sejarah
Pengembangan Medium 199 pada tahun 1950-an menandai kemajuan yang signifikan dalam media kultur jaringan. Sebelum diperkenalkan, banyak media kultur yang mengandalkan produk turunan hewan dan ekstrak jaringan. Namun, Morgan dan rekannya merevolusi bidang ini dengan memformulasikan sumber nutrisi yang sepenuhnya terdefinisi untuk kultur sel. Melalui eksperimen mereka yang melibatkan berbagai kombinasi vitamin, asam amino, dan faktor lainnya, mereka menemukan sifat pemacu pertumbuhan yang luar biasa dari Medium 199.
Kontrol kualitas
pH = 7,2 +/
- 0,02 pada suhu 20-25°C.
Setiap lot telah diuji sterilitasnya dan tidak adanya mikoplasma dan bakteri.
Pemeliharaan
Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C dalam keadaan gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan menurunkan kualitas produk.
Jangan memanaskan media hingga lebih dari 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, peralatan microwave).
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah ini dari botol dan hangatkan pada suhu kamar.
Umur simpan untuk media apa pun kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal pembuatan.
Komposisi
Komponen
mg / L
Garam Anorganik
Kalsium klorida x 2H2O
264,92
Besi (III) nitrat x 9H2O
0,72
Magnesium sulfat
97,67
Kalium klorida
400,00
Natrium asetat x 3H2O
82,95
Natrium klorida
6,800.00
Natrium dihidrogen fosfat x H2O
140,00
Komponen Lainnya
Adenin sulfat
10,00
AMP
0,20
ATP
1,00
Kolesterol
0,20
2'-Deoksiribosa
0,50
D (+)
- Glukosa anhidrat
1,000.00
Glutathione (merah)
0,05
Guanin x HCl
0,30
Hipoksantin
0,30
Fenol merah
10,00
D-Ribosa
0,50
Timin
0,30
Tween 80
4,90
Urasil
0,30
Xanthine
0,30
NaHCO3
2,200.00
Asam Amino
L-Alanin
25,00
L-Arginin x HCl
70,00
Asam L-Aspartat
30,00
L-Sistein x HCl x H2O
0,10
L-Sistin
20,00
L-Glutamin stabil
149,00
Asam L-Glutamat
67,00
Glisin
50,00
L-Histidin x HCl x H2O
21,88
L-Hidroksiprolin
10,00
L-Isoleusin
20,00
L-Leusin
60,00
L-Lisin x HCl
70,00
L-Metionin
15,00
L-Fenilalanin
25,00
L-Prolin
40,00
L-Serine
25,00
L-Treonin
30,00
L-Tryptophan
10,00
L-Tirosin
40,00
L-Valine
25,00
Vitamin
asam benzoat 4-Amino
0,05
Asam askorbat
0,05
D (+)
- Biotin
0,01
Kalsiferol
0,10
D-Kalsium pantotenat
0,01
Kolin klorida
0,50
Asam folat
0,01
myo-Inositol
0,05
Menadione
0,01
Asam nikotinat
0.025
Nikotinamida
0.025
Piridoksal x HCl
0.025
Piridoksol x HCl
0.025
Riboflavin
0,01
Garam disodium disodium DL-α-Tokoferol fosfat
0,01
Tiamin x HCl
0,01
Vitamin A asetat
0,14
IMDM sangat cocok untuk kultur sel yang berkembang biak dengan cepat dan berkepadatan tinggi, termasuk sel Jurkat, COS-7, dan sel makrofag. Berbagai modifikasi IMDM yang tersedia untuk berbagai aplikasi kultur sel dapat ditemukan dengan menggunakan alat pemilih media. Media cair menyediakan nutrisi penting untuk semua aplikasi kultur sel. Setiap media kultur sel berkualitas tinggi kami diproduksi sesuai dengan formula yang diterbitkan pada awalnya atau modifikasi yang diperlukan untuk kinerja dan stabilitas media kultur yang konsisten.
IMDM vs DMEM
IMDM mengandung kalium nitrat sebagai pengganti ferri nitrat dan HEPES serta natrium piruvat. Komponen tambahan dalam IMDM membuatnya lebih cocok untuk jenis sel khusus dan aplikasi spesifik daripada DMEM.
IMDM vs RPMI
IMDM dan RPMI memiliki formulasi yang berbeda yang mungkin relevan untuk stimulasi PMA/ionomisin. Salah satu perbedaan yang signifikan adalah konsentrasi Ca2+. Sementara RPMI mengandung 0,42 mM Ca2+, IMDM mengandung 1,49 mM.
