Les cellules Hep2 et leur rôle dans la recherche sur le cancer du larynx
Lescellules Hep 2 sont un modèle in vitro essentiel, largement utilisé dans les domaines de la recherche biomédicale, tels que la rhumatologie, la recherche sur le cancer et l'immunologie. Provenant d'un carcinome laryngé, ces cellules humaines ont permis d'élucider le tissu d'origine et les caractéristiques spécifiques des néoplasmes laryngés. Leur importance est bien reconnue dans la recherche translationnelle sur le cancer, où elles ont grandement contribué à notre compréhension de la nature laryngée et de l'origine des cancers, marquant une présence substantielle dans les publications sur la recherche sur le cancer du larynx [1].
Origine et caractéristiques générales des cellules Hep 2
L'origine et les caractéristiques générales d'une lignée cellulaire définissent son applicabilité en recherche. Cette section vous aidera à connaître l'origine et certaines caractéristiques importantes des cellules Hep 2. Par exemple, vous découvrirez : Qu'est-ce que la lignée cellulaire HEp-2 ? Quelle est la source des cellules Hep 2 ? Et quelle est la morphologie de Hep 2 ?
- Hep 2, une lignée de cellules épithéliales humaines immortelles, a été décrite pour la première fois par H.W. Toolan en tant que cellules de carcinome laryngé en 1954. Cependant, il a été récemment rapporté que la lignée cellulaire Hep 2 est composée de cellules d'adénocarcinome cervical et provient de la contamination de la lignée cellulaire Hela [2].
- Les cellules Hep 2 contiennent des chromosomes marqueurs Hela et sont positives pour la kératine et les séquences d'ADN du papillomavirus humain, comme le confirment respectivement la coloration par immunoperoxydase et la PCR.
- La lignée cellulaire Hela dérivée Hep 2 possède une morphologie de type épithélial.
- La lignée cellulaire Hep 2 présente des abrasions chromosomiques structurelles et numériques avec un caryotype quasi-triploïde [3].
Lignée cellulaire Hep 2 : Informations sur la culture
Avant de travailler avec une lignée cellulaire, il faut connaître les points clés suivants pour sa culture. Ces informations peuvent être utiles pour cultiver et maintenir efficacement la lignée cellulaire. Vous devez savoir Quel est le temps de doublement des cellules HEp-2 ? Les cellules Hep-2 sont-elles adhérentes ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules Hep2 ?
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Temps de doublement de la population : |
Le temps de doublement rapporté pour les cellules Hep 2 est d'environ 40 heures. |
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Adhérentes ou en suspension : |
Les cellules Hep 2 sont adhérentes et se développent en monocouches. |
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Densité d'ensemencement : |
Une densité d'ensemencement de 1 x104 cellules/cm2 est idéale pour la culture des cellules Hep 2. Pour l'ensemencement, les cellules Hep 2 adhérentes sont rincées avec une solution 1 x PBS, suivie d'une incubation avec la solution de dissociation Accutase. Après 8-10 minutes d'incubation à température ambiante, les cellules sont remises en suspension dans le milieu et centrifugées. Les cellules collectées sont ensuite réparties dans du milieu frais et versées dans de nouveaux flacons pour la culture. |
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Milieu de croissance : |
L'EMEM ou le milieu minimal essentiel d'Eagle est utilisé pour la culture des cellules Hep 2. Ce milieu est supplémenté avec 10% de FBS, 1,0 g/L de glucose, 2,2 g/L de NaHCO3, 2,0 mM de L-glutamine, 1% de NEAA, et 1 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire idéale. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine. |
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Conditions de croissance : |
Comme d'autres lignées cellulaires de mammifères, Hep 2 est également cultivée dans un incubateur humidifié à une température de 37°C et avec un apport continu de 5% de CO2. |
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Stockage : |
Les cellules Hep 2 peuvent être conservées dans des congélateurs électriques à très basse température (inférieure à -150 °C) ou dans de l'azote liquide en phase vapeur pour un stockage à long terme. |
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Processus et milieu de congélation : |
Les milieux de congélation recommandés pour les cellules Hep 2 sont CM-1 ou CM-ACF. Les cellules doivent être congelées en utilisant un processus de congélation lent qui permet une baisse progressive de la température de 1 °C et protège la viabilité des cellules. |
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Processus de décongélation : |
Le flacon de cellules congelées est rapidement décongelé par agitation dans un bain-marieà 37°Cjusqu'à ce qu'il ne reste plus qu'un petit amas de glace. Les cellules sont ensuite ajoutées à un milieu frais et centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Ensuite, le culot cellulaire est remis en suspension dans le milieu et les cellules sont distribuées dans des flacons de culture. Les cellules doivent reposer pendant près de 24 heures pour adhérer. |
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Niveau de biosécurité |
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est recommandé pour la manipulation et l'entretien des cultures de cellules Hep 2. |
Avantages et limites des cellules Hep 2
Presque toutes les lignées cellulaires présentent une combinaison unique d'avantages et de limites qui contribuent à leur utilisation dans le domaine de la recherche. Cette section décrit quelques avantages et inconvénients principaux associés à la lignée cellulaire Hep 2.
