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Les cellules Hep2 et leur rôle dans la recherche sur le cancer du larynx

Les cellules Hep 2 constituent un modèle in vitro essentiel largement utilisé dans divers domaines de la recherche biomédicale, tels que la rhumatologie, la recherche sur le cancer et l'immunologie. Issu d'un carcinome du larynx, ce type de cellules humaines a joué un rôle essentiel dans l'élucidation du tissu d'origine et des caractéristiques spécifiques des néoplasmes laryngés. Leur importance est largement reconnue dans la recherche translationnelle sur le cancer, où elles ont grandement contribué à notre compréhension de la nature et de l'origine des cancers du larynx, occupant une place prépondérante dans les publications consacrées à la recherche sur le cancer du larynx [1].

📋 Lignée cellulaire Hep2 — En bref
Milieu de culture
Le milieu EMEM (milieu minimal essentiel d'Eagle) est utilisé pour cultiver les cellules Hep 2. Ce milieu est complété par 10 % de FBS, 1,0 g/L de glucose, 2,2 g/L de NaHCO3, 2,0 mM de L-glutamine, 1 % de NEAA et 1 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Temps de doublement
Le temps de doublement rapporté pour les cellules Hep 2 est d'environ 40 heures.
Type de croissance
Les cellules Hep 2 sont adhérentes et se développent en monocouches.
Niveau de biosécurité
BSL-1
Disponible auprès de
Cytion — Commander Hep2

Origine et caractéristiques générales des cellules Hep 2

L'origine et les caractéristiques générales d'une lignée cellulaire déterminent son applicabilité dans la recherche. Cette section vous aidera à mieux connaître l'origine et certaines caractéristiques marquantes des cellules Hep 2. Vous découvrirez notamment : Qu'est-ce que la lignée cellulaire HEp-2 ? Quelle est la source des cellules Hep 2 ? Et quelle est la morphologie des cellules Hep 2 ?

  • Hep 2, une lignée cellulaire épithéliale humaine immortelle, a été décrite pour la première fois par H.W. Toolan comme des cellules de carcinome laryngé en 1954. Cependant, il a récemment été rapporté que la lignée cellulaire Hep 2 est composée de cellules d'adénocarcinome cervical et provient d'une contamination de la lignée cellulaire Hela [2].
  • Les cellules Hep 2 contiennent des chromosomes marqueurs Hela et se révèlent positives pour la kératine et les séquences d'ADN du papillomavirus humain, comme l'ont confirmé respectivement la coloration à l'immunoperoxydase et la PCR.
  • La lignée cellulaire Hep 2, dérivée de la lignée Hela, présente une morphologie de type épithélial.
  • La lignée cellulaire Hep 2 présente des aberrations chromosomiques tant structurelles que numériques, avec un caryotype quasi-triploïde [3].

Division de cellules HeLa responsables du cancer du col de l'utérus au microscope.

Lignée cellulaire HEp-2 : informations sur la culture

Avant de travailler avec une lignée cellulaire, il est indispensable de connaître les points clés suivants concernant sa culture. Ces informations peuvent s'avérer utiles pour cultiver et entretenir efficacement la lignée cellulaire. Vous devez savoir : Quel est le temps de doublement des cellules HEp-2 ? Les cellules Hep 2 sont-elles adhérentes ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules Hep 2 ?

 

Temps de doublement de la population :

Le temps de doublement rapporté pour les cellules Hep 2 est d'environ 40 heures.

Adhérentes ou en suspension :

Les cellules Hep 2 sont adhérentes et se développent en monocouches.

Densité d'ensemencement :

Une densité d'ensemencement de 1 x 10 cellules/cm² est idéale pour la culture de cellules Hep 2. Pour l'ensemencement, les cellules Hep 2 adhérentes sont rincées avec une solution PBS 1x, puis incubées avec une solution de dissociation Accutase. Après une incubation de 8 à 10 minutes à température ambiante, les cellules sont remises en suspension dans le milieu de culture et centrifugées. Les cellules recueillies sont ensuite réparties dans du milieu frais et versées dans de nouvelles flacons pour la culture.

Milieu de croissance :

L'EMEM (milieu minimal essentiel d'Eagle) est utilisé pour la culture des cellules Hep 2. Ce milieu est complété par 10 % de FBS, 1,0 g/L de glucose, 2,2 g/L de NaHCO3, 2,0 mM de L-glutamine, 1 % de NEAA et 1 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.

