Que contient l'EMEM ?
L'EMEM est une version modifiée du milieu minimum essentiel d'Eagle, contenant la solution saline équilibrée d'Earle, des acides aminés non essentiels, de la L-glutamine, du pyruvate de sodium et du bicarbonate de sodium. Il est important de noter que ce niveau de bicarbonate de sodium est destiné à une utilisation dans un air à 5 % de CO2. Pour préserver son efficacité, il est recommandé de conserver le milieu entre 2 °C et 8 °C dans l'obscurité lorsqu'il n'est pas utilisé.
À quoi sert l'EMEM ?
Le milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM) est un milieu de culture cellulaire qui permet de maintenir les cellules en culture tissulaire. Le milieu contient des concentrations plus élevées d'acides aminés, ce qui permet une approximation plus précise de la composition protéique des cellules de mammifères cultivées. L'EMEM peut être utilisé pour cultiver diverses cellules, notamment des fibroblastes, des cellules de la lignée cellulaire du cancer du foie humain (HepG2) et des cellules astrocytaires dérivées de progéniteurs de cerveau fœtal humain (PDA). Il est généralement utilisé en présence de sérum bovin fœtal (FBS), de sérum de veau ou de cheval.
En quoi l'EMEM est-il différent des autres milieux de culture cellulaire ?
Si l'EMEM et le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) présentent certaines similitudes, ils diffèrent également. Les deux milieux sont dépourvus de protéines et contiennent les acides aminés, les sels, le glucose et les vitamines nécessaires pour fournir de l'énergie à une cellule et la maintenir en culture tissulaire. Cependant, la formulation du DMEM est modifiée pour contenir jusqu'à quatre fois plus de vitamines et d'acides aminés et deux à quatre fois plus de glucose que l'EMEM. Il convient de noter que l'EMEM est également différent de la formulation originale du MEM.
Contrôle de la qualité
Filtré stérilement
Stockage et durée de conservation
Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6 à 8 semaines.
Conditions d'expédition
Température ambiante
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.
Composition
Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)
Acides aminés
L-Arginine HCl
126.00
L-Cystine 2 HCl
31.30
L-Glutamine
292.00
L-Histidine HClH2O
42.00
L-Isoleucine
52.00
L-Leucine
52.00
L-Lysine HCl
72.50
L-Méthionine
15.00
L-Phénylalanine
32.00
L-Thréonine
48.00
L-Tryptophane
10.00
L-Tyrosine 2 Na 2H2O
51.90
L-Valine
46.00
Vitamines
Chlorure de choline
1.00
Vitamines
D-Pantothénate de calcium
1.00
Acide folique
1.00
myo-Inositol
2.00
Nicotinamide
1.00
Pyridoxal HCl
1.00
Riboflavine
0.10
Thiamine HCl
1.00
Sels inorganiques
CaCl2 2H2O
265.00
Sels inorganiques
KCl
400.00
MgSO4
97.67
NaCl
6800.00
NaHCO3
2200.00
NaH2PO4
122.00
Autres composants
D-Glucose
1000.00
Autres composants
Sel de sodium de phénol rouge
11.00
Le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) est soigneusement formulé pour optimiser les conditions de culture cellulaire. Il présente une composition enrichie, fournissant des niveaux élevés de composants essentiels tels que les acides aminés et le pyruvate de sodium, ainsi que des éléments supplémentaires tels que la putrescine, la thymidine, l'hypoxanthine et le zinc. Ces ajouts permettent aux chercheurs de compléter le milieu avec un minimum de sérum ou des composants définis pour des types de cellules spécifiques, facilitant ainsi des conditions expérimentales précises.
Notamment, le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) ne contient pas de protéines ni de facteurs de croissance. Par conséquent, il est souvent nécessaire d'ajouter des facteurs de croissance et du sérum bovin fœtal (FBS), ce qui permet aux chercheurs d'adapter le milieu aux exigences de leurs lignées cellulaires spécifiques. Pour une performance optimale, la concentration de FBS doit être soigneusement optimisée pour chaque lignée cellulaire, afin de garantir une croissance et une fonctionnalité optimales.
