Wilms6 细胞
一般信息
| 说明 | Wilms6 细胞系是根据一名患有种系 WT1 基因突变的儿科患者的原发性 Wilms 肿瘤建立的。该细胞系是由 WT1 基因的同卵无义突变(c.1168 C>T,p.R390X)所决定的,该突变导致 WT1 蛋白截短和无功能。WT1 是肾脏发育的关键调节因子,其缺失与 Wilms 肿瘤密切相关,尤其是在出现间质分化的病例中。Wilms6 细胞系是研究 WT1 完全缺失致瘤效应的重要模型,尤其是在肿瘤同时表现出上皮和间质特征的情况下。 Wilms6 细胞还携带 CTNNB1 基因突变,特别是影响丝氨酸 45(p.S45F)的突变,丝氨酸 45 是调节β-Catenin 降解的关键磷酸化位点。这种突变导致β-Catenin的稳定和核积累,从而导致Wnt信号通路的构成性激活。众所周知,Wnt 信号的异常激活是 Wilms 肿瘤细胞增殖和肿瘤发生的驱动因素,因此 Wilms6 是研究 Wnt 通路失调在 WT1 突变肿瘤中的作用的重要工具。 从表型上看,Wilms6 细胞呈现间质形态,波形蛋白表达强,而细胞角蛋白等上皮标志物缺失,反映了原始肿瘤的基质性质。这些细胞已被证明具有有限但显著的分化潜能,包括在特定条件下分化成肌肉样细胞的能力,这反映了在一些 Wilms 肿瘤中观察到的间质分化。Wilms 的蛋白质组学研究6 发现了多种受体酪氨酸激酶(RTK)的激活,包括 PDGFRβ 和 AXL,它们参与促进细胞的存活、增殖和迁移。MAPK 和 PI3K/AKT 等信号通路的下游激活进一步凸显了该细胞系的侵袭性。 总之,Wilms6 细胞系是探索 Wilms 肿瘤发生的分子机制的重要模型,尤其是在 WT1 完全缺失并结合 Wnt 信号激活的情况下。它的遗传和表型特征使其成为研究 WT1 缺失与异常信号通路之间相互作用的绝佳平台,为这一侵袭性肿瘤类型的潜在治疗靶点提供了见解。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肾脏 |
| 疾病 | Wilms 肿瘤 |
| 应用 | 体外细胞培养模型。生化研究 |
特点
| 年龄 | 15 个月 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 纺锤形 |
| 细胞类型 | Wilms 细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | Wilms6(Cytion 目录号 300415) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SI |
生物分子数据
| 突变概况 | WT1 突变状态:同基因 c.1168C>T,p.R390x,LOH:11p11-11pter,CTNNB1 突变状态:同基因 del TCT,p.DS45 |
|---|
处理
| 培养基 | MSCGM 试剂盒(龙沙公司提供) |
|---|---|
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '02:05:01, '29:01:01
B*: '07:05:01, '13:02:01
C*: '06:02:01, '15:05:02
DRB1*: '07:01:01, '10:01:01
DQA1*: '01:05:01, '02:01:01
DQB1*: '02:02:01, '05:01:01
DPB1*: '04:02:01, '17:01:01
E: '01:01:01
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300415-221 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300415 |