DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 adalah media dasar yang diakui secara luas dan banyak digunakan dalam kultur sel untuk penelitian biologi. Media ini berfungsi sebagai sumber nutrisi utama bagi pertumbuhan berbagai lini sel mamalia, terutama bila ditambah dengan Serum Janin Sapi (FBS).
Formulasi unik ini menggabungkan Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) dan Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) dalam perbandingan 1:1 yang tepat. Penambahan L-glutamin semakin meningkatkan komposisinya.
DMEM, yang berasal dari Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), menawarkan konsentrasi asam amino dan vitamin yang lebih tinggi dibandingkan pendahulunya. Sebaliknya, Ham's F-12 didasarkan pada media Ham's F-10, yang menyediakan rangkaian komponen esensial yang saling melengkapi.
Untuk mendukung pertumbuhan sel yang optimal, praktik umum yang dilakukan adalah menambahkan FBS ke dalam campuran DMEM:Ham's F-12 dengan konsentrasi umum sebesar 5–10%. Penambahan ini diperlukan karena media tersebut tidak mengandung hormon pertumbuhan, lipid, dan protein yang sangat penting bagi perkembangan sel.
DMEM:Ham’s F12 dilengkapi dengan sistem penyangga pH dan sering ditambahkan fenol merah, suatu indikator pH. Sel yang dibudidayakan dalam DMEM:Ham’s F12, atau media apa pun yang menggunakan sistem penyangga bikarbonat, memerlukan lingkungan CO₂ yang terkontrol sebesar 5–10% untuk mempertahankan tingkat pH yang sesuai.
Pengendalian Mutu
- Disaring secara steril
Penyimpanan dan Umur Simpan
- Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
- Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6–8 minggu.
Kondisi Pengiriman
- Suhu ruangan
Perawatan
- Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan berulang hingga +37°C, karena hal ini dapat menurunkan kualitas produk.
- Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti alat microwave.
- Jika hanya sebagian media yang akan digunakan, ambil jumlah yang diperlukan dan panaskan hingga suhu kamar sebelum digunakan.
Komposisi
| Kategori | Komponen | Konsentrasi (mg/L) |
| Asam Amino | Glisin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-Arginine HCl | 147,50 | |
| L-Asparagin H₂O | 7,50 | |
| Asam L-Aspartat | 6,65 | |
| L-Sistein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-Sistin 2 HCl | 31,29 | |
| Asam L-Glutamat | 7,35 | |
| L-Glutamin | 365,00 | |
| L-Histidin HCl H₂O | 31,48 | |
| L-Isoleusin | 54,47 | |
| L-Leusin | 59,05 | |
| L-Lisin HCl | 91,25 | |
| L-Metionin | 17,24 | |
| L-fenilalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-Serin | 26,25 | |
| L-treonin | 53,45 | |
| L-Triptofan | 9,02 | |
| L-Tirosin 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-Valin | 52,85 | |
| Vitamin | D-Biotin | 0,0035 |
| Klorida Kolin | 8,98 | |
| D-Kalsium Pantotenat | 2,24 | |
| Asam folat | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamida | 2,02 | |
| Pyridoxine HCl | 0,031 | |
| Piridoksal HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Tiamin HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Garam Anorganik | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9 H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Komponen Lain | D-Glukosa | 3151,00 |
| Hipoksantin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Asam linoleat | 0,042 | |
| Asam lipoat | 0,105 | |
| Garam Natrium Fenol Merah | 8,63 | |
| Putresin 2 HCl | 0,081 | |
| Natrium Piruvat | 55,00 | |
| Timidin | 0,365 |