Pour maintenir un pH physiologique, le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) utilise un système tampon de bicarbonate de sodium (2,5 g/L), ce qui nécessite un environnement contrôlé de 5 à 10 % de CO2 pendant la culture. Cela garantit que le pH du milieu reste dans la plage idéale pour la croissance et la viabilité des cellules
Contrôle de qualité
pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37°C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tous les milieux, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants
mg/L
Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2H2O
135,24
Sulfate de cuivre(II) x 5H2O
0,00
Sulfate de fer (II) x 7H2O
0,83
Chlorure de magnésium x 6H2O
105,72
Sulfate de magnésium x 7H2O
394,49
Chlorure de potassium
283,29
Phosphate de potassium dihydrogène
58,52
Chlorure de sodium
7597,20
hydrogénophosphate de di-sodiumanhydre
115,02
Sulfate de zinc x 7H2O
0,14
Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
1260,00
Hypoxanthine
4,08
Acide DL-α-Lipoïque
0,21
Rouge de phénol
3,00
Putrescine x 2HCl
0,32
Pyruvate de sodium
220,00
NaHCO3
2500,00
Thymidine
0,73
Acides aminés
L-Alanine
17,82
L-Arginine x HCl
421,40
L-Asparagine x H2O
30,02
Acide L-aspartique
26,62
L-Cystéine x HCl x H2O
70,24
L-Glutamine
292,20
Acide L-Glutamique
29,42
Glycine
15,01
L-Histidine x HCl x H2O
41,92
L-Isoleucine
7,87
L-Leucine
26,24
L-Lysine x HCl
73,04
L-Méthionine
8,95
L-Phénylalanine
9,91
L-Proline
69,06
L-Sérine
21,02
L-Thréonine
23,82
L-Tryptophane
4,08
L-Tyrosine
10,87
L-Valine
23,42
Vitamines
D(+)-Biotine
0,07
D-Pantothénate de calcium
0,48
Chlorure de choline
13,96
Acide folique
1,32
myo-Inositol
18,02
Nicotinamide
0,04
Pyridoxine x HCl
0,06
Riboflavine
0,04
Thiamine x HCl
0,34
Vitamine B12
1,36
Initialement conçu pour favoriser la croissance de cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI 1640 a évolué au fil des modifications apportées par les chercheurs et les fournisseurs commerciaux pour convenir à une gamme variée de cellules de mammifères. Il est exceptionnellement compatible avec des lignées cellulaires telles que HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes et carcinomes.
Le milieu RPMI 1640 se distingue des autres milieux de culture cellulaire par sa composition unique. Il contient une quantité substantielle de phosphate, d'acides aminés et de vitamines. Il contient notamment de la biotine, de la vitamine B12 et du PABA, absents du milieu minimal essentiel d'Eagle ou du milieu modifié d'Eagle de Dulbecco. En outre, le milieu RPMI 1640 présente des concentrations significativement élevées de vitamines inositol et choline. Cependant, il ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, une supplémentation avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS) est généralement nécessaire pour fournir des conditions optimales pour la croissance des cellules.
Le système tampon du milieu RPMI 1640 repose sur le bicarbonate de sodium et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologiquement approprié. L'inclusion d'un agent réducteur, le glutathion, distingue encore davantage ce milieu des autres.
Contrôle de la qualité
Filtré stérilement
Stockage et durée de conservation
Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.
Conditions d'expédition
Température ambiante
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.
Composition
Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)
Acides aminés
Glycine
10.00
L-Alanyl-L-Glutamine
434.40
L-Arginine
200.00
L-AsparagineH2O
56.82
Acide L-Aspartique
20.00
L-Cystine 2HCl
65.20
Acide L-Glutamique
20.00
L-Histidine HClH2O
20.27
L-Hydroxy-L-Proline
20.00
L-Isoleucine
50.00
L-Leucine
50.00
L-Lysine HCl
40.00
L-Méthionine
15.00
L-Phénylalanine
15.00
L-Proline
20.00
L-Sérine
30.00
L-Thréonine
20.00
L-Tryptophane
5.00
L-Tyrosine 2Na 2H2O
28.83
L-Valine
20.00
Vitamines
acide p-amino-benzoïque
1.00
D-Biotine
0.20
Chlorure de choline
3.00
D-Pantothénate de calcium
0.25
Acide folique
1.00
myo-Inositol
35.00
Nicotinamide
1.00
Pyridoxine HCl
1.00
Riboflavine
0.20
Thiamine HCl
1.00
Vitamine B12
0.005
Sels inorganiques
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Autres composants
D-Glucose
2000.00
L-Glutathion réduit
1.00
Sel de sodium du rouge de phénol
5.30
Cette formulation unique combine le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) et le Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) dans un rapport précis de 1:1. L'ajout de L-glutamine améliore encore sa composition.
