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Milieu de culture cellulaire

Les cellules cultivées nécessitent un contrôle environnemental méticuleux pour une croissance et une maintenance réussies. Une approche globale consiste à garantir la stérilité, l'apport en nutriments, la stabilité du pH et le contrôle de la température.

Conditions stériles et apport de nutriments

Pour éviter toute contamination et garantir la viabilité des cellules, il est essentiel de disposer d'un environnement stérile. Cet objectif est généralement atteint grâce à des techniques aseptiques et à des équipements spécialisés tels que les hottes à flux laminaire. Les nutriments sont fournis par les milieux de culture, qui contiennent un mélange d'ingrédients essentiels, notamment

  • Des sels inorganiques : Vitaux pour maintenir l'équilibre osmotique et fournir les ions nécessaires aux activités cellulaires.
  • Glucides : Servent de sources d'énergie ; le glucose est le sucre le plus couramment utilisé.
  • Acides aminés : éléments constitutifs des protéines ; certains sont essentiels et ne peuvent être synthétisés par les cellules.
  • Vitamines : Elles agissent comme cofacteurs des réactions enzymatiques ; les vitamines B sont essentielles au métabolisme cellulaire.
  • Acides gras et lipides : Composants essentiels à l'intégrité et au fonctionnement des membranes cellulaires.
  • Protéines et peptides : Dans les milieux sans sérum, ils remplacent les facteurs de croissance et les protéines de liaison généralement fournis par le sérum.
  • Sérum : Souvent inclus comme source de facteurs de croissance, bien que les alternatives sans sérum gagnent en popularité pour réduire la variabilité et les risques de contamination.
  • stabilité du pH et de la température : Les cellules ont généralement besoin d'un pH compris entre 7,2 et 7,4 pour une croissance optimale. Ce pH est régulé par des systèmes tampons, qui peuvent être à base de CO2/bicarbonate ou obtenus chimiquement à l'aide d'agents tels que l'HEPES. La température est maintenue autour de 37°C pour reproduire les conditions physiologiques.

Variantes de milieu et optimisation

Au fil des ans, différents milieux de base ont été développés pour répondre à des types de cellules spécifiques :

  • Solutions salines équilibrées : Constituent la base de formulations de milieux plus complexes.
  • Lesmilieux de base, tels que le milieu minimum essentiel (MEM), sont utilisés pour les cultures primaires et les cellules diploïdes.
  • Milieux complexes : Comme le RPMI 1640, ils conviennent à une plus large gamme de cellules de mammifères.
  • Milieux sans sérum : Adaptés à des applications spécifiques, ils réduisent le risque de contamination par des composants d'origine animale.

Préparation des milieux et contrôle de la qualité

Les milieux peuvent être préparés en interne à partir d'ingrédients essentiels ou achetés sous forme de solutions prêtes à l'emploi. Le contrôle de la qualité consiste à s'assurer de l'absence de contaminants et de la bonne concentration des ingrédients. La reconstitution des milieux en poudre nécessite de l'eau de qualité supérieure et les milieux préparés doivent être stérilisés, généralement par filtration.

Utilisation du sérum et considérations de sécurité

L'utilisation de sérum, en particulier de sérum bovin fœtal (FBS), est courante en raison de sa richesse en facteurs de croissance. Toutefois, en raison des inquiétudes suscitées par des maladies telles que l'ESB, des protocoles rigoureux de test et d'approvisionnement sont appliqués pour garantir la sécurité.

Directives et tendances réglementaires

Les réglementations régissent les matières d'origine animale dans les cultures, soulignant l'importance de l'approvisionnement et des tests. La tendance à l'élimination de ces matières dans la mesure du possible se reflète dans le développement de milieux sans sérum et sans animaux.

En conclusion, les milieux de culture cellulaire jouent un rôle fondamental dans la croissance et le maintien des cellules in vitro. Chaque composant est soigneusement sélectionné et optimisé pour imiter l'environnement in vivo, garantissant aux cellules des conditions de croissance, de survie et de fonctionnalité.

