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Cellules SH-SY5Y - Recherche sur le neuroblastome et pertinence neuroscientifique des cellules SH-SY5Y

La lignée cellulaire SH-SY5Y, dérivée d'un neuroblastome humain, est largement utilisée dans la recherche médicale pour l'étude des maladies neurodégénératives et le développement de médicaments. Les chercheurs utilisent ces cellules dans leur forme initiale indifférenciée ou les différencient en cellules ressemblant à des neurones.

Informations générales et origine de la lignée cellulaire SH-SY5Y

Cette section aborde les informations de base sur la lignée cellulaire SH-SY5Y, notamment son origine, sa définition et sa structure cellulaire. Nous aborderons des questions telles que sa morphologie et l'origine des cellules.

  • SH-SY5Y est une lignée cellulaire d'origine humaine issue du sous-clonage de la lignée cellulaire de neuroblastome SK-N-SH en 1970.
  • La lignée cellulaire parentale, SK-N-SH, a été développée à partir de la biopsie de la moelle osseuse d'une patiente de quatre ans atteinte d'un neuroblastome.
  • Les cellules SH-SY5Y sont phénotypiquement adrénergiques et expriment des marqueurs dopaminergiques, ce qui en fait un modèle in vitro utile pour l'étude des maladies neurodégénératives, de la neurogenèse et des caractéristiques des cellules cérébrales [1].
  • Les cellules SH-SY5Y se développent comme des amas de cellules neuroblastiques viables avec des neurites et sont peu adhérentes.
  • La taille des cellules SH-SY5Y est de 12 μm.
  • Le nombre modal de chromosomes des cellules SH-SY5Y est de 47, et elles possèdent un marqueur rare du chromosome numéro 1, la trisomie 1q, causée par l'insertion d'une copie supplémentaire du segment 1q dans le bras long du chromosome 1.

Culture des cellules SH-SY5Y

Dans les laboratoires de recherche neurobiologique, les cellules SH-SY5Y sont les cellules de neuroblastome les plus cultivées. Pour travailler avec ces cellules, il est essentiel de comprendre quel type de milieu de croissance est adapté à leur culture, leurs caractéristiques de croissance, la densité d'ensemencement optimale et la méthode appropriée pour les congeler. Cette section fournit des informations essentielles sur la culture des cellules SH-SY5Y afin de vous aider sur ces aspects.

Points clés pour la culture des cellules SH-SY5Y

Temps de double ment de la population : Le temps moyen de doublement de la population pour les cellules SH-SY5Y est d'environ 3 à 4 jours.

Adhérentes ou en suspension : Les cellules SH-SY5Y sont des cellules faiblement adhérentes. Elles se développent en amas lorsqu'elles sont ensemencées à une densité élevée.

Densité d'ensemencement : La densité d'ensemencement optimale pour SH-SY5Y est de 1 x 104 cellules/cm2. Les cultures de SH-SY5Y sont composées de cellules adhérentes et flottantes.

Milieu de croissance : Le milieu DMEM:Ham's F12 complété par 3,1 g/L de glucose, 10 % de FBS et 1,6 mM de L-glutamine est idéal pour la culture de la lignée cellulaire SH-SY5Y.

Conditions de croissance (température, CO2) : Les cellules SH-SY5Y sont cultivées à 37°C dans un incubateur humidifié avec 5% de CO2.

Stockage : Pour maintenir la viabilité des cellules SH-SY5Y, elles sont stockées dans la phase vapeur de l'azote liquide à une température inférieure à -150°C.

Processus de congélation et milieu : Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF sont utilisés pour congeler les cellules SH-SY5Y. Pour la congélation de cette lignée cellulaire de neuroblastome, on opte pour une méthode de congélation lente qui abaisse progressivement la température de 1°C.

Processus de décongélation : Les flacons congelés contenant les cellules SH-SY5Y sont placés dans un bain-marie réglé à 37°C. Le flacon est rapidement agité jusqu'à ce que les cellules SH-SY5Y soient décongelées. Le flacon est rapidement agité jusqu'à ce que les cellules décongèlent et qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace.

Niveau de biosécurité : Les cellules SH-SY5Y peuvent être cultivées dans un laboratoire de niveau de biosécurité 1.

Cellules SH-SY5Y à confluence moyenne et élevée.

SH-SY5Y : Avantages et limites

Avantages

  • Différenciation en neurones : Les cellules SH-SY5Y peuvent être différenciées en neurones fonctionnels à l'aide de composés spécifiques, ce qui constitue une alternative plus pratique aux neurones primaires et permet d'éviter les problèmes éthiques liés à leur utilisation [2].
  • Modèle in vitro pour les maladies neurodégénératives : L'expression de marqueurs moléculaires, y compris de marqueurs neuronaux dopaminergiques, fait des cellules SH-SY5Y des cellules adaptées à l'étude des troubles neurodégénératifs tels que la maladie de Parkinson.

Limites

  • Cycle cellulaire non synchronisé : Les cultures de cellules SH-SY5Y présentent des cycles cellulaires non synchronisés dans un état indifférencié [3].
  • État de différenciation indéfini : Les cellules SH-SY5Y ont un état de différenciation indéfini qui va d'un état de neuroblastome tumorigène à des neurones postmitotiques ou des cellules progénitrices neurales. Elles n'expriment pas les marqueurs moléculaires des cellules neuronales matures [4].