Le DMEM, dérivé de l'Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), offre une concentration accrue d'acides aminés et de vitamines par rapport à son prédécesseur. En revanche, Ham's F-12 est basé sur le milieu Ham's F-10, fournissant un ensemble complémentaire de composants essentiels.
Pour favoriser une croissance cellulaire optimale, il est courant de compléter le DMEM:Ham's F12 par de la FBS à une concentration typique de 5 à 10 %. Cet ajout est nécessaire car le milieu manque d'hormones de croissance, de lipides et de protéines cruciales pour le développement cellulaire.
Le DMEM:Ham's F12 comprend un système tampon de pH et est souvent complété par du rouge de phénol, un indicateur de pH. Les cellules cultivées dans le DMEM:Ham's F12, ou tout autre milieu utilisant le système de tampon bicarbonate, nécessitent un environnement contrôlé en CO2 de 5 à 10 % pour maintenir des niveaux de pH appropriés.
Contrôle de la qualité
Stérile-filtré
Stockage et durée de conservation
Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.
Conditions d'expédition
Température ambiante
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.
Composition
Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)
Acides aminés
Glycine
18.75
L-Alanine
4.45
L-Arginine HCl
147.50
L-Asparagine H₂O
7.50
Acide L-Aspartique
6.65
L-Cystéine HCl H₂O
17.56
L-Cystine 2 HCl
31.29
Acide L-Glutamique
7.35
L-Glutamine
365.00
L-Histidine HCl H₂O
31.48
L-Isoleucine
54.47
L-Leucine
59.05
L-Lysine HCl
91.25
L-Méthionine
17.24
L-Phénylalanine
35.48
L-Proline
17.25
L-Sérine
26.25
L-Thréonine
53.45
L-Tryptophane
9.02
L-Tyrosine sel disodique
48.10
L-Valine
52.85
Vitamines
D-Biotine
0.0035
Chlorure de choline
8.98
D-Pantothénate de calcium
2.24
Acide folique
2.66
myo-Inositol
12.60
Nicotinamide
2.02
Pyridoxine HCl
0.031
HCl de pyridoxal
2.00
Riboflavine
0.219
Thiamine HCl
2.17
Vitamine B12
0.68
Sels inorganiques
CaCl₂ 2 H₂O
154.50
CuSO₄ 5 H₂O
0.0013
Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05
FeSO₄ 7 H₂O
0.417
KCl
311.80
MgCl₂ 6 H₂O
61.20
MgSO₄
48.84
NaCl
6996.00
NaHCO₃
1200.00
Na₂HPO₄
71.02
NaH₂PO₄
54.30
ZnSO₄ 7 H₂O
0.432
Autres composants
D-Glucose
3151.00
Hypoxanthine
2.40
HEPES
3574.50
Acide linoléique
0.042
Acide lipoïque
0.105
Sel de sodium du rouge de phénol
8.63
Putrescine 2 HCl
0.081
Pyruvate de sodium
55.00
Thymidine
0.365
- 0,02 à 20-25 °C. Chaque lot a été testé pour vérifier sa stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries. Conservation Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement à +37 °C réduisent la qualité du produit. Ne pas chauffer le milieu à plus de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes). Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélevez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante. La durée de conservation de tous les milieux, à l'exception du milieu de base, est de 6 à 8 semaines à compter de la date d'ouverture. Composition Composants mg/L Sels inorganiquesChlorure de calcium x 2H2O132,00 Sulfate de magnésium97,67 Chlorure de potassium400 Chlorure de sodium6 460,00 Hydrogénophosphate disodique (anhydre)504,00 Autres composantsD(+)-Glucose (anhydre)3 000 Glutathion (réduit)0,5 Peptone de viande600,00 Sel de sodium du rouge de phénol11 Acides aminésL-alanine13,36 L-arginine x HCl42,14 L-asparagine x H2O45,03 Acide L-aspartique19,97 L-Cystéine x HCl x H2O31,75 L-glutamine (stable)219,15 Acide L-glutamique22,07 Glycine7,51 L-histidine x HCl x H2O20,96 L-hydroxyproline19,67 L-isoleucine39,36 L-leucine39,36 L-lysine x HCl36,54 L-méthionine14,92 L-phénylalanine16,52 L-proline17,27 L-sérine26,28 L-thréonine17,87 L-tryptophane3,06 Sel disodique de L-tyrosine26,10 L-Valine17,57 VitaminesAcide p-aminobenzoïque1,00 Acide ascorbique0,56 D(+)-Biotine0,20 D-pantothénate de calcium0,20 Chlorure de choline5,00 Acide folique10 Myo-inositol36,00 Nicotinamide0,5 Acide nicotinique0,5 Chlorhydrate de pyridoxal0,50 Chlorhydrate de pyridoxine0,50 Riboflavine0,20 Chlorhydrate de thiamine0,20 Vitamine B122,00