Avantages
Les principaux avantages de la lignée cellulaire Hep 2 sont les suivants :
- Origine humaine : Hep 2 est dérivée de cellules épithéliales humaines, ce qui en fait un modèle in vitro précieux pour l'étude des maladies humaines et des infections virales
- Détection des ANA : La lignée cellulaire Hep 2 possède un réseau de protéines natives qui présente de nombreux antigènes, ce qui en fait un excellent substrat pour la détection des anticorps antinucléaires (ANA). Cette caractéristique permet un dépistage spécifique et très sensible des ANA dans le sérum, ce qui en fait un outil de diagnostic crucial pour l'identification des maladies du tissu conjonctif
Limites
- Anomalies chromosomiques : Les cellules Hep 2 présentent de multiples anomalies chromosomiques numériques et structurelles. Ces anomalies peuvent avoir un impact sur le comportement des cellules et limiter leur applicabilité dans certaines expériences de laboratoire
- Tumorigénicité : Hep 2, une lignée de cellules épithéliales humaines dérivées de tumeurs, peut présenter des anomalies génétiques typiquement absentes dans les cellules épithéliales. Par conséquent, l'utilisation des cellules Hep 2 pourrait être limitée dans des études spécifiques axées sur la physiologie cellulaire normale.
Extension des applications de la lignée cellulaire Hep 2 dans la recherche biomédicale
La lignée cellulaire Hep 2 est un modèle exemplaire pour une multitude d'applications en recherche biomédicale. Réputées pour leur polyvalence, ces cellules jouent un rôle essentiel dans les expériences in vitro, allant de l'analyse des récepteurs à l'étude de maladies complexes.
Exploration des mécanismes tumorigènes et des cibles thérapeutiques avec les cellules Hep 2
Les cellules Hep 2, étant tumorigènes, sont essentielles pour explorer les subtilités de la biologie du cancer. Elles permettent de comprendre les voies de signalisation du cancer, de réaliser des études mécanistiques et constituent un pilier du criblage et de l'évaluation des médicaments anticancéreux. Par exemple, une étude perspicace a utilisé Hep 2 pour délimiter l'influence du miARN-33a sur la prolifération des cellules cancéreuses. Les résultats ont mis en évidence les effets antiprolifératifs du miARN-33a par le biais de son interaction avec PIM1, un oncogène connu, ce qui suggère une nouvelle cible thérapeutique [4]. Dans un autre cas, Hep 2 a été utilisé pour évaluer le potentiel thérapeutique des nanoparticules d'oxyde de zinc Marsdenia tenacissima, mettant en évidence leur efficacité antiproliférative et apoptotique [5].
Faire progresser la recherche en virologie grâce aux cellules Hep 2
La sensibilité des cellules Hep 2 à divers virus humains en fait une ressource inestimable pour la recherche virologique. Elles ont été utilisées efficacement dans l'expression des gènes viraux du SRAS-CoV-2 pour élucider l'interaction complexe entre le virus et les mécanismes cellulaires de l'hôte [6]. Cette application est particulièrement cruciale à l'heure actuelle, où la compréhension et la lutte contre les infections virales telles que COVID-19 constituent une priorité mondiale.
Déchiffrer les fonctions cellulaires : Manipulation de gènes dans les cellules Hep 2
L'adaptabilité de la lignée cellulaire Hep 2 aux manipulations génétiques souligne son utilité dans les études mécanistiques. Les chercheurs tirent parti de cette caractéristique pour moduler l'expression des gènes et élucider le rôle de gènes spécifiques dans les fonctions cellulaires. Une étude notable a porté sur la surexpression de la protéine de liaison à l'ARN RBM6 dans les cellules Hep 2, ce qui a facilité l'étude de son potentiel suppresseur de tumeurs, fournissant ainsi des informations précieuses sur les fondements moléculaires du cancer [7].
Améliorer le diagnostic des maladies grâce aux applications des lignées cellulaires Hep 2
Au-delà de ces domaines de recherche, les cellules Hep 2 sont reconnues pour leurs capacités de diagnostic, en particulier pour la détection des ANA, qui sont essentiels dans le diagnostic des maladies auto-immunes telles que le lupus érythémateux disséminé. La précision avec laquelle les cellules Hep 2 peuvent présenter les ANA facilite le diagnostic et la mise au point de traitements ciblés, ce qui nous permet de mieux comprendre les pathologies auto-immunes et d'améliorer les soins aux patients.
Grâce à ces diverses applications, les cellules Hep 2 ont contribué de manière significative aux progrès de la recherche translationnelle sur le cancer, à l'étude des infections virales et à l'exploration des mécanismes cellulaires. Leur contribution à la génération de données cliniquement pertinentes est inestimable, confirmant leur rôle indispensable tant en laboratoire qu'en clinique. Alors que la recherche continue d'évoluer, la lignée cellulaire Hep 2 restera certainement au premier plan, contribuant à la découverte de nouveaux traitements et élargissant notre connaissance de la santé et des maladies humaines.