Kontrol kualitas
pH = 7,2 +/
- 0,02 pada suhu 20-25°C.
Setiap lot telah diuji sterilitasnya dan tidak adanya mikoplasma dan bakteri.
Pemeliharaan
Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C dalam gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan menurunkan kualitas produk.
Jangan memanaskan media hingga lebih dari 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, peralatan microwave).
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah ini dari botol dan hangatkan pada suhu kamar.
Umur simpan untuk media apa pun kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal pembuatan.
Komposisi
Komponen
mg / L
Garam Anorganik
Kalsium klorida x 2 H2O
219,00
Kalium klorida
330,00
Kalium nitrat
0.076
Magnesium sulfat anhidrat
97,73
Natrium klorida
4,505.00
Natrium dihidrogen fosfat anhidrat
109,00
Natrium selenit
0,02
Komponen lainnya
D (+)
- Glukosa anhidrat
4,500.00
HEPES
5,958.00
Natrium piruvat
110,00
Fenol merah
15,00
Asam Amino
L-Alanin
25,00
L-Arginin x HCl
84,00
L-Asparagin x H2O
25,00
Asam L-Aspartat
30,00
L-Sistin x 2HCl
91,24
L-Glutamin
584,00
Asam L-Glutamat
75,00
Glisin
30,00
L-Histidin x HCl x H2O
42,00
L-Isoleusin
104,80
L-Leusin
104,80
L-Lisin x HCl
146,20
L-Metionin
30,00
L-Fenilalanin
66,00
L-Prolin
40,00
L-Serine
42,00
L-Treonin
95,20
L-Tryptophan
16,00
L-Tirosin x 2Na
104,20
L-Valine
93,60
Vitamin
D (+)
- Biotin
0.013
D-Kalsium pantotenat
4,00
Kolin klorida
4,00
Asam folat
4,00
myo-Inositol
7,20
Media kultur sel: Gambaran umum
Dalam bidang ilmu hayati, salah satu metodologi terpenting adalah kultur sel. Pengambilan sel, jaringan, atau organ dari hewan atau tumbuhan, serta penanaman sel, jaringan, atau organ tersebut dalam lingkungan buatan yang mendukung kelangsungan hidup dan/atau pertumbuhannya, itulah yang dimaksud dengan istilah "kultur sel." Kebutuhan lingkungan mendasar untuk perkembangan sel yang optimal adalah suhu yang terkendali, substrat untuk pelekatan sel, media pertumbuhan yang memadai, dan inkubator yang menjaga pH dan osmolalitas optimal. Sel harus memiliki kondisi-kondisi ini agar dapat tumbuh secara maksimal.
Pemilihan media pertumbuhan yang memadai untuk budidaya in vitro merupakan tahap dalam kultur sel yang paling kritis sekaligus paling vital. Media pertumbuhan, yang juga dikenal sebagai media kultur, adalah cairan atau gel yang diformulasikan untuk mendorong perkembangan organisme pada skala mikroskopis, seluler, atau tumbuhan. Media yang digunakan untuk membudidayakan sel sering kali mengandung pasokan energi yang memadai serta zat-zat yang mengatur siklus sel. Komponen utama media kultur meliputi asam amino, vitamin, garam anorganik, glukosa, dan serum. Serum ditambahkan ke dalam media karena berfungsi sebagai sumber faktor pertumbuhan, hormon, dan faktor perlekatan. Selain menyediakan nutrisi, media juga berperan dalam menjaga tingkat pH dan osmolalitas.
Jenis-jenis media yang digunakan dalam kultur sel
Baik sel manusia maupun sel hewan berpotensi ditumbuhkan baik dalam media buatan atau sintetis maupun media yang sepenuhnya alami yang dilengkapi dengan unsur-unsur alami. Berikut ini, kami akan memberikan gambaran umum mengenai berbagai jenis media yang saat ini tersedia.
Media alami
Hanya cairan biologis yang ada dalam keadaan alami yang dapat ditemukan dalam media alami. Media alami sangat bermanfaat dan mudah digunakan untuk membiakkan berbagai jenis sel hewan. Kurangnya pemahaman tentang komponen tepat yang menyusun media alami merupakan faktor utama yang menyebabkan rendahnya tingkat pengulangan hasil yang diperoleh dengan menggunakan media alami.
