BxPC-3 rakuliin
BxPC-3 on inimeselt pärinev kõhunäärmevähi rakuliin. Seda kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes. Teadlased kasutavad neid rakke peamiselt kõhunäärmevähi bioloogia uurimiseks, terapeutiliste sihtmärkide tuvastamiseks ja vähivastaste ravimite väljatöötamiseks.
See artikkel hõlmab olulist teavet BxPC-3 rakuliini kohta, mis võib oluliselt aidata teil sellega töötada. Peamiselt arutatakse:
- BxPC-3 rakuliini üldine teave ja päritolu
- BxPC-3 rakkude kasvatamine
- BxPC-3 rakuliin: Bxxx-Bxxx-3: eelised ja piirangud
- BxPC-3 rakkude rakendused teadusuuringutes
- BxPC-3 rakkude kohta avaldatud teaduspublikatsioonid
- BxPC-3 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud
1. üldine teave ja BxPC-3 rakuliini päritolu
Rakuliini päritolu teadmine on selle rakendatavuse jaoks teadusuuringutes ülioluline. Selle omaduste, sealhulgas morfoloogia, rakkude suuruse ja ploidsuse tundmine muudab selle kasutamise lihtsamaks ja mugavamaks. Siinkohal saate teada BxPC-3 rakkude päritolu ja üldised omadused: Mis on BxPC-3 rakud? Mis on BxPC-3 rakuliin? Mis on BxPC-3 rakuliini päritolu? Milline on BxPC-3 morfoloogia?
- BxPC-3, inimese kõhunäärmekartsinoomi rakud on saadud 1986. aastal 61-aastaselt Euroopa naiselt, kellel oli kõhunäärme adenokartsinoom. Need rakud kinnitati kasvajaks ka pärast seda, kui patsient oli läbinud mitmeid radio- ja keemiaravi seansse. Seega on loodud rakuliin hindamatu väärtusega mudel vähi arengu ja progresseerumise uurimiseks.
- BxPC-3 rakkudel on epiteelirakkude sarnane morfoloogia.
- BxPC-3 modaalne kromosoomiarv on 59. Nendel rakkudel on homosügootne deletsioon kromosoomil 18q, mis kodeerib SMAD4/DPC4 valku. Lisaks puudub rakuliinil BxPC-3 kras-mutatsioon, mis on levinud kõhunäärmekasvajate seas. Nendes kõhunäärmevähi rakkudes on leitud ka BxPC-3 braf deletsioon.
Mis on BxPC3 ja PANC-1 erinevus?
BxPC-3 PADC (pankrease ductus adenokartsinoom) ja PANC-1 rakud on primaarsed kõhunäärmevähi rakuliinid, millel on epiteliaalne morfoloogia. Siinkohal on esimestel rakkudel rohkem epiteelilaadseid omadusi, samas kui hilisematel on rohkem mesenhüümilisi omadusi [1].
2. bxPC-3 rakkude kasvatamine
BxPC-3 rakuliini kasutatakse laialdaselt vähiuuringute laborites. Selle kõhunäärmevähi rakuliini tõhusaks kultiveerimiseks peate teadma järgmisi põhipunkte. Te saate teada: Milline on bxpc3 kahekordistumisaeg? Kuidas kasvatada BxPC-3 rakuliini?
