B16 rakud - B16 melanoomirakkude põhijuhend onkoloogilistes uuringutes

B16 on nahavähi (melanoomi) rakuliin, mis on pärit hiirtest. See rakuliin on tõhus in vitro mudel inimese nahavähi uurimiseks. Seda kasutatakse sageli vähirakkude tahkete kasvajate moodustumise ja metastaaside tekke uurimiseks.

See artikkel aitab teil mõista B16 melanoomi rakuliini põhitõdesid. Konkreetsemalt käsitletakse järgmist:

1.b16 rakuliini üldised omadused ja päritolu

Selles artikli osas käsitletakse B16 melanoomi rakuliini iseloomulikke omadusi. Te saate teada vastused järgmistele sageli esitatavatele küsimustele. Näiteks: Mis on B16 vähirakuliin? Kust pärinevad B16 rakud? Milline on B16 rakkude suurus?

B16 rakuliin loodi 1954. aastal. Need rakud on saadud C57BL/6J hiirtest, kes said Maine'is asuvas Jackson Laboratories'is spontaanselt nahakasvaja.
Need on melaniini tootvad epiteelirakud, millel on võime metastaseeruda põrnas, maksas ja kopsudes.
Melanoomi B16 rakud kasvavad monokihina ja neil on epiteelilaadne ja spindlikujuline rakumorfoloogia.
B16 rakuliini suurus on ligikaudu 15,4 μm.
B16-rakkudest on olemas erinevad alamkloonid, sealhulgas B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 ja B16F10. Need alamliinid erinevad B16-vanuserakkudest ja säilitavad mõned spetsiifilised omadused. Näiteks on neil erinev morfoloogia, rakkude suurus ja muud omadused. B16F10-l on suur kopsumetastaatiline võime ja B164A5 on kõige agressiivsem nahavähi rakuliin võrreldes B16F10, B16-GMCSF ja B16FLT3-ga [1].

3D-animatsioon lähivõttest kasvavast nahavähist, näiteks pahaloomulisest melanoomist, mis põletab ümbritsevat kude.

2.b16 rakuliini kultiveerimisandmed

Enne rakuliini säilitamist või kultiveerimist võiksite otsida põhiteavet kahekordistumisaja, rakutüübi, kasvukeskkonna, kultiveerimistingimuste jne kohta. Selles jaotises on esitatud kogu vajalik teave B16-rakkude kultiveerimiseks.

B16 rakkude kultiveerimise põhipunktid

Populatsiooni kahekordistumisaeg:	B16-rakkude keskmine populatsiooni kahekordistumisaeg on hinnanguliselt 24 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	B16 rakud on adherentsed ja kasvavad monokihina.
Külvikutihedus:	B16 rakke soovitatakse külvata 1 kuni 2 x¹⁰⁴ ^rakku/cm2 rakutihedusega. Kinninevad B16 rakud loputatakse 1 x PBS-ga ja dissotsieeruvad pinnalt Accutase lahuse abil. Rakud tsentrifuugitakse ja rakupellet resuspenseeritakse kasvukeskkonnas. Hiljem doseeritakse need rakud uude kolbi kasvatamiseks.
Kasvukeskkond:	B16 rakke kasvatatakse EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) kasvukeskkonnas, mis sisaldab 10 % veiste loote seerumit (FBS). Kasvukeskkonda tuleb uuendada 2-3 korda nädalas.
Kasvutingimused:	B16 rakuliini kasvatamiseks kasutatakse niisutatud inkubaatorit, kus on 5 %_CO2 ja 37 °C temperatuur.
Säilitamine:	Neid rakke säilitatakse alla -150 °C temperatuuril või vedela lämmastiku aurufaasis, et kaitsta rakkude elujõulisust.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	B16 rakkude külmutamiseks kasutatakse CM-1 või CM-ACF külmutuskeskkonda, kasutades aeglast külmutamisprotsessi.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud B16 rakud sulatatakse 37 °C juures veevannis, mis sisaldab antimikroobset ainet. Sulatatud rakke saab otse kasvatada, doseerides neid kasvukeskkonda sisaldavatesse kolvidesse. Peale selle võib neid rakke tsentrifuugida, et eemaldada külmutuskeskkonna komponendid, ja seejärel kasvatada neid uues keskkonnas.
Bioturvalisuse tase:	B16 rakuliini tuleks käsitleda või hoida esimese bioohutuse taseme laboris.

