INS-1 rakuliin

INS-1 on hästi iseloomustatud roti insulinoomi rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt diabeediuuringutes. INS-1 rakud eritavad glükoosistimulatsiooni korral insuliini; seetõttu kasutatakse neid glükoosi metabolismi, beetarakkude füsioloogia ja insuliini sekretsiooni reguleerimise uurimiseks. Lisaks kasutatakse neid rakke ka diabeedi võimalike ravimeetodite sõelumisel, testimisel ja arendamisel.

See artikkel annab teile kogu vajaliku teabe INS-1 beetarakkude kohta, mida te peate teadma enne nende kasutamist oma teadusuuringutes. Peamiselt saate teada järgmist:

INS-1 rakkude üldised omadused ja päritolu
INS-1 rakuliin: Teave kultiveerimise kohta
INS-1 rakuliini eelised ja puudused
INS-1 roti insulinoomirakkude uurimisrakendused
INS-1 beetarakkudega seotud teaduspublikatsioonid
INS-1 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud

1. INS-1 rakkude üldised omadused ja päritolu

Rakuliini üldiste omaduste ja päritolu tundmine aitab teil seda oma uurimistöös tõhusalt ja tulemuslikult kasutada. See artikli osa annab teile teavet INS-1 päritolu ja üldiste omaduste kohta. Te saate teada: Mis on INS-1 roti insulinoomi rakuliin? Millised on INS-1 üldised omadused? Mis on INS-1 832/3 rakuliin? Mis on INS-1E?

INS-1 rakud isoleeriti algselt 666 päeva vanuselt rottidelt, kellel oli röntgenkiirte abil siirdatav insulinoom.
INS-1 rakud on bi-hormonaalsed. Nad ekspresseerivad samaaegselt insuliini ja proglükagooni valke. Neid rakke peetakse ebaküpseteks, kuna neil on madal Nkx6.1 transkriptsioonifaktori ekspressioonitase ja neil puuduvad alfarakkude markerid [1].
INS-1 rakke on kaks alamklooni, s.o INS-1E ja INS-1 832/3.
INS-1E erineb vanemrakuliinist INS-1 seoses sekretäride reaktsiooniga glükoosile ja insuliinisisaldusega.
INS-1 832/3 või INS-1 832/13 on samuti INS-1 rakuliini alamkloon. See on hindamatu mudel kõhunäärme saarekeste beetarakkude funktsiooni ja insuliini sekretsiooni reguleerimise uurimiseks. Samuti erineb see INS-1 vanemrakkudest glükoosi stimuleeritud insuliini sekretsiooni (GSIS) kontekstis.

insuliini poolt vahendatud glükoosi omastamise 3D-modelleerimine.

2. INS-1 rakuliin: Teave kasvatamise kohta

Rakuliini tõhusaks käitlemiseks ja hooldamiseks peate teadma järgmisi kultiveerimisandmeid selle kohta. Selles artikli osas käsitletakse kõiki INS-1 rakkude kultiveerimise põhipunkte. saate teada: Kuidas kasvatada INS-1 beetarakke? Milline on INS-1 rakukultuuri protokoll? Milline on INS-1 rakkude kahekordistumisaeg? Milline on INS-1 roti insulinoomirakkude keskkond?

INS-1 rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	INS-1 rakkude populatsiooni kahekordistumisaeg on ligikaudu 44 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	INS-1 rakud kasvavad nii suspensioonis kui ka adherentselt.
Subkultiveerimise suhe:	INS-1 rakke subkultiveeritakse jaotussuhtes 1:3. Lühidalt öeldes kogutakse suspendeeritud rakud. Adherentsed rakud loputatakse PBSiga ja inkubeeritakse Accutase lahusega. Pärast eraldumist lisatakse rakkudele värsket keskkonda. Seejärel tsentrifuugitakse ja kogutakse nii suspendeeritud kui ka adherentsed rakud. Rakud resuspenseeritakse ettevaatlikult ja jaotatakse uutesse kolvidesse kasvatamiseks.
Kasvukeskkond:	INS-1rat insulinoomi rakuliini kasvatamiseks kasutatakse RPM1 1640. Keskkonda on täiendatud 10% soojusinaktiveeritud veiste loote seerumi, 2,1 mM stabiilse glutamiini, 10 mM HEPESi, 2,0 g/L NaHCO3 ja 1 mM naatriumpüruvaadi sisaldusega.
Kasvutingimused:	INS-1 rakke hoitakse niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja pideva 5% CO2-ga.
Säilitamine:	INS-1 beetarakke võib pikaajaliselt säilitada vedela lämmastiku aurufaasis või alla -150 °C temperatuuril elektrilises sügavkülmikus.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	INS-1 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF keskkonda aeglase külmutamise teel. See võimaldab rakkude elujõulisuse kaitsmiseks temperatuuri langust ainult 1 °C minutis.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud INS-1 rakke sulatatakse 40-60 sekundi jooksul 37 °C temperatuurile eelseadistatud vesivannis. Pärast sulatamist lisatakse rakud värskele kasvukeskkonnale ja valatakse otse uude kolbi kasvamiseks. 24 tunni pärast vahetatakse keskkond välja, et kõrvaldada külmunud keskkonna komponendid.
Bioturvalisuse tase:	INS-1 roti insulinoomi rakkude kasvatamiseks on vaja 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratooriumi.

