MG-63 rakuliin: MG-63 rakkude üksikasjalik juhend osteosarkoomi uuringutes
MG-63 rakud on fibroblastide sarnased inimese osteosarkoomi rakud, mis pakuvad biomeditsiini valdkonnas mitmesuguseid uurimisvõimalusi. See võib hõlmata luuga seotud protsesside, näiteks luu arengu, diferentseerumise jne uurimist. Lisaks on MG-63 rakuliin sobiv in vitro mudel luurakkude elujõulisuse, proliferatsiooni ja adhesiivsuse uurimiseks.
MG-63 rakuliini üldised omadused ja päritolu
Selles artikli osas käsitletakse MG-63 rakuliini päritolu ja üldisi omadusi. Te saate teada: Mis on MG-63 rakuliin? Mis on MG63 rakuliini päritolu? Milline on MG-63 rakkude morfoloogia? Milline on MG-63 rakkude suurus?
- MG-63 on osteoblastide rakuliin, mis pärineb 14-aastase meessoost osteosarkoomiga patsiendi (kaukaasia) luust. A. Billiau ja kolleegid talletasid selle rakuliini 1977. aastal.
- MG-63 rakuliinil on fibroblastide rakkude sarnane morfoloogia.
- Inimese osteosarkoomi rakkudel (MG-63) on hüpotriploidsus. Nende rakkude modaalne kromosoomide arv on 66, mis esineb ligikaudu 44%-l rakupopulatsioonist. Kõrgemat ploidsust on täheldatud ka peaaegu 2%-l rakupopulatsioonist. Lisaks sellele on kõigis rakkudes rohkesti 18-19 markerkromosoomi.
Teave MG-63 rakuliini kasvatamise kohta
Oluline teave rakuliini kultiveerimisnõuete kohta võib teie tööd lihtsustada. Selles artikli osas on loetletud kõik olulised punktid, mis on olulised MG-63 rakkude kultiveerimisel ja hooldamisel. Siit saate teada: Milline on MG-63 rakkude kahekordistumisaeg? Millist kasvukeskkonda kasutatakse MG-63 rakkude puhul? Milline on MG-63 rakkude külvi tihedus?
MG-63 rakkude kasvatamise põhipunktid
|
Kordistumisaeg |
MG-63 rakkude populatsiooni kahekordistumise aeg jääb sõltuvalt kasvatustingimustest vahemikku 28-38 tundi. |
|
Kasvuomadused |
MG-63 on kleepuv rakuliin. |
|
Külvikutihedus |
mG-63 rakkude puhul on soovitatavrakutihedus 1 x104 rakku/cm2 . Adherentsed rakud pestakse 1 x fosfaatpuhvrisoolalahusega (PBS) ilma magneesiumi ja kaltsiumita. Seejärel inkubeeritakse need rakud dissotsiatsioonilahusega (Accutase), lisatakse värske keskkond ja tsentrifuugitakse. Kogutud rakupellet resuspenseeritakse värskes söötmes ja doseeritakse uude kolbi kasvatamiseks. |
|
Kasvukeskkond |
MG-63 rakkude kasvatamiseks kasutatakse DMEM või Ham's F12 keskkonda. Optimaalse rakkude kasvu saavutamiseks võib neid söötmeid täiendada 5% veiste loote seerumi (FBS), 3,0 g/l glükoosi, 2,5 mM L-glutamiini ja 1,2 g/l NaHCO3-ga. Keskkonda tuleb vahetada 2-3 korda nädalas. |
|
Kasvutingimused |
MG-63 rakkude kasvatamiseks on vaja 37 °C temperatuuril niisutatud inkubaatorit ja 5% CO2-ga varustamist. |
|
Säilitamine |
Neid osteoblastitaolisi rakke võib rakkude elujõulisuse säilitamiseks ladustada vedela lämmastiku aurufaasis või temperatuuril alla -150 °C. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond |
MG-63 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF keskkonda. Üldiselt soovitatakse aeglast külmutamist, et vältida rakkude šokki ja kaitsta nende elujõulisust. |
|
Sulatamisprotsess |
Külmutatud rakke inkubeeritakse 40-60 sekundit eelsoojendatud vesivannis (37 kraadi Celsiuse järgi). Rakud resuspenseeritakse värskes kasvukeskkonnas ja valatakse uude kolbi. Pärast 24-tunnist inkubeerimist vahetatakse keskkond välja, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid. |
|
Bioturvalisuse tase |
MG-63 kultuuride käitlemiseks ja hooldamiseks on vaja esimese bioloogilise ohutuse taseme laboratoorset seadistust. |
MG-63 rakuliin: Eelised ja puudused
MG-63 on laialdaselt kasutatav osteoblastide rakuliin. Sellega on seotud mitmeid eeliseid ja puudusi. Siinkohal nimetame mõned peamised MG-63 rakuliini plussid ja miinused.
Eelised
MG-63 rakkude eelised on järgmised:
-
Osteoblastide sarnased omadused
MG-63 rakuliinil on osteoblastilaadsed omadused, mistõttu see sobib luuga seotud protsesside ja haiguste uurimiseks. Seda saab kasutada ka rakkude adhesiivsuse, proliferatsiooni ja elujõulisuse uurimiseks titaanpindadel [1].
-
Transfektsioonikõlblikkus
MG-63 rakke kasutatakse laialdaselt transfektsiooniuuringutes, mis võimaldab uurida geeniekspressiooni, funktsiooni ja rakuprotsesse.