DMEM, w : 4,5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3,7 g/L NaHCO3, w : 1,0 mM Pyruvate de sodium
Le DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) est un milieu de base très polyvalent et largement utilisé, conçu pour favoriser la croissance d'une gamme variée de cellules de mammifères dans la recherche biologique. C'est un milieu idéal pour la culture de fibroblastes primaires, de neurones, de cellules gliales, de HUVEC, de cellules musculaires lisses, ainsi que de lignées cellulaires populaires telles que HeLa, 293, Cos-7 et PC-12.
Le DMEM se distingue des autres milieux par sa composition unique. Il contient une concentration impressionnante d'acides aminés et de vitamines, multipliée par quatre par rapport au milieu minimal essentiel d'Eagle. Initialement développé avec un faible taux de glucose (1 g/L) et du pyruvate de sodium, le DMEM est fréquemment utilisé avec des taux de glucose plus élevés, avec ou sans pyruvate de sodium. Notamment, le DMEM ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance, ce qui nécessite une supplémentation. Pour obtenir une croissance optimale, une approche courante consiste à compléter le DMEM avec 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). En outre, le DMEM utilise un système tampon de bicarbonate de sodium, nécessitant un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologique.
Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est très apprécié parmi les milieux définis pour la culture de cellules et de tissus, car il répond aux besoins de croissance de divers phénotypes de cellules adhérentes. Il surpasse le milieu Eagle original, mis au point dans les années 1950 pour la culture de cellules de poulet, grâce à une formulation supplémentaire améliorée connue sous le nom de modification de Dulbecco. Cette modification multiplie par quatre la teneur en certains acides aminés et en vitamines par rapport au milieu d'origine.
Dans le domaine de la culture cellulaire, le DMEM joue un rôle essentiel en tant que milieu de croissance pour différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. Les chercheurs utilisent également la version modifiée du DMEM pour un large éventail d'applications de recherche, telles que la découverte de médicaments, l'ingénierie tissulaire et l'étude des voies de signalisation cellulaire.

Contrôle de la qualité

Filtré stérilement


Stockage et durée de conservation

Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.


Conditions d'expédition

Température ambiante


Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.


Composition



Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)


Acides aminés
Glycine
30.00



L-Arginine HCl
84.00



L-Cystine 2 HCl
62.57



L-Glutamine
584.00



L-Histidine HClH2O
42.00



L-Isoleucine
105.00



L-Leucine
105.00



L-Lysine HCl
146.00



L-Méthionine
30.00



L-Phénylalanine
66.00



L-Sérine
42.00



L-Thréonine
95.00



L-Tryptophane
16.00



L-Tyrosine 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Vitamines
Chlorure de choline
4.00



D-Pantothénate de calcium
4.00



Acide folique
4.00



myo-Inositol
7.20



Nicotinamide
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavine
0.40



Thiamine HCl
4.00


Sels inorganiques
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Autres composants
D-Glucose
4500.00



Sel de sodium de rouge de phénol
15.90



Pyruvate de sodium
110.00

25,00 €*
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2,2 g/L NaHCO3, w : EBSS
Le milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM) est l'un des milieux de base les plus couramment utilisés pour la culture d'un large éventail de cellules mammifères, en particulier les lignées cellulaires adhérentes. Développée à l'origine par Harry Eagle, cette formulation classique contient les acides aminés essentiels, les vitamines et les sels inorganiques nécessaires à la croissance des cellules primaires et des lignées cellulaires établies dans des conditions de culture standard.

Cette formulation liquide prête à l'emploi et filtrée de manière stérile est enrichie en solution saline équilibrée d'Earle (EBSS), en L-glutamine 2 mM, en D-glucose (1,0 g/L) et en bicarbonate de sodium (NaHCO₃) à 2,2 g/L, ce qui la rend adaptée à une utilisation dans une atmosphère d'incubateur à CO₂ contrôlé (généralement 5 % de CO₂). Le rouge de phénol inclus sert d’indicateur de pH, permettant un contrôle visuel pratique de l’état du milieu pendant la culture cellulaire.