Le milieu 199 offre une gamme d'applications dans ce domaine. Il peut maintenir efficacement le complexe cumulus-ovocyte (COC) et soutenir la maturation in vitro des ovocytes. En outre, il est utilisé pour le rinçage des lignes d'aspiration lors de la collecte d'ovules de vaches Holstein allemandes. De plus, le milieu 199 est un excellent milieu pour la culture de cellules endothéliales cardiaques provenant de rats. Ces applications démontrent la polyvalence et l'adaptabilité du milieu 199 à divers besoins expérimentaux.
Historique
La mise au point du milieu 199 dans les années 1950 a marqué un progrès important dans le domaine des milieux de culture tissulaire. Avant son introduction, de nombreux milieux de culture reposaient sur des produits d'origine animale et des extraits de tissus. Cependant, Morgan et ses collègues ont révolutionné le domaine en formulant une source nutritionnelle entièrement définie pour les cultures cellulaires. Grâce à leurs expériences impliquant différentes combinaisons de vitamines, d'acides aminés et d'autres facteurs, ils ont découvert les propriétés exceptionnelles de stimulation de la croissance du milieu 199.
Contrôle de qualité
pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants
mg/L
Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2H2O
264,92
Nitrate de fer (III) x 9H2O
0,72
Sulfate de magnésium
97,67
Chlorure de potassium
400,00
Acétate de sodium x 3H2O
82,95
Chlorure de sodium
6,800.00
Dihydrogénophosphate de sodium x H2O
140,00
Autres composants
Sulfate d'adénine
10,00
AMP
0,20
ATP
1,00
Cholestérol
0,20
2'-Désoxyribose
0,50
D(+)-Glucose anhydre
1,000.00
Glutathion (rouge)
0,05
Guanine x HCl
0,30
Hypoxanthine
0,30
Phénol rouge
10,00
D-Ribose
0,50
Thymine
0,30
Tween 80
4,90
Uracile
0,30
Xanthine
0,30
NaHCO3
2,200.00
Acides aminés
L-Alanine
25,00
L-Arginine x HCl
70,00
Acide L-Aspartique
30,00
L-Cystéine x HCl x H2O
0,10
L-Cystine
20,00
L-Glutamine stable
149,00
Acide L-Glutamique
67,00
Glycine
50,00
L-Histidine x HCl x H2O
21,88
L-Hydroxyproline
10,00
L-Isoleucine
20,00
L-Leucine
60,00
L-Lysine x HCl
70,00
L-Méthionine
15,00
L-Phénylalanine
25,00
L-Proline
40,00
L-Sérine
25,00
L-Thréonine
30,00
L-Tryptophane
10,00
L-Tyrosine
40,00
L-Valine
25,00
Vitamines
acide 4-Amino benzoïque
0,05
Acide ascorbique
0,05
D(+)-Biotine
0,01
Calciférol
0,10
D-Pantothénate de calcium
0,01
Chlorure de choline
0,50
Acide folique
0,01
myo-Inositol
0,05
Ménadione
0,01
Acide nicotinique
0.025
Nicotinamide
0.025
Pyridoxal x HCl
0.025
Pyridoxol x HCl
0.025
Riboflavine
0,01
Sel disodique de DL-α-Tocophérol phosphate
0,01
Thiamine x HCl
0,01
Vitamine A acétate
0,14
L'IMDM est bien adapté aux cultures cellulaires à haute densité et à prolifération rapide, notamment les cellules Jurkat, COS-7 et les macrophages. Les différentes modifications de l'IMDM disponibles pour une gamme d'applications de culture cellulaire peuvent être trouvées en utilisant l'outil de sélection des milieux. Les milieux liquides fournissent des nutriments essentiels pour toutes les applications de culture cellulaire. Chacun de nos milieux de culture cellulaire de haute qualité est fabriqué selon la formule initialement publiée ou selon les modifications nécessaires à la performance et à la stabilité du milieu de culture.