Conditions de culture :

Comme d'autres lignées cellulaires mammifères, Hep 2 est également cultivée dans un incubateur humidifié réglé à une température de 37 °C et avec un apport continu de 5 % de CO2.

Conservation :

Les cellules Hep 2 peuvent être conservées dans des congélateurs électriques à très basse température (inférieure à -150 °C) ou en phase vapeur d'azote liquide pour une conservation à long terme.

Procédé de congélation et milieu :

Les milieux de congélation recommandés pour les cellules Hep 2 sont le CM-1 ou le CM-ACF. Les cellules doivent être congelées selon un processus de congélation lente permettant une baisse progressive de la température de 1 °C et préservant la viabilité cellulaire.

Procédé de décongélation :

Le flacon de cellules congelées est rapidement décongelé par agitation dans un bain-marie à 37 °C jusqu'à ce qu'il ne reste qu'un petit morceau de glace. Les cellules sont ensuite ajoutées à un milieu frais et centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Par la suite, le culot cellulaire est remis en suspension dans le milieu, et les cellules sont réparties dans des flacons de culture. Les cellules doivent reposer pendant près de 24 heures pour adhérer.

Niveau de biosécurité

Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est recommandé pour la manipulation et l'entretien des cultures cellulaires Hep 2.

Hep2 cells

Cellules Hep 2 avant et après avoir atteint la confluence.

Avantages et limites des cellules Hep 2

Presque toutes les lignées cellulaires présentent une combinaison unique d'avantages et de limites qui contribuent à leur utilisation dans le domaine de la recherche. Cette section décrit quelques-uns des principaux avantages et inconvénients associés à la lignée cellulaire Hep 2.

Avantages

Les principaux avantages de la lignée cellulaire Hep 2 sont les suivants :

  • Origine humaine : Hep 2 est dérivée de cellules épithéliales humaines, ce qui en fait un modèle in vitro précieux pour l'étude des maladies humaines et des infections virales.
  • Détection des ANA : La lignée cellulaire Hep 2 possède un réseau de protéines natives présentant de nombreux antigènes, ce qui en fait un excellent substrat pour la détection des anticorps antinucléaires (ANA). Cette caractéristique permet un dépistage spécifique et hautement sensible des ANA dans le sérum, ce qui en fait un outil diagnostique crucial pour l'identification des maladies du tissu conjonctif.

Limites

  • Anomalies chromosomiques : Les cellules Hep 2 présentent de multiples anomalies chromosomiques numériques et structurelles. Ces anomalies peuvent avoir un impact sur le comportement cellulaire et limiter leur applicabilité dans certaines expériences de laboratoire.
  • Tumorigénicité : Hep 2, une lignée cellulaire épithéliale humaine dérivée d'une tumeur, peut présenter des anomalies génétiques généralement absentes des cellules épithéliales. Par conséquent, l'utilisation des cellules Hep 2 pourrait être limitée dans certaines études spécifiques axées sur la physiologie cellulaire normale.

Développement des applications de la lignée cellulaire Hep 2 dans la recherche biomédicale

La lignée cellulaire Hep 2 se distingue comme un modèle exemplaire pour une multitude d'applications dans la recherche biomédicale. Réputées pour leur polyvalence, ces cellules jouent un rôle essentiel dans les expériences in vitro, allant de l'analyse des récepteurs à l'étude de maladies complexes.

Exploration des mécanismes tumorigènes et des cibles thérapeutiques avec les cellules Hep 2

Les cellules Hep 2, étant tumorigènes, sont essentielles pour approfondir les subtilités de la biologie du cancer. Elles fournissent des informations sur les voies de signalisation du cancer et les études mécanistiques, et constituent un pilier du criblage et de l'évaluation des médicaments anticancéreux. Par exemple, une étude approfondie a utilisé les cellules Hep 2 pour mettre en évidence l'influence du miARN-33a sur la prolifération des cellules cancéreuses. Les résultats ont mis en lumière les effets antiprolifératifs du miARN-33a par le biais de son interaction avec PIM1, un oncogène connu, suggérant ainsi une nouvelle cible thérapeutique [4]. Dans un autre cas, les cellules Hep 2 ont été utilisées pour évaluer le potentiel thérapeutique des nanoparticules d'oxyde de zinc de Marsdenia tenacissima, mettant en évidence leur efficacité antiproliférative et apoptotique [5].