Caractéristiques principales

Formulation MEM classique d’Eagle avec la solution saline équilibrée d’Earle (EBSS)
2 mM de L-glutamine inclus – prêt à l'emploi
2,2 g/L de bicarbonate de sodium – tamponné pour une incubation à 5 % de CO₂
Avec du D-glucose (1,0 g/L) comme source principale de carbone
Avec du rouge de phénol comme indicateur de pH
Sans HEPES et sans pyruvate de sodium
Milieu liquide filtré stérile, prêt à l'emploi
pH 7,0 – 7,6


Applications typiques
L'EMEM permet la culture d'une grande variété de lignées cellulaires mammifères, notamment HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 et de nombreuses cellules primaires. Les applications courantes comprennent :

L'entretien et la multiplication de routine de lignées cellulaires adhérentes
Les processus de propagation virale et de production de vaccins
Applications de cytotoxicité et de bioessais
Études de transfection et d'expression protéique
La recherche fondamentale en biologie cellulaire et en biologie moléculaire

Pour une croissance cellulaire optimale, l'EMEM est généralement complété par 5 à 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) et, selon la lignée cellulaire, par des acides aminés non essentiels (NEAA) et des antibiotiques tels que la pénicilline/streptomycine.

Manipulation et conservation
Conserver le flacon non ouvert entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière. Après ouverture, utiliser dans des conditions aseptiques. La L-glutamine en solution est sujette à une dégradation progressive ; nous recommandons d'utiliser le milieu dans les 4 semaines suivant l'ouverture pour obtenir les meilleures performances, ou de le compléter avec de la L-glutamine fraîche avant utilisation en cas de stockage prolongé. Laisser le milieu se réchauffer à 37 °C avant de l'ajouter aux cellules.

Qualité
Fabriqué selon des normes de qualité strictes. Chaque lot est testé pour vérifier sa stérilité, son pH, son osmolalité et ses niveaux d'endotoxines afin de garantir des performances constantes dans les applications de culture cellulaire.

Spécifications du produit



Spécifications
Détails



Type de produitMEM
Catégorie de produitMilieux de culture cellulaire
FormatLiquide
StérileOui
Contenance500 ml
L-glutamineAvec L-glutamine (2 mM)
GlucoseAvec du glucose (1,0 g/L)
Bicarbonate de sodiumAvec NaHCO3 (2,2 g/L)
HEPESSans HEPES
Pyruvate de sodiumSans pyruvate de sodium
Rouge de phénolAvec rouge de phénol
Solution salineSolution saline équilibrée d'Earle (EBSS)
pH7,0 – 7,6
Teneur en endotoxinesNon spécifiée
Conservation+2 °C à +8 °C



Formulation (composition par litre)



Composant
Concentration (mg/L)




Sels inorganiques


Chlorure de calcium · 2H₂O265,00
Sulfate de magnésium97,72
Chlorure de potassium400,00
Chlorure de sodium6 800,00
Dihydrogénophosphate de sodium, anhydre122,00
Bicarbonate de sodium (NaHCO3)2 200,00


Acides aminés

L-Arginine · HCl126,00
L-cystine · 2HCl31,30
L-Glutamine292,00
L-histidine · HCl · H₂O42,00
L-isoleucine52,00
L-Leucine52,00
L-Lysine · HCl72,50
L-méthionine15,00
L-phénylalanine32,00
L-thréonine48,00
L-tryptophane10,00
L-Tyrosine · 2Na · 2H2O51,90
L-Valine46,00


Vitamines

D-pantothénate de calcium1,00
Chlorure de choline1,00
Acide folique1,00
Myo-inositol2,00
Nicotinamide1,00
Pyridoxal · HCl1,00
Riboflavine0,10
Thiamine · HCl1,00