INS-1 rakud kasvavad saarekestes 10x ja 20x suurendusega.

3. iNS-1 rakuliini eelised ja puudused

Nagu teistelgi rakuliinidel, on ka INS-1-l mõned kindlad omadused, mis on seotud teatud eeliste ja puudustega. Siinkohal oleme maininud mõned olulised neist.

Eelised

INS-1 rakuliini peamised eelised on järgmised:

Hästi iseloomustatud
INS-1 on hästi tõestatud ja hästi iseloomustatud rakuliin. Seda on kasutatud arvukates teadusuuringutes. See säilitab oma fenotüübilised omadused ja insuliini sekretsioonivõime pikema aja jooksul, andes seega usaldusväärseid ja järjepidevaid katsetulemusi.
Beetarakkude mudel
INS-1 rakke kasutatakse pankrease saarekeste beetarakkude funktsiooni uurimiseks, kuna need eritavad insuliini ja reageerivad glükoositaseme kõikumistele.

puudused

INS-1 rakkude puudused on järgmised:

Mitteinimlik päritolu
INS-1 beetarakud ei ole inimpäritolu. Need on saadud roti insulinoomist. See võib põhjustada liigispetsiifilisi erinevusi ja piirata katsetulemuste otsest ülekandmist inimese füsioloogiasse.

4. INS-1 roti insulinoomirakkude uurimisrakendused

INS-1 beetarakke kasutatakse laialdaselt diabeediuuringutes. Siinkohal on mainitud mõned selle rakuliini paljutõotavad rakendused.

Insuliini sekretsiooni uuringud: INS-1 rakkudel on insuliini sekretsiooni võime ja seega kasutatakse neid laialdaselt insuliini sekretsiooni rakumehhanismide uurimiseks. Teadlased uurivad insuliini vabanemisega seotud olulisi tegureid, sealhulgas glükoosi ainevahetust, signaaliradu, hormoone ja farmakoloogilisi aineid. Ühes uuringus leiti, et K + ATP ioonikanalist sõltuv tee reguleerib INS-1 beetarakkudes insuliini sekretsiooni [2]. Peale selle on uuringud näidanud, et INS-1 roti insulinoomirakkudes osalevad insuliini sekretsioonis ka GLP-1R- ja AKT/PDX1-radad [3].
Beetarakkude funktsiooni uuringud: INS-1 rakkudel on kõhunäärme saarekese beetarakkude sarnased omadused, nagu reageerimisvõime glükoosi metabolismile ja insuliini sekretsioon. Seetõttu kasutatakse neid beetarakkude füsioloogiliste protsesside ja funktsioonide uurimiseks. Aastal 2022 tehtud uuringus kasutati INS-1 rakke ja töötati välja _H2O2 abil beetarakkude talitlushäire mudel Nad uurisid rakkude elujõulisust, insuliini sekretsiooni ja oksüdatiivse stressiga seotud markereid neis rakkudes vastusena looduslikule ühenditega ravile [4].
Ravimite avastamine ja arendamine: Roti INS-1 insulinoomirakke kasutatakse laialdaselt diabeedivastaste ühendite või ravimite sõelumiseks ja testimiseks. Neid saab kasutada ravimi võimalike mõjude uurimiseks insuliini sekretsioonile ja muudele asjakohastele parameetritele. Ühes uuringus leiti, et loganiin, mis on ühe hiina taimse retsepti koostisosa, kaitses INS-1 rakkude insuliinisekretsiooni funktsiooni ja avaldas potentsiaalset antidiabeetilist toimet. Komponent vahendas neid soodsaid mõjusid FOXO1 geeni tuuma translokatsiooni inhibeerimise kaudu PI3K/AKT raja kaudu [5].