Faire progresser la recherche en virologie grâce aux connaissances sur les cellules Hep 2

La sensibilité des cellules Hep 2 à divers virus humains en fait une ressource inestimable pour la recherche virologique. Elles ont été utilisées avec succès pour l'expression de gènes viraux du SARS-CoV-2 afin de démêler l'interaction complexe entre le virus et les mécanismes cellulaires de l'hôte [6]. Cette application est particulièrement cruciale à l'heure actuelle, où la compréhension et la lutte contre les infections virales telles que la COVID-19 constituent une priorité mondiale.

Décrypter les fonctions cellulaires : manipulation génétique des cellules Hep 2

L'adaptabilité de la lignée cellulaire Hep 2 à la manipulation génétique souligne son utilité dans les études mécanistiques. Les chercheurs tirent parti de cette caractéristique pour moduler l'expression génique et élucider les rôles de gènes spécifiques dans les fonctions cellulaires. Une étude notable a porté sur la surexpression de la protéine de liaison à l'ARN RBM6 dans les cellules Hep 2, ce qui a facilité l'étude de son potentiel de suppresseur de tumeur, fournissant des informations précieuses sur les fondements moléculaires du cancer [7].

Améliorer le diagnostic des maladies grâce aux applications de la lignée cellulaire Hep 2

Au-delà de ces domaines de recherche, les cellules Hep 2 sont reconnues pour leurs capacités diagnostiques, en particulier dans la détection des ANA, qui sont essentielles au diagnostic des maladies auto-immunes telles que le lupus érythémateux disséminé. La précision avec laquelle les cellules Hep 2 peuvent mettre en évidence les ANA facilite le diagnostic et le développement de traitements ciblés, améliorant ainsi notre compréhension des pathologies auto-immunes et les soins prodigués aux patients.

Grâce à ces diverses applications, les cellules Hep 2 ont considérablement contribué aux progrès de la recherche translationnelle sur le cancer, à l'étude des infections virales et à l'exploration des mécanismes cellulaires. Leur contribution à la génération de données cliniquement pertinentes est inestimable, confirmant leur rôle indispensable tant en laboratoire qu'en clinique. À mesure que la recherche continue d'évoluer, la lignée cellulaire Hep 2 restera sans aucun doute à l'avant-garde, contribuant à la découverte de nouveaux traitements et élargissant nos connaissances sur la santé et les maladies humaines.

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Cellules Hep 2 : Publications de recherche

Voici quelques publications de recherche intéressantes et parmi les plus citées concernant les cellules Hep 2.

Ressources pour la lignée cellulaire Hep 2 : protocoles, vidéos et plus encore

Hep 2 est une lignée cellulaire bien connue. Il existe plusieurs ressources disponibles consacrées à la lignée cellulaire Hep 2.

Questions fréquemment posées sur les cellules HEp-2 dans la recherche biomédicale