BxPC-3 rakkude kultiveerimise põhipunktid
|
Populatsiooni kahekordistumisaeg: |
BxPC-3 rakkude kahekordistumisaeg jääb vahemikku 48-60 tundi. |
|
Adherentselt või suspensioonis: |
BxPC-3 on adherentne rakuliin. |
|
Jagunemissuhe: |
BxPC-3 rakke subkultiveeritakse vahekorras 1:2 kuni 1:4. Rakud pestakse 1 x PBS-ga ja inkubeeritakse akutase-nimelise passageerimislahusega. Pärast 8-10 minutit lisatakse rakkudele värsket keskkonda ja rakud tsentrifuugitakse. Pellet taas resuspendeeritakse meediumis ja rakud valatakse kasvamiseks uude kasvatusanumasse. |
|
Kasvukeskkond: |
BxPC-3 rakuliini kasvatamiseks kasutatakse RPMI 1640 keskkonda. Seda täiendatakse 10% veise loote seerumi, 2,1 mM stabiilse glutamiini ja 2,0 g/L NaHCO3-ga, et saavutada rakkude ideaalne kasv. Keskkonda tuleb vahetada 2 kuni 3 korda nädalas. |
|
Kasvutingimused: |
BxPC-3 rakukultuure hoitakse 37 °C niiskendatud inkubaatoris, mis on ühendatud 5% CO2-ga. |
|
Säilitamine: |
Külmutatud rakke säilitatakse üldiselt alla -150 °C temperatuuril või vedela lämmastiku aurufaasis, et kaitsta rakkude elujõulisust. |
|
Külmutamisprotsess ja keskkond: |
BxPC-3 rakukultuuride külmutamiseks võib kasutada CM-1 või CM-ACF. Rakkude šoki vältimiseks järgitakse aeglast külmutamisprotsessi, mis võimaldab temperatuuri langust ainult 1 °C võrra. |
|
Sulatamisprotsess: |
Külmutatud BxPC-3 rakke sulatatakse 40-60 sekundi jooksul eelnevalt seadistatud 37 °C veevannis. Pärast seda, kui on jäänud väike jääklomp, lisatakse rakud värske kultuurkeskkonnaga ja tsentrifuugitakse, et eemaldada külmutuskeskkonna elemendid. Seejärel resuspenseeritakse rakupellet uuesti ja rakud doseeritakse kolbi kasvamiseks. |
|
Bioturvalisuse tase: |
BxPC-3 rakukultuure hoitakse 1. bioohutuse taseme laboratooriumides. |
3. bxPC-3 rakuliin: Bxxxx: Eelised ja piirangud
BxPC-3 on tuntud kõhunäärme adenokartsinoomi rakuliin, millel on mitmeid eeliseid ja piiranguid. Siin on loetletud rakuliini peamised eelised ja puudused.
Eelised
BxPC-3 rakuliini peamised eelised on järgmised:
-
In vitro kõhunäärmevähi mudel
BxPC-3 rakud, mis on saadud kõhunäärme adenokartsinoomiga patsientidelt, omavad asjakohaseid omadusi, mistõttu on nad sobiv mudel kõhunäärmevähi käitumise uurimiseks in vitro.
-
Tuumorigeenne rakuliin
BxPC-3 rakkudel on tumorigeensed omadused ja nad võivad moodustada tuumoreid, kui neid süstitakse alasti või immuunpuudulikkusega hiirtele. Need kasvajad sarnanevad suuresti primaarsete kõhunäärme adenokartsinoomi kasvajatega, mistõttu BxPC-3 ksenotransplantaadi mudel on ideaalne vähi kasvu ja progresseerumise uurimiseks.
Piirangud
BxPC-3 rakuliiniga seotud piirangud on järgmised:
-
Ristsaastumine
BxPC-3 rakuliiniga, nagu iga teisegi rakuliiniga, kaasneb ristsaastumise oht. Teadlased peaksid nende rakkude käitlemisel olema ettevaatlikud ja järgima rangeid saastumise vältimise protokolle.
-
Aeglane kasvukiirus
BxPC-3 rakud on suhteliselt aeglaselt paljunevad, nende kahekordistumisaeg jääb vahemikku 48-60 tundi. See omadus võib nõuda pikemaid inkubatsiooniperioode konkreetsete katsete jaoks, mis võib põhjustada viivitusi teadusuuringute läbiviimisel.
4. bxPC-3 rakkude kasutamine teadusuuringutes
BxPC-3 rakud pakuvad vähiuuringutes mitmeid rakendusi. Kõige levinumad rakendused on järgmised:
- Kõhunäärmevähi uuringud: BxPC-3 rakud imiteerivad kõhunäärme adenokartsinoomi ja seega kasutatakse neid kasvajate arengu ja kasvu aluseks olevate geneetiliste ja molekulaarsete mehhanismide uurimiseks. Lisaks sellele avastavad teadlased nende rakkude abil uusi biomarkereid ja terapeutilisi sihtmärke. Lisaks sellele ekspresseerivad BxPC-3 rakud märkimisväärselt angiogeensed faktorid, st interleukiin-8 (IL-8), prostaglandiin E2 (PGE2) ja vaskulaarne endoteeli kasvufaktor (VEGF), mis muudab need rakud sobivaks angiogeneesi uurimiseks. Siinkohal on angiogenees oluline protsess, mis on seotud vähi kasvu ja metastaasidega. 2022. aastal avaldatud uuringus uuriti, et laminiin-5 gamma-2 (LAMC2) üleekspressioon BxPC3 PDAC-s (pankrease ductuse adenokartsinoom) suurendab selle kasvajate teket BxPC3 EGFR /ERK1/2 / AKT / mTOR-signaaltee reguleerimise kaudu [2].
- Ravimite avastamine ja arendamine: BxPC-3 rakuliin on hindamatu väärtusega vähivastase ravimi testimise mudel. Teadlased uurivad potentsiaalsete ravimite tsütotoksilist, metastaatikavastast ja apoptootilist toimet BxPC3 PDAC-le. Alexandria Turneri ja kolleegide 2020. aastal läbi viidud uuringus uuriti Elaeocarpus reticulatus'e puuviljaekstrakti apoptootilisi omadusi BxPC-3 kõhunäärmevähirakkudes [3]. Samamoodi viidi 2020. aastal läbi uuring, milles määrati Oxialis obtriangulata nimelise taime metanoolse ekstrakti vähivastane potentsiaal BxPC-3 rakkudes. Lisaks uurisid teadlased ka rakumehaanilist teed, mille kaudu taimeekstrakt avaldas terapeutilist mõju [4].
5.bxPC-3 rakke käsitlevad teaduspublikatsioonid
Selles jaotises on loetletud mõned enim tsiteeritud ja huvitavad publikatsioonid, milles kasutatakse BxPC-3 rakuliini.
Licocoumarone indutseerib BxPC-3 kõhunäärme adenokartsinoomi rakkude surma DYRK1A inhibeerimise teel
Selles ajakirjas Chemico-Biological Interactions (2020) avaldatud väljaandes uuriti loodusaine licocoumarone apoptootilist mõju BxPC-3 kõhunäärmevähirakkudele.
See teadusartikkel on avaldatud ajakirjas Anticancer Research (2022). Uuringus pakuti välja, et hüdroksüklorokiin põhjustab BxPC3 rakkude surma BCL-XL geeni inhibeerimise kaudu.
See uuring avaldati 2020. aastal ajakirjas Journal of Cellular Biochemistry. Uuringus märgitakse, et looduslik ühend salidrosid avaldab BxPC-3 rakkudes vähivastast toimet, reguleerides HIF-1α (hüpoksia indutseeritav faktor) ja LOXL2 signaalkaskaadi.
See artikkel ajakirjas Biomedicine & Pharmacotherapy viitab sellele, et ibrutiniibi võib kasutada suurepärase kiirgustundlikkuse suurendajana kõhunäärmevähiga patsientidel. In vitro uuring BxPC-3 rakkudes näitab, et see vähendab BxPC3 EGFR-i fosforüülimist ja pAKT ning radioteraapia poolt ülesreguleeritud allavoolu geenide ekspressiooni.
Chelidoniin indutseerib apoptoosi GADD45a-p53 regulatsiooni kaudu inimese kõhunäärmevähirakkudes
Käesolevas uuringus ajakirjas Integrative Cancer Therapies pakuti välja, et looduslik toode keliidoniin avaldab inimese kõhunäärme rakkudes BxPC-3 apoptootilist toimet BxPC3 p53 ja GADD45a signaalimise reguleerimise kaudu.
6. bxPC-3 rakuliini ressursid: Bxxxxxx: Protokollid, videod ja muud vahendid: Protokollid, videod ja muud
BxPC-3 rakuliinil on palju kütkestavaid eeliseid, mis muudavad selle sobivaks teaduslikuks kasutamiseks. Paljudes BxPC-3 rakuliini käsitlevates veebiressurssides on mainitud selle käitlemist, hooldust ja transfektsiooniprotokollis.
- BxPC3 transfektsioon: See video on samm-sammuline juhend BxPC-3 rakkude transfektsiooniprotokolli õppimiseks.
Selles artikli osas on mõned lingid, mis selgitavad BxPC3 rakukultuuriprotokolle.
- BxPC3 rakukultuur: See veebisait aitab teil õppida protokolle krüokonserveeritud ja proliferatiivsete BxPC-3 kultuuride subkultiveerimiseks ja käitlemiseks.
Viited
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Laminiin-5 gamma-2 üleekspressioon soodustab pankrease ductuse adenokartsinoomi kasvajate teket EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR kaskaadi kaudu. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruit extracts reduce viability and induce apoptosis in pancreatic cancer cells in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Oxialis obtriangulata vähivastane potentsiaal kõhunäärmevähirakkudes ERK/Src/STAT3-vahendatud raja reguleerimise kaudu. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.