IMDM vs. DMEM
L'IMDM contient du nitrate de potassium au lieu du nitrate ferrique, de l'HEPES et du pyruvate de sodium. Les composants supplémentaires de l'IMDM le rendent plus adapté aux types de cellules spécialisées et aux applications spécifiques que le DMEM.
IMDM vs. RPMI
L'IMDM et le RPMI ont des formulations différentes qui peuvent être pertinentes pour la stimulation PMA/ionomycine. Une différence significative est la concentration de Ca2+. Alors que le RPMI contient 0,42 mM de Ca2+, l'IMDM en contient 1,49 mM.
Contrôle de qualité
pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants
mg/L
Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2 H2O
219,00
Chlorure de potassium
330,00
Nitrate de potassium
0.076
Sulfate de magnésium anhydre
97,73
Chlorure de sodium
4,505.00
Dihydrogénophosphate de sodium anhydre
109,00
Sélénite de sodium
0,02
Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
4,500.00
HEPES
5,958.00
Pyruvate de sodium
110,00
Rouge de phénol
15,00
Acides aminés
L-Alanine
25,00
L-Arginine x HCl
84,00
L-Asparagine x H2O
25,00
Acide L-aspartique
30,00
L-Cystine x 2HCl
91,24
L-Glutamine
584,00
Acide L-Glutamique
75,00
Glycine
30,00
L-Histidine x HCl x H2O
42,00
L-Isoleucine
104,80
L-Leucine
104,80
L-Lysine x HCl
146,20
L-Méthionine
30,00
L-Phénylalanine
66,00
L-Proline
40,00
L-Sérine
42,00
L-Thréonine
95,20
L-Tryptophane
16,00
L-Tyrosine x 2Na
104,20
L-Valine
93,60
Vitamines
D(+)-Biotine
0.013
D-Pantothénate de calcium
4,00
Chlorure de choline
4,00
Acide folique
4,00
myo-Inositol
7,20
L'un de ses avantages notables est sa capacité à soutenir la croissance cellulaire sans nécessiter de supplémentation en sérum. Cela élimine les interférences potentielles causées par les composants sériques, garantissant ainsi des résultats expérimentaux cohérents et fiables. En fournissant un environnement de culture sans sérum, le milieu F-12 de Ham's offre aux chercheurs un plus grand contrôle sur leurs recherches.
Une autre caractéristique clé du milieu Ham's F-12 est son aptitude à l'ensemencement d'une seule cellule. Il s'agit donc d'un excellent choix pour une variété de lignées cellulaires, y compris les cellules CHO, les cellules pulmonaires et les cellules L de souris. La composition optimisée en nutriments du milieu facilite l'attachement et la croissance efficaces des cellules individuelles, ce qui permet l'établissement de cultures cellulaires homogènes avec une meilleure reproductibilité.
De plus, le milieu Ham's F-12 est reconnu comme le milieu préféré pour le test de toxicité clonale (CTA). Cet essai joue un rôle essentiel dans l'évaluation des effets cytotoxiques des substances sur les cellules. En utilisant le milieu Ham's F-12 dans le CTA, les chercheurs peuvent évaluer avec précision l'impact de divers composés ou traitements sur des cellules individuelles, ce qui permet d'obtenir des informations précieuses sur les profils toxicologiques.
Contrôle de qualité
pH = 7,2 +/
- 0,02 à 20-25°C.
Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants
mg/L
Sels inorganiques
Chlorure de calcium x 2H2O
44,00
Sulfate de cuivre(II) x 5H2O
0,00
Sulfate de fer (II) x 7H2O
0,83
Chlorure de magnésium x 6H2O
122,00
Chlorure de potassium
223,65
Chlorure de sodium
7599,00
hydrogénophosphate de di-sodiumanhydre
142,04
Sulfate de zinc x 7H2O
0,86
Autres composants
D(+)-Glucose anhydre
1801,60
Hypoxanthine
4,08
Acide linoléique
0,08
Acide DL-α-Lipoïque
0,21
Rouge de phénol
1,20
Putrescine x 2HCl
0,16
Pyruvate de sodium
110,00
Thymidine
0,73
NaHCO3
1176,00
Acides aminés
L-Alanine
8,91
L-Arginine x HCl
210,70
L-Asparagine x H2O
15,01
Acide L-aspartique
13,31
L-Cystéine x HCl x H2O
35,12
L-Alanyl-L-Glutamine
217,30
Acide L-Glutamique
14,71
Glycine
7,51
L-Histidine x HCl x H2O
20,96
L-Isoleucine
3,94
L-Leucine
13,12
L-Lysine x HCl
36,54
L-Méthionine
4,48
L-Phénylalanine
4,96
L-Proline
34,53
L-Sérine
10,51
L-Thréonine
11,91
L-Tryptophane
2,04
L-Tyrosine
5,44
L-Valine
11,71
Vitamines
D(+)-Biotine
0,01
D-Pantothénate de calcium
0,24
Chlorure de choline
13,96
Acide folique
1,32
myo-Inositol
18,02
Nicotinamide
0,04
Pyridoxine x HCl
0,06
Riboflavine
0,04
Thiamine x HCl
0,34
Vitamine B12
1,36
Le DMEM se distingue des autres milieux par sa composition unique. Il contient une concentration impressionnante d'acides aminés et de vitamines, multipliée par quatre par rapport au milieu minimal essentiel d'Eagle. Initialement développé avec un faible taux de glucose (1 g/L) et du pyruvate de sodium, le DMEM est fréquemment utilisé avec des taux de glucose plus élevés, avec ou sans pyruvate de sodium. Notamment, le DMEM ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance, ce qui nécessite une supplémentation. Pour obtenir une croissance optimale, une approche courante consiste à compléter le DMEM avec 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). En outre, le DMEM utilise un système tampon de bicarbonate de sodium, nécessitant un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologique.
Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est très apprécié parmi les milieux définis pour la culture de cellules et de tissus, car il répond aux besoins de croissance de divers phénotypes de cellules adhérentes. Il surpasse le milieu Eagle original, mis au point dans les années 1950 pour la culture de cellules de poulet, grâce à une formulation supplémentaire améliorée connue sous le nom de modification de Dulbecco. Cette modification multiplie par quatre la teneur en certains acides aminés et en vitamines par rapport au milieu d'origine.
Dans le domaine de la culture cellulaire, le DMEM joue un rôle essentiel en tant que milieu de croissance pour différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. Les chercheurs utilisent également la version modifiée du DMEM pour un large éventail d'applications de recherche, telles que la découverte de médicaments, l'ingénierie tissulaire et l'étude des voies de signalisation cellulaire.
Contrôle de la qualité
Filtré stérilement
Stockage et durée de conservation
Stocker entre +2°C et +8°C, à l'abri de la lumière.
Après ouverture, conserver à 4°C et utiliser dans les 6-8 semaines.
Conditions d'expédition
Température ambiante
Entretien
Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. Éviter la congélation et le réchauffement fréquent jusqu'à +37°C, car cela réduit la qualité du produit.
Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37°C ou utiliser des sources de chaleur non contrôlées telles que les micro-ondes.
Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant de l'utiliser.
Composition
Catégorie
Composants
Concentration (mg/L)
Acides aminés
Glycine
30.00
L-Arginine HCl
84.00
L-Cystine 2 HCl
62.57
L-Glutamine
584.00
L-Histidine HClH2O
42.00
L-Isoleucine
105.00
L-Leucine
105.00
L-Lysine HCl
146.00
L-Méthionine
30.00
L-Phénylalanine
66.00
L-Sérine
42.00
L-Thréonine
95.00
L-Tryptophane
16.00
L-Tyrosine 2 Na 2H2O
103.79
L-Valine
94.00
Vitamines
Chlorure de choline
4.00
D-Pantothénate de calcium
4.00
Acide folique
4.00
myo-Inositol
7.20
Nicotinamide
4.00
Pyridoxal HCl
4.00
Riboflavine
0.40
Thiamine HCl
4.00
Sels inorganiques
CaCl2 2H2O
265.00
Fe(NO3)3 9H2O
0.10
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
NaCl
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
Autres composants
D-Glucose
4500.00
Sel de sodium de rouge de phénol
15.90
Pyruvate de sodium
110.00