A431 rakud - Epidermoidse kartsinoomi rakkude süvaanalüüs dermatoloogilistes uuringutes

A431 on inimese epidermoidse vähi rakuliin. Seda kasutatakse laialdaselt biomeditsiiniuuringute valdkonnas, peamiselt vähibioloogia, immuunsüsteemi ja toksikoloogia uuringutes. Lisaks sellele ekspresseerivad A431 rakud EGFR-i (epidermise kasvufaktori retseptor) üle, mistõttu neid kasutatakse väärtusliku in vitro mudelina rakutsükli ja vähiga seotud raku signaaliradade uurimiseks.

Käesolevas artiklis selgitatakse vähirakuliini A431 põhitõdesid. Te saate teada järgmist:

A431 rakud: Üldised omadused ja päritolu
A431 rakuliin: Teave kultiveerimise kohta
A431 rakuliini eelised ja puudused
A431 rakkude uurimisrakendused
A431 rakke sisaldavad teaduspublikatsioonid
A431 rakuliini ressursid: Protokollid, videod ja muud materjalid: protokollid, videod ja muud

1. A431 rakud: Üldised omadused ja päritolu

See artikli osa aitab teil teada saada üldist teavet A431 rakuliini kohta, mida peate teadma enne sellega töötamist. Näiteks, mis on A431 rakuliini päritolu Mis on A431 rakuliin? Millised on A431 rakuliini omadused? Milline on A431 rakkude morfoloogia? Kust pärinevad A431 rakud?

A431 on inimese nahavähi rakuliin, mis saadi 85-aastase naise epidermoidkartsinoomiga patsiendi epidermisest [1]. See loodi D.J. Giard jt. poolt, kes arendasid mitmeid teisi rakuliine soliidsetest kasvajatest.
A-431 rakud omavad epiteeli morfoloogiat. Nad koonduvad ja moodustavad rakuklastreid.
Nahavähi rakuliin a431 on hüpertriploidne. Selle rakuliini modaalne kromosoomide arv on 74, mis esineb umbes 36%-l rakkudest. Kõrgemat ploidsust esineb ka umbes 1% rakupopulatsioonist.

Kasvaja kasvab naha all ja infiltreerub aluskudedesse.

2.a431 rakuliin: Teave kasvatamise kohta

Rakuliini rakukultuuri nõuete ja protseduuride tundmine võib muuta selle käitlemise probleemivabaks. See osa artiklist aitab teil teada saada A431 rakuliini kultiveerimise põhipunkte. Näiteks saate teada, milline on A431 rakkude kahekordistumisaeg? Kas A431 vähirakuliin on adherentne? Millist kasvukeskkonda kasutatakse A431 jaoks?

A431 rakkude kultiveerimise põhipunktid

Kordistumisaeg:	A431 rakkude populatsiooni kahekordistumisaeg on 80-100 tundi.
Adherentselt või suspensioonis:	A431 on kleepuv rakuliin.
Külvikutihedus:	1 x¹⁰⁴ ^rakku/cm2 on A431 rakuliini jaoks ideaalne rakutihedus. Sellise tiheduse korral võtab rakkude konfluentseks muutumine peaaegu 4 päeva. Adherentsed rakud pestakse PBSiga (1x) ja inkubeeritakse Accutase passageerimislahusega. Seejärel resuspenseeritakse rakud kultuurkeskkonnas ja tsentrifuugitakse. Korjatud rakud resuspenseeriti uuesti ja jaotati uutesse kolvidesse kasvatamiseks.
Kasvukeskkond:	A431 rakuliini kasvatamiseks kasutatakse DMEM-keskkonda, mida on täiendatud 10% veise loote seerumi, 4,5 g/L glükoosi, 1,0 mM naatriumpüruvaadi, 1,5 g/L NaHCO3 ja 4 mM L-glutamiini sisaldusega. Keskkonda tuleb vahetada iga 2 kuni 3 päeva tagant nädalas.
Kasvutingimused:	A431 vähirakke kasvatatakse niisutatud inkubaatoris, mis on varustatud 5% CO2 allikaga temperatuuril 37 °C.
Säilitamine:	Rakuliini võib säilitada elektrilises sügavkülmikus või vedela lämmastiku aurufaasis temperatuuril alla -150°C, kuna see aitab kaitsta rakkude elujõulisust.
Külmutamisprotsess ja keskkond:	CM-1 või CM-ACF on kaks väga soovituslikku külmutuskeskkonda, mida kasutatakse A431 rakkude puhul. Rakkude külmutamisel kasutatakse aeglast külmutamismeetodit, mis võimaldab temperatuuri langust ainult 1 kraadi võrra minutis.
Sulatamisprotsess:	Külmutatud A431 rakke sulatatakse 37 °C veevannis, mis sisaldab antimikroobset ainet, 40-60 sekundit. Kui alles on jäänud vaid väike jääklomp, lisatakse rakud kultuurkeskkonnaga ja tsentrifuugitakse. Korjatud rakud resuspenseeritakse ja valatakse kasvukolbidesse.
Bioturvalisuse tase:	A431-kultuuride käitlemiseks ja hooldamiseks soovitatakse bioloogilise ohutuse esimest taset.

