CAL27 rakud - CAL27 rakke kasutades keskendutakse pea- ja kaelavähi uurimisele
CAL27 on üks kõige sagedamini kasutatavatest suuõõne laikerkartsinoomi rakuliinidest biomeditsiinilistes uuringutes. See on väärtuslik vahend, mille abil saab uurida lamerakkvähi keerukust, sealhulgas kasvaja kasvu, arengut ning selle aluseks olevaid rakulisi ja molekulaarseid mehhanisme. Lisaks sellele hõlbustab see ka ravimite sõelumist ja testimist vähivastaste ravimite väljatöötamiseks.
See artikkel pakub teile väärtuslikke teadmisi CAL27 rakuliini kohta ja käsitleb järgmisi teemasid:
- CAL27 rakkude päritolu ja üldised omadused
- Teave CAL27 rakuliini kultiveerimise kohta
- CAL27 rakuliin: Eelised ja puudused
- CAL27 rakkude rakendused teadusuuringutes
- CAL27 rakuliiniga seotud publikatsioonid
- CAL27 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud
1. CAL27 rakkude päritolu ja üldised omadused
Esimene asi, mida peate rakuliini kohta teadma, on selle päritolu ja üldised omadused, mis eristavad seda teistest rakuliinidest. See artikli osa hõlmab esmast teavet CAL27 rakkude kohta. Te saate teada: Mis on CAL27 rakuliin? Mis on CAL27 HPV? Mis on CAL27 HER2 staatus? Mis on CAL27 rakuliini päritolu? Milline on CAL27 rakkude morfoloogia? Milline on CAL27 rakkude suurus?
- Suu laugurakuvähi rakuliin CAL27 töötati välja 56-aastase valge mehe keele koest, kellel esines keele laugurakukartsinoomi haigus. Rakuliin loodi 1982. aastal Gioanni ja tema kolleegide poolt [1].
- CAL27 vähirakkudel on epiteelilaadne morfoloogia.
- Nendel rakkudel on aneuploidne karüotüüp. Nende modaalne kromosoomide arv on 43.
2.teave CAL27 rakuliini kasvatamise kohta
Rakuliini lihtsaks ja teostatavaks hooldamiseks peate teadma selle peamisi rakukultuurinõudeid. Selles jaotises käsitletakse CAL27 rakuliini tähtsaid rakukultuuride kasvatamise mõisteid. Te peaksite teadma: Milline on rakuliini CAL27 kahekordistumisaeg? Milline on CAL27 rakuliini rakukeskkond? Milline on rakuliini CAL27 subkultiveerimissuhe? Millised on CAL27 kasvatustingimused? Kuidas kasvatada CAL27 rakke?
CAL27 rakkude kultiveerimise põhipunktid
|
Kordistumisaeg: |
CAL27 rakkude kasvutempo on mõõdukas, populatsiooni kahekordistumise aeg on ligikaudu 45 tundi. |
|
Adherentselt või suspensioonis: |
Need hulknurksed CAL27 rakud kleepuvad kultuuranuma pinnale ja kasvavad monokihiliseks. |
|
Jagunemissuhe: |
CAL27 rakke subkultiveeritakse jagatud vahekorras 1:2 kuni 1:4. Subkultuurimiseks pestakse adherentsed rakud magneesiumi- ja kaltsiumivaba fosfaatpuhvrisoolalahusega (1x). Seejärel inkubeeritakse rakke Accutase'iga (passageerimislahus) ümbritseva õhu temperatuuril 8-10 minutit. Eemaldunud rakud lisatakse värsket keskkonda ja tsentrifuugitakse. Kogutud pellet resuspendeeritakse seejärel ettevaatlikult ja valatakse uutesse kasvukeskkonda sisaldavatesse kolvidesse. |
|
Kasvukeskkond: |
CAL27 rakuliini kasvatamiseks kasutatakse kasvukeskkonda DMEM, millele on lisatud 10% FBS, 4,5 g/L glükoosi, 4 mM L-glutamiini, 1,5 g/L NaHCO3 ja 1,0 mM naatriumpüruvaati. Keskkonda tuleb vahetada 2 kuni 3 korda nädalas. |
|
Kasvutingimused: |
