HL-60 rakud: Akuutne müeloidne leukeemia Uuringud Essentials

HL-60 on surematu inimese leukeemiarakkude liin. Seda kasutatakse laialdaselt vähi bioloogia uurimiseks ja vähivastaste ravimite tõhususe uurimiseks. Lisaks saab seda kasutada ka erinevate rakuliste ja molekulaarsete mehhanismide mõistmiseks, mis on seotud leukeemiarakkude proliferatsiooni ja diferentseerumisega.

HL-60 rakuliin: Päritolu ja üldine teave

HL-60 rakuliin on oluline mudel hematoloogilistes uuringutes, pakkudes põhjalikke teadmisi ägeda promüelotsütaarse leukeemia olemuse ja ravi kohta. Selles blogipostituses käsitletakse HL-60 rakuliini päritolu ja eripärasid, valgustades selle olulist rolli meditsiiniuuringutes ja terapeutilistes arengutes.

HL-60 loodi esmakordselt 36-aastase kaukaasia naisterahva leukeemiarakkudest, kellel diagnoositi äge promüelotsütaarne leukeemia. Selle teedrajava töö tegid S. J. Collins ja tema meeskond, mis tähistas olulist läbimurret, sest HL-60 oli esimene müeloidse leukeemia rakuliin, mida õnnestus isoleerida ja kasvatada suspensioonis. See saavutus on hõlbustanud arvukaid uurimisvõimalusi leukeemia ja teiste sellega seotud haiguste uurimisel. Füüsiliste omaduste poolest on HL-60 rakud lümfoblastilise morfoloogiaga ja teadaolevalt kasvavad suspensioonis, olles ümmarguse kujuga. Nende rakkude suurus varieerub, nende läbimõõt ulatub 9-25 μm, mis peegeldab nende heterogeensust. Genoomilisel tasandil on HL-60 rakuliin valdavalt pseudodiploidne, mille modaalne kromosoomide arv on 43. Huvitaval kombel on väike protsent (6,2%) rakkudest 2S-komponent, mis lisab nende geneetilisele koostisele veel ühe keerukuse kihi [1].

Nende HL-60 rakkude põhiaspektide mõistmine mitte ainult ei suurenda meie teadmisi leukeemiast rakutasandil, vaid toetab ka käimasolevaid teadusuuringuid uute ravivõimaluste avastamiseks. Järgnevalt uurime, kuidas HL-60 rakuliini ainulaadsed omadused on aidanud kaasa olulistele edusammudele meditsiinilistes uuringutes.

Monotsellulaarne leukeemiakude mikroskoobi all.

HL-60 rakukultuuri teave

HL-60 rakkude kasvatamine on lihtne ja kerge. Selles jaotises tutvustatakse teile selliseid põhitõdesid nagu Milline on HL-60 rakuliini kahekordistumisaeg? Kas HL-60 on adherentne või suspensioonikultuur? Milline on HL-60 rakuliini külvi tihedus? Millist keskkonda kasutatakse HL-60 kasvatamiseks?

Kordistumisaeg:	HL-60 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 36-48 tundi.
Kinnine või suspensioon:	HL-60 rakud kasvavad suspensioonikultuurina.
Külvitihedus:	Neid rakke külvatakse 1 x¹⁰⁶ rakku/ml tihedusega, kui neid subkultiveeritakse, ja 2 x¹⁰⁵ rakku/ml tihedusega, kui alustatakse uut kultuuri.
Kasvukeskkond:	HL-60 rakkude kasvatamiseks kasutatakse RPMI 1640 kasvukeskkonda, millele on lisatud 10 % FBS ja 2,5 mM L-glutamiini. Keskkonda tuleb uuendada 2-3 korda nädalas.
Kasvutingimused:	HL-60 rakke kasvatatakse niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja 5 %_CO2-ga.
Säilitamine:	HL-60 rakke säilitatakse temperatuuril alla -150 °C või vedela lämmastiku aurufaasis, et säilitada maksimaalne arv rakke elujõulisena.
Külmutussubstraat ja protsess:	HL-60 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda. HL-60 rakkude külmutamiseks eelistatakse aeglast külmutamismeetodit.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud HL-60 rakkude viaali liigutatakse kiiresti 37 °C temperatuurile seatud vesivannis. Seejärel tsentrifuugitakse rakud külmutuskeskkonna eemaldamiseks. Lisatakse uus kasvukeskkond ja rakud resuspenseeritakse, et neid kasvatamiseks kolbi doseerida.
Bioturvalisuse tase:	HL-60 kultuuride käitlemiseks soovitatakse bioloogilise ohutuse 1. taset.

