Mine kodulehele

Avaldatud: 2023 | Viimati läbi vaadatud: mai 2026

HCT116 rakuliin: kolorektaalvähi uurimise nurgakivi

HCT116 rakuliin on kolorektaalvähi uurimise nurgakivi, pakkudes hindamatut teavet haiguse patogeneesi ja võimalike ravivõimaluste kohta. HCT116 on tuntud oma kasulikkuse poolest vähiuuringutes ja farmakoloogilistes hindamistes ning hõlbustab olulisi uuringuid kasvajate käitumise ja ravimite efektiivsuse kohta.

📋 HCT116 rakuliin — lühifaktid
Kasvukeskkond
HCT116 rakkude kasvatamiseks on optimaalne McCoys 5a keskkond, millele on lisatud 3,0 g/l L-glükoosi, 1,5 mM L-glutamiini, 3,0 g/l NaHCO3 ja 10% loote veise seerumit. Soovitatav on keskkonda uuendada 1–2 korda nädalas.
Kahekordistumisaeg
HCT116 vähirakkude kahekordistumisaeg on 25–35 tundi.
Kasvutüüp
HCT116 käärsoolevähirakkude liin on adhesiivne, rakud kasvavad monokihina.
Bioloogiline ohutustase
BSL-1

HCT116 rakkude päritolu ja põhiomadused

HCT116 rakkude päritolu ja põhiomaduste, nagu morfoloogilised tunnused, geneetiline koosseis ja rakkude mõõtmed, mõistmine on oluline teadlastele, kes alustavad selle rakuliini kasutamisega seotud uuringuid.

Päritolu ja geneetiline maastik: HCT116 rakud pärinevad 48-aastase valge mehe käärsoolest, kellel diagnoositi kolorektaalvähk, ning neid iseloomustab mutatsioon KRAS-geeni kodonis 13 (G13D), mis on osa RAS/RAF/MEK/ERK signaaliteest. See konkreetne mutatsioon on otsustava tähtsusega nende rakkude onkogeenses transformatsioonis, mis rõhutab nende olulisust vähiuuringutes.

Morfoloogia ja kasvukarakteristikud: Epiteelilaadse morfoloogiaga HCT116 rakud kasvavad tavaliselt ühekihilistes kultuurides, kuid võivad moodustada ka sfääre läbimõõduga 150–400 µm. See kasvumustrite kohanemisvõime rõhutab nende mitmekülgsust erinevates eksperimentaalsetes seadistustes.

Kromosoomiprofiil: HCT116-rakkude kromosoomikoostis on peaaegu diploidne, umbes 70% rakupopulatsioonist sisaldab 45 kromosoomi. Tähelepanuväärne on korduv amplifikatsioon kromosoomide 8, 10, 16 ja 17 pikkades harudes, samas kui Y-kromosoom puudub, mis annab neile unikaalse genoomilise signatuuri.

Võrdlev analüüs: HCT116 vs. HT29 rakuliinid

HCT116 ja HT29, teise inimese kolorektaalse kartsinoomi rakuliini võrdlemisel ilmnevad selged erinevused nende onkogeenses potentsiaalis ja diferentseerumisvõimes:

Onkogeenne agressiivsus ja diferentseerumine: HCT116 rakke iseloomustab kõrge onkogeenne agressiivsus ja piiratud diferentseerumisvõime, mis teeb neist mudeli agressiivsete kasvajate fenotüüpide uurimiseks. Seevastu HT29 rakud suudavad diferentseeruda enterotsüütidele sarnasteks ja muutsini tootvateks rakuliinideks, pakkudes kontrastset mudelit, mis jäljendab kolorektaalse vähi bioloogia mitmesuguseid aspekte.

See võrdlev arusaam HCT116 ja HT29 rakuliinidest rikastab teadlaste käsutuses olevaid vahendeid, võimaldades kolorektaalvähi mitmekülgse olemuse põhjalikumat uurimist.

Pärasoole kasvavad eelvähilised polüübid.