Autres composants

D(+)-Glucose1 000,00
Rouge de phénol10,00

25,00 €*
Milieu Ham's F12, w : 1.0 mM Glutamine stable, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.176 g/L NaHCO3
Le milieu Ham's F-12, également connu sous le nom de Ham's F-12 Nutrient Mix, est un milieu de base largement utilisé, conçu spécifiquement pour la culture cellulaire. Il a été largement utilisé pour l'ensemencement sans sérum de cellules d'ovaire de hamster chinois (CHO), de cellules pulmonaires et de cellules L de souris. En outre, Ham's F-12 est le milieu de choix pour les essais de toxicité clonale (CTA).
L'un de ses avantages notables est sa capacité à soutenir la croissance cellulaire sans nécessiter de supplémentation en sérum. Cela élimine les interférences potentielles causées par les composants sériques, garantissant ainsi des résultats expérimentaux cohérents et fiables. En fournissant un environnement de culture sans sérum, le milieu F-12 de Ham's offre aux chercheurs un plus grand contrôle sur leurs recherches.
Une autre caractéristique clé du milieu Ham's F-12 est son aptitude à l'ensemencement d'une seule cellule. Il s'agit donc d'un excellent choix pour une variété de lignées cellulaires, y compris les cellules CHO, les cellules pulmonaires et les cellules L de souris. La composition optimisée en nutriments du milieu facilite l'attachement et la croissance efficaces des cellules individuelles, ce qui permet l'établissement de cultures cellulaires homogènes avec une meilleure reproductibilité.
De plus, le milieu Ham's F-12 est reconnu comme le milieu préféré pour le test de toxicité clonale (CTA). Cet essai joue un rôle essentiel dans l'évaluation des effets cytotoxiques des substances sur les cellules. En utilisant le milieu Ham's F-12 dans le CTA, les chercheurs peuvent évaluer avec précision l'impact de divers composés ou traitements sur des cellules individuelles, ce qui permet d'obtenir des informations précieuses sur les profils toxicologiques.
Contrôle de qualité

pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.

Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.

Composition




Composants
mg/L


Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2H2O
44,00



Sulfate de cuivre(II) x 5H2O
0,00



Sulfate de fer (II) x 7H2O
0,83



Chlorure de magnésium x 6H2O
122,00



Chlorure de potassium
223,65



Chlorure de sodium
7599,00



hydrogénophosphate de di-sodiumanhydre
142,04



Sulfate de zinc x 7H2O
0,86


Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
1801,60



Hypoxanthine
4,08



Acide linoléique
0,08



Acide DL-α-Lipoïque
0,21



Rouge de phénol
1,20



Putrescine x 2HCl
0,16



Pyruvate de sodium
110,00



Thymidine
0,73



NaHCO3
1176,00


Acides aminés
L-Alanine
8,91



L-Arginine x HCl
210,70



L-Asparagine x H2O
15,01



Acide L-aspartique
13,31



L-Cystéine x HCl x H2O
35,12



L-Alanyl-L-Glutamine
217,30



Acide L-Glutamique
14,71



Glycine
7,51



L-Histidine x HCl x H2O
20,96



L-Isoleucine
3,94



L-Leucine
13,12



L-Lysine x HCl
36,54



L-Méthionine
4,48



L-Phénylalanine
4,96



L-Proline
34,53



L-Sérine
10,51



L-Thréonine
11,91



L-Tryptophane
2,04



L-Tyrosine
5,44



L-Valine
11,71


Vitamines
D(+)-Biotine
0,01



D-Pantothénate de calcium
0,24



Chlorure de choline
13,96



Acide folique
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamide
0,04



Pyridoxine x HCl
0,06



Riboflavine
0,04



Thiamine x HCl
0,34



Vitamine B12
1,36

25,00 €*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Pyruvate de sodium, w : 1.2 g/L NaHCO3
Le DMEM:Ham's F12 est un milieu de base largement reconnu et très utilisé en culture cellulaire pour la recherche biologique. Il constitue une source fondamentale de nutriments pour la croissance de diverses lignées cellulaires mammifères, en particulier lorsqu'il est complété par du sérum fœtal bovin (FBS).

Cette formulation unique combine le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) et le Ham's F-12 (mélange nutritif F-12 de Ham) dans un rapport précis de 1:1. L'ajout de L-glutamine améliore encore sa composition.

Le DMEM, dérivé du milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM), offre une concentration accrue en acides aminés et en vitamines par rapport à son prédécesseur. En revanche, le Ham's F-12 est basé sur le milieu Ham's F-10, fournissant un ensemble complémentaire de composants essentiels.

Pour favoriser une croissance cellulaire optimale, il est courant de compléter le DMEM:Ham's F12 avec du sérum fœtal bovin (FBS) à une concentration typique de 5 à 10 %. Cet ajout est nécessaire car le milieu manque d'hormones de croissance, de lipides et de protéines essentiels au développement cellulaire.