Media buatan
Persiapan media buatan atau sintetis melibatkan penambahan nutrisi (baik organik maupun anorganik), protein serum, karbohidrat, kofaktor, vitamin, dan garam, serta fase gas O₂ dan CO₂ [1].
Berbagai jenis media buatan telah dikembangkan untuk memenuhi satu atau lebih fungsi berikut: 1) Kelangsungan hidup segera (larutan garam seimbang dengan pH dan tekanan osmotik yang tepat). 2) Kelangsungan hidup jangka panjang (larutan garam seimbang yang ditambah dengan berbagai formulasi bahan kimia organik dan/atau serum). 3) Perkembangan tanpa batas waktu. 4) Fungsi khusus.
Ada empat klasifikasi berbeda untuk media buatan:
Media yang mengandung serum
Jenis suplemen yang paling sering ditemukan dalam media yang digunakan untuk menumbuhkan sel hewan adalah serum janin sapi. Serum ini ditambahkan ke media kultur sebagai suplemen berbiaya rendah guna mencapai kondisi pertumbuhan terbaik. Selain bertindak sebagai pengangkut atau pengkelat untuk nutrisi yang tidak stabil atau tidak larut dalam air, hormon dan faktor pertumbuhan, penghambat protease, serta zat lainnya, serum juga mengikat dan menetralkan molekul berbahaya.
Media Bebas Serum
Kehadiran serum dalam media memiliki sejumlah kelemahan dan berpotensi menyebabkan kesalahan interpretasi yang signifikan dalam penelitian imunologi [2, 3]. Berbagai jenis media bebas serum telah dikembangkan [4, 5]. Media-media ini umumnya diformulasikan secara khusus untuk mendukung kultur satu jenis sel, seperti Knockout Serum Replacement dan Knockout DMEM dari Thermo Fisher Scientific, serta media mTESR dari Stem Cell Technologies [6], untuk sel punca [7].
Selain itu, media ini mengandung jumlah yang telah ditentukan dari faktor pertumbuhan yang dimurnikan, lipoprotein, dan protein lainnya, yang biasanya disediakan oleh serum [8]. Media ini sering disebut sebagai "media kultur terdefinisi" karena komponen yang menyusunnya telah dipahami dengan baik.
Media yang didefinisikan secara kimiawi
Media ini mengandung komponen anorganik dan organik ultra-murni yang tidak terkontaminasi oleh zat apa pun. Media ini juga dapat mengandung tambahan protein murni, seperti faktor pertumbuhan.
Modifikasi genetik bakteri atau ragi, bersama dengan penambahan asam lemak, vitamin, kolesterol, dan asam amino tertentu, menghasilkan komponen-komponennya [9].
Media bebas protein
Media bebas protein adalah media yang sama sekali tidak mengandung protein dan hanya mengandung unsur-unsur non-protein. Dibandingkan dengan media yang ditambahkan serum, penggunaan media tanpa penambahan protein mendorong proliferasi sel dan ekspresi protein yang lebih baik serta memudahkan pemurnian produk apa pun yang dihasilkan dalam proses hilir [10-12]. Protein tidak termasuk dalam formulasi seperti MEM dan RPMI-1640. Namun, suplemen protein dapat diberikan jika diperlukan.
Media kultur dan komponen dasarnya
Media kultur komersial dapat dibeli dalam bentuk bubuk atau cairan dan sering kali mengandung berbagai nutrisi seperti asam amino, glukosa, garam, vitamin, dan suplemen makanan lainnya.
Kebutuhan akan komponen-komponen ini berbeda untuk setiap lini sel, dan variasi inilah yang menyebabkan banyaknya formulasi media yang berbeda. Setiap komponen memiliki fungsi tertentu, yang akan dijelaskan dalam paragraf berikut:
Sistem penyangga
Untuk menjaga kondisi pertumbuhan yang optimal, pH harus dikontrol, yang sering dilakukan dengan salah satu dari dua sistem penyangga berikut:
Sistem penyangga alami
Rasio CO₂/H₂CO₃ di atmosfer sama dengan yang ada di media, sehingga menciptakan mekanisme penyangga alami. Untuk mempertahankan mekanisme penyangga alami ini, kultur harus disimpan dalam lingkungan udara dengan kadar CO₂ 5–10%, yang sering dicapai dengan menggunakan inkubator CO₂. Salah satu keunggulan menggunakan penyangga alami adalah harganya yang murah dan aman.