HL-60 suspensioonirakud 10x ja 20x suurendusega.

HL-60 rakud: Eelised ja puudused

Enne mis tahes rakuliiniga töötamist võiksite teada selle eeliseid ja puudusi. Selles artikli osas käsitletakse mõningaid HL-60 rakkude kasutamise plusse ja miinuseid.

Eelised

HL-60 rakuliini mõned silmapaistvad eelised on järgmised:

Mitmekülgsus: HL-60 rakkudel on võime diferentseeruda sobivate kasvutingimuste korral mitmeks rakutüübiks, sealhulgas monotsüütideks, makrofaagideks ja granulotsüütideks. See muudab nad kasulikuks rakkude diferentseerumise ja muude rakuprotsesside uurimiseks
Lihtne kasvatada: HL-60 rakke on lihtne kasvatada ja säilitada suspensioonikultuurides, mis teeb neist mugava vahendi mitmete rakuprotsesside uurimiseks
Leukeemia in vitro mudel: Need rakud on saadud ägeda müeloidse leukeemiaga patsiendilt ja seega on nende geneetilised ja molekulaarsed omadused sarnased selle haigusega

Puudused

HL-60 rakuliini puudused on järgmised:

Piiratud diferentseerumispotentsiaal: HL-60 võib vastuseks stiimulitele diferentseeruda mõneks müeloidseks liiniks, kuid nende diferentseerumispotentsiaal on võrreldes primaarsete rakkudega piiratud.

HL-60 rakuliini rakendused teadusuuringutes: Hõlmatud rakud: vähktõvest immunoloogiani ja kaugemale

HL-60 rakuliin, mis on saadud ägeda promüelotsütaarse leukeemiaga patsiendilt, on tänu oma mitmekülgsusele ja kasvatamise lihtsusele muutunud meditsiiniliste uuringute nurgakiviks. Need vähese hooldusega kultuurid on kesksel kohal arvukates teadusuuringute rakendustes ning meie eesmärk on uurida mõningaid kõige olulisemaid, hõlmates laiaulatusliku ülevaate andmiseks mitmesuguseid uurimisalaseid märksõnu.

Vähiuuringud

Onkoloogia valdkonnas on HL-60 rakuliin aidanud kaasa vähirakkude signaaliülekande keerukuse avamisele, on edendanud meie arusaamist onkogeenide ekspressioonist ja aidanud kaasa uute terapeutiliste sihtmärkide avastamisele. See rakuliin moodustab osa leukeemiarakkude paneelist, mida kasutatakse uute kemoterapeutiliste ainete skriininguks. Üks terav näide on HL-60 rakkude kasutamine mereorganismidest saadud ühendite leukeemiavastaste omaduste kindlakstegemiseks, mis näitas nii antiproliferatiivset kui ka proapoptootilist mõju [2]. Lisaks sellele on rakuliin võimaldanud uurida olulisi signaaliradu, nagu JAK/STAT, ja nende mõju leukeemiarakkude proliferatsioonile, ning hinnata bioaktiivsete ühendite, näiteks timokinooni, terapeutilist potentsiaali [3].