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Cellules Hep 2 : Publications de recherche
Voici quelques publications de recherche intéressantes et les plus citées sur les cellules Hep 2.
- La synthèse de nanoparticules d'oxyde de zinc à partir de Marsdenia tenacissima inhibe la prolifération cellulaire et induit l'apoptose dans les cellules cancéreuses du larynx (Hep-2)
Cet article publié dans le Journal of Photochemistry and Photobiology B : Biology (2019) a exploré le potentiel anticancéreux des nanoparticules d'oxyde de zinc Marsdenia tenacissima biosynthétisées dans la lignée cellulaire Hep 2. - Des nanoparticules PLGA bioformulées chargées d'hespéridine contrecarrent la voie apoptotique intrinsèque médiée par les mitochondries dans les cellules cancéreuses
Cet article a été publié dans le Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials en 2021. Cette étude a examiné les propriétés anticancéreuses des nanoparticules bio-formulées chargées d'hespéridine et d'acide poly (lactique-co-glycolique) (PLGA) dans les cellules Hep 2. - Activité antivirale de l'extrait éthanolique de Lophatherum gracile contre l'infection par le virus respiratoire syncytial
Cette publication dans le Journal of Ethnopharmacology en 2019 a utilisé des cellules Hep 2 pour étudier l'infection par le virus respiratoire syncytial et cribler des médicaments antiviraux contre elle. L'étude rapporte le potentiel antiviral prometteur de l'extrait d'éthanol d'une plante médicinale, Lophatherum gracile, contre l'infection par le virus respiratoire syncytial. - Évaluation des extraits aqueux de quatre plantes aromatiques pour leur activité contre l'adhésion de Candida albicans aux cellules épithéliales humaines HEp-2
Cette recherche est publiée dans Gene Reports (2020). Cette étude a exploré le potentiel inhibiteur des extraits aqueux de quatre plantes aromatiques contre l'adhésion de Candida albicans aux cellules épithéliales humaines Hep 2. - La protéine de signalisation 1 inductible par Wnt1 régule la glycolyse et la chimiorésistance du carcinome épidermoïde laryngé via la voie YAP1/TEAD1/GLUT1
Cette étude a été publiée dans le Journal of Cellular Physiology en 2019. L'étude rapporte que la Wnt1-inducible signalling protein 1 (WISP1) interagit avec la voie YAP1/TEAD1/GLUT1 et régule le métabolisme du glucose et la chimiorésistance dans la lignée cellulaire Hep 2.
Ressources pour la lignée cellulaire Hep2 : Protocoles, vidéos et autres
Hep 2 est une lignée cellulaire bien connue. Il existe plusieurs ressources disponibles sur la lignée cellulaire Hep 2.
- Sous-culture de la lignée cellulaire Hep2 : Cette vidéo est un guide étape par étape de la subculture des cellules Hep 2.
- Dépistage des ANA dans les cellules Hep 2 : Cette vidéo explique le dépistage des anticorps antinucléaires (ANA) à l'aide de la lignée cellulaire Hep 2.
- Culture des cellules Hep 2 : Ce lien contient des informations de base sur la culture des cellules Hep 2. Il comprend la division des cellules, la congélation et la décongélation des cellules.
Questions fréquemment posées sur les cellules HEp-2 dans la recherche biomédicale
Références
- Fusi, M. et S. Dotti, Adaptation of the HEp-2 cell line to totally animal-free culture systems and real-time analysis of cell growth. Biotechniques, 2021. 70(6) : p. 319-326.
- Gorphe, P., A comprehensive review of Hep-2 cell line in translational research for laryngeal cancer. Am J Cancer Res, 2019. 9(4) : p. 644-649.
- Wang, M., et al, Cancer-associated fibroblasts in a human HEp-2 established laryngeal xenografted tumor are not derived from cancer cells through epithelial-mesenchymal transition, phenotypically activated but karyotypically normal. PLoS One, 2015. 10(2) : p. e0117405.
- Karatas, O.F., Potentiel antiprolifératif du miR-33a dans les cellules Hep-2 du cancer du larynx via le ciblage de PIM1. Head Neck, 2018. 40(11) : p. 2455-2461.
- Wang, Y., et al, Synthèse de nanoparticules d'oxyde de zinc à partir de Marsdenia tenacissima inhibe la prolifération cellulaire et induit l'apoptose dans les cellules cancéreuses du larynx (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B : Biology, 2019. 201 : p. 111624.
- Zhang, J., et al, A systemic and molecular study of subcellular localization of SARS-CoV-2 proteins. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1) : p. 269.
- Wang, Q., et al, RNA-binding protein RBM6 as a tumor suppressor gene represses the growth and progression in laryngocarcinoma. Gene, 2019. 697 : p. 26-34.