A-431 sferoidid erineva rakutihedusega.

3.a431 rakuliini eelised ja puudused

A431 rakuliinil on eristatavad omadused ning sellel on mitmeid eeliseid ja puudusi. Siinkohal oleme allpool kokku võtnud mõned neist.

Eelised

Vähirakuliini A431 peamised eelised on järgmised:

EGFR-i üleekspressioon	A431 rakud üleekspresseerivad epidermise kasvufaktori retseptorit (EGFR). Nad on positiivseks kontrolliks EGFR-signalisatsiooni ja selle mõju uurimisel vähktõve puhul. Neid kasutatakse ka uute vähiravimite hindamiseks.
Tumorigeensus	A431 rakud on tumorigeensed ja neil on võime moodustada kasvajaid. Neid saab kasutada ksenotransplantaadi vähimudelite väljatöötamiseks, mis on väärtuslikud vahendid kasvajate kasvudünaamika uurimiseks ja uute vähiravimite hindamiseks.

Puudused

A431 rakkude puudused on järgmised:

Geneetilised kõrvalekalded	A431 on vähirakuliin, mis sisaldab geneetilisi mutatsioone ja muutusi, mis võivad erineda algse kasvaja omadustest.
Mikroobne saastumine	A431 on altid mikroobilisele saastumisele, eelkõige bakteriaalsele saastumisele. Standardsete aseptiliste kasvatustingimuste säilitamine aitab siiski vältida sellist saastumist A431 rakukultuurides.

430,00 €*

Sisu: 1.5 milliliter

Hinnad ilma maksudeta pluss saatmiskulud

cryovial

Toote number: 300112

4. A431 rakkude uurimisrakendused

A431 rakuliini kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes. Siin on loetletud mõned selle nahavähi rakuliini paljutõotavad rakendused. Vähi bioloogia: Nahavähi rakuliin A431 on suurepärane uurimisvahend, et uurida rakulisi ja molekulaarseid mehhanisme, mis juhivad vähi kasvu, arengut, metastaasi ja invasiivsust.