Le DMEM:Ham's F12 intègre un système tampon de pH et est souvent complété par du rouge de phénol, un indicateur de pH. Les cellules cultivées dans le DMEM:Ham's F12, ou dans tout milieu utilisant le système tampon bicarbonate, nécessitent un environnement à teneur en CO₂ contrôlée de 5 à 10 % pour maintenir des niveaux de pH appropriés. 


Contrôle qualité

Filtré stérile


Conservation et durée de conservation

Conserver entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière.
Une fois ouvert, conserver à 4 °C et utiliser dans les 6 à 8 semaines.


Conditions d'expédition

Température ambiante


Conservation

Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière. Éviter le gel et les réchauffements fréquents à +37 °C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur non contrôlées telles que les fours à micro-ondes.
Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant utilisation.


Composition



Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)


Acides aminés
Glycine
18,75


L-alanine
4,45


L-Arginine HCl
147,50


L-asparagine H₂O
7,50


Acide L-aspartique
6,65


L-cystéine HCl H₂O
17,56


L-cystine 2 HCl
31,29


Acide L-glutamique
7,35


L-glutamine
365,00


L-histidine HCl H₂O
31,48


L-isoleucine
54,47


L-Leucine
59,05


L-Lysine HCl
91,25


L-méthionine
17,24


L-phénylalanine
35,48


L-proline
17,25


L-sérine
26,25


L-thréonine
53,45


L-tryptophane
9,02


L-Tyrosine 2 Na 2 H₂O
55,79


L-Valine
52,85


Vitamines
D-biotine
0,0035


Chlorure de choline
8,98


D-pantothénate de calcium
2,24


Acide folique
2,66


Myo-inositol
12,60


Nicotinamide
2,02


Pyridoxine HCl
0,031


Pyridoxal HCl
2,00


Riboflavine
0,219


Chlorhydrate de thiamine
2,17


Vitamine B12
0,68



Sels inorganiques
CaCl₂·2H₂O
154,50


CuSO4 5 H2O
0,0013


Fe(NO₃)₃·9H₂O
0,05


FeSO₄ 7 H₂O
0,417


KCl
311,80


MgCl₂ 6 H₂O
61,20


MgSO4 7 H2O
100,00


NaCl
6996,00


NaHCO3
1200,00


Na₂HPO₄
71,02


NaH₂PO₄·2H₂O
70,87


ZnSO4 7 H2O
0,432



Autres composants
D-glucose
3151,00


Hypoxanthine
2,40


HEPES
3574,50


Acide linoléique
0,042


Acide lipoïque
0,105


Sel de sodium du rouge de phénol
8,63


Putrescine 2 HCl
0,081


Pyruvate de sodium
55,00


Thymidine
0,365

25,00 €*
Milieu Ham's F12K, w : 2.0 mM L-Glutamine, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.5 g/L NaHCO3
Voici le milieu Ham's F-12K (Kaighn's), une modification spécialisée du milieu Ham's F-12 conçue pour répondre aux exigences uniques de la recherche biologique. Ce milieu avancé offre des avantages distincts, améliorant la culture des hépatocytes humains primaires, ainsi que des cellules de foie de rat et de poulet, en particulier dans des conditions de sérum réduit.

Le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) est soigneusement formulé pour optimiser les conditions de culture cellulaire. Il présente une composition enrichie, fournissant des niveaux élevés de composants essentiels tels que les acides aminés et le pyruvate de sodium, ainsi que des éléments supplémentaires tels que la putrescine, la thymidine, l'hypoxanthine et le zinc. Ces ajouts permettent aux chercheurs de compléter le milieu avec un minimum de sérum ou des composants définis pour des types de cellules spécifiques, facilitant ainsi des conditions expérimentales précises.

Notamment, le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) ne contient pas de protéines ni de facteurs de croissance. Par conséquent, il est souvent nécessaire d'ajouter des facteurs de croissance et du sérum bovin fœtal (FBS), ce qui permet aux chercheurs d'adapter le milieu aux exigences de leurs lignées cellulaires spécifiques. Pour une performance optimale, la concentration de FBS doit être soigneusement optimisée pour chaque lignée cellulaire, afin de garantir une croissance et une fonctionnalité optimales.