HCT116-rakkude käitlemine

Kaksinkordistumisaeg:

HCT116 vähirakkude kahekordistumisaeg on 25–35 tundi.

Adherentne või suspensioonis:

HCT116 käärsoolevähirakkude liin on adhesiivne, rakud kasvavad monokihina.

Istutustihedus:

HCT116 rakukultuuri jaoks soovitatakse külvitihedust 2 x 104 rakku/cm2. Subkultiveerimiseks tuleb rakud pärast 1x PBS-ga pesemist lahti eraldada Accutase lahuse abil. Tsentrifuugimise järel suspendeeritakse rakupellet uues kasvukeskkonnas ja viiakse üle uude kolbi.

Kasvukeskkond:

HCT116 rakkude kasvatamiseks on optimaalne McCoys 5a keskkond, millele on lisatud 3,0 g/l L-glükoosi, 1,5 mM L-glutamiini, 3,0 g/l NaHCO3 ja 10% loote veise seerumit. Soovitatav on keskkonda uuendada 1–2 korda nädalas.

Kasvatustingimused (temperatuur, CO2):

Kasvatamine toimub niisutatud inkubaatoris temperatuuril 37 °C ja 5% CO2-sisaldusega keskkonnas.

Säilitamine:

HCT116 rakke võib säilitada temperatuuril alla -150 °C vedela lämmastiku aurustatud või vedelas faasis.

Külmutamisprotsess ja kasvukeskkond:

Krüokonserveerimiseks kasutage CM-1 või CM-ACF keskkonda. Soovitatav on kasutada kontrollitud kiirusega külmutamismeetodit, mis võimaldab temperatuuri järkjärgulist langust 1 °C minutis, mis aitab säilitada rakkude eluvõimelisust.

Sulatusprotsess:

Sulata HCT116 rakud 37 °C veevannis. Pärast kasvukeskkonna lisamist tsentrifuugi, et eemaldada külmutuskeskkonda jäägid. Resuspendeeri rakupellet värskes keskkonnas ja kultiveeri uutes kolvides.

Bioloogiline ohutustase:

Tase 1

HCT 116 cells

Kultiveeritud käärsoolevähirakud HCT116, suurendatud 20- ja 10-kordselt.

HCT116 rakuliini eelised

Käesolevas osas käsitletakse HCT116 rakuliini, rõhutades selle keskset rolli vähiuuringutes, eriti kolorektaalvähi uurimisel, ning arutades selle loomulikke eeliseid.

HCT116 rakuliin paistab vähiuuringutes silma mitme olulise eelise tõttu:

  • Kolorektaalvähi mudel: See on laialdaselt tunnustatud in vitro mudel kolorektaalvähi jaoks, mis on maailmas kolmas kõige levinum vähivorm. Selle asjakohasus inimese kolorektaalvähi jäljendamisel muudab selle hindamatuks vähibioloogia mõistmisel ja ravistrateegiate katsetamisel.

  • Homogeensus: Märkimisväärselt on umbes 70% HCT116 rakkudest geneetiliselt ühtlased, moodustades suhteliselt homogeense populatsiooni. See ühtlus on otsustava tähtsusega uuringutes, mis keskenduvad geeniekspressioonile, rakkude signaaliteedele ja ravimite efektiivsuse hindamisele, kuna see tagab eksperimentaalsete tulemuste järjepidevuse ja usaldusväärsuse.

  • Transfektsiooni efektiivsus: Üks HCT116 rakkude eristavaid omadusi on nende hea vastuvõtlikkus transfektsioonile, eriti viirusvektorite puhul. See omadus on eriti kasulik geeniteraapia uuringutes, võimaldades geneetilise materjali sisseviimist efektiivselt ja täpselt, hõlbustades seeläbi keerukaid geneetilisi manipulatsioone ja funktsionaalseid uuringuid.

