NIH-3T3 rakud: NIH-3T3 fibroblastide uuringute ja rakenduste edendamine

NIH-3T3 rakuliinist, mille Howard Green ja George Todaro rajasid 1962. aastal New Yorgi ülikooli meditsiinikooli 17 päeva vanuse Šveitsi albiino hiire embrüo koest, on saanud biomeditsiiniuuringute põhiressurss. NIH-3T3 rakud, mis on tuntud oma kõrge vastuvõtlikkuse poolest leukeemiaviiruse ja sarkoomiviiruse fookuste moodustamise suhtes, on kriitiline vahend paljude teaduslike uuringute, sealhulgas viirusliku onkoloogia uuringute, geeniekspressiooni analüüsi ja rakkude kasvudünaamika uurimise jaoks. Nomenklatuur "3T3" kajastab rakukultuurimeetodit, tähistades "3-päevase ülekande" intervalli algse külvitihedusega 3 × 10^5 rakku, rõhutades standardiseeritud tingimusi, milles neid rakke esmakordselt kasvatati ja laiendati.

NIH-3T3 rakkude erinevad morfoloogiad ja rakendused

Üks NIH-3T3 rakkude iseloomulikke omadusi on nende morfoloogiline kohanemisvõime, mis varieerub oluliselt sõltuvalt kultiveerimise konfluentsusest. Väiksema tiheduse korral on neil fibroblastidel spindlikujuline, üksikute rakkude struktuur, mis areneb tihedaks, keerlevaks mustriks, kui populatsioon saavutab konfluentsuse. NIH-3T3 rakud, mille keskmine läbimõõt on umbes 18 μm, pakuvad mitmekülgset mudelit põhjalikeks rakubioloogilisteks uuringuteks, mis ulatuvad kudede parandamise mehhanismidest kuni rakutsükli regulatsiooni keeruliste radadeni.

Teabe kasvatamine

Šveitsi albiino hiir laboris.

NIH 3T3 rakkude kasutamise plussid ja miinused

Eelised

• Transfektsiooni tõhusus: NIH-3T3 rakud on tuntud oma kõrge transfektsioonikiiruse poolest ja sobivad suurepäraselt nii transientse kui ka stabiilse geeniekspressiooni uuringuteks, mis võimaldavad erinevaid transfektsioonitehnikaid.

• Söödakihi kasulikkus: Need rakud on sageli toetavaks söödakihiks selliste rakkude nagu keratinotsüüdid ja tüvirakud kooskultuurides, kuna nad vabastavad kasvufaktoreid, mis soodustavad kooskultuuritud rakkude kasvu.

• Tüvirakkude uurimine: NIH-3T3 rakud on eelistatud valik tüvirakkude uurimisel, kuna need indutseerivad pluripotentsust ilma geneetilise modifikatsioonita ja pakuvad soodsat keskkonda tüvirakkude diferentseerimiseks.

• Kultuuri stabiilsus: NIH-3T3 rakud on tuntud oma stabiilsuse ja spontaanse transformatsiooni madala sageduse poolest. Siiski võivad NIH-3T3 rakud teatud tingimustel või pärast kokkupuudet spetsiifiliste onkogeenide või mutageenidega spontaanselt transformeeruda. See transformatsioon võib viia vähkkasvaja omaduste omandamiseni, nagu kontrollimatu kasv, kontakti inhibeerimise kadumine ja võime moodustada kasvajaid, kui neid süstitakse vastuvõtlikele peremeestele.

Puudused

• Ebajärjekindel rakkude suurus: NIH-3T3-rakkude piklik, spindlilaadne morfoloogia võib varieeruda, mis raskendab pildianalüüsi katsetes.

• Nakkusele vastuvõtlikkus: Need rakud on altid bakteriaalsetele ja mükoplasmainfektsioonidele, kui neid ei hoitakse rangetes aseptilistes tingimustes, mis võib mõjutada katsete terviklikkust.

NIH-3T3 rakkude uurimisrakendused

• DNA transfektsiooni uuringud: NIH-3T3 rakkude vastupidavus muudab nad ideaalseks erinevate geenide sisestamiseks ja nende funktsiooni uurimiseks, mida on näidatud selliste valkude nagu NAB2-STAT6 ja nende rolli uurimiseks rakuprotsessides.

• Rakupõhised uuringud: Nende usaldusväärsus laieneb erinevatele katsetele, sealhulgas elujõulisuse, apoptoosi ja fookuste moodustamise katsetele, mis annavad ülevaate raku reaktsioonidest erinevates katsetingimustes.

• Rakkutsükli uuringud: Rakuliini lihtne rakutsükliga manipuleerimine seerumi kaudu muudab selle tõhusaks mudeliks rakutsükli regulatsiooni ja selle kõrvalekallete uurimiseks haiguste kontekstis.