Immunoloogia

HL-60 rakud on usaldusväärne in vitro süsteem erinevate immuunvastuste, sealhulgas kemotaksise keerulise protsessi ja peamiste immuunvahendajate ekspressiooni reguleerimise uurimiseks. Need rakud võivad diferentseeruda makrofaagide ja neutrofiilide sarnasteks müeloidseteks rakkudeks, mis on mitmekülgne mudel põletikuradade uurimiseks. Näiteks kasutati HL-60-st saadud makrofaagilaadseid rakke Brassica perekonna fütokemikaalide põletikuvastase potentsiaali uurimiseks [4]. Ühes teises uuringus võimaldas HL-60 rakkude diferentseerimine neutrofiilide sarnasteks rakkudeks tuvastada rakkude diferentseerumise ja sellega seotud immuunsüsteemi funktsioonide jaoks olulisi geene [5].

Ravimite avastamine

HL-60 rakkude müeloidse diferentseerumise võimeid on kasutatud ka ravimite avastamisel, eelkõige selliste kandidaatide tuvastamisel, mis võiksid moduleerida diferentseerumisradu, mis on leukeemiaravis ülioluline. Seda näitavad näiteks uuringud, milles on kasutatud HL-60 rakuliini looduslike toodete vähivastase potentsiaali hindamiseks [6].

Lisaks kasutatakse HL-60 rakuliini müeloidsete rakuliinide bioloogia erinevate aspektide uurimiseks, näiteks mõistmaks, kuidas ravi selliste ainetega nagu retinoiinhape võib viia monotsüütilise diferentseerumiseni või kuidas need rakud jäljendavad primaarseid neutrofiile rakuväliseid püüniseid tekitades. Mudeli kasutamist hematoloogiliste pahaloomuliste haiguste molekulaarsete sündmuste selgitamisel on veelgi laiendatud selle kasutamisega mutatsioonirakkude paneeli uuringutes, eelkõige leukeemia p53 hotspot'ide analüüsi kontekstis.

Neile, kes uurivad HL-60 rakumehaanikat, kahekordistumisaega ja nende reaktsiooni elektroporatsioonile mikrofluidilistes kanalites, pakub rakuliin usaldusväärset platvormi uurimiseks.

HL-60 rakuliin teie teadusuuringuteks

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300209

HL-60 rakud: Teadusuuringute publikatsioonid

HL-60 rakkude kohta on saadaval mitu uurimust. Siin on loetletud mõned märkimisväärsed näited:

Dendronephthya gigantea-stigmast-5-en-3-ooli apoptootiline ja antiproliferatiivne toime inimese leukeemia HL-60 ja inimese rinnavähi MCF-7 rakkudele

Selles uurimistöös pakuti välja ühendi Stigmast-5-en-3-ol kasvajavastane toime HL-60 leukeemiarakkudele ja MCF7 rinnavähirakkudele.

Tümokinoon pärsib rakkude proliferatsiooni ja suurendab HL60 leukeemiarakkude apoptoosi JAK/STAT-negatiivsete regulaatorite reekspressiooni kaudu

Selles uuringus kirjeldatakse JAK/STAT-signalisatsiooni rolli HL-60 rakkude proliferatsioonis. Lisaks uurivad teadlased selle leukeemiarakuliini abil timokinooni ühendi terapeutilist potentsiaali. Ühend inhibeerib rakkude proliferatsiooni ja kutsub esile rakusurma, taastades JAK/STAT-kaskaadi negatiivsete regulaatorite ekspressiooni.

Brassica bioaktiivsete ühendite põletikuvastase potentsiaali analüüs inimese makrofaagilaadsete rakkude mudelis, mis on saadud HL-60 rakkudest

Käesolevas uuringus kasutati HL-60 rakke, et tuletada makrofaagilaadne rakumudel, millest uuriti Brassica taimeühendite põletikuvastast toimet.