Les cellules HEp-2 sont une lignée cellulaire immortelle dont on pensait à l'origine qu'elle provenait d'un carcinome laryngé, mais qui a ensuite été identifiée comme étant des cellules d'adénocarcinome du col de l'utérus contaminées par des cellules HeLa. Leur origine épithéliale humaine en fait un outil clé dans l'étude de diverses maladies, en particulier dans la recherche sur le cancer, l'immunologie et la virologie, permettant de comprendre les mécanismes de la maladie et les traitements potentiels
Les motifs de coloration des cellules HEp-2 lors de la recherche d'anticorps antinucléaires (ANA) sont essentiels pour diagnostiquer les maladies auto-immunes. Ces motifs permettent d'identifier des auto-anticorps spécifiques, ce qui facilite le diagnostic de maladies telles que le lupus érythémateux disséminé, et constituent une pierre angulaire de l'immunologie clinique en raison de leur rôle dans la compréhension des pathologies auto-immunes
Les cellules HEp-2 sont largement utilisées pour la détection des ANA en raison de leur capacité à présenter une large gamme d'antigènes, ce qui permet un dépistage sensible et spécifique des ANA dans les échantillons de sérum.Elles sontdonc très utiles pour diagnostiquer les maladies auto-immunes, ce qui souligne leur rôle essentiel dans l'avancement des méthodes de diagnostic en immunologie
Les titres d'ANA dans les cellules HEp-2 indiquent la dilution sérique la plus élevée à laquelle les auto-anticorps restent détectables, ce qui constitue une mesure cruciale pour évaluer la gravité et la progression de la maladie auto-immune.Destitres élevés suggèrent souvent une maladie plus active, ce qui guide les cliniciens dans leurs décisions thérapeutiques et le suivi de la maladie
Issues du carcinome laryngé, les cellules HEp-2 sont essentielles à l'étude des origines et des caractéristiques du cancer du larynx.Leurutilisation dans la recherche translationnelle sur le cancer a permis des avancées significatives dans la compréhension du cancer du larynx, dans le développement de thérapies ciblées et dans l'enrichissement de la littérature sur le cancer du larynx
Initialement considérées comme provenant d'un carcinome laryngé, les cellules HEp-2 ont ensuite été identifiées comme des cellules d'adénocarcinome cervical, une révélation qui a mis en évidence la complexité des origines des lignées cellulaires, mais qui n'a pas diminué leur valeur dans la recherche en raison de leurs caractéristiques uniques et de leurs applications dans l'étude des comportements et des pathologies des cellules épithéliales
Malgré leur origine commune, les cellules HeLa et HEp-2 présentent des propriétés distinctes.Laprolifération rapide de HeLa la rend adaptée à un large éventail d'études, tandis que les caractéristiques uniques de HEp-2, en particulier dans la recherche sur les cellules épithéliales, offrent des avantages spécifiques dans l'étude des pathologies et des mécanismes des cellules épithéliales
La réussite de la culture des cellules HEp-2 implique des conditions spécifiques telles que l'utilisation d'EMEM complété par du FBS et le maintien d'un environnement contrôlé à 37°C avec 5% de CO2. La connaissance des conditions de culture, y compris la densité d'ensemencement et la composition des milieux, est essentielle pour une utilisation efficace dans la recherche
Les cellules HEp-2 présentent de nombreux avantages, notamment leur pertinence dans l'étude des maladies humaines et leur utilité dans la détection des ANA.Cependant, leurs anomalies chromosomiques et leur nature tumorigène peuvent limiter leur applicabilité dans certains domaines de recherche, ce qui nécessite un examen attentif de leur utilisation
Les cellules HEp-2 ont élargi les horizons de la recherche dans divers domaines biomédicaux, du dépistage des médicaments à l'étude des mécanismes de la maladie.Leurpolyvalence et leur contribution à la compréhension et au traitement des maladies soulignent leur rôle inestimable dans la recherche fondamentale et translationnelle, promettant une pertinence continue dans les efforts scientifiques futurs

Références

  1. Fusi, M. et S. Dotti, Adaptation de la lignée cellulaire HEp-2 à des systèmes de culture totalement exempts de composants d'origine animale et analyse en temps réel de la croissance cellulaire. Biotechniques, 2021. 70(6) : p. 319-326.
  2. Gorphe, P., Revue exhaustive de la lignée cellulaire Hep-2 dans la recherche translationnelle sur le cancer du larynx. Am J Cancer Res, 2019. 9(4) : p. 644-649.
  3. Wang, M., et al., Les fibroblastes associés au cancer dans une tumeur laryngée xénogreffée établie à partir de la lignée cellulaire humaine HEp-2 ne proviennent pas de cellules cancéreuses par transition épithélio-mésenchymateuse ; ils sont activés sur le plan phénotypique mais normaux sur le plan caryotypique. PLoS One, 2015. 10(2) : p. e0117405.
  4. Karatas, O.F., Potentiel antiprolifératif du miR-33a dans les cellules Hep-2 du cancer du larynx via le ciblage de PIM1. Head Neck, 2018. 40(11) : p. 2455-2461.
  5. Wang, Y., et al., La synthèse de nanoparticules d'oxyde de zinc à partir de Marsdenia tenacissima inhibe la prolifération cellulaire et induit l'apoptose dans les cellules cancéreuses du larynx (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
  6. Zhang, J., et al., Étude systémique et moléculaire de la localisation subcellulaire des protéines du SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1) : p. 269.
  7. Wang, Q., et al., La protéine de liaison à l'ARN RBM6, en tant que gène suppresseur de tumeur, réprime la croissance et la progression du carcinome du larynx. Gene, 2019. 697 : p. 26-34.

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