Tehke uusi avastusi meie autentifitseeritud HCT116 rakuliini abil

HCT116 rakuliini rakendused teadustöös

HCT116 rakuliinil on laialdased rakendused vähiuuringutes. Mõned olulisemad rakendused on:

Vähibioloogia

HCT116 käärsoolevähirakkude liini kasutatakse käärsoolevähi progresseerumise ja arengu uurimiseks. Lisaks aitab see selgitada vähirakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsusega seotud alusmehhanisme ja signaaliteid. Ühes uuringus kasutati HCT116 rakke ravimresistentsuse arenguga seotud geenide uurimiseks. Teadlased üleväljendasid MDR1 geeni käärsoolevähirakkudes ja jälgisid NOX (NADPH oksüüd) isoformide ja Nrf2 ekspressiooni. Uuring näitas, et NOX2 ja Nrf2 ülesreguleerimine põhjustab vähirakkudes kemoresistentsust; seega saab neid geene sihtida, et ületada resistentsuse arengut vähiravi ajal [1]. Samamoodi teatas 2021. aastal läbi viidud uuring, et NF-κB signaalitee on seotud käärsoolevähi proliferatsiooni ja migratsiooni reguleerimisega. Seega saab seda sihtmärgiks võtta uute ja tõhusate ravimite väljatöötamisel kolorektaalse kartsinoomi vastu [2].

Onkoloogia valdkonnas on rakutsükli, proliferatsiooni ja kasvu ning apoptoosi keeruliste protsesside mõistmine fundamentaalne. Need bioloogilised funktsioonid on kesksel kohal inimrakuliinide uurimisel, eriti pahaloomulistest rakkudest pärinevate, nagu inimese käärsoolevähirakkude ja pankreasevähimudelite puhul. Näiteks rakuliinid HCT116 ja SW620 on olulised vastavalt käärsoole- ja pankreasevähi aluseks olevate mehhanismide uurimisel. Selliste tehnikate abil nagu voolutsütomeetria ja kloonogeneetilised analüüsid saavad teadlased selgitada geeniekspressiooni profiile ja sõltumatute rakkude käitumist kasvajates, heites valgust sellele, kuidas vähk suhtleb ekstratsellulaarse maatriksi sees.

Apoptoosi roll vähi progresseerumisel

Apoptoos ehk programmeeritud rakusurm mängib olulist rolli rakkude homöostaasi säilitamisel ja on vähiuuringute keskne uurimisvaldkond. Oluline on eristada mitteseotud apoptoosi ja spetsiifiliselt vähi kontekstis indutseeritud apoptoosi, nagu käärsoolevähirakkude surm. See protsess ei hõlma ainult rakkude kõrvaldamist, vaid ka signaalide keerulist vastastikmõju, mis võib mõjutada kasvaja kasvu ja metastaase. Uurides apoptoosi ja rakkude surma koos metastaaside supressorite ja kasvajate supressorite aktiivsuse kontekstis, saavad teadlased aimu rakkude progressiooni ja metastaaside tekkimise potentsiaali reguleerivatest mehhanismidest.

Metastaasid ja molekulaarsed markerid vähktõves

Metastaasid on endiselt üks vähktõve kõige hirmuäratavamaid aspekte, kusjuures hematogeensed metastaasid on pahaloomuliste rakkude leviku seisukohalt oluline mure. Metastaaside uurimine hõlmab vähirakkude liikumise ja invasiivsuse ehk rakkude lokomotsiooni uurimist ning seda, kuidas rakud suhtlevad oma ümbrusega, sealhulgas ekstratsellulaarse maatriksiga. Molekulaarsed markerid, nagu CD133 ekspressioon ja epidermaalse kasvufaktori retseptor, on olulised positiivsete käärsoolekartsinoomi rakkude ja muude vähitüüpide käitumise tuvastamisel ja mõistmisel. Näiteks SIRT6 signaalitee on muutunud huvipakkuvaks valdkonnaks tänu selle potentsiaalsele rollile kasvajate kasvu ja metastaatilise käärsoolevähi moduleerimisel.