HEPES
Penyangga kimiawi yang menggunakan zwitterion HEPES memiliki kemampuan penyangga yang lebih besar pada kisaran pH 7,2–7,4 dan tidak memerlukan lingkungan gas yang diatur. Untuk jenis sel tertentu, dosis HEPES yang lebih tinggi dapat berbahaya. Media yang mengandung HEPES juga jauh lebih rentan terhadap efek fototoksik dari cahaya fluoresen [13].
Phenol Red
Indikator pH fenol merah sering ditambahkan ke dalam media kultur yang tersedia secara komersial, sehingga memungkinkan pemantauan pH secara terus-menerus. Seiring pertumbuhan sel, metabolit yang dihasilkan oleh sel-sel ini menyebabkan pergeseran pH dan akibatnya perubahan warna media. Phenol Red memiliki efek ganda terhadap warna media, yaitu berubah menjadi kuning pada pH asam dan ungu pada pH basa. pH 7,4, nilai optimal untuk kultur sel, menyebabkan media tampak berwarna merah fluoresen.
Namun, fenol merah memiliki beberapa kelemahan: Pertama, fenol merah mampu meniru fungsi sejumlah hormon steroid, terutama estrogen [14]. Oleh karena itu, saat mempelajari sel yang sensitif terhadap estrogen seperti jaringan payudara, disarankan menggunakan media yang bebas dari fenol merah. Keseimbangan natrium-kalium terganggu oleh adanya fenol merah dalam beberapa formulasi bebas serum. Menambahkan serum atau hormon hipofisis sapi ke dalam media dapat menetralkan efek ini [15]. Ketiga, deteksi dalam eksperimen sitometri aliran terhambat oleh adanya fenol merah.
Garam anorganik
Media yang mengandung garam anorganik, seperti ion natrium, kalium, dan kalsium, membantu menjaga keseimbangan osmotik dan mengatur potensial membran.
Asam amino
Karena asam amino merupakan komponen dasar protein, maka asam amino merupakan komponen esensial dari setiap media pertumbuhan sel yang pernah diciptakan. Karena sel tidak mampu memproduksi asam amino tertentu secara mandiri, penting bagi media kultur untuk mengandung asam amino esensial. Asam amino diperlukan untuk proliferasi sel, dan konsentrasinya menentukan kepadatan sel maksimum yang dapat dicapai. Secara khusus, L-glutamin, sebuah asam amino esensial, sangatlah penting.
L-glutamin berfungsi sebagai sumber energi sekunder untuk metabolisme dan menyumbangkan nitrogen untuk produksi NAD, NADPH, dan nukleotida. Karena L-glutamin merupakan asam amino yang tidak stabil dan seiring waktu berubah menjadi bentuk yang tidak dapat dimanfaatkan oleh sel, maka L-glutamin harus ditambahkan ke dalam media.
Selain itu, asam amino non-esensial dapat ditambahkan ke dalam media untuk mengisi kembali asam amino yang telah habis selama proses pertumbuhan. Pertumbuhan sel akan meningkat dan viabilitasnya akan bertambah jika media pertumbuhan ditambah dengan asam amino non-esensial.
Karbohidrat
Karbohidrat dalam bentuk gula merupakan sumber energi utama. Banyak media juga mengandung maltosa dan fruktosa selain gula yang lebih umum seperti glukosa dan galaktosa.
Protein dan peptida
Albumin, transferrin, dan fibronektin adalah protein dan peptida yang paling umum digunakan. Ketiganya sangat penting terutama dalam media yang tidak mengandung serum. Albumin, transferrin, aprotinin, fetuin, dan fibronektin adalah beberapa protein yang dapat ditemukan dalam serum, yang merupakan sumber protein yang kaya.
Albumin adalah protein utama yang terdapat dalam darah, dan fungsinya adalah mengikat serta mengangkut berbagai zat, termasuk air, garam, asam lemak bebas, hormon, dan vitamin, antar organ dan sel. Kemampuan albumin untuk mengikat zat kimia menjadikannya kandidat yang efektif untuk menghilangkan senyawa berbahaya dari media tempat sel-sel dikultur.
Aprotinin merupakan agen pelindung dalam sistem kultur sel, karena stabil pada pH netral dan asam, serta tahan terhadap suhu tinggi dan kerusakan yang mungkin disebabkan oleh enzim proteolitik. Aprotinin mampu menghambat sejumlah protease serin, termasuk tripsin, di antara enzim lainnya.