B16 melanoomirakkude poolkonfluentne kiht 10x ja 20x suurenduses.

3. b16 rakuliin: B16: eelised ja puudused

Nagu teistelgi rakuliinidel, on ka B16-l unikaalne segu eeliseid ja puudusi. Selles jaotises on loetletud selle melanoomi rakuliini mõned olulised eelised ja puudused.

Eelised

B16 on esimene tõhus hiireliin, mida kasutatakse laialdaselt metastaaside uurimisel tänu selle eelistele. Mõned selle nahavähi rakuliini eelised on järgmised:

Lihtne kasvatada	B16 rakuliini on lihtne kasvatada uurimislaboratooriumides. Seda kasutatakse laialdaselt vähirakkude bioloogia, signaaliradade jms uurimiseks.
Kiire kasvamine	B16 melanoomi rakuliinil on kõrge proliferatsioonikiirus, mistõttu sobib see rakkude jagunemise ja kasvuprotsesside uurimiseks.
Tumorigeensus	B16 on tuumorigeenne rakuliin, millel on kasvajakujulised omadused, nagu invasiivsus, migratsioon ja proliferatsioon. See on väärtuslik kasvajate tekke, progresseerumise ja metastaaside uurimise jaoks.

Puudused

B16 rakuliiniga seotud puudused on järgmised:

Puudulikkus inimese jaoks	Kuna B16 on hiire melanoomi rakuliin, ei pruugi see täpselt esindada inimese nahavähi bioloogiat, mis piirab uurimistulemuste ülekantavust.
Heterogeensus	B16 rakud on heterogeensed, omades samas kultuuris erinevaid geneetilisi ja fenotüüpseid omadusi. See võib mõjutada tulemuste usaldusväärsust ja reprodutseeritavust.

4. b16 rakkude rakendused

B16 rakuliini kasutatakse laialdaselt teadusuuringutes. Mõned selle rakuliini paljutõotavad rakendused on järgmised:

Kasvaja bioloogia: See hiirte nahavähi rakuliin on tuumorigeenne ja seda kasutatakse laialdaselt kasvajate bioloogia mõistmiseks. B16 rakkude abil on läbi viidud mitmeid uuringuid, et uurida rakumehhanisme, mis on aluseks kasvajarakkude kasvule, proliferatsioonile ja metastaasile. 2020. aastal läbiviidud uuringus kasutati B16 rakke, et uurida pika mittekodeeriva RNA, LncRNA MEG3, rolli melanoomi moodustumisel, kasvamisel ja metastaasis. Selles uuringus leiti, et see mittekodeeriv RNA moduleerib miRNA-21/E-Cadherini telge, et stimuleerida neid rakusündmusi [2]. Samamoodi viidi läbi uuringud, et uurida Notch1-signalisatsiooni võimalikku rolli kasvajast põhjustatud immunosupressioonis, kasutades B16 rakke [3].
Ravimite avastamine: B16 rakke kasutatakse ravimikandidaatide võimaliku terapeutilise toime valideerimiseks ja testimiseks. Uuringus hinnati loodusliku ühendi neogamboghappe kasvajavastast toimet, kasutades B16 rakuliini. Uuringu tulemused näitasid, et see ühend moduleerib PI3K/Akt/mTOR signaalirada, et põhjustada vähirakkude surma [4]. Teises uuringus uuriti saponiini Ginsenosiid Rg3 melanoomivastast toimet, kasutades B16 rakuliini. Uuringus pakuti välja, et see looduslik ühend põhjustas kasvajavastast toimet ERK- ja Akt-radade allareguleerimise kaudu [5].

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 305154

5.b16 rakke sisaldav teaduspublikatsioon

Siin on mõned olulised uurimuspublikatsioonid, milles kasutatakse B16 melanoomi rakuliini.

LncRNA MEG3 soodustab melanoomi kasvu, metastaaside teket ja moodustumist miR-21/E-kadheriini telje moduleerimise kaudu

See publikatsioon ajakirjas Cancer Cell International (2020) pakkus välja, et pikk mittekodeeriv RNA MEG3 suurendab B16 melanoomirakkude moodustumist, kasvu ja metastaasi, moduleerides miRNA-21/E-kadheriini telge.