Teadlased on seda rakuliini ulatuslikult kasutanud erinevate vähirakkude protsessides osalevate raku signaaliradade intensiivseks uurimiseks. Näiteks 2018. aastal läbi viidud uuringus uuriti, et PI3K/AKT/mTOR signaalirada on seotud vähirakkude proliferatsiooniga ja selle raja inhibeerimine kutsub esile apoptoosi nahakasvaja rakkudes A431 [2]. Peale selle teatati teises uuringus ka PI3K/AKT/mTOR raja panusest nahavähirakkude metastaasis ja epiteeli-mesenhümaalses üleminekus (EMT), mis näitab selle olulist rolli vähi arengus ja progresseerumises [3]. Ravimi testimine ja hindamine: A431 rakke kasutatakse potentsiaalsete vähivastaste ravimikandidaatide tõhususe ja tulemuslikkuse hindamiseks. Teadlased määrasid ravimite mõju vähirakkude proliferatsioonile, metastaasile, invasiivsusele ja apoptoosile, viies läbi mitmeid laborikatsete-uuringuid, mille viis läbi Nurhidayah Ab. Rahim ja kolleegid kasutasid A431 rakke ja hindasid 2022. aastal biogeenselt sünteesitud Alstonia angustiloba taime hõbeda nanoosakeste terapeutilist potentsiaali. Tulemustest selgus, et angustiloba-AgNP-d avaldasid antiproliferatiivset toimet naha plaatsiumsete kartsinoomirakkudele [4]. Kasvaja ksenotransplantaadimudelid: A431 rakuliin on tuumorigeenne ja võib hiire mudelisse inokuleerimisel moodustada kasvajaid. Seega on see kasulik vahend hiirte ksenotransplantaadimudelite väljatöötamiseks, et uurida vähi bioloogiat in vivo. Mitmes uuringus on vähirakuliini A431 kasutatud kasvajate ksenotransplantaadimudelite väljatöötamiseks. Näiteks Yu Jin Lim ja tema töörühm arendasid A431 rakkude abil nahakasvaja ksenotransplantaadi hiiremudeli, et hinnata eksogeense epidermise kasvufaktori (EGF) in vivo kasvajavastast ja kiirgussensibiliseerivat toimet [5]. 5. Uuringud, milles kasutati A431 rakke, on näidanud, et naha kasvajaks on kasvaja. A431 rakke sisaldavad teaduspublikatsioonid Siin on mõned olulised teaduspublikatsioonid, milles käsitletakse A431 nahakartsinoomi rakuliini. Biopolümeersete PVA-AuNPs ja PCL-Curcuminiga koormatud elektrospunitud nanokiudude tõhusus ja nende vähivastane toime A431 nahavähi rakuliini vastu See artikkel avaldati ajakirjas Materials Today Communications 2020. aastal. Uuringus hinnati polü-ε-kaprolaktooniga kurkumiiniga koormatud elektrospunditud nanokiudude ja polüvinüülalkohol-AuNP-de vähivastast potentsiaali vähirakkude A431 vastu. miRNA-221 soodustab nahapõletikukartsinoomi progresseerumist PTENi sihtimisega See Cellular & Molecular Biology Letters'is (2019) avaldatud uuring pakkus välja, et mikroRNA-221 mängib onkogeenset rolli nahapõletikukartsinoomis, sihtides PTEN-geeni. Catharanthus roseus'est isoleeritud Eutypella spp-CrP14 seenest saadud vinkristiin indutseerib apoptoosi inimese plaaskartsinoomi rakuliinis-A431 See uuring ajakirjas BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) näitab, et vinkristiin, sekundaarne metaboliit, mis on isoleeritud seenest Eutypella spp - CrP14, indutseerib apoptoosi A431 rakkudes. CDC42SE1 üleekspressioon A431 rakkudes vähendas rakkude proliferatsiooni Akt'i raja inhibeerimise kaudu See uuring avaldati 2019. aastal ajakirjas Cells. See uuring pakkus välja CDC42SE1 geeni kui nahavähi progresseerumise olulise biomarkeri, kuna selle allareguleerimine soodustab kasvajate teket. Metformiin pärsib A431 rakkude proliferatsiooni, moduleerides PI3K/Akt signaalirada See uuring avaldati 2015. aastal ajakirjas Experimental and therapeutic medicine. Selles pakuti välja, et metformiin pärsib nahavähi rakuliini a431 proliferatsiooni, reguleerides PI3K/Akt-signaalteed. 6. Eeldati, et metformiin pärsib nahavähi rakuliini a431 proliferatsiooni, reguleerides PI3K/Akt-signaalteed. A431 rakuliini ressursid: Siin on mõned veebiressursid, milles käsitletakse nahavähi rakuliini A431. A-431 rakkude transfekteerimine: Sellel lingil on A431 vähirakkude transfekteerimise samm-sammuline juhend. Järgmine link sisaldab teavet rakukultuuri kohta A431 rakkude puhul. A431 vähirakuliin: See link sisaldab vajalikku rakukultuuriteavet A431 rakuliini kohta. See sisaldab kultuurikeskkonda, rakkude tihedust, krüokonserveeritud ja proliferatiivsete kultuuride käitlemist jne. A431 rakkude kultiveerimine: See veebileht sisaldab lühikest protokolli A431 rakuliini kultiveerimiseks.

Viited

Quadri, M., et al., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models. Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Caffeic acid n-butyl ester anticancer activity against A431 skin carcinoma cell line occurs via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Molekulaarmeditsiini aruanded, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al., Eukalüptool on suunatud PI3K/Akt/mTOR-radale, et pärssida nahavähi metastaaside teket.

Carcinogenesis, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Alstonia angustiloba-silver nanoosakeste antiproliferatiivsete mehhanismide uurimine naha lamerakk-kartsinoomil (A431 rakuliin).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: p. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumori kasvu pärssimine ja tõhustatud kiirgusvastus eksogeense epidermise kasvufaktori poolt A431 rakkudega hiire ksenotransplantaadi mudelites.

Cancer Research and Treatment: Official Journal of Korean Cancer Association, 2015. 47(4): p. 921-930.