Fetuin adalah glikoprotein yang dapat terdeteksi dalam jumlah lebih tinggi pada serum hewan janin dan bayi baru lahir dibandingkan dengan serum hewan dewasa. Selain itu, fetuin juga bertindak sebagai penghambat protease serin. Protein fibronektin merupakan komponen esensial dalam proses adhesi sel. Transferrin adalah protein yang mengangkut zat besi dan bertanggung jawab untuk mengantarkan zat besi ke membran sel.
Asam lemak dan lipid
Keduanya memainkan peran penting dalam media bebas serum ketika serum tidak ada.
Vitamin
Banyak vitamin diperlukan untuk perkembangan dan proliferasi sel. Vitamin tidak dapat diproduksi dalam jumlah yang cukup oleh sel dan oleh karena itu sangat penting dalam kultur jaringan sebagai suplemen makanan.
Dalam kultur sel, serum merupakan sumber utama vitamin; namun, media juga diperkaya dengan berbagai vitamin agar sesuai untuk jenis sel tertentu. Umumnya, vitamin kelompok B digunakan untuk merangsang pertumbuhan.
Unsur jejak
Unsur-unsur kimia seperti tembaga, seng, selenium, dan zat antara asam trikarboksilat dikenal sebagai unsur jejak. Unsur jejak sering ditambahkan ke media yang tidak mengandung serum untuk menggantikan unsur-unsur yang biasanya terdapat dalam serum. Unsur-unsur ini merupakan komponen kimia penting yang diperlukan untuk perkembangan sel yang sehat. Banyak reaksi biokimia bergantung pada mikronutrien tertentu, seperti aktivitas enzim.
Suplemen media
Media pertumbuhan lengkap yang disarankan untuk garis sel tertentu memerlukan komponen tambahan yang tidak terdapat dalam media dasar dan serum. Suplemen ini mendukung pertumbuhan sel dan fungsi metabolik yang tepat.
Meskipun hormon, faktor pertumbuhan, dan molekul pensinyalan sangat penting untuk proliferasi yang tepat dari lini sel tertentu, tindakan pencegahan berikut harus selalu dilakukan: Karena penambahan suplemen dapat mengubah osmolalitas media pertumbuhan lengkap, yang dapat menghambat perkembangan sel, disarankan untuk selalu memverifikasi osmolalitas setelah menambahkan suplemen. Untuk sebagian besar lini sel, osmolalitas optimal berkisar antara 260 dan 320 mOSM/kg.
Antibiotik
Antibiotik sering digunakan untuk menghambat pertumbuhan kontaminan bakteri dan jamur [16], meskipun antibiotik tersebut tidak esensial bagi pertumbuhan sel. Karena antibiotik dapat menyembunyikan kontaminasi oleh mikoplasma dan bakteri resisten, penggunaan rutin antibiotik tidak disarankan dalam kultur sel [17, 18].
Selain itu, antibiotik dapat mengganggu metabolisme sel yang hipersensitif. Kombinasi penisilin-streptomisin yang diproduksi oleh MilliporeSigma dan Life Technologies sering digunakan. Plasmocin telah digunakan dalam kultur garis sel glioma TS603, TS516, dan BT260 [19], dan terbukti efektif dalam menghilangkan kontaminasi mikoplasma (20).
Serum
Albumin, faktor pertumbuhan, dan penghambat pertumbuhan semuanya terdapat dalam serum. Serum merupakan salah satu komponen terpenting dalam medium kultur sel karena menyediakan asam amino, protein, vitamin (terutama vitamin larut lemak seperti A, D, E, dan K), karbohidrat, lipid, hormon, faktor pertumbuhan, mineral, dan unsur jejak.
Serum dari sumber janin sapi dan anak sapi sering digunakan untuk mendorong perkembangan sel yang dikultur. Serum janin merupakan sumber faktor pertumbuhan yang melimpah dan cocok untuk kloning sel serta pengembangan sel yang sensitif. Karena kemampuannya dalam mendorong pertumbuhan yang lebih rendah, serum anak sapi digunakan dalam eksperimen penghambatan kontak. Media pertumbuhan normal biasanya mengandung 2% hingga 10% serum. Penambahan serum ke dalam media kultur memiliki tujuan sebagai berikut [21]:
-
Serum menyediakan nutrisi esensial bagi sel (baik dalam bentuk larutan maupun terikat pada protein).