Cellules SH-SY5Y pour la neuropharmacologie in vitro et la découverte de médicaments

Applications des cellules SH-SY5Y

Recherche sur les maladies neurodégénératives : Les cellules SH-SY5Y sont utilisées pour étudier les maladies neurodégénératives, telles que la maladie d'Alzheimer et la maladie de Parkinson. Par exemple, une étude a traité des cellules SH-SY5Y avec le peptide β amyloïde 1-42 pour établir un modèle in vitro de la maladie d'Alzheimer. La lignée cellulaire développée a ensuite été transfectée avec pcDNA-17A et 17A shRNA pour examiner l'effet du long ARN non codant 17A sur les cellules similaires à celles de la maladie d'Alzheimer. L'étude a montré que le LncRNA-17A régule l'apoptose et l'autophagie des cellules SH-SY5Y, imitant ainsi la maladie d'Alzheimer [5].

Développement de médicaments : Les cellules SH-SY5Y sont utilisées pour cribler et valider les médicaments pour leur effet thérapeutique contre les maladies neurodégénératives. Par exemple, une étude menée en 2021 a induit le parkinsonisme dans les cellules SH-SY5Y à l'aide d'un herbicide (Paraquat) et a ensuite utilisé ces cellules pour étudier le potentiel thérapeutique d'un flavonoïde, la naringénine. Ce composé a démontré un effet protecteur contre la neurodégénérescence et la neurotoxicité liées à la maladie de Parkinson dans des modèles cellulaires, ce qui indique son potentiel pour le développement de traitements contre la MP [6].

Publications de recherche sur les cellules SH-SY5Y

Il existe de nombreuses études de recherche sur les cellules SH-SY5Y. Cette section présente quelques exemples significatifs.

Ressources pour les cellules SH-SY5Y : Protocoles, vidéos et autres

Plusieurs ressources en ligne sont disponibles sur cette célèbre lignée cellulaire de neuroblastome. Ces ressources peuvent vous renseigner sur la manipulation et l'entretien des cultures SH-SY5Y.

Protocoles de culture cellulaire

Les articles suivants peuvent vous aider à apprendre les méthodes de culture, de congélation et de décongélation des cellules SH-SY5Y.

Nous espérons que cet article fournira des informations utiles concernant la manipulation, la culture et l'utilisation des cellules SH-SY5Y dans les études de recherche. Si vous souhaitez travailler sur cette lignée de cellules de neuroblastome, envisagez de passer commande chez nous.

Lignée cellulaire SH-SY5Y : Questions fréquemment posées

La lignée cellulaire SH-SY5Y est une sous-lignée dérivée de la lignée SK-N-SH, qui provient d'un neuroblastome métastatique. Elle présente des caractéristiques neuronales et est largement utilisée dans la recherche neuroscientifique pour étudier divers mécanismes moléculaires liés au système nerveux.

Les marqueurs neuronaux tels que NSE, NeuN et beta-tubuline III sont utilisés pour confirmer le statut de différenciation des cellules SH-SY5Y. Ces marqueurs indiquent le développement de caractéristiques neuronales, y compris la croissance des neurites, ce qui est essentiel pour les études axées sur les modèles de cellules neuronales.

Oui, les cellules SH-SY5Y sont couramment utilisées dans les essais de croissance des neurites en raison de leur capacité à se différencier et à étendre les neurites. Ces essais sont essentiels pour comprendre le développement et la régénération des neurites dans le contexte des maladies du système nerveux.

Les cellules SH-SY5Y sont un modèle privilégié en neurotoxicologie pour étudier les effets de diverses substances, y compris les polluants organiques, sur les cellules neuronales humaines. Elles permettent de comprendre l'impact de ces substances sur la viabilité cellulaire, la croissance des neurites et les fonctions neuronales.

Les cellules SH-SY5Y sont utilisées dans les essais de criblage à haut débit en raison de leur reproductibilité et de leur pertinence pour les voies neuronales humaines. Ces essais permettent de tester rapidement les effets neuroactifs ou neurotoxiques des composés, ce qui facilite la découverte de médicaments et la toxicologie.

La culture de maintenance SH-SY5Y nécessite des conditions spécifiques, notamment une atmosphère humidifiée avec 5% de CO2 et une température de 37°C. Le milieu contient généralement un mélange de F12 et de DMEM, complété par du sérum bovin fœtal, afin d'assurer une croissance et une viabilité optimales de ces cellules.

Les cellules SH-SY5Y expriment des enzymes liées à la synthèse des neurotransmetteurs, telles que la choline acétyltransférase et la tyrosine hydroxylase, ce qui permet d'étudier les interconversions biochimiques impliquant la dopamine et l'acétylcholine. Cela les rend inestimables pour la recherche sur les aspects moléculaires de la neurotransmission et des troubles associés.

Références

  1. Carvajal-Oliveros, A., et al, La lignée cellulaire BE (2)-M17 a un meilleur phénotype dopaminergique que la lignée traditionnellement utilisée pour la recherche sur la maladie de Parkinson SH-SY5Y, qui est principalement sérotoninergique. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
  2. Kovalevich, J. et D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Neuronal cell culture : methods and protocols, 2013 : p. 9-21.
  3. Martin, E.-R., J. Gandawijaya, et A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022 : p. 4042.
  4. Feles, S., et al, Streamlining culture conditions for the neuroblastoma cell line SH-SY5Y : a prerequisite for functional studies. Méthodes et protocoles, 2022. 5(4) : p. 58.
  5. Wang, X., M. Zhang, et H. Liu, LncRNA17A regulates autophagy and apoptosis of SH-SY5Y cell line as an in vitro model for Alzheimer's disease. Bioscience, biotechnologie et biochimie, 2019. 83(4) : p. 609-621.
  6. Ahmad, M.H., et al, Naringenin alleviates paraquat-induced dopaminergic neuronal loss in SH-SY5Y cells and a rat model of Parkinson's disease (La naringénine atténue la perte neuronale dopaminergique induite par le paraquat dans les cellules SH-SY5Y et dans un modèle de rat de la maladie de Parkinson). Neuropharmacology, 2021. 201: p. 108831.

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