Pour maintenir un pH physiologique, le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) utilise un système tampon de bicarbonate de sodium (2,5 g/L), ce qui nécessite un environnement contrôlé de 5 à 10 % de CO2 pendant la culture. Cela garantit que le pH du milieu reste dans la plage idéale pour la croissance et la viabilité des cellules
Contrôle de qualité

pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.

Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37°C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tous les milieux, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.

Composition




Composants
mg/L


Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2H2O
135,24



Sulfate de cuivre(II) x 5H2O
0,00



Sulfate de fer (II) x 7H2O
0,83



Chlorure de magnésium x 6H2O
105,72



Sulfate de magnésium x 7H2O
394,49



Chlorure de potassium
283,29



Phosphate de potassium dihydrogène
58,52



Chlorure de sodium
7597,20



hydrogénophosphate de di-sodiumanhydre
115,02



Sulfate de zinc x 7H2O
0,14


Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
1260,00



Hypoxanthine
4,08



Acide DL-α-Lipoïque
0,21



Rouge de phénol
3,00



Putrescine x 2HCl
0,32



Pyruvate de sodium
220,00



NaHCO3
2500,00



Thymidine
0,73


Acides aminés
L-Alanine
17,82



L-Arginine x HCl
421,40



L-Asparagine x H2O
30,02



Acide L-aspartique
26,62



L-Cystéine x HCl x H2O
70,24



L-Glutamine
292,20



Acide L-Glutamique
29,42



Glycine
15,01



L-Histidine x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucine
7,87



L-Leucine
26,24



L-Lysine x HCl
73,04



L-Méthionine
8,95



L-Phénylalanine
9,91



L-Proline
69,06



L-Sérine
21,02



L-Thréonine
23,82



L-Tryptophane
4,08



L-Tyrosine
10,87



L-Valine
23,42


Vitamines
D(+)-Biotine
0,07



D-Pantothénate de calcium
0,48



Chlorure de choline
13,96



Acide folique
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamide
0,04



Pyridoxine x HCl
0,06



Riboflavine
0,04



Thiamine x HCl
0,34



Vitamine B12
1,36

108,00 €*
Milieu McCoys 5A (modifié), w : 3.0 g/L Glucose, w : Glutamine stable, w : 2.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.2 g/L NaHCO3
Le milieu McCoy's 5A est un milieu hautement recommandé et spécialisé, conçu pour faciliter la croissance et la réplication des virus dans les cultures cellulaires primaires. Il a acquis une reconnaissance significative pour ses performances exceptionnelles dans diverses applications de recherche biologique. L'une des applications les plus importantes du milieu McCoy's 5A est son utilisation dans la culture de lignées cellulaires de carcinome du côlon humain. Plus précisément, il a été utilisé dans l'étude du récepteur couplé à la protéine G riche en leucine (LGR5) et de son rôle dans la métastase du cancer du côlon. Ce milieu a été utilisé efficacement dans la culture de plusieurs lignées cellulaires de carcinome du côlon, notamment HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b et TENN, permettant aux chercheurs d'approfondir leurs connaissances sur les mécanismes sous-jacents des métastases du cancer du côlon. Outre son application dans la recherche sur le cancer, le milieu McCoy's 5A s'est révélé indispensable dans l'étude des ostéoblastes. Les chercheurs qui étudient la réactivité ionique de l'hydroxyapatite déficiente en calcium dans les milieux de culture cellulaire standard ont utilisé ce milieu pour cultiver des ostéoblastes. Cette application a permis de mieux comprendre les interactions entre les ostéoblastes et l'hydroxyapatite déficiente en calcium, contribuant ainsi aux progrès dans le domaine de la recherche sur les os. Le milieu McCoy's 5A a été méticuleusement formulé en modifiant les acides aminés présents dans le milieu basal Eagle afin d'offrir un soutien optimal aux cellules tumorales hépatiques. Cette formulation enrichie lui permet de convenir à un large éventail de lignées cellulaires établies, ainsi qu'aux cellules primaires, ce qui renforce encore sa polyvalence et son applicabilité dans divers contextes de recherche. Le milieu McCoy's 5A étend ses effets biochimiques et physiologiques au-delà des cellules tumorales hépatiques. Il