550,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300471

5. INS-1 beetarakkudega seotud teaduspublikatsioonid

Siin on mõned olulised teaduspublikatsioonid, milles on kasutatud INS-1 roti insulinoomi rakuliini.

Alfa-mangostiin parandab insuliini sekretsiooni ja kaitseb INS-1 rakke streptozototsiinist põhjustatud kahjustuste eest

See uuring avaldati ajakirjas Internation Journal of Molecular Sciences 2018. aastal. Uuringus pakuti välja, et kollane kristalliline looduslik ühend, alfa-mangostiin, soodustab INS-1 beetarakkude insuliini sekretsiooni ja kaitseb neid beetarakkude toksiini streptozototsiinist põhjustatud kahjustuste eest.

Epikatekiini võimendamine glükoosi stimuleeritud insuliini sekretsiooni INS-1 rakkudes ei sõltu selle antioksüdantsest aktiivsusest

See uurimus on avaldatud ajakirjas acta pharmacologica sinica 2018. aastal. Uuringu tulemus näitas, et epikatekiini ühend soodustab glükoosistimuleeritud insuliini sekretsiooni küllastunud rasvhapetega kahjustatud INS-1 beetarakkudes CaMKII raja aktiveerimise kaudu.

Äsja avastatud fenüületanoidglükosiid Stevia rebaudiana Bertoni'st mõjutab insuliini sekretsiooni roti INS-1 saarekeste β-rakkudes

See artikkel ajakirjas Molecules (2019) pakkus välja, et uudne looduslik ühend Fenüületanoidi glükosiid mõjutab insuliini sekretsiooni INS-1 roti insulinoomirakkudes ja omab seega antidiabeetilist potentsiaali.

Loureirin B soodustab insuliini sekretsiooni GLP-1R ja AKT/PDX1 radade kaudu

See uuring on avaldatud ajakirjas European Journal of Pharmacology (2022). Uuringus pakuti välja, et looduslik toode Loureirin B suurendab INS-1 pankrease saarekeste beetarakkude insuliini sekretsiooni AKT/PDX1 ja GLP-1R radade modulatsiooni kaudu.

Withania coagulans'i in vitro vähivastane toime HeLa, MCF-7, RD, RG2 ja INS-1 vähirakkude suhtes ning fütokemiline analüüs

Selles Integrative Medicine Research (2018) artiklis hinnati Withania coagulans 'i ekstrakti vähivastast potentsiaali, kasutades INS-1 vähirakke.

6. INS-1 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud

Siin on mõned veebiressursid, mis tutvustavad INS-1 rakke:

Suspensioonirakkude subkultiveerimine: See video on põhjalik juhend suspensioonikultuurides kasvavate rakkude subkultuurimiseks.
Adhereeruvate rakkude subkultuurimine: See video aitab teil õppida adherentsete rakkude passiveerimise üldist protokolli.

Järgmine link sisaldab INS-1 rakukultuuri protokolli:

INS-1 rakuliin: See veebileht sisaldab kogu teavet INS-1 rakukultuuri kohta. See sisaldab teavet INS-1 rakukultuuride ja külmutuskeskkonna kohta, subkultuurimise protokollid ning krüokonserveeritud ja proliferatiivsete INS-1 kultuuride käitlemise kohta.

Viited

Acosta-Montalvo, A., et al., Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. ja J.S. Han, Portulaca oleracea L. ekstrakt soodustab insuliini sekretsiooni K+ ATP kanalist sõltuva tee kaudu INS-1 pankrease β-rakkudes. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al., Loureirin B soodustab insuliini sekretsiooni GLP-1R ja AKT/PDX1 radade kaudu. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenia macrophylla kuninga swieteniin ja swietenoliid parandavad insuliini sekretsiooni ja nõrgendavad apoptoosi H2O2-indutseeritud INS-1 rakkudes. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al., Loganiini diabeedivastane toime FOXO1 tuuma translokatsiooni inhibeerimise kaudu PI3K/Akt signaalitee kaudu INS-1 rakkudes. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.