-
Kõrgetasemeline interferooni tootmine
MG-63 rakud on võimelised kõrgetasemeliseks interferooni tootmiseks. Tsükloheksimiidi, polüinosiinhappe-polütsütidüülhappe ja aktinomütsiiniga indutseerituna võivad nad anda 3,7 korda suurema interferoonisaagi cm² kohta kui diploidsed fibroblastid [2].
Puudused
MG-63 B-rakkudega seotud puudused on järgmised:
-
Heterogeensus
MG-63 rakud on rakupopulatsiooni sees heterogeensed, mis võib mõjutada reprodutseeritavust.
-
Kasvaja rakuliin
MG-63 on vähirakuliin ja ei pruugi täielikult esindada rakkude normaalset käitumist ja füsioloogiat, mis piirab selle kasutamist teatavates laboratoorsetes katsetes.
Tellige oma MG-63 rakud juba täna
MG-63 rakkude rakendused
MG-63 rakud on suurepärane uurimisvahend. Nad pakuvad mitmeid paljulubavaid rakendusi teadusuuringute valdkonnas. Siin on loetletud mõned peamised MG-63 rakkude teadusrakendused.
- Luuga seotud protsesside/haiguste uurimine: MG-63 rakud on osteoblastilaadsed (luupõhised) rakud. Seetõttu kasutatakse neid rakke laialdaselt luuhaiguste ja rakuprotsesside, sealhulgas arengu, diferentseerumise ja mineraliseerumise uurimiseks. Lisaks kasutatakse neid rakke laialdaselt luude paranemist soodustavate ravimite sõelumiseks. Uuringutes kasutati MG-63 rakke, et uurida Scutellaria baicalensis 'st saadud roheliselt sünteesitud tsinkoksiidi nanoosakeste terapeutilist potentsiaali luurakkude proliferatsioonile, mineraliseerumisele ja diferentseerumisele [3].
- Vähiuuringud: MG-63 rakke kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes. Mitmed uuringud on kasutanud neid osteosarkoomirakke vähi signaaliradade mõistmiseks ja ravimite tsütotoksilise ja terapeutilise potentsiaali hindamiseks. 2019. aastal läbi viidud uuringus uuriti loodusliku ühendi, tomentosiini, kasvajavastaseid omadusi, kasutades MG-63 rakke. Tulemused näitasid, et Tomentosiinil on vähivastane toime, käivitades rakusisese reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) tootmise [4].
Uurimisväljaanded, milles kasutatakse MG-63 rakke
Järgnevalt on esitatud mõned teaduspublikatsioonid, milles kasutatakse osteoblastilaadset rakuliini MG-63.
miR-192 suurendab metotreksaadi ravimi tundlikkust MG-63 osteosarkoomi vähirakkudes
See artikkel avaldati ajakirjas Pathology - Research and Practice aastal 2020. Selles uuringus kasutati MG-63 rakke, et uurida osteosarkoomi vähirakkude (MG-63) ravimiresistentsuse molekulaarseid mehhanisme. Tulemused näitasid, et miRNA-192 võib olla kasulik sihtmärk metotreksaadi ravimresistentsuse ületamisel osteosarkoomi puhul.
See uurimus on avaldatud ajakirjas Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). Uuringus teatati Rehmanniae Radix 'ist saadud roheliste sünteesitud tsinkoksiid-nanoosakeste (ZnONP) vähivastasest potentsiaalist luuvähirakkude (MG-63) vastu.
See teadusartikkel avaldati 2021. aastal ajakirjas Materials Science and Engineering. Selles uuringus pakuti välja Scutellaria baicalensis 'e taimest biosünteesitud tsinkoksiidi nanoosakeste luuparandusomadused, kasutades MG-63 rakuliini.
See uuring avaldati ajakirjas Onco Targets and Therapy 2021. aastal. Uuringus pakuti välja kurkumiini ühendi kasvajavastased omadused osteosarkoomirakkude vastu. Ühend avaldas neid terapeutilisi toimeid, inaktiveerides p-JAK2/p-STAT3 vähi signaalirada.
See uuring avaldati 2018. aastal ajakirjas International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Uuringus leiti, et biovälja energiaga töödeldud D3-vitamiin mõjutab positiivselt luurakkude proliferatsiooni, küpsemist ja diferentseerumist ning parandab luutervise parameetreid.
MG-63 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud
MG-63 rakuliini kohta on saadaval mitu ressurssi, mis selgitavad selle rakkude kasvatamise ja transfektsiooni protokollid.
- MG-63 rakkude transfektsioon: See video selgitab põhjalikult MG-63 rakkude transfektsiooniprotokolli.
- Adherentsete rakkude passageerimine: See video annab juhiseid adherentsete rakuliinide subkultiveerimiseks või passageerimiseks. See aitab teil õppida põhilisi rakukultuuriprotokolle.
Järgneval lingil leiate MG-63 rakkude kultiveerimisprotokolli.
- MG-63 rakkude kultiveerimine: Sellel veebisaidil on lihtne ja üksikasjalik protokoll MG-63 rakuliini subkultuurimiseks või jagamiseks.
KKK MG-63 rakkude kohta
Viited
- Wandiyanto, J.V., et al., The Fate of Osteoblast-Like MG-63 Cells on Pre-Infected Bactericidal Nanostructured Titanium Surfaces. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Inimese interferoon: masstootmine vastloodud rakuliinis MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
- Tang, Y., et al., Scutellaria baicalensis'e tsinkoksiidi nanoosakeste osteogeenne diferentseerimine ja mineraliseerimispotentsiaal inimese osteoblastilaadsetes MG-63 rakkudes. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
- Lee, C.M., et al., Tomentosiin avaldab antikantserogeenset toimet inimese osteosarkoomi MG-63 rakkudes rakusiseste reaktiivsete hapnikuliikide indutseerimise kaudu. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.