CAL27 rakukultuure hoitakse 37 °C juures niisutatud inkubaatoris, kus on 5% CO2. |
|
Säilitamine: |
Külmutatud CAL27 rakke hoitakse pikemalt kas vedelas lämmastikus aurufaasis või alla -150°C temperatuuril ülimadalas sügavkülmikus. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond: |
CAL27 rakkude külmutamiseks soovitatakse kasutada CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda. Selleks soovitatakse aeglast külmutamist, mis võimaldab rakkude elujõulisuse kaitsmiseks temperatuuri langust ainult 1 °C minutis. |
|
Sulatamisprotsess: |
Külmutatud rakkude viaalid pannakse 40-60 sekundiks 37 °C temperatuurile eelseadistatud vesivanni, kuni alles jääb väike jääklomp. Rakkudele lisatakse värsket söötmeainet ja tsentrifuugitakse. Seejärel eemaldatakse külmutuskeskkond ning rakupellet lisatakse värskele kasvukeskkonnale ja resuspendeeritakse ettevaatlikult. Seejärel jaotatakse rakud uutesse kasvukolbidesse. |
|
Bioturvalisuse tase: |
CAL27 rakukultuuride käitlemiseks ja hooldamiseks on vaja 1. bioloogilise ohutuse taseme laboratooriumi seadeid. |
3.cAL27 rakuliin: Eelised ja puudused
CAL27 on laialdaselt kasutatav suuõõne laugurakk-kartsinoomi rakuliin. Selles jaotises tuuakse välja mõned olulised eelised ja puudused, mis on seotud nende vähirakkudega.
Eelised
CAL27 rakuliini peamised eelised on järgmised:
|
Tumorigeensus |
CAL27 rakuliinil on tumorigeenne potentsiaal. Need rakud võivad arendada tuumoreid, kui neid süstitakse alasti või immuunpuudulikkusega hiirtele. See võib aidata teadlastel sügavuti mõista kasvaja bioloogiat ja mikrokeskkonda. |
|
Geneetilised mutatsioonid |
CAL27 rakkudel on spetsiifilised genoomimuutused, näiteks CAL27 P53, mis esinevad tavaliselt suuõõne plaatinakartsinoomil. Seega võib CAL27 kasutamine olla kasulik teadlastele, kes uurivad nende mutatsioonide mõju vähi kasvule, arengule ja progresseerumisele. |
|
Lihtne kasvatada |
Suuõõne skamoosse rakuliini CAL27 puhul ei ole rakukultuurile mingeid keerulisi nõudeid. Seega on seda lihtne kasvatada ja hooldada teaduslaboratooriumides. |
Puudused
CAL27 rakuliiniga seotud puudused on järgmised:
|
In vitro mudel |
CAL27 rakud toimivad suuõõne lamerakk-kartsinoomi in vitro mudelina. Siiski on oluline märkida, et need ei pruugi täpselt kajastada originaalsete laasirakkude kasvajate omadusi ja keerukust. |
4.cAL27 rakkude rakendused teadusuuringutes
CAL27 rakuliinil on biomeditsiinilistes uuringutes palju rakendusi. Mõned olulised kasutusalad teadusuuringutes on loetletud siin.
- Vähibioloogia: CAL27 rakke on laialdaselt kasutatud suuõõne lamerakk-kartsinoomi (OSCC) arengu ja progresseerumise aluseks olevate molekulaar- ja rakumehhanismide uurimiseks. Teadlased uurivad ka geneetilisi mutatsioone, signaaliradu ja olulisi biomarkereid, mis on seotud lamerakk-kasvajatega. 2021. aastal läbiviidud uuringus kasutati CAL27 rakke ja uuriti CD147 rolli suuõõne plaatinavähi arengus. Uuringu tulemused näitasid, et CD147 knockdown põhjustas CAL27 rakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiooni pärssimist. Lisaks sellele takistab selle allareguleerimine ka vähirakkude ravimresistentsuse arengut [2].