a été utilisé avec succès pour soutenir la croissance dans des cultures primaires de moelle osseuse, de peau, de gencive, de rein, d'épiploon, de surrénale, de poumon, de rate, d'embryon de rat et d'autres types de cellules. Ce large éventail d'applications atteste de la grande utilité du milieu McCoy's 5A pour soutenir la croissance et le maintien de divers types de cellules dans le cadre de recherches biologiques approfondies. Formulation Ce milieu McCoy's 5A (modifié) contient 3,0 g/L de glucose, de la glutamine stable, 2,0 mM de pyruvate de sodium et 2,2 g/L de NaHCO3. Contrôle qualité pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25 °C.  Chaque lot a été testé pour vérifier sa stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries. Conservation Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement à +37 °C réduisent la qualité du produit.  Ne pas chauffer le milieu à plus de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).  Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélevez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante. La durée de conservation de tous les milieux, à l'exception du milieu de base, est de 6 à 8 semaines à compter de la date d'ouverture. Composition Composants mg/L Sels inorganiquesChlorure de calcium x 2H2O132,00 Sulfate de magnésium97,67 Chlorure de potassium400 Chlorure de sodium6 460,00 Hydrogénophosphate disodique (anhydre)504,00 Autres composantsD(+)-Glucose (anhydre)3 000 Glutathion (réduit)0,5 Peptone de viande600,00 Sel de sodium du rouge de phénol11 Acides aminésL-alanine13,36 L-arginine x HCl42,14 L-asparagine x H2O45,03 Acide L-aspartique19,97 L-Cystéine x HCl x H2O31,75 L-glutamine (stable)219,15 Acide L-glutamique22,07 Glycine7,51 L-histidine x HCl x H2O20,96 L-hydroxyproline19,67 L-isoleucine39,36 L-leucine39,36 L-lysine x HCl36,54 L-méthionine14,92 L-phénylalanine16,52 L-proline17,27 L-sérine26,28 L-thréonine17,87 L-tryptophane3,06 Sel disodique de L-tyrosine26,10 L-Valine17,57 VitaminesAcide p-aminobenzoïque1,00 Acide ascorbique0,56 D(+)-Biotine0,20 D-pantothénate de calcium0,20 Chlorure de choline5,00 Acide folique10 Myo-inositol36,00 Nicotinamide0,5 Acide nicotinique0,5 Chlorhydrate de pyridoxal0,50 Chlorhydrate de pyridoxine0,50 Riboflavine0,20 Chlorhydrate de thiamine0,20 Vitamine B122,00

30,00 €*
IMDM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 25 mM HEPES, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 3.024 g/L NaHCO3
Le milieu Dulbecco modifié d'Iscove (IMDM) est un milieu de croissance complexe et enrichi pour la culture cellulaire. L'IMDM est une modification du DMEM contenant du sélénium et des acides aminés, des vitamines et des sels inorganiques supplémentaires par rapport au DMEM. Il manque de fer et nécessite une supplémentation en sérum bovin fœtal (FBS). L'IMDM utilise un système tampon de bicarbonate de sodium et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologique.
L'IMDM est bien adapté aux cultures cellulaires à haute densité et à prolifération rapide, notamment les cellules Jurkat, COS-7 et les macrophages. Les différentes modifications de l'IMDM disponibles pour une gamme d'applications de culture cellulaire peuvent être trouvées en utilisant l'outil de sélection des milieux. Les milieux liquides fournissent des nutriments essentiels pour toutes les applications de culture cellulaire. Chacun de nos milieux de culture cellulaire de haute qualité est fabriqué selon la formule initialement publiée ou selon les modifications nécessaires à la performance et à la stabilité du milieu de culture.
IMDM vs. DMEM
L'IMDM contient du nitrate de potassium au lieu du nitrate ferrique, de l'HEPES et du pyruvate de sodium. Les composants supplémentaires de l'IMDM le rendent plus adapté aux types de cellules spécialisées et aux applications spécifiques que le DMEM.
IMDM vs. RPMI
L'IMDM et le RPMI ont des formulations différentes qui peuvent être pertinentes pour la stimulation PMA/ionomycine. Une différence significative est la concentration de Ca2+. Alors que le RPMI contient 0,42 mM de Ca2+, l'IMDM en contient 1,49 mM.
Contrôle de qualité

pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.

Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition




Composants
mg/L


Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2 H2O
219,00



Chlorure de potassium
330,00



Nitrate de potassium
0.076



Sulfate de magnésium anhydre
97,73



Chlorure de sodium
4,505.00



Dihydrogénophosphate de sodium anhydre
109,00



Sélénite de sodium
0,02


Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
4,500.00



HEPES
5,958.00



Pyruvate de sodium
110,00



Rouge de phénol
15,00


Acides aminés
L-Alanine
25,00



L-Arginine x HCl
84,00



L-Asparagine x H2O
25,00



Acide L-aspartique
30,00



L-Cystine x 2HCl
91,24



L-Glutamine
584,00



Acide L-Glutamique
75,00



Glycine
30,00



L-Histidine x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucine
104,80



L-Leucine
104,80



L-Lysine x HCl
146,20



L-Méthionine
30,00



L-Phénylalanine
66,00



L-Proline
40,00



L-Sérine
42,00



L-Thréonine
95,20



L-Tryptophane
16,00



L-Tyrosine x 2Na
104,20



L-Valine
93,60


Vitamines
D(+)-Biotine
0.013



D-Pantothénate de calcium
4,00



Chlorure de choline
4,00



Acide folique
4,00



myo-Inositol
7,20

25,00 €*
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3
Le milieu RPMI 1640, également connu sous le nom de milieu RPMI, est un milieu de culture cellulaire très polyvalent, largement utilisé dans la recherche biologique pour cultiver diverses cellules de mammifères. Développé par George E. Moore, Robert E. Gerner et H. Addison Franklin en 1966 au célèbre Roswell Park Comprehensive Cancer Center, ce milieu tire son nom de son origine au Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Initialement conçu pour favoriser la croissance de cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI 1640 a évolué au fil des modifications apportées par les chercheurs et les fournisseurs commerciaux pour convenir à une gamme variée de cellules de mammifères. Il est exceptionnellement compatible avec des lignées cellulaires telles que HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes et carcinomes.
Le milieu RPMI 1640 se distingue des autres milieux de culture cellulaire par sa composition unique. Il contient une quantité substantielle de phosphate, d'acides aminés et de vitamines. Il contient notamment de la biotine, de la vitamine B12 et du PABA, absents du milieu minimal essentiel d'Eagle ou du milieu modifié d'Eagle de Dulbecco. En outre, le milieu RPMI 1640 présente des concentrations significativement élevées de vitamines inositol et choline. Cependant, il ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, une supplémentation avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS) est généralement nécessaire pour fournir des conditions optimales pour la croissance des cellules.
Le système tampon du milieu RPMI 1640 repose sur le bicarbonate de sodium et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologiquement approprié. L'inclusion d'un agent réducteur, le glutathion, distingue encore davantage ce milieu des autres.
Contrôle de la qualité

Filtré stérilement


Stockage et durée de conservation

Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.


Conditions d'expédition

Température ambiante


Entretien

Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.



Composition




Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)


Acides aminés
Glycine
10.00



L-Alanyl-L-Glutamine
434.40



L-Arginine
200.00



L-AsparagineH2O
56.82



Acide L-Aspartique
20.00



L-Cystine 2HCl
65.20



Acide L-Glutamique
20.00



L-Histidine HClH2O
20.27



L-Hydroxy-L-Proline
20.00



L-Isoleucine
50.00



L-Leucine
50.00



L-Lysine HCl
40.00



L-Méthionine
15.00



L-Phénylalanine
15.00



L-Proline
20.00



L-Sérine
30.00



L-Thréonine
20.00



L-Tryptophane
5.00



L-Tyrosine 2Na 2H2O
28.83



L-Valine
20.00


Vitamines
acide p-amino-benzoïque
1.00



D-Biotine
0.20



Chlorure de choline
3.00



D-Pantothénate de calcium
0.25



Acide folique
1.00



myo-Inositol
35.00



Nicotinamide
1.00



Pyridoxine HCl
1.00



Riboflavine
0.20



Thiamine HCl
1.00



Vitamine B12
0.005


Sels inorganiques
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Autres composants
D-Glucose
2000.00



L-Glutathion réduit
1.00



Sel de sodium du rouge de phénol
5.30

25,00 €*

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