Toksikoloogia/ravimite arendamine

HCT116 rakuliini kasutatakse uute vähiravimite sõelumismudelina. Vähiravimite, sealhulgas looduslike toodete ja keemiliselt sünteesitud nanokübemete efektiivsuse ja toksilisuse hindamiseks on läbi viidud mitmeid uuringuid. Nii hinnati uuringus taimse ravimi Caesalpinia pulcherrima ekstraktidest sünteesitud hõbenanokübemete tsütotoksilisust HCT116 rakkudes [3]. Ühes uuringus kasutasid teadlased HCT116 vähirakkude liini, et hinnata kakaotee veeekstrakti vähivastast potentsiaali. Nad leidsid, et kakaotee ekstrakt vähendab käärsoolevähi levikut ja indutseerib rakkude surma [4]. Teises uuringus kasutati HCT116 vähirakke ja avastati, et õhukartuli (Dioscorea bulbifera) ekstraktidel on kolorektaalse kartsinoomi rakkudes proapoptootiline toime JNK signaalikaskadi aktiveerimise ja ERK1/2 geeni supressiooni kaudu [5].

Metformiini mõju vähirakkudele, eriti käärsoole- ja pankreasevähi kontekstis, on näide sellest, kuidas vähirakkude bioloogiliste funktsioonide mõistmine võib viia potentsiaalsete ravistrateegiateni. Uuringud vähirakkude kloonilise ellujäämise ehk kloonide moodustamise võime kohta pärast ravi selliste ravimitega nagu metformiin või spetsiifiliste signaaliteede, näiteks epidermaalse kasvufaktori retseptori sihtmärgistamisega, võivad anda väärtuslikku teavet tõhusate vähiravimeetodite kohta. Lisaks võimaldab HCT116 kloonide ja HCT116 rakupopulatsioonide kasutamine nendes uuringutes nüansseeritud arusaama sellest, kuidas vähirakud reageerivad erinevatele ravimeetoditele, sillutades teed isikupärasematele lähenemisviisidele vähiravis.

HCT116 rakud: teaduslikud publikatsioonid

Selles osas vaadeldakse mõningaid olulisi ja enim tsiteeritud hiljutisi publikatsioone, milles käsitletakse HCT116 rakuliini.

Piper nigrum'i seemnetest saadud sünteetiliste SnO2-nanopartiklite tsütotoksilisuse uuring kolorektaalse (HCT116) ja kopsuvähi (A549) rakuliinide suhtes

See uuring avaldati ajakirjas Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2017). Teadlased kasutasid HCT116 käärsoolevähi ja A549 kopsuvähi rakuliine, et hinnata piper nigrum'i seemnetest sünteesitud tinaoksiidnanopartiklite tsütotoksilist mõju.

Pikk mittetranslatsiooniline RNA SNHG15 suhtleb transkriptsioonifaktoriga Slug, stabiliseerib seda ja soodustab käärsoolevähi progresseerumist

Ajakirjas Cancer Letters (2018) avaldatud uuringus väidetakse, et lncRNA SNHG15 soodustab käärsoolevähirakkude rännet kolorektaalse vähirakkude liinides, sealhulgas HCT116.

Pika mittetranslatsiooni-RNA TUG1 üleväljendamine soodustab käärsoolevähi progresseerumist

See artikkel avaldati ajakirjas Medical Science Monitor 2016. aastal. Uuringus leiti, et onkogeenne LncRNA TUG1 soodustab HCT116 käärsoolevähirakkude proliferatsiooni ja rännet.

Ravimresistentsus indutseerib H2S-i tootvate ensüümide ülesreguleerimist HCT116-kolorektaalvähirakkudes

Ajakirjas Biochemical Pharmacology (2018) avaldatud uuringus väidetakse, et ravimresistentsuse tekkimine suurendab H2S-i tootvate ensüümide taset HCT116 käärsoolevähirakkudes.