- Ravimite väljatöötamine: CAL27 rakuliin on väärtuslik vahend kasvajavastaste ravimite skriininguks ja testimiseks. Teadlased kasutavad neid rakke erinevate kemoterapeutiliste ainete, sihtotstarbeliste ravimeetodite ja eksperimentaalsete ravimite tõhususe testimiseks suuvähirakkude proliferatsiooni, kasvu ja elujõulisuse pärssimisel. Lisaks sellele on hinnatud potentsiaalsete vähivastaste ainete moduleerivat mõju vähirakkude düsreguleeritud signaaliradadele. See võib aidata välja töötada tõhusaid ja isikupärastatud ravimeetodeid haiguse vastu võitlemiseks. Uuringus uuriti tsinkoksiidi nanoosakeste kasvajavastast potentsiaali, kasutades CAL27 rakke. Uuringu tulemused näitasid, et tsinkoksiidi nanoosakesed avaldasid tsütotoksilist mõju ja indutseerisid ka PINK1/Parkini raja poolt vahendatud mitofaagiat CAL27 keelevähirakkudes [3]. Samamoodi täheldasid teadlased doksorubitsiini ja selle nanovorminguga vormi (Doxil) vähivastast potentsiaali CAL27 suuõõne plaatinavähi puhul [4].
5.cAL27 rakuliiniga seotud publikatsioonid
Selles artikli osas käsitletakse mõningaid huvitavaid ja enim tsiteeritud publikatsioone CAL27 vähirakkude kohta:
See uurimus on avaldatud ajakirjas Frontiers in Oncology (2020). Uuringus uuriti vismodegibi või itrakonasooli mõju suuõõne laikerkelmevähi vastu, kasutades CAL27 rakke.
See artikkel ajakirjas Frontiers in Genetics (2021) pakkus välja, et plasminogeeni aktivaator, urokinaasi (PLAU) valk soodustab CAL27 rakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja epiteeli-mesenhüümset üleminekut (EMT).
MikroRNA-145-5p süvendab rakkude apoptoosi ja oksüdatiivset stressi keele plaatinakartsinoomil
Käesolevas artiklis ajakirjas Experimental and Therapeutic Medicine (2021) leiti, et miRNA-145-5p süvendab CAL27 rakkude oksüdatiivset stressi ja surma ning pärsib PI3K/AKT signaalirada.
Taimeekstrakti moriini kasvajavastane aktiivsus keele plaatrakartsinoomi rakkudes
See uuring ajakirjas Oncology Reports (2018) uuris CAL27 rakke kasutades bioflavonoidi nimega morin vähivastast toimet.
Selles ajakirjas Journal of Ethnopharmacology (2023) avaldatud artiklis uuriti Rosmarinus officinalis L. ja Taraxacum officinale ekstraktide terapeutilist potentsiaali CAL27 rakkudele.
6.cAL27 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud materjalid: protokollid, videod ja muud
CAL27 rakuliini kohta on piiratud hulk kättesaadavaid ressursse. Selles jaotises on loetletud mõned üldised protokollid, mis võivad aidata teil ka CAL27 rakkudega tegelemisel:
- CAL27 rakkude transfektsioon: See video aitab teil õppida üldist protokolli plasmiid-DNA transfektsiooni jaoks.
- Adherentsete rakkude subkultiveerimine: See video juhendab teid põhjalikult adherentsete rakuliinide subkultiveerimise kohta.
Järgmine link sisaldab CAL27 rakukultuuri protokolli.
- CAL27 rakuliin: See veebisait sisaldab teavet CAL27-keskkonna, külvitiheduse, kahekordistumisaja jne kohta. Peale selle sisaldab see protokolli subkultuuride subkultiveerimise ja proliferatsiooni ning krüokonserveeritud kultuuride käitlemise kohta.
Viited
- Liu, X., et al., LINC00472 pärsib suuõõne plaatinakartsinoomi kasvu miR-455-3p/ELF3 telje suunamisega. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
- Pan, S., et al., Knockout of CD147 inhibeerib inimese suuvähi CAL27 rakkude proliferatsiooni, invasiivsust ja ravimiresistentsust in vitro ja in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
- Wang, J., et al., Tsinkoksiidi nanoosakesed indutseerivad toksilisust CAL 27 suuvähi rakuliinides PINK1/Parkin-vahendatud mitofaagia aktiveerimise kaudu. International Journal of Nanomedicine, 2018: p. 3441-3450.
- Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen ja A.M.S. Eldeen, Liposoomiga kaetud nanodoksorubitsiin indutseerib apoptoosi suuõõne plaatinarakukartsinoomi CAL-27 rakkudel. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47-54.