-
Beberapa faktor pertumbuhan dan hormon yang berperan dalam mendorong pertumbuhan dan aktivitas sel khusus terdapat dalam serum.
-
Serum menyediakan banyak protein pengikat, seperti albumin dan transferrin, yang mengangkut zat kimia lain ke dalam sel. Misalnya, albumin mengantarkan lemak, vitamin, hormon, dll. ke dalam sel.
-
Serum juga menyediakan protein, seperti fibronektin, yang meningkatkan adhesi sel ke substrat. Selain itu, serum menghasilkan unsur-unsur penyebaran yang membantu ekspansi sel sebelum pembelahan.
-
Serum mengantarkan penghambat protease yang mencegah proteolisis dalam sel.
-
Serum juga mengandung mineral seperti Na+, K+, Zn2+, dan Fe2+.
-
Media ini meningkatkan viskositas, sehingga melindungi sel dari cedera mekanis selama pengadukan kultur suspensi.
-
Albumin juga berfungsi sebagai penyangga.
Referensi
[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrisi sel hewan dalam kultur jaringan; studi awal mengenai media sintetis. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8
[2] Kerbel R, Blakeslee D. Adsorpsi cepat komponen serum janin sapi oleh sel mamalia dalam kultur. Sumber potensial artefak dalam studi antiserum terhadap antigen spesifik sel. Immunology. 1976;31:881-91
[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Penambahan serum ke dalam medium yang digunakan untuk persiapan suspensi sel sebagai sumber potensial artefak dalam reaksi yang dimediasi sel yang diteliti melalui uji kelenjar getah bening popliteal. J Immunogenet. 1980;7:483-9
[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Media bebas serum komersial: pertumbuhan hibridoma dan produksi antibodi monoklonal. J Immunol Methods. 1991;145:175-83
[5] Barnes D, Sato G. Metode pertumbuhan sel kultur dalam media bebas serum. Anal Biochem. 1980;102:255-70
[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, dkk. HSP70 mengarahkan TDP-43 bebas RNA ke dalam cangkang cair intranuklear berbentuk bola yang anisotropik. Science. 2021;371:
[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, dkk. Penuaan yang dipicu oleh sindrom Down mengganggu arsitektur nukleus sel progenitor saraf. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7
[8] Iscove N, Melchers F. Penggantian total serum dengan albumin, transferrin, dan lipid kedelai dalam kultur limfosit B yang reaktif terhadap lipopolisakarida. J Exp Med. 1978;147:923-33
[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Peningkatan sistematis terhadap media bebas protein yang didefinisikan secara kimiawi untuk pertumbuhan hibridoma dan produksi antibodi monoklonal. J Biotechnol. 1996;45:111-23
[10] Darfler F. Media bebas protein untuk pertumbuhan hibridoma dan sel-sel sistem kekebalan lainnya. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78
[11] Barnes D, Sato G. Kultur sel bebas serum: suatu pendekatan terpadu. Cell. 1980;22:649-55
[12] Hamilton W, Ham R. Pertumbuhan klonal garis sel hamster Cina dalam media bebas protein. In Vitro. 1977;13:537-47
[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Analisis efek sitotoksik media kultur yang mengandung HEPES dan terpapar cahaya. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7
[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenol merah dalam media kultur jaringan merupakan estrogen lemah: implikasi terkait studi sel yang responsif terhadap estrogen dalam kultur. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500
[15] Karmiol S. Pengembangan media bebas serum. Dalam: Master JRW, editor. Kultur Sel Hewan, edisi ke-3. Oxford: Oxford University Press; 2000.
[16] Perlman D. Penggunaan antibiotik dalam media kultur sel. Methods Enzymol. 1979;58:110-6
[17] McGarrity G. Penyebaran dan pengendalian infeksi mikoplasma pada kultur sel. In Vitro. 1976;12:643-8
[18] Masters J, Stacey G. Mengganti media dan melakukan passaging pada garis sel. Nat Protoc. 2007;2:2276-84
[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, dkk. Demetilase histon KDM6A secara langsung mendeteksi oksigen untuk mengendalikan kromatin dan nasib sel. Science. 2019;363:1217-1222
[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, dkk. Efektivitas Plasmocin™ pada berbagai garis sel mamalia yang terinfeksi mollicutes dibandingkan dengan antibiotik yang umum digunakan dalam kultur sel: pengalaman lokal. Cytotechnology. 2011;63:609-20
[21] Kragh Hansen U. Aspek molekuler pengikatan ligan pada albumin serum. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53