Inula viscosa L. veekstrakti apoptootiline ja antiproliferatiivne toime mikroRNAde ekspressioonile HCT 116 rakuliinis: in vitro uuring

Ajakirjas International Journal of Environmental Health Research (2023) avaldatud uurimistöö väidab, et Inula viscosa L. ekstrakt avaldab HCT116 kolorektaalvähirakkudele vähivastast mõju mikroRNA-de reguleerimise kaudu.

Allikad HCT116 rakkude kohta

Allpool on toodud mõned HCT116 rakkudega seotud ressursid.

Korduma kippuvad küsimused HCT116 rakkude kohta

HCT116 on inimese kolorektaalkartsinoomist saadud rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, et uurida kolorektaalvähi bioloogiat, geneetikat ja ravivastust
HCT116 rakud, millel on epiteelilaadne morfoloogia, on standardsetes kasvatustingimustes tavaliselt umbes 15 mikromeetri läbimõõduga
Kuigi algselt peeti neid peaaegu diploidseteks, on edasised geneetilised analüüsid näidanud, et HCT116 rakkudel on kromosoomianomaaliad, mis muudab nad aneuploidseks, mis on paljude vähirakkude tunnusjooneks
HCT116 rakkude jagunemissuhe, mis näitab rakkude osakaalu, mis kantakse subkultuurimise käigus uude kultuuranumasse, on tavaliselt vahemikus 1:3 kuni 1:6, sõltuvalt rakkude tihedusest ja kasvukiirusest
HCT116 ja SW480 rakud, mis mõlemad on saadud kolorektaalkartsinoomidest, erinevad oma geneetiliste mutatsioonide, kasvajate tekitamise võime ja ravimitele reageerimise poolest, mis peegeldab kolorektaalkartsinoomi heterogeensust
Kuigi nii HCT116 kui ka HT-29 rakuliine kasutatakse kolorektaalvähi uuringutes, erinevad nad oma geneetilise koostise, morfoloogiliste omaduste ja kemoteraapiale reageerimise poolest, mistõttu sobivad mõlemad erinevateks uurimisvaldkondadeks
HCT116 rakke eelistatakse vähiuuringutes nende hästi iseloomustatud geneetilise tausta, eksperimentide reprodutseeritavuse ja nende asjakohasuse tõttu inimese pärasoolevähi puhul, mis muudab need väärtuslikuks vähibioloogia ja ravimite tõhususe uuringutes

 Viited

  1. Waghela, B.N., F.U. Vaidya ja C. Pathak: NOX-2 ja Nrf-2 ülesreguleerimine soodustab 5-fluorouratsiili resistentsust inimese käärsoolekartsinoomi (HCT-116) rakkudes. Biochemistry (Moskva), 2021, 86, lk 262–274.
  2. Yang, M. jt, Astragaliin pärsib inimese käärsoolevähirakkude HCT116 proliferatsiooni ja migratsiooni, reguleerides NF-κB signaaliteed. Frontiers in Pharmacology, 2021, 12: lk 639256.
  3. Deepika, S., C.I. Selvaraj ja S.M. Roopan, Caesalpinia pulcherrima L. swartz'i bioaktiivsuse ja ekstraktist sünteesitud hõbedananoosakeste tsütotoksilisuse sõelumine HCT116 rakuliinil. Materials Science and Engineering, C, 2020, 106, lk 110279.
  4. Gao, X. jt, Kakaotee (Camellia ptilophylla) indutseerib HCT116 rakkudes mitokondritest sõltuvat apoptoosi ROS-i tekke ja PI3K/Akt signaalitee kaudu. Food Research International, 2020, 129, lk 108854.
  5. Hidayat, A.F.A. jt, Dioscorea bulbifera indutseeris apoptoosi ERK 1/2 inhibeerimise ja JNK signaaliteede aktiveerimise kaudu HCT116 inimese kolorektaalse kartsinoomi rakkudes. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2018. 104: lk 806–816.

 

Oleme tuvastanud, et asute teises riigis või kasutate hetkel valitud keelest erinevat brauseri keelt. Kas soovite nõustuda soovitatud seadistustega?

Sulge