ERK osaleb dimetüülsulfoksiidist indutseeritud HL-60 neutrofiililaadsete rakkude diferentseerumises ja funktsioonis, mis imiteerivad põletikulisi neutrofiile

Selles ajakirjas International Immunopharmacology avaldatud uuringus arendati dimetüülsulfoksiidi abil HL-60 rakuliinist neutrofiilseid rakke jäljendavaid rakke. Uuringus täheldati, et nende rakkude diferentseerimisel osaleb ERK geen.

Valitud taimsete polüfenoolide, gallikhappe ja ellagiinhappe kasvajavastane toime tundlikele ja multiresistentsetele leukeemiarakkudele HL60

Käesolevas uurimistöös uuritakse taimsete polüfenoolsete ühendite, st galliushappe ja ellagiinhappe, vähivastast potentsiaali ravimitundlikele ja ravimresistentsetele HL-60 leukeemiarakkudele.

HL-60 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud materjalid: Protokollid, videod ja muud materjalid

HL-60 rakuliini kohta on saadaval mitu veebipõhist õppevahendit. Selles jaotises käsitletakse mõningaid ressursse, mis kirjeldavad selle rakuliini kultiveerimist ja transfektsiooni.

Rakukultuuri protokollid

HL-60 rakkude kultiveerimismeetodeid kirjeldavad ressursid on järgmised:

HL-60 paljundamine: See dokument annab teavet HL-60 rakkude subkultiveerimise kohta.
HL-60 rakuliin: See veebileht sisaldab põhiteavet HL-60 rakkude ja protokollide kohta, sealhulgas rakkude kultiveerimise, külmutamise ja sulatamise kohta.

Transfektsiooni protokollid

Siin on mõned ressursid, mis kirjeldavad HL-60 rakkude jaoks valitud transfektsioonimeetodeid.

HL-60 rakkude transfektsioon: Sellel lingil on üksikasjalik HL-60 leukeemiarakkude transfektsiooniprotseduur.
HL-60 rakkude transientne transfektsioon: See dokument sisaldab kasulikku teavet rakuliini kohta ja annab üksikasjaliku protokolli HL-60 rakkude transientse transfektsiooni jaoks.

HL-60 rakuliiniga seotud videod

HL-60 rakkude kohta on väga vähe videoressursse.

HL-60 rakkude passageerimine: Selles videos selgitatakse HL-60 rakkude subkultiveerimise protokolli.

Eeldame, et see artikkel annab teile põhiteavet HL-60 rakuliini kultiveerimise ja hooldamise kohta. Lisaks võib see suurendada teie teadmisi nende leukeemiarakkude kasutamise eeliste kohta teadusuuringutes. Kui kavatsete seda rakuliini kasutada, tellige meilt.

HL-60 rakuliin: Olulised KKK-d teadlastele

Viited

Fleck, R., S. Romero-Steiner ja M. Nahm, HL-60 rakuliini kasutamine pneumokokkavastaste antikehade opsoonilise võime mõõtmiseks. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
Fernando, I.S., et al., Dendronephthya gigantea-stigmast-5-en-3-ooli apoptootiline ja antiproliferatiivne toime inimese leukeemia HL-60 ja inimese rinnavähi MCF-7 rakkudele. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Almajali, B., et al., Thymoquinone supresses cell proliferation and enhances apoptosis of HL60 leukemia cells through re-expression of JAK/STAT negative regulators. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Brassica bioaktiivsete ühendite põletikuvastase potentsiaali analüüs inimese HL-60 rakkude makrofaagilaadses rakumudelis. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D., et al., ERK osaleb dimetüülsulfoksiidist indutseeritud HL-60 neutrofiililaadsete rakkude diferentseerumises ja funktsioonis, mis imiteerivad põletikulisi neutrofiile. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-Leukemic Activity of Brassica-Derived Bioactive Compounds in HL-60 Myeloid Leukemia Cells. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.