Tõsta oma teadusuuringuid NIH-3T3 rakkudega

Tähtsamad uuringud, milles osaleb fibroblastide rakuliin NIH 3T3

Rakuliin NIH-3T3 on olnud kesksel kohal paljudes teadusprojektides, mis hõlmavad rakubioloogia erinevaid tahke. Allpool on esitatud mõned olulised uuringud, milles on kasutatud neid rakke:

• NAB2-STAT6 fusioonivalgu uurimine: See uuring on avaldatud ajakirjas Biochemical and Biophysical Research Communications ja uurib, kuidas NAB2-STAT6 fusioonvalk mõjutab NIH-3T3 rakke, eriti selle rolli rakkude kasvu ja migratsiooni suurendamisel EGR-1 reguleerimise kaudu
• APOBEC3 ja hiirte leukeemiaviiruse uurimine: See uuring ajakirjas Virology uurib AKV hiire leukeemiaviiruse hüpermutatsiooni NIH-3T3 rakkudes, mis ekspresseerivad hiire APOBEC3 geeni
• Epigeneetiliste ravimite antimetastaatilise potentsiaali hindamine: Oncotargets and Therapy: selles uuringus hinnatakse hüdralasiini ja valproehappe antimetastaatilist toimet RAS-transformeeritud NIH-3T3 rakkudele
• Baikaliini mõju NIH-3T3 proliferatsioonile ja kollageeni sünteesile: Selles uuringus kasutatakse NIH-3T3 rakke, et uurida, kuidas Baicalein mõjutab rakkude proliferatsiooni ja kollageeni tootmist miR-9/insuliinilaadse kasvufaktori-1 telje moduleerimise kaudu
• Riboflaviini ammendumise ja tuumorigeneesi uurimine: Selles uuringus esitatakse tulemused selle kohta, kuidas riboflaviini puudus NIH-3T3 rakkudes aitab kaasa kasvajate tekkimisele, soodustades rakkude proliferatsiooni ja rakutsükli geenide düsreguleerimist

Olulised ressursid NIH-3T3 rakkude uurimiseks

NIH-3T3 rakkudega töötamisest huvitatud teadlastele on kättesaadavad mitmesugused ressursid, mis juhatavad kultiveerimis- ja katseprotokollid:

• Spheroidide moodustamine NIH-3T3 rakkudes: See video annab üksikasjaliku ülevaate sferoidide moodustamise kohta, mis on 3D rakukultuuritehnika, mis koondab NIH-3T3 rakud klastriteks, pakkudes uuringuteks füsioloogiliselt asjakohasemat mudelit
• NIH-3T3 rakkude kasvu jälgimine: See video näitab NIH-3T3 rakkude kasvudünaamikat 65 tunni jooksul, näidates rakkude paljunemist reaalajas, kasutades JuLI Br elusrakkude pildistamissüsteemi

Nende ressursside eesmärk on toetada teie uurimistegevust NIH-3T3 rakkudega, andes aluse edukatele katsetele ja avastustele.

Viited

1. Rahimi, A.M., M. Cai ja S. Hoyer-Fender, NIH3T3 fibroblastide rakuliini heterogeensus. Cells, 2022. 11(17): p. 2677.
2. Leibiger, C., et al., NIH 3T3 rakuliini esimene molekulaartsütogeneetiline kõrgresolutsiooniline iseloomustus mürilise mitmevärvilise ribastamise abil. Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4): p. 306-312.
3. Wang, H.-X., et al., Erinevate feeder-kihide võrdlev analüüs koos 3T3 fibroblastidega küülikute limbiliste tüvirakkude kultiveerimiseks. International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7): p. 1021.
4. Wang, Z., et al., Neuronaalsete rakkude diferentseerimine NIH/3T3 fibroblastidest määratletud tingimustes. Development, growth & differentiation, 2011. 53(3): p. 357-365.
5. Park, Y.-S., et al., NAB2-STAT6 fusioonvalk vahendab rakkude proliferatsiooni ja onkogeenset progresseerumist EGR-1 regulatsiooni kaudu. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020. 526(2): p. 287-292.
6. Mattsson, M., Sloppymerase™ ekspressioon NIH/3T3 rakkudes: Exploring the Versatility of an Error Prone Fusion Polymerase. 2021.
7. Sahinturk, V., et al., Acrylamide exerts its cytotoxicity in NIH/3T3 fibroblastide cells by apoptosis. Toxicology and Industrial Health, 2018. 34(7): p. 481-489.
8. Lusi, E.A. ja F. Caicci, Esimese inimese retro-giantviiruse avastamine: Description of its morphology, retroviral kinase and ability to induce tumors in mice. bioRxiv, 2019: p. 851063.
9. Endo, M., et al., E2F1-Ror2signalisatsioon vahendab koordineeritud transkriptsiooni regulatsiooni, et edendada G1/S faasi üleminekutbFGF-stimuleeritudNIH/3T3 fibroblastides. The FASEB Journal, 2020. 34(2): p. 3413-3428.
10. Long, L., et al., Riboflaviini ammendumine soodustab kasvajate teket HEK293T ja NIH3T3 rakkudes, säilitades rakkude proliferatsiooni ja reguleerides rakutsükliga seotud geenide transkriptsiooni. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6): p. 834-843.