Uudne psoraleeni derivaat-MPFC suurendab melanogeneesi p38 MAPK ja PKA signaaliradade aktiveerimise kaudu B16 rakkudes

See artikkel avaldati ajakirjas International Journal of Molecular Medicine 2018. aastal. Selles uuringus uuriti psoraleeni derivaadi 4-metüül-6-fenüül-2H-furo[3,2-g] kromen-2-ooni (MPFC) melanogeenset toimet ja mehhanisme B16 rakkudes. Uuringus pakuti välja, et see derivaat soodustab melanogeneesi, stimuleerides PKA ja p38 MAPK rakkude signalisatsiooni.

Notch1-signalisatsioon melanoomirakkudes soodustas kasvajast tingitud immunosupressiooni TGF-β1 ülereguleerimise kaudu

See uuring avaldati 2018. aastal ajakirjas Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Uuringu tulemused viitavad sellele, et Notch1-signalisatsiooni aktiveerimine B16-rakkudes võib takistada kasvajavastast immuunsust TGF-β1 geeni ekspressiooni ülespoole tõstmise kaudu.

Neogambogaanhape indutseerib melanoomi B16 rakkude apoptoosi PI3K/Akt/mTOR-signaalitee kaudu

Selle uuringu viisid Chunlan Wu ja tema kolleegid läbi 2020. aastal ning see avaldati ajakirjas Acta Biochimica Polonica. Selles uuringus väidetakse, et looduslik ühend neogamboghape võib põhjustada B16 melanoomi rakkude surma, moduleerides PI3K/Akt/mTOR-signalisatsioonikaskadeid.

Iridium(III)-kompleks kui tugev vähivastane aine kutsub B16 rakkudes esile apoptoosi ja autofaagiat AKT/mTOR raja inhibeerimise kaudu

See teadustöö avaldati ajakirjas European Journal of Medicinal Chemistry 2018. aastal. Selles uuringus uurisid teadlased ühe ühendi, iriidium(III)-kompleksi vähivastast toimet, kasutades B16 melanoomirakke.

Ailantoon indutseerib rakutsükli peatamist ja apoptoosi melanoomi B16 ja A375 rakkudes

Selles uuringus pakuti välja, et taimne bioaktiivne aine, ailantoon, omab vähivastast potentsiaali, kuna see võib esile kutsuda apoptoosi ja rakutsükli peatamist B16 ja A375 melanoomirakkudes. See töö avaldati ajakirjas Biomolecules 2019. aastal.

6. b16 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud

B16 rakuliini kohta on piiratud ressursid, mis selgitavad selle kultiveerimise ja transfektsiooni protokollid.

Melanoomirakkude kultiveerimine: See video annab väärtuslikke nõuandeid melanoomi rakuliinide kultiveerimiseks.
Rakuliini subkultiveerimine: Selles videos selgitatakse rakuliini üldist subkultiveerimisprotokolli.
B16F10 rakuliini transfektsioon: Selles videos selgitatakse B16 melanoomirakkude alaliini transfektsiooniprotokolli. See aitab teil optimeerida B16 rakkude transfektsiooniprotokolli.

Järgnevalt on esitatud mõned rakukultuuriprotokollid B16 rakkude jaoks.

B16 rakkude kultiveerimine: See veebisait sisaldab kogu vajalikku teavet B16-rakkude kultiveerimiseks, sealhulgas kasvukeskkonda, subkultiveerimist, rakkude sulatamist ja külmutamist.

Viited

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J nahk. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 soodustab melanoomi kasvu, metastaaside teket ja moodustumist miR-21/E-kadheriini telje moduleerimise kaudu. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1-signalisatsioon melanoomirakkudes soodustas kasvajast põhjustatud immunosupressiooni TGF-β1 ülereguleerimise kaudu. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogambogaanhape indutseerib melanoomi B16 rakkude apoptoosi PI3K/Akt/mTOR-signaalitee kaudu. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Ginsenosiidi Rg3 kasvajavastane toime melanoomi puhul ERK ja Akt radade